2-烷氧基苯甲酰芳胺类化合物及其药物用图
【技术领域】
[0001] 本发明属药物化学领域，涉及2-烷氧基苯甲醜芳胺类化合物及其药物用途，具体 涉及2-烷氧基苯甲醜芳胺类化合物及其在制备銷磯脂合酶抑制剂中的用途W及在制备预 防或治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、肥胖和II型糖尿病的药物中的用途。
【背景技术】
[0002] 据报道，在我国，随着经济社会的发展和人口的老龄化，必脑血管病发病率与死亡 率近年显著增加至除肿瘤外总死因的第2位，已经成为危害人类健康的主要疾病之一。研 究显示，动脉粥样硬化（atherosclerosis,A巧是许多必脑血管疾病的主要病理基础之一， 因此，抗动脉粥样硬化药物的研究成为当前药物研发领域的热点。研究还显示，动脉粥样 硬化表现为大、中动脉内膜出现含胆固醇、类脂肪等的黄色物质，从而导致血栓形成、供血 障碍等；虽然其分子病理尚未完全阐明，但业内公认在已知的诸多因素中血脂异常是动脉 粥样硬化形成的最重要的诱导因素，并且粥瘤和动脉硬化的形成与脂质成分的异常表达 密切相关。通常，血脂异常是指脂肪代谢或转运异常导致血浆中脂质高于正常，血液粘稠 度增高，其主要表现为低密度脂蛋白（low-densitylipoprotein,LDL)和极低密度脂蛋 白（verylow-densitylipoprotein,VLDL)水平升高W及高密度脂蛋白（hi曲-density lipoprotein,皿L)水平下降，因此，降低LDL和（或）升高皿L可W起到调节血脂的作用， 并且调血脂药亦成为临床上用于抗动脉粥样硬化的主要药物。
[0003] 临床上常用的调血脂药主要有他汀类、贝特类、胆酸结合树脂类、烟酸等。其 中，他汀类药物通过抑制胆固醇生物合成过程中的关键酶-3-居基-3-甲基戊二醜辅 酶A还原酶（HMGCo-A还原酶），降低血浆中LDL胆固醇的水平，能减少冠必病的发病率 (Linsel-化tsclikeP,TallAR.化t.Rev.Drug.Discov, 2005, 4, 193-206)。然而，有研究表 明使用普伐他汀（pravastatin)或阿巧伐他汀（atorvastatin)强化治疗冠必患者后，LDL 胆固醇水平虽有不同程度降低，但仍然存在必血管病的高发病率（CannonCP,Braunwald E，etal.N化glJMed, 2004, 350:1495-1504)，因此，通过单独降低LDL胆固醇水平带来 的治疗效果存在一定的限度；还有研究显示他汀类药物存在着横纹肌溶解等严重的不良反 应。
[0004] 随着研究的深入，有研究提出了多种抗动脉粥样硬化的潜在药物祀标如；銷磯脂 合酶抑制剂、PPAR激动剂、胆固醇醋转移蛋白（CET巧抑制剂、输注载脂蛋白、肝脏X受体激 活剂和磯脂转移蛋白（PLT巧抑制剂等；尤其是銷磯脂（S地ingomyelin，SM)及其代谢酶在 引起脂蛋白改变的同时介导一系列细胞过程，表明其在动脉粥样硬化发生发展进程中扮演 着重要的角色。
[0005] 研究表明，銷磯脂能通过多种途径诱发动脉粥样硬化；（1)抑制甘油； 醋（TG)的脂解（ParkTS,PanekI?L,etal.Atherosclerosis. 2006, 189(2):264-7 2.);似延缓致AS的脂蛋白残粒的清除（SchlittA,HojjatiMR,etal.JLipid Res. 2005, 46 (2) : 196-200.) ; (3)影响皿L介导的胆固醇逆向转运，造成胆固醇清除障碍 (SanoO'KobayashiA,etal.JLipidRes. 2007, 48 (11) :2377-84;MarmillotP,Patel S，etal.Met油olism. 2007, 56 (2) : 251-9.) ; (4)神经醜胺及SM合成或分解的相关产物是 细胞增殖、激活、调亡的调节因子，影响着动脉粥样硬化斑块的生长与稳定（Park,T.-S.; Panek,R.L.;etal.Cir州lation. 2004, 110, 3465-:3471.)。（5)富含SM的LDL具有很强的凝 聚和黏附，导致巨瞻细胞更易于在动脉壁滞留聚集而形成泡沫细胞从而促进AS(FanY，Shi S,etal.ArteriosclerΤ'虹ombVaseBiol, 2010, 30:2114-20.);
[0006] 流行病学调查也显示，人类SM水平与动脉粥样硬化（A巧存在独立的相关 性，血浆SM浓度是动脉粥样硬化的独立危险因子，在评价动脉粥样硬化发展过程中 具有指标性的意义（Jiang,X.-C. ;Paultre,F.;etal.Arterioscler.T虹omb.Vase. Biol. 2000, 20, 2614-2618;ZhiqiangLi；MariaJ.Basterr；etal.Biochimicaet Bio地ysicaActa. 2005, 1735, 130 - 134.);动物实验研究已经显示对SM从头生物合成的 抑制确实能有效降低apoE-KO小鼠的血浆胆固醇及甘油Η脂水平，升高皿心胆固醇含量， 从而阻止AS病变的发展（Park,Τ.-S. ;Panek,R.L.;etal.Cir州lation. 2004, 110, 3465-3471.);因此，业内认为降低血浆中銷磯脂水平或抑制SM的合成可达到减缓或阻止动脉粥 样硬化发生发展的目的。
[0007] 还有研究发现，銷磯脂合酶（S地ingomyelinsynthase,SM巧可调节神经醜胺 (ceramide)与卵磯脂（PC)合成SM，是銷磯脂从头合成途径最后一步的关键酶。进一步 的研究发现，SMS直接调控SM水平，SMS的过度表达是动脉粥样硬化病变组织中的普遍现 象，也是动脉粥样硬化病变发生的关键指标之一狂ian-chengJiang;化rcyPaultre;et al.Arterioscler.Thromb.VaseBiol. 2000, 20, 2614-2618;ZhiqiangLi；TirunehK.et al.BiochimicaetBio地ysicaActa, 2007, 1771, 1186 - 1194.)。动物实验显不SMS2 和 apoE双基因敲除小鼠模型的主动脉弓动脉粥样硬化斑块显著减小，头臂动脉中SM等脂 质水平显著降低，同时对小鼠的正常生理未见影响（FanY,ShiS,etal.Arterioscler. Τ'虹omb.VaseBiol, 2010, 30:2114-20.)，表明SMS催化合成SM的反应处于銷磯脂生物合成 循环的最后环节，抑制其活性引起潜在的毒副反应较小；因此，综上研究结果，业内展望，通 过抑制銷磯脂合酶降低銷磯脂水平可成为治疗动脉粥样硬化的新方法，銷磯脂合酶作为抗 动脉粥样硬化的新祀标具有潜在优越性，銷磯脂合酶抑制剂将成为新型的抗动脉粥样硬化 的治疗药物。
[0008] 除此之外，有研究发现SMS2缺乏可W防止高脂饮食诱导的肥胖和膜岛素抵抗， 同时在SMS2基因敲除小鼠的肝脏中，很难观察到大的成熟的脂肪斑块，表明SMS2参与肝 脏脂肪斑块的形成且可诱导肥胖和II型糖尿病的发生（SusumuMitsutake,KotaZama,et al.JournalofBiologicalChemistry. 2011，286(32)，28544-28555)dSMS2缺乏导致的血 浆中SM的降低可W改善动物组织和整个身体中膜岛素的敏感性（LiZ，Zhan化etal.Mol. Cell.Biol. 2011，31 (20) :4205-4218)。因此，銷磯脂合酶小分子抑制剂将可W预防和治疗 肥胖、脂肪肝和II型糖尿病等代谢综合症。
[0009] 目前有文献报道的銷磯脂合酶抑制剂之一是D609(AiminMeng;化iaraLub&rto; etal.ExperimentalCellResearch, 2004, 292, 385 - 392.)，该化合物的酶抑制活性 较弱（ICs。= 375μΜ),且化学结构上含有原礙酸醋而使得结构高度不稳定度ai，A.et al.J.Pharmacol.Exp.Ther. 2004, 309, 1051-1059)，半衰期短；此外，有研究采用同源模 建的方法首次构建出hSMSl(人类SMSl型）的Η维蛋白结构模型狂hang化；Lin化；etal.化in.J.化em. 2011，29, 2421-2429)，确定了銷磯脂合酶上底物结合的活性位点， 并用生物学实验进行了验证（Calvin化日叫；511￥613Varshney;etal.Biochimicaet Bio地ysicaActa, 2008, 1781，610 - 617.);采用该Η维蛋白结构模型和经过验证的酶与底 物结合的活性位点，发现了銷磯脂合酶小分子抑制剂化合物D2狂iaodongDeng,化Lin,et al.IiuropeanJournalofMedicinalQiemistry, 2014, 73, 1-7)，其体外对SMS2 的抑制活 性（ICw= 13. 5μΜ)虽较D609高，但仍存在如下缺陷对SMS2的抑制活性有待提高，其含 有潜在毒性风险较大的氯基基团，并且水溶性和稳定性等理化性质不佳。
【发明内容】
[0010] 本发明的目的在于克服现有技术的缺陷和不足，提供2-烷氧基苯甲醜芳胺类化 合物及其药物用途，具体涉及2-烷氧基苯甲醜芳胺类化合物及其在制备銷磯脂合酶抑制 剂中的用途W及在制备用于预防或治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、肥胖和II型糖尿病的药物 中的用途。
[0011] 本发明的第一个目的是提供2-烷氧基苯甲醜芳胺类化合物或其药学上可接受的 盐；所述的2-烷氧基苯甲醜芳胺类化合物是具有如式I所示结构的游离碱或盐，
[0012]
[0013] 式中X、Υ和Ζ代表C原子或者Ν原子，但X、Υ和Ζ不可同时选自C原子；G代表 苯基、取代苯基和蔡基，当Υ与X或者Υ与Ζ同时选自C原子时，G选自取代苯基或者蔡基； 尤其地当G为取代苯基时，其上的取代基选自因素，硝基，氯基，Η氣甲氧基，駿基，醋基，予 氧基，Ci-C,的烷基或者Ci-C,的烷氧基等其中任意一个或者两个；R代表Η，因素，硝基或者 C1-C4的烷氧基。
[0014] 进一步的，当G为取代苯基时，其上的取代基为0-F，m-F，P-F，0-C1，m-Cl， p-Cl, o-Br, m-Br, p-Br,〇-N〇2, m-N〇2, p-N〇2, o-CN, m-CN, p-CN,0-OCF3，m-OCFs, P-OCF3, o-COOH, m-COOH, p-COOH, o-CO犯t, m-CO犯t, p-CO犯t,〇-〇Bn, m-OBn, p-〇Bn,0-OCH2CO2C2H5, m-0CH2C02C2H5,〇-0CH2C00H，m-0CH2C00H，Ci-C7的烷基或者C1-C7的烷氧基中的任意一个或者 两个。
[0015] 更具体的，描述为式I-1~式I-60的化合物：
[0016]
[0017] ?
[0018]
[0019]
[0020] 本发明化合物含有碱性基团可与酸成盐，采用普通手段可W形成衍生物的盐。包 括有机酸盐如己酸盐、构稼酸盐、富马酸盐、马来酸盐、草酸盐、苹果酸盐、巧樣酸盐、玻巧酸 盐、酒石酸盐、乳酸盐、棒脑礙酸盐、苯礙酸盐、对甲苯礙酸盐、甲礙酸盐、Η氣醋酸盐、Η氣 甲礙酸盐等；无机酸盐如氨因酸（氨氣酸、氨氯酸、氨漠酸、氨贿酸）盐、硫酸盐、磯酸盐、硝 酸盐等。或与氨基酸，如谷氨酸或天冬氨酸可形成谷氨酸盐或天冬氨酸盐。优选的盐为盐 酸盐、漠氨酸盐。
[0021] 本发明还包括2-烷氧基苯甲醜芳胺类化合物的溶剂合物，其溶剂优选为水、己醇 或甲醇。
[0022] 本发明的第二个目的是提供式I所示的2-烷氧基苯甲醜芳胺类化合物在制备銷 磯脂合酶小分子抑制剂中的用途。本发明采用文献报道的高效液相色谱0PLC)英光定量 检测方法测定式I所示的2-烷氧基苯甲醜芳胺类化合物对銷磯脂合酶抑制剂的抑制活性 狂iaodongDeng;HongSun;etal.AnalyticalLetters, 2012, 45:12, 1581-1589)，通过其 中的NBD-ceramide和NBD-sphingomyelin的含量变化计算出抑制剂对銷磯脂合酶催化神 经醜胺转化为銷磯脂的活性的改变。
[0023] 基于高效液相色谱0PLC)英光定量法的活性测试实验表明，式I所示的2-烷氧 基苯甲醜芳胺类化合物具有亚微摩尔级的銷磯脂合酶抑制活性，是抑制銷磯脂合酶的有效 成分；高效液相色谱（HPLC)英光定量方法检测所述化合物对銷磯脂合酶2 (SMS2)的抑制活 性为：
[0024] 1)2-(2-氣予氧基）-N-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-1)在5μΜ下的抑制率为 53. 8% ；
[00巧]2) 2- (3-氣予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-2)在5μΜ下的抑制率为 69. 3% ；
[0026] 3) 2- (3-硝基予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-扣在50μΜ下的抑制 率为64. 6% ;
[0027] 4) 2- (3-氯基予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-4)在50μΜ下的抑制 率为66. 0% ;
[0028] 5) 2- ((4-甲氧基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-5)在50μΜ下的 抑制率为23. 0% ;
[0029] 6) 2- (2-氯基予氧基）-N-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-6)在50μΜ下的抑制 率为50. 0% ;
[0030] 7) 2- (3-氯予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-7)在5μΜ下的抑制率为 70. 6% ；
[0031] 8) 2- (3-漠予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-8)在50μΜ下的抑制率 为 67. 1% ;
[0032] 9) 2- (4-漠予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-9)在50μΜ下的抑制率 为 14. 7% ;
[0033] 10) 2-((3-甲基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-10)在50μΜ下的 抑制率为69. 5% ;
[0034] 11)2-((2-甲基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-11)在5μΜ下的 抑制率为71.3% ;
[0035] 12) 2- ((2-硝基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-12)在50μΜ下的 抑制率为35.5% ;
[0036] 13) 2- ((4-硝基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-13)在50μΜ下的 抑制率为11.8% ;
[0037] 14) 2-((4-甲基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-14)在50μΜ下的 抑制率为69. 0% ;
[0038] 15) 2- ((4-氯基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-15)在50μΜ下的 抑制率为15.0% ;
[0039] 16) 2-((2-氯-5-氣）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-16)在5μΜ 下的抑制率为75. 7%。
[0040] 17) 2- ((2, 6-二氯）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-17)在5μΜ下 的抑制率为77. 2%。
[0041] 18) 2-((2-氣-3-氯）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-18)在5μΜ 下的抑制率为55.2%。
[0042] 19)4-((2-(化巧-3-基氨基甲醜基）苯氧基）甲基）苯甲酸己醋（式I-19)在 10μΜ下的抑制率为2. 9%。
[004引 20) 2- ((4-Η氣甲基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-20)在10μΜ 下的抑制率为3.9%。
[0044] 21)2-((2-甲基-5-氣）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-21)在10μΜ 下的抑制率为84.7%。
[0045] 22)2-(3-((2-(化巧-3-基氨基甲醜基）苯氧基）甲基）苯氧基）己酸己醋（式 I-22)在10μΜ下的抑制率为15. 3%。
[0046] 23) 2- ((3-甲氧基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-23)在10μΜ下 的抑制率为59.8%。
[0047] 24) 2- ((2-甲氧基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-24)在10μΜ下 的抑制率为89. 4%。
[0048] 25) 2-((2,5-二甲氧基）予氧基）-N-"比巧-3-基）苯甲醜胺（式I-25)在10μΜ 下的抑制率为78.9%。
[0049] 26) 2-((2-予氧基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-26)在10μΜ下 的抑制率为76. 9%。
[0050] 27) 2-((2-己基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-27)在5μΜ下的 抑制率为78. 4%。
[0051] 28)2-((4-己基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-28)在10μΜ下的 抑制率为10. 1%。
[00閲 29) 2- ((2, 6-二甲基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-29)在10μΜ 下的抑制率为88.8%。
[0053] 30) 2-((2-己氧基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-30)在10μΜ下 的抑制率为86. 3%。
[0054] 31) 2-((2-甲氧基-5-氯）予氧基）-Ν-([??；"產-3-基）苯甲醜胺（式I-31)在 10μΜ下的抑制率为92. 4%。
[0055] 3。2-((2-氯-6-氣）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-3。在10μΜ 下的抑制率为82. 3%。
[0056] 33) 2-((2, 5-二氯）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-33)在10μΜ下 的抑制率为87.9%。
[0057] 34) 2- (2- (4-氯了氧基）予氧基）-Ν-"比巧-3-基）苯甲醜胺（式I-34)在10μΜ 下的抑制率为85. 5%。
[005引 35) 2- (2- (5-氯戊氧基）予氧基）-Ν-"比巧-3-基）苯甲醜胺（式I-35)在10μΜ 下的抑制率为91. 3%。
[0059] 36) 2-(2-(6-氯己氧基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-36)在10μΜ 下的抑制率为91. 5%。
[0060] 37) 2-((2-己氧基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-37)在10μΜ下 的抑制率为90. 2%。
[0061] 38) 2-((2-庚氧基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-38)在10μΜ下 的抑制率为90. 5%。
[0062] 39) 2-((5-氯-2-己氧基）予氧基）-Ν-([??；"產-3-基）苯甲醜胺（式I-39)在 5μΜ下的抑制率为85. 5%。
[0063] 40) 2-((5-氯-2-庚氧基）予氧基）-Ν-([??；"產-3-基）苯甲醜胺（式I-40)在 5μΜ下的抑制率为87. 1%。
[0064] 41) 2-((3-Η氣甲基）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-41)在10μΜ 下的抑制率为10.0%。
[00财 42)2-((2-H氣甲基）予氧基）-N-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-42)在5μM 下的抑制率为65.5%。
[0066] 43) 2-((2-甲基-5-氯）予氧基）-Ν-([]比巧-3-基）苯甲醜胺（式I-43)在5μΜ 下的抑制率为74.8%。
[0067] 44) 2-((2-甲基-3-氯）予氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-44)在5μΜ 下的抑制率为47.ο%。
[006引 45) 2-((蔡-1-基）甲氧基）-Ν-(化巧-3-基）苯甲醜胺（式I-45)在10μΜ下 的抑制率为78.0%。
[0069] 46)4-((2-(化巧-3-基氨基甲醜基）苯氧基）甲基）苯甲酸（式I-46)在10μΜ 下的抑制率为2. 6%。
[0070] 47) 2-(2-((2-"比巧-3-基氨基甲醜基）苯氧基）甲基）苯氧基）己酸（式I-47) 在10μΜ下的抑制率为7. 4%。
[0071] 48) 2-(3-((2-"比巧-3-基氨基甲醜基）苯氧基）甲基）苯氧基）己酸（式I-48) 在10μ