核壳型交联透明质酸凝胶颗粒、其制造方法和医用材料的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及核壳型交联透明质酸凝胶颗粒、其制造方法和医用材料。
【背景技术】
[0002] 透明质酸为β -D-N-乙酰葡糖胺与β -D-葡萄糖醛酸相互键合而得到的直链状的 高分子多糖。透明质酸由于表现出优异的生物体适应性和粘弹性，所以正向医用领域扩展。 例如，作为用于变形性膝关节炎的粘性补充剂，市售有各种液体制剂。
[0003] 透明质酸广泛分布于脊椎动物的玻璃体·关节液?皮肤等处，广泛应用于眼科手 术辅助剂?关节注入剂等药品、医疗器械、化妆品和健康食品。透明质酸作为本来的生物体 成分高浓度地存在于组织、器官中，因此本质上安全性极其高。
[0004] 作为透明质酸，还已知有交联透明质酸凝胶。例如，使用了自交联的透明质酸颗粒 的粘性补充剂被专利文献1公开了，通过将透明质酸高浓度地凝胶化，药效提高。
[0005] 另一方面，还市售有生物体贮存性提高了的各种交联透明质酸凝胶（作为例子， 有Synvisc :注册商标；Durolane :注册商标；Monovisc :注册商标；Gel-One :注册商标）。
[0006] 但是，还已知交联透明质酸凝胶具有生物体贮存性提高的特性，另一方面，与透明 质酸溶液相比较，有弱的异物反应（非专利文献1)。
[0007] 现有技术文献
[0008] 专利文献
[0009] 专利文献1 :国际公开第12/026468号
[0010] 非专利文献
[0011] 非专利文献 I:Clin. Exp. Rheumatol.，Vol. 20, Ρ. 445-454(2002)
【发明内容】
[0012] 发明要解决的问题
[0013] 本发明的目的在于，提供异物反应被降低至与透明质酸溶液相同程度、生物体亲 和性高的交联透明质酸凝胶颗粒。
[0014] 另外，本发明的目的还在于，提供该凝胶颗粒的制造方法以及包含该凝胶颗粒的 医用材料。
[0015] 用于解决问题的方案
[0016] 本发明提供一种核壳型交联透明质酸凝胶颗粒，其表面的平衡溶胀倍率比中心 高，并且从中心到表面的平衡溶胀倍率的变化曲线存在拐点，从表面起至深度SOOnm的探 针压入力为20nN以下。
[0017] 本发明的核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的表面具有接近透明质酸溶液的柔软度， 尽管分子结构几乎不变化，但能够降低异物反应，从而得到高的生物体亲和性。
[0018] 核壳型交联透明质酸凝胶颗粒优选为从拐点至表面的平衡溶胀倍率为40以上的 颗粒。即，将核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的从重心至表面方向的长度作为横轴（X)、将规 定的横轴位置的平衡溶胀倍率作为纵轴（Y)进行作图而得到的平衡溶胀倍率的变化曲线 中，从拐点存在的横轴位置（X。）至与表面对应的横轴位置（Xs)之间的平衡溶胀倍率的值 (Y)优选为40以上。
[0019] 通过核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的表面部分的平衡溶胀倍率为上述范围，则能 够确保颗粒的表面为更接近透明质酸溶液的柔软度，因此核壳型交联透明质酸凝胶颗粒成 为异物反应被降低至与透明质酸溶液相同程度的、具有高的生物体亲和性的颗粒。
[0020] 本发明还提供一种核壳型透明质酸凝胶颗粒，其表面的平衡溶胀倍率比中心高， 并且从中心到表面的平衡溶胀倍率的变化曲线存在拐点，从拐点至表面的平衡溶胀倍率为 65以上。
[0021] 上述核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的表面具有接近透明质酸溶液的柔软度，尽管 分子结构几乎不变化，但能够降低异物反应，能够得到高的生物体亲和性。
[0022] 核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的从拐点至表面的距离优选为5 μπι以上。即，从横 轴位置（X。）至横轴位置（Xs)的长度在核壳型交联透明质酸凝胶颗粒中优选为5 μπι以上。
[0023] 认为因为从拐点至表面的距离为上述范围，所以能够确保颗粒表面的柔软部分的 厚度，颗粒在给予后在关节内等即使表面分解，也会从内部新出现平衡溶胀倍率高的表面 部分，异物反应被降低至长期与透明质酸溶液相同程度，从而能够保持高的生物体亲和性。
[0024] 本发明提供一种制造上述的核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的制造方法，其包括： 通过使交联透明质酸凝胶颗粒与碱性物质接触，从而使该凝胶颗粒形成核壳结构。
[0025] 由这样的制造方法得到的核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的表面具有接近透明质 酸溶液的柔软度，在生物体内不易被识别为交联透明质酸凝胶颗粒，因此异物反应被降低 至与透明质酸溶液相同程度，生物体亲和性高。
[0026] 本发明还提供一种制造核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的制造方法，其包括：在交 联透明质酸凝胶颗粒的表面形成透明质酸的交联密度低于该交联透明质酸凝胶颗粒的交 联透明质酸凝胶的壳。
[0027] 通过这样的制造方法得到的核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的表面也具有接近透 明质酸溶液的柔软度，在生物体内不易被识别为交联透明质酸凝胶颗粒，所以异物反应能 够被降低至与透明质酸溶液相同程度，生物体亲和性高。
[0028] 本发明还提供包含上述核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的医用材料。
[0029] 对于这样的包含核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的医用材料，例如向生物体内给予 该医用材料的情况下，在生物体内不易被识别为异物，因此不易引起炎症作用等，能够确保 与包含透明质酸溶液的医用材料同样高的生物体亲和性。
[0030] 医用材料可以适用于选自关节注入剂、药理活性物质的载体、创伤敷剂、组织替代 型生物体组织修复剂、防粘连剂、止血剂、人工细胞外基质和皮肤填充剂中的任意者。
[0031] 这样的医用材料在生物体内等不易被识别为异物，所以不易引起炎症作用等，从 而能够确保与包含透明质酸溶液的医用材料同样高的生物体亲和性。从以上这样的观点出 发，特别是用作关节注入剂的情况下，能够发挥出显著的效果，因而更优选。
[0032] 发明的效果
[0033] 通过本发明，能够提供异物反应被降低至与透明质酸溶液相同程度、生物体亲和 性高的交联透明质酸凝胶颗粒。
[0034] 另外，还能够提供该凝胶颗粒的制造方法以及包含该凝胶颗粒的医用材料。
【附图说明】
[0035] 图1是本发明的一个实施方式的核壳型交联透明质酸凝胶颗粒在用亚甲基蓝染 色之后、用苯胺黑水溶液进行负染色时的显微镜照片。
[0036] 图2是将包含本发明的一个实施方式的核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的关节注 入剂与透明质酸制剂的疼痛抑制效果进行比较而示出的曲线图。
[0037] 图3是将包含本发明的一个实施方式的核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的关节注 入剂与透明质酸制剂的疼痛抑制效果进行比较而示出的曲线图。
[0038] 图4是表示本发明的一个实施方式的核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的平衡溶胀 倍率的变化曲线的曲线图。
【具体实施方式】
[0039] 以下，对于本发明优选的的实施方式进行说明，但本发明不限定于这些的实施方 式。
[0040] 首先，对于核壳型交联透明质酸凝胶颗粒进行说明。实施方式的核壳型交联透明 质酸凝胶颗粒是从中心到表面的平衡溶胀倍率的变化曲线存在拐点的颗粒。此处，核壳型 交联透明质酸凝胶颗粒在凝胶的状态下具有颗粒形状即可，但未必限于球状的颗粒。另外， 核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的中心是指该颗粒的重心，其位置可以用显微镜图像等确 定。"从中心到表面的平衡溶胀倍率的变化曲线存在拐点"是指使纵轴为平衡溶胀倍率、横 轴为从中心到颗粒表面的直线距离（将中心作为横轴0)，对平衡溶胀倍率作图而得到的变 化曲线存在拐点。需要说明的是，作图优选横轴每0. 2~15 μπι(优选横轴每0. 5~5 μπι) 进行一次，优选作为作图的近似曲线得到变化曲线。
[0041] 变化曲线的拐点可以存在多个，但优选存在1个拐点。作为变化曲线的形状，优选 在横轴特定的区域平衡溶胀倍率的线急剧地上升的形状（上升的前后，平衡溶胀倍率优选 显示平缓的变化。即，优选存在1个拐点，且在该拐点的前后，变化曲线的斜率的变化率由 正向负变化），在该特定区域间存在拐点。并且，可以将比该拐点更靠近内侧的颗粒部分称 为"核"、将外侧的颗粒部分称为"壳"。需要说明的是，核壳型交联透明质酸凝胶颗粒的从 中心至表面的直线可以认为是多个，选择该直线的一个将其作为横轴、平衡溶胀倍率如上 述变化即可。
[0042] 交联透明质酸凝胶颗粒的平衡溶胀倍率可以通过激光共焦显微拉曼光谱法而算 出。通过激光共焦显微拉曼光谱法，对凝胶颗粒内特定微小范围内的透明质酸浓度进行分 析，将平衡溶胀倍率已知的样品作为指标，由此能够计算出该特定微小范围内的平衡溶胀 倍率。另外，由于能够计算出凝胶颗粒内任意特定微小范围的平衡溶胀倍率，所以通过重复 利用激光共焦显微拉曼光谱法计算平衡溶胀倍率以及进行一定微小范围的移动，也可以观 察凝胶颗粒内部的平衡溶胀倍率的现象变化。
[0043] 测定分为二个阶段。第一阶段是如下阶段：通过对水系溶剂中（缓冲液中）处 于平衡溶胀状态的凝胶颗粒内部的特定微小范围进行分析，由得