H+)。
[0395] 实施例37 :N-(4-(叔丁基）苄基）-2, 5-二甲基吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺 (TJ830135)
[0396]
[0397] 合成方法如实施例6。
[0398] 4 匪R(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 52(d，J = 6. 8Hz，1H)，7. 96(t，J = 6. 0Hz， 1H) ,7. 72(s, 1H), 7. 35(d, J = 8. 0Hz, 2H), 7. 28 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 80 (dd, J = 6. 8, 1. 6Hz, 1H)，4. 45 (d, J = 6. OHz, 2H), 2. 54 (s, 3H), 2. 38 (s, 3H), 1. 27 (s, 9H)。
[0399] MS(ESI)，m/z:336(M++H+)。
[0400] 实施例38 :N-(4-(二甲氨基）苄基）-2, 5-二甲基吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺 (TJ830136)
[0401]
[0402] 合成方法如实施例6。
[0403] 4 MlR(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 51 (d，J = 7. 2Hz，1H)，7. 86(t，J = 5. 6Hz， 1H) , 7. 69 (s, 1H), 7. 19 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 79 (d, J = 6. 0Hz, 1H), 6. 70 (d, J = 8. 4Hz, 2H)，4. 36 (d, J = 6. 0Hz, 2H)，2. 85 (s, 6H)，2. 52 (s, 3H)，2. 37 (s, 3H)。
[0404] MS (ESI)，m/z: 323 (M++H+)。
[0405] 实施例39 :N-(4-(4-(4-甲氧基苯基）哌啶-1-取代）苄基）-2,5-二甲基-吡唑 [1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830140)
[0406]
[0407] 合成方法如实施例6。
[0408] 4 MMR(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 52 (d，J = 6. 8Hz，1H)，7. 90 (t，J = 6· 0Hz，1H)， 7. 71 (s, 1H), 7. 20 (m, 4H), 6. 94 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 86 (d, J = 8. 8Hz, 2H), 6. 80 (dd, J = 6. 8, 1. 2Hz, 1H), 4. 39 (d, J = 5. 6Hz, 2H), 3. 76 (m, 2H), 3. 72 (s, 3H), 2. 71 (m, 2H), 2. 60 (m, 1H )，2. 53 (s, 3H)，2. 37 (s, 3H)，1. 82 (m, 2H)，1. 71 (m, 2H) 〇
[0409] MS (ESI)，m/z: 469 (M++H+)。
[0410] 实施例40 :N-(4-(4-(4-氟苯基）哌啶-1-取代）苄基）-2,5-二甲基-吡唑 [1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830141)
[0411]
[0412] 合成方法如实施例6。
[0413] 4 匪R(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 52(d，J = 7. 2Hz，1H)，7. 90(t，J = 6. 0Hz， 1H) , 7. 71 (s, 1H), 7. 30 (m, 2H), 7. 22 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 7. 11 (m, 2H), 6. 94 (d, J = 8. 8Hz, 2H), 6. 80 (d, J = 7. 2Hz, 1H), 4. 39 (d, J = 5. 6Hz, 2H), 3. 77 (m, 2H), 2. 69 (m, 3H), 2. 53 (s, 3H), 2. 37 (s, 3H), 1. 84 (m, 2H), 1. 73 (m, 2H)。
[0414] MS(ESI)，m/z:457(M++H+)。
[0415] 实施例41 :2, 5-二甲基-N-(4_(哌啶-1-取代）苄基）吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲 酰胺（TJ830146)
[0416]
[0417] 合成方法如实施例1和6。
[0418] 4 匪R(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 51 (d，J = 7. 6Hz，1H)，7. 88(t，J = 5. 6Hz， 1H) ,7. 70(s, 1H), 7. 19(d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 88 (d, J = 8. 8Hz, 2H), 6. 79 (dd, J = 6. 8, 1. 6Hz, 1H), 4. 37 (d, J = 6. 0Hz, 2H), 3. 08 (m, 4H), 2. 53 (s, 3H), 2. 37 (s, 3H), 1. 60 (m, 4H )，1. 51(m, 2H) 〇
[0419] MS (ESI)，m/z: 363 (M++H+)。
[0420] 实施例42 :N-(4-(4-氟苯氧基）苄基）-2, 5-二甲基吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰 胺（TJ830147)
步骤1: 4- (4-氟苯氧基）苯甲腈
[0422]将 4-氟苯甲腈（0. 6g，5mmol)、4_ 氟苯酸（0. 85g，7. 5mmol)和叔丁醇钾（1. lg， lOmmol)溶于DMSO(lOmL)中，在微波反应器中加热至120°C。反应15min后，冷却至室温， 加入大量水，用乙酸乙酯萃取三次后，收集有机相。经柱层析得到产物〇. 42g (39. 3 % )
[0423] MS(ESI)，m/z:214(M++H+)。
[0424] 步骤2 :N-(4-(4-氟苯氧基）苄基）-2, 5-二甲基吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺 (TJ830147)
[0425]
[0426] 合成方法如实施例1中的步骤4和9,两步产率80. 6%。
[0427] 4 匪R(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 52(d，J = 6. 8Hz，1H)，7. 99(t，J = 6. 0Hz， 1H) , 7. 72 (s, 1H), 7. 37 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 7. 20 (m, 2H), 7. 03 (m, 2H), 6. 97 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 80 (dd, J = 7. 2, 1. 6Hz, 1H), 4. 46 (d, J = 6. 0Hz, 2H), 2. 54 (s, 3H), 2. 38 (s, 3H) 〇
[0428] MS (ESI)，m/z: 390 (M++H+)。
[0429] 实施例43 :2,5-二甲基-N-(4-(4_(三氟甲基）哌啶-1-取代）苄基）吡唑 [1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830149)
[0430]
[0431] 合成方法如实施例1和6。
[0432] 4 匪R(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 52(d，J = 6. 8Hz，1H)，7. 90(t，J = 6· 0Hz， 1H) ,7. 70(s, 1H), 7. 21 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 92 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 79 (dd, J = 6. 8, 1. 6Hz, 1H), 4. 38 (d, J = 5. 6Hz, 2H), 3. 74 (m, 2H), 2. 68 (m, 2H), 2. 53 (s, 3H), 2. 44 (m, 1H )，2. 37 (s, 3H)，1. 86 (m, 2H)，1. 54 (m, 2H) 〇
[0433] MS(ESI)，m/z:431(M++H+)。
[0434] 实施例44 :2,5-二甲基-N-((2-(4_(三氟甲氧基）苯基）嘧啶-5-取代）甲基） 吡唑[l，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830150)
[0435]
[0436] 步骤1 :5-溴-2- (4-(三氟甲氧基）苯基）嘧啶
[0437]
[0438] 将 5-溴 2-碘嘧啶（6.0g，21. lmmol)、4-三氟甲氧基苯硼酸（4.77g，23.2mmol)、 Pd(PPh3)4(0. 24g，0. 21mmol)和碳酉爱纳（4. 46g，42. 12mmol)溶于 H20(60mL)和甲苯（480mL) 的混合溶剂中，加热至回流过夜。冷却反应至室温，经2cm硅胶短柱过滤，滤渣用乙酸乙酯 洗三次，减压旋干溶剂，经柱层析分离得到产物5. 6g(83. 6% )。
[0439] MS(ESI)，m/z:319(M++H+)。
[0440] 步骤2 :2- (4-(三氟甲氧基）苯基）嘧啶-5-甲醛
[0441]
[0442] 将5-溴-2-(4-(三氟甲氧基）苯基）嘧啶（3.28,9.72臟〇1)溶于无水1'册(10〇1^) 中，氩气置换三次后降温至-80 °C，向反应体系中缓慢滴加2. 4M正丁基锂（4. 86mL， 11. 66mmol)，搅拌5min后，再缓慢滴加无水DMF (12. 4mL)。保持-80°C，反应20min后，升温 至室温。向反应体系中缓慢加入大量水，减压旋蒸溶剂，再用乙酸乙酯萃取。经柱层析得到 产物 〇.38g(14.8% )。
[0443] MS (ESI)，m/z: 269 (M++H+)。
[0444] 步骤3 : (2-(4-(三氟甲氧基）苯基）嘧啶-5-取代）甲胺
[0445]
[0446] 合成方法如实施例26中的步骤2、3和4。
[0447] MS(ESI)，m/z:270(M++H+)。
[0448] 步骤：4:2,5_二甲基-N-((2-(4_(三氟甲氧基）苯基）嘧啶-5-取代）甲基）吡 唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830150)
[0449]
[0450] 合成方法如实施例1中的步骤9。
[0451] 4 MMR(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 92(s，1H)，8. 54(d，J = 7. 2Hz，1H)，8. 49(d，J = 8. 8Hz, 2H), 8. 10(t, J = 5. 6Hz, 2H), 7. 75 (s, 1H), 7. 51 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 6. 82 (dd, J = 6. 8, 1. 2Hz, 1H)，4. 54 (d, J = 6. 0Hz, 2H)，2. 55 (s, 3H)，2. 39 (s, 3H)。
[0452] MS (ESI)，m/z: 442 (M++H+)。
[0453] 实施例45 :2,5-二甲基-N-((4'_(三氟甲氧基）_[1，1'-联苯]-4-取代）甲基） 吡唑[l，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830151)
[0455] 步骤1:(4'_(三氟甲氧基联苯]-4-取代）甲胺
[0456]
[0457] 将（4-溴苯基）甲胺（0· 56g，3. Ommol)、4_ 三氟甲氧基苯硼酸（0· 68g，3. 3mmol)、 Pd(PPh3)4(0. 17g，0. 15mmol)和碳酉爱钾（1.66g，12mmol)溶于 H20(6mL)和乙腈（34mL)的混 合溶剂中，加热至90°C过夜。冷却反应至室温，经2cm硅胶短柱过滤，滤渣用乙酸乙酯洗三 次，减压旋干溶剂，经柱层析分离得到产物〇. 72g(89. 6% )。
[0458] MS (ESI)，m/z: 268 (M++H+)。
[0459] 步骤2 :2,5-二甲基-N-((4'_(三氟甲氧基）_[1，1'-联苯]-4-取代）甲基）吡 唑[l，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830151)
[0460]
[0461] 合成方法如实施例1中的步骤9,产率67. 3%。
[0462] 4 NMR (400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 53 (d，J = 7. 2Hz，1H)，78. 04 (t，J = 5. 6Hz，1H)， 7. 77 (m, 3H), 7. 66 (d, J = 8. 0Hz, 2H), 7. 45 (m, 4H), 6. 81 (d, J = 7. 2Hz, 1H), 4. 53 (d, J = 6. 0Hz, 2H)，2. 56 (s, 3H)，2. 38 (s, 3H)。
[0463] MS (ESI)，m/z: 440 (M++H+)。
[0464] 实施例46 :N-(4-(4-(4-氟苯基）哌嗪-1-取代）苄基）-2,5-二甲基-吡唑 [1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830152)
[0465]
[0466] 合成方法如实施例1和6。
[0467] 4 MIR (400MHz，DMS0-d6) : δ 8.52 (d，J = 6.8Hz，1H)，7.91 (t，J = 5· 6Ηζ，1Η)， 7. 71 (s, 1H), 7. 24(d, J = 8. 4Hz, 2H), 7. 02 (m, 6H), 6. 80 (d, J = 6. 8Hz, 1H) 4. 40 (d, J = 5. 6Hz, 2H)，3. 22 (m, 8H)，2. 53 (s, 3H)，2. 37 (s, 3H)。
[0468] MS (ESI)，m/z: 458 (M++H+)。
[0469] 实施例47 :2, 5-二甲基-N-(4-(4_(三氟甲氧基）苯基）苄基）吡唑[1，5-a]吡 啶-3-甲酰胺（TJ830153)
[0470]
[0471] 合成方法如实施例42。
[0472] 4匪1?(4001抱，0150-(16):5 8.53((1，了 = 7.2抱，1!1)，8.00(8，1!1)，7.73(8，1!1)，7· 39 (m, 4H), 7. 06 (m, 4H), 6. 81 (d, J = 6. 8Hz, 1H), 4. 48 (d, J = 5. 6Hz, 2H), 2. 55 (s, 3H), 2. 38 ( s, 3H) 〇
[0473] MS(ESI)，m/z:456(M++H+)。
[0474] 实施例48 :2, 5-二甲基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯氧基）哌啶-1-取代）苄 基）吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830161)
[0476] 步骤1 :叔丁基4-(4-(三氟甲氧基）苯氧基）哌啶-1-羧酸酯
[0477]
[0478] 将叔丁基4-羟基哌啶-1-羧酸酯（1.08g，5. 37mmol)、4-三氟甲氧基苯酚（1.05g， 5. 9mmol)和 PPh3(L 55g，5. 9mL)溶于 THF(50mL)中，再向反应体系缓慢滴加 DIAD(L 19g， 5. 9mmol)。反应2h后，减压旋蒸溶剂，加入大量水，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机相，经柱 层析得到产物1. 37g(70. 4% )。
[0479] tert-butyl 4-hydroxypiperidine-1-carboxylate
[0480] MS (ESI)，m/z: 362 (M++H+)。
[0481] 步骤2 :(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯氧基）哌啶-1-取代）苯基）甲胺二盐酸盐
[0482]
[0483] 合成方法如实施例1中的步骤2, 3和4。
[0484] MS (ESI)，m/z: 367 (M++H+)。
[0485] 步骤3 :2, 5-二甲基-N-(4-(4-(4-(三氟甲氧基）苯氧基）哌啶-1-取代）苄基） 吡唑[l，5-a]吡啶-3-甲酰胺（TJ830161)
[0486]
[0487] 合成方法如实施例1中的步骤9,产率68. 0%。
[0488] 4 MlR(400MHz，DMS0-d6) : δ 8. 51 (d，J = 7. 2Hz，1H)，7. 90(t，J = 6. 0Hz， 1H) , 7. 70 (s, 1H), 7. 27 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 7. 21 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 7. 08 (d, J = 9. 2Hz, 2H), 6. 93 (d, J = 8. 8Hz, 2H), 6. 79 (dd, J = 7. 2, 1. 2Hz, 1H), 4. 57 (m, 1H), 4. 38 (d, J = 6. 0Hz, 2H)，3. 48 (m, 2H)，3. 02 (m, 2H)，2. 53 (s, 3H)，2. 37 (s, 3H)，2. 03 (m, 2H)，1. 71 (m, 2H)。
[0489] MS(ESI)，m/z:539(M++H+)。
[0490] 实施例49 :5-氯-2-乙基-N-(4-氟苄基）吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺 (TJ4570004)
[0491]
[0492] 合成方法如实施例1。
[0493] ^NMR (400MHz, DMS〇-d6) ： δ 8. 73 (d, J = 7. 2Hz, 1H), 8. 25 (s, 1H), 7. 92 (s, 1H), 7. 3 9 (m, 2H), 7. 16 (m, 2H), 7. 02 (dd, J = 7. 2, 1. 6Hz, 1H), 4. 46 (d, J = 6. 0Hz, 2H), 3. 00 (q, J = 7. 2Hz, 2H), 1. 24(t, J = 7. 6Hz，3H)。
[0494] MS(ESI)，m/z:332(M++H+)。
[0495] 实施例50 :N-(4-氟苄基）-2, 5-二甲基吡唑[1，5-a]吡啶-3-甲酰胺 (TJ4570006)
[0496]
[0497] 合成方法如实施例6。
[0498] ^NMR(400MHz, DMS0-d6) ： δ 8. 52 (d, J = 6. 8Hz, 1H), 8. 00 (t, J = 6. 0Hz, 1H), 7. 72 (s, 1H), 7. 39 (m, 2H), 7. 15 (m, 2H), 6. 80 (d, J = 6. 8Hz, 1H), 4. 46 (d, J = 6. 0Hz, 2H), 2. 5 4(s, 3H), 2. 38(s, 3H) 〇
[0499] MS(ESI)，m/z:298(M++H+)。
[0500] 实施例51 :对自主发光结核菌的抑制活性。
[0501] 1.自主发光结核菌的准备：
[0502] 1. 1培养发光菌
[0503] 将-80°C冻存的无抗性筛选标记的稳定的原代发光菌以2mL接种至含有 50mL7H9 (含有0. 1 %土温80)培养基的锥形瓶中，培养至0D值达到0. 3-1. 0之间。
[0504] 注：检测0D600值注意事项：将菌液加入检测杯后，用封口膜封住杯口，上下颠倒 轻柔摇匀后立即检测，重复三次后取平均值。另外，在1.5mL EP管中检测荧光值，荧光值约 在10-100万/mL以上为宜。
[0505] 1. 2获得检测用菌液并置于384孔板
[0506] 将菌液以原液、稀释10、100及1000倍（稀释方法：取上一浓度100 μ L加 入900 yL 7Η9培养基中为下一浓度，充分吹吸后继续依次稀释）。取荧光值达到 2000-10000/25 μ L的稀释倍数稀释的菌液为检测用菌液。
[0507] 将稀释好的菌液用排枪加入到384孔板中，每孔25 μ L，将384孔板放入37°C孵箱 内孵育约1-2小时后，检测各孔的荧光值，并将该荧光值的平均值纪录为Day 0荧光值。
[0508] 2.配制化合物溶液并置于384孔板保存
[0509] 各检测样品统一用DMS0配置为10mg/mL的母液，并进行3倍梯度稀释，阳性药利 福平（RIF)和异烟肼（INH)用DMS0配置两个浓度，2mg/mL和lmg/mL。将化合物加入到384 孔板中。在384孔板中，每孔50 μ L检测样品，-20 °C保存。
[0510] 3.加药
[0511] 使用Ech〇520超声微量移液系统进行加药，检测样品每孔打样25nL(在总体积 为0. 025ml的7H9培养基中进行操作），形成以化合物终浓度从10 μ g/mL开始的3倍梯 度稀释，终浓度分别为 10mg/mL，3mg/mL，lmg/mL，0. 3mg/mL，0. lmg/mL，0. 03mg/mL，0.0 lmg/ mL，0. 003mg/mL，0. 001mg/mL，0. 0003mg/mL，0. 0001mg/mL，0. 00003mg/mL，0. 00001mg/mL， 0. 000003mg/mL，0.0 OOOOlmg/mL。阳性药分别从 2mg/mL 的母液孔加样 125nL 和 12. 5nL，及 从lmg/mL的母液孔2. 5nL到终体积0. 025nL的培养基中，最后阳性药终浓度分别为10 μ g/ mL，1 μ g/mL，0. 1 μ g/mL。DMS0作为对照。在振荡器上震荡5min，继续培养。
[0512] 4.检测及数据分析
[0513] 37°C孵箱孵育，分别于24小时、48小时、72小时用envision酶标仪检测荧光值。 以荧光值随时间逐渐降低的样品为有活性，其中，RLU为荧光值的相对光单位。结果如表1 所示。
[0514] 表1.化合物对自主发光结核菌的MIClux值
[0517] 活性范围：A 表示< 1 μ g/mL，B 表示 1-10 μ g/mL，C 表示> 10 μ g/mL。
[0518] 实施例52 :平板法测定本发明所述化合物的结核分枝杆菌MIC (最低抑菌浓度）
[0519] 1.结核分枝杆菌标准株H37Rv的液体培养：在7H9培养基中培养，37°C摇床长培 养至菌液600nm下吸光值（0D 6J为0· 3-0. 7〇
[0520] 2.制作各个化合物不同浓度（化合物的浓度设计如表2所示）的7H11平