一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱的制作方法
【专利摘要】本实用新型属于生物技术中的核酸纯化领域，具体涉及一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，解决了现有技术中在核酸的提取以及纯化过程中添加的酶需要在低温下储存，有可能会污染提取的核酸，添加的酶难以在后续的洗涤步骤中完全去除，操作复杂，步骤多，容易出现失误影响最终产量及质量等缺陷，提供一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，包括柱体、固化酶层，主填充物层，复合二氧化硅层；所述主填充物层分为上主填充物层和下主填充物层，固化酶层位于上下两层主填充物之间；本实用新型生产效率高，产品纯度高，结构简单操作方便适宜推广应用。
【专利说明】
一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱
技术领域
[0001]本实用新型属于生物技术中的核酸纯化领域，具体涉及一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱。【背景技术】
[0002]核酸纯化柱可以用于各种材料的DNA/RNA的提取以及纯化。具有操作简单、回收率高、性能稳定等特点，目前产品已经为国内外大多数实验室和公司使用。核酸纯化柱(Spin column)采用硅胶膜作为核酸的特异性吸附材料，而对其他生物材料基本不吸附，可以保障最大程度地回收样品中的DNA/RNA，同时去除其他杂质。
[0003]为了纯化出符合下游实验要求的DNA或RNA，经常需要添加RNAse A或DNAse I来去除不需要的RNA或DNA。但是这些酶尤其是RNAse A难以在后续的洗涤步骤中完全去除。
[0004]固定化酶(immobi 1 ized enzyme)是20世纪60年代发展起来的一种新技术。所谓固定化酶，是指在一定的空间范围内起催化作用，并能反复和连续使用的酶。通常酶催化反应都是在水溶液中进行的，而固定化酶是将水溶性酶用物理或化学方法处理，使之成为不溶于水的，但仍具有酶活性的状态。
[0005]酶固定化后一般稳定性增加，易从反应系统中分离，且易于控制，能反复多次使用。便于运输和贮存，有利于自动化生产，但是活性降低，使用范围减小，技术还有发展空间。固定化酶是近十余年发展起来的酶应用技术，在工业生产、化学分析和医药等方面有诱人的应用前景。现有技术中还没有核酸纯化柱与固定化酶相结合的结构。【实用新型内容】
[0006]为了解决现有技术中在核酸的提取以及纯化过程中添加的酶需要在低温下储存， 有可能会污染提取的核酸，添加的酶难以在后续的洗涤步骤中完全去除，操作复杂，步骤多，容易出现失误影响最终产量及质量等缺陷，本实用新型提供一种生产效率高，产品纯度高，结构简单操作方便的一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱。
[0007]本实用新型解决其技术问题所采用的技术方案如下:一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，包括柱体、固化酶层，主填充物层，复合二氧化硅层;所述柱体包括柱主体、出液口、下管，所述出液口位于柱主体下端，下管与出液口密封连接，所述下管的直径小于柱主体的直径;所述固化酶层、主填充物层、复合二氧化硅层位于柱体内，所述主填充物层分为上主填充物层和下主填充物层，固化酶层位于上下两层主填充物之间，所述复合二氧化硅层位于下主填充物层与出液口之间。
[0008]所述固化酶层包括载体和酶，所述载体为多孔网格状，酶分散在载体内。
[0009]所述载体优选类似石墨结构的多孔网格状，即所述载体为多层，每一层为六边形构成的片状结构，多层片状结构叠加形成多孔网格状结构。
[0010]所述复合二氧化硅层由2层及以上的二氧化硅纤维膜构成。[〇〇11]所述固化酶层，主填充物层，复合二氧化硅层外径等于柱体内径，紧密填塞在柱体内。
[0012]所述复合二氧化硅层紧贴出液口，将主填充物层与下管分隔开。
[0013]所述固化酶层位于柱体中下部，与复合二氧化硅层之间隔有主填充物。
[0014] 1.本实用新型的有益效果在于:本实用新型采用主填充物层间设置固化酶层的结构，不需要自行加入酶，有利于提取性能的稳定，并且也方便了提取试剂盒的存储；
[0015] 2.固定化的酶无须单独的步骤洗涤，不会随洗脱液进入核酸中；使得核酸的提取更加方便，步骤少，损耗小，从而使得效率和产量以及产品质量均得到提升。本实用新型结构科学合理，制造方便，适宜推广应用。【附图说明】
[0016]图1为实施例1结构示意图；
[0017]图2为实施例2载体的一片结构示意图。【具体实施方式】
[0018]下面参照附图详细描述本实用新型的实施方式。
[0019]实施例1:
[0020] 参见图1本实施例结构示意图:
[0021] —种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，包括柱体1、固化酶层2,主填充物层3,复合二氧化硅层4;所述柱体1包括柱主体5、出液口 6、下管7，所述出液口 6位于柱主体5下端，下管7与出液口 6密封连接，所述下管7的直径小于柱主体5的直径;所述固化酶层2、主填充物层3、复合二氧化硅层4位于柱体1内，所述主填充物层3分为上主填充物层3.1和下主填充物层3.2，固化酶层2位于上下两层主填充物之间，所述复合二氧化硅层4位于下主填充物层 3.2与出液口 6之间。
[0022]所述固化酶层2包括载体和酶，所述载体为多孔网格状，酶粘附在载体内所以固化酶层的结构也为多孔网格状。
[0023]所述复合二氧化硅层4由多层二氧化硅纤维膜构成。
[0024]所述固化酶层2，主填充物层3，复合二氧化硅层4外径等于柱体1内径，紧密填塞在柱体1内。
[0025]所述复合二氧化硅层4紧贴出液口 6,将主填充物层与下管7分隔开。[〇〇26] 实施例2:
[0027]参考图2,基于实施例1所述的采用固定化酶结构的核酸纯化柱，实施例2与实施例 1的区别在于所述载体为类似石墨结构的多孔网格状，即所述载体为多层，每一层为六边形构成的片状结构，多层片状结构叠加形成多孔网格状结构。
[0028]当然，以上所述是本实用新型的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本实用新型的保护范围。
【主权项】
1.一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，其特征在于:包括柱体、固化酶层，主填充物 层，复合二氧化硅层;所述柱体包括柱主体、出液口、下管，所述出液口位于柱主体下端，下 管与出液口密封连接，所述下管的直径小于柱主体的直径;所述固化酶层、主填充物层、复 合二氧化硅层位于柱体内，所述主填充物层分为上主填充物层和下主填充物层，固化酶层 位于上主填充物层和下主填充物层之间，所述复合二氧化硅层位于下主填充物层与出液口 之间。2.根据权利要求1所述的一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，其特征在于:所述固化 酶层包括载体和酶，所述载体为多孔网格状，酶分散在载体内。3.根据权利要求2所述的一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，其特征在于:所述载体 为多层，每一层为由六边形构成的片状结构，多层片状结构叠加形成多孔网格状结构。4.根据权利要求1所述的一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，其特征在于:所述复合 二氧化硅层由2层及以上的二氧化硅纤维膜构成。5.根据权利要求1所述的一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，其特征在于:所述固化 酶层，主填充物层，复合二氧化硅层外径等于柱体内径，紧密填塞在柱体内。6.根据权利要求5所述的一种采用固定化酶结构的核酸纯化柱，其特征在于:所述复合 二氧化硅层紧贴出液口，将主填充物层与下管分隔开。
【文档编号】C12M1/12GK205576159SQ201620240029
【公开日】2016年9月14日
【申请日】2016年3月28日
【发明人】李文娴
【申请人】河北蓝梦生物医药科技有限公司