一种人参肽的提取方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种人参活性成分的提取方法，更特别地设及一种人参肤的提取方 法，属于植物活性成分提取和纯化技术领域。
【背景技术】
[0002] 人参在我国的中药领域中具有重要的地位，长期W来都被奉为非常名贵的中药植 物，具有多种药物活性。其药用部位主要是其根部，该根部含有皂武、人参酸、蛋白质、聚烘 醇、有机醋、人参多糖、维生素、酱醇、多肤、挥发性组分等等，具有补原益气、生津安神、舒张 血管、兴奋神经、改善血液循环、增强屯、脏收缩等多种功效。
[0003] 但另一个方面，长期W来，人们对于人参根部中的人参肤研究相对较少，但也取得 了一定的成果，例如：
[0004] 魏俊杰等人r生晒参肤类的提取分离"，白求恩医科大学学报，16 (5)，1990年）报 道了从人参中分离得到了两个人参肤，其氨基酸组成分别为：第一种为2Asp，2Ser，3Glu， 3Gly，Ala,Lys，该肤的分子量在 1300 左右；第二种为 2Asp，2Ser，3Glu，2Gly，Ala,Pro,该 肤的分子量在1000左右。 阳0化]吴庆夫等人r红参中肤类成分的分离鉴定"，药学学报，26 (7) ,1991年）报道了从 红参中得到了两种人参肤，第一种为3Gly，2Ser，2Glu，Ala, 1'虹，Leu,Val;第二种为4Gly， 3Ser，2Glu，2Ala，Asp，Thr，Leu，lie。
[0006] CN104264466A公开了一种人参肤的提取方法，所述方法包括如下步骤：A、采用溫 度120-128°C、压力0. 12-0. 16MPa，恒溫恒压蒸煮0. 5-1. 5小时，人参提取液排入汤罐，人参 渣排出；B、提取液由汤罐进入水解罐，升溫灭菌后降溫至50-56°C，加化0H，再加入0. 5%人 参专用酶，酶解；C、在酶解结束后加入3-5%的活性炭进行吸附；D、酶解液加活性炭静置分 层后，经过滤器除滤和板框保护过滤，过滤至清液储罐；E、浓缩，过滤液经真空浓缩设备浓 缩，采用真空浓缩；F、将浓缩液升溫并保持在80-90°C，灭菌，喷雾干燥得到人参肤。所述方 法W干人参为原料，利用酶解技术得到了人参肤。
[0007] CN102652829A公开了一种人参肤的提取方法，所述方法包括高压蒸煮、酶解、吸 附、过滤、浓缩、干燥、成品包装；其中，高压蒸煮时，溫度为124°C、压力0. 14MPa，恒溫恒压 蒸煮1小时；酶解时，升溫灭菌后降溫至53°C，加化OH调抑=7,再加入0. 5%的人参专用 酶，酶解3. 5小时；吸附时，加入4%的活性炭进行吸附；过滤时，静置液先经桶式过滤器，再 经板框作为保护过滤器，最后过滤至清液储罐；浓缩时，浓缩的压力为负0. 5MPa，浓缩溫度 为8(TC，浓缩过程中测定波美度。所述方法工序简单，提取率高，适用于人参肤的提取。
[000引王德彬（"人参肤的提取分离及活性研究"，吉林大学硕±论文，2005年）中公开 了一种人参肤的提取分离方法，该方法先将人参进行醇提，然后进行阳离子交换树脂和阴 离子交换树脂进行分离，从而得到人参肤。
[0009] 如上所述，现有技术中已经公开了多种人参肤的提取方法，但对于人参肤的新型 提取方法，仍存在继续研究的必要，运是广大科研工作者的目标，运也正是本发明得W完成 的动力所在和基础所倚。
【发明内容】
[0010] 为了研究人参肤的新颖提取方法，本发明人对此进行了大量深入的研究，在付出 了充分的创造性劳动和经过深入的科学探究后，从而完成了本发明。
[0011] 具体而言，本发明主要设及一种人参肤的提取方法，所述方法包括如下步骤：
[0012] Sl、人参微波预提取；
[0013] S2、膨胀溶剂提取；
[0014] S3、复合酶解； 阳01引 S4、两相萃取；
[0016] S5、分离纯化，得人参肤。
[0017] 在本发明的所述人参肤的提取方法中，所述步骤Sl具体为：将干燥充分的人参 粉碎，得到人参粉末；然后用复合有机溶剂在30-40°C下，W微波功率300-400W进行提取 20-30分钟；最后过滤，得到滤液和人参滤渣。
[0018] 其中，所述人参的种类并没有特别的限定，其可为各种人参品种，例如可为野人 参、林下参或园参等，可根据实际情况进行合适的选择，例如可为经过完全干燥后的成品 (例如中药店里直接出售给消费者的人参片、块茎或整棵的人参）。W及，所述粉碎也是非 常常规的技术手段，例如可使用粉碎机进行，在此也不进行详细描述。
[0019] 其中，所述复合有机溶剂为体积比为1:2-3的氯仿与甲基叔下基酸的混合物。
[0020] 其中，所述人参粉末与所述复合有机溶剂的质量体积比为l:4-6g/ml，即每Ig人 参粉末使用4-6ml复合有机溶剂。
[0021] 其中，所述微波功率为300-400W，例如可为300W、350W或400W，优选为300-350W， 最优选为350W。
[0022] 在本发明的所述人参肤的提取方法中，所述步骤S2具体为：将步骤Sl得到的人参 滤渣加入到由C〇2和C1 4醇组成的膨胀溶剂中，加压至3-4MPa形成膨胀体系，在室溫下揽拌 提取15-25分钟；提取完成后，泄压至常压，过滤，得到提取液。
[0023] 其中，在所述膨胀体系中，所述C〇2与C1 4醇的体积比为1:3。
[0024] 其中，所述Cl4醇例如可为甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正下醇、异下醇、叔下醇等， 最优选为异下醇。
[0025] 其中，步骤Sl中的人参粉末与所述Cl4醇的质量体积比为1:1. 2-1. 6g/ml，即每Ig 人参粉末使用1. 2-1. 6ml的所述Cl4醇；也即按照步骤Sl中的人参粉末计，其与步骤S2中 所使用的Cl4醇的质量体积比为1:1. 2-1. 6g/ml。
[00%] 在本发明的所述人参肤的提取方法中，所述步骤S3包括如下步骤：
[0027] S3-1 :将步骤S2得到的提取液浓缩至原来体积的1/5-1/7,冷却至室溫，得到浓缩 液；
[00測 S3-2 :向浓缩液中加入混合酶，揽拌混合，得到混合液，并调节该混合液的抑值为 5-6 ;然后在40-50°C下进行保溫酶解20-30分钟，得到第一酶解液；
[0029] S3-3 :将第一酶解液W2°C/分钟的速率升溫到60°C，然后加入内切酶，并在该溫 度下继续保溫酶解40-60分钟，最后升溫至沸腾，并保持5-10分钟，从而使酶灭活，自然冷 却至室溫后调节抑值为中性，得到第二酶解液。
[0030] 其中，在所述步骤S3-2中，所述混合酶为0 -葡聚糖酶与蛋白水解酶的混合物，其 中0-葡聚糖酶与蛋白水解酶的质量比为1:2-3,例如可为1:2、1:2. 5或1:3。
[0031] 其中，在所述步骤S3-2中，所述混合酶与步骤Sl中得到的人参粉末的质量比为 1:150-200,也即在该步骤中使用的所述混合酶与最初所使用的人参粉末（该人参粉末在 该步骤S3-2中已经转化为浓缩液的形式）的质量比为1:150-200,例如可为1:150、1:175 或 1:200。
[0032] 其中，在所述步骤S3-3中，所述内切酶与步骤Sl中得到的人参粉末的质量比为 1:200-220,也即在该步骤中使用的所述内切酶与最初所使用的人参粉末（该人参粉末在 该步骤S3-3中已经转化为第一酶解液的形式）的质量比为1:200-220,例如可为1:200、 1:210 或 1:220。
[003引在本发明的所述人参肤的提取方法中，所述步骤S4具体为：向步骤S3得到的第二 酶解液中加入等体积比的乙酸乙醋与丙酬的混合溶剂，充分振荡，然后再加入质量百分比 浓度为5%的碳酸钢水溶液，充分振荡，静置分层，分出水相I和有机相；向所述有机相中再 次加入质量百分比浓度为5 %的碳酸钢水溶液，充分振荡，静置分层，分离出水相II;合并 水相I和水相II，得到预处理液。
[0034]