一种脂肪干细胞分离装置的制造方法
【专利摘要】本实用新型涉及一种脂肪干细胞分离装置，包含设置有进料口和出料口的细胞分离腔，分离腔内设置有至少一滤膜，分离腔的进料口与第一个滤膜之间安装有螺旋搅拌浆，螺旋搅拌桨中轴线与分离腔中轴线位于同一纵截面上。本实用新型所提供的脂肪干细胞分离装置，结构简单合理，安装有搅拌桨，可对进入到分离腔内的组织液进行有效搅拌，解决由于组织液的重量差异而通过滤膜的不均匀性，从而导致待分离脂肪肝干细胞与特异捕获抗体层之间的结合率较低，滤膜使用效率低的问题；搅拌桨为螺旋状，增加搅拌效率，减少对细胞的损伤的概率。
【专利说明】
一种脂肪干细胞分离装置
技术领域
[0001 ]本实用新型涉及细胞分离装置，特别涉及一种脂肪干细胞分离装置。
【背景技术】
[0002]脂肪干细胞是近年来从脂肪组织中分离得到的一种具有多向分化潜能的干细胞，主要恢复组织细胞的修复功能，与其它来源的干细胞相似，于具有一定适当的生长因子的环境中，可以分化成特化的细胞，以供应用于组织工程与细胞治疗当中。
[0003]现有的干细胞分离方法包括密度梯度离心技术、选择性细胞凝集和利用细胞表面标志分离纯化细胞的方法，其中利用细胞表面标志分离纯化细胞的方法利用单克隆抗体的特异性和多样性，利用不同抗体的合理组合，分离不同类型的细胞，又包括细胞溶解法、流式细胞仪分选法、平面粘附分离法和免疫磁珠分离法;上述干细胞分离方法中，利用细胞表面标志分离纯化细胞的方法由于分离纯度高、分离效果好而更有应用潜能，但大部分分离方法需要昂贵的仪器或繁复的步骤，不易普及。
[0004]中国专利CN201901672提供了一种脂肪干细胞分离装置，包含一管体，管体内形成有一容室，管体的顶端设有一进料口，管体的底部形成有一出口部，管体内设置至少一滤膜层，滤膜层的周缘是与管体的内壁紧密结合并设于该进料口与该出口部之间，该容室分隔成至少二隔间，其在滤膜层上涂布有群组抗体，细胞通过滤膜会被抗体所捕捉，从而实现脂肪干细胞的分离;所述脂肪干细胞分离装置结果简单，成本低廉，容易操作;但其具有明显缺点，由于组织液内各成分重量不同，难以控制组织液经由滤膜过程的均一性，极易对滤膜造成堵塞，滤膜堵塞后严重影响待分离细胞与涂覆在滤膜表面的抗体层的接触，从而使细胞分离效率较低。
【实用新型内容】
[0005]为了解决上述技术问题，本实用新型提供一种脂肪干细胞分离装置，技术方案为:
[0006]本实用新型提供一种脂肪干细胞分离装置，包含设置有进料口和出料口的细胞分离腔，分离腔内设置有至少一滤膜，分离腔的进料口与第一个滤膜之间安装有螺旋搅拌浆，螺旋搅拌桨中轴线与分离腔中轴线位于同一纵截面上。
[0007]如此技术领域中所知者，依据Rodriguez、Anne-Marie等人研究指出，所述的脂肪干细胞表现的细胞表面标记(ce 11 surface marker)SCD44+、CD49b+、CD105+、CD90+、CD13+、Stro-l-、CD34-、CD15-、CDl 17-、Flk-l-、gly-A-、CD133-、HLA-DR-以及HLA-1low等；因此上述滤膜上可涂布脂肪干细胞特异捕获抗体层，可选自于下列者所构成的群组的抗体:抗-Stro-1 抗体(Ant1-Stro-1 antibody) Jjt_CD34^J^^^(Ant1-CD34antibody)、抗-CD 15 抗体(Ant1-CD15antibody)、抗-CD117抗体(Ant1-CD117antibody)、抗-CD133抗体(Ant1-CD133antibody)、抗-Flk-1 抗体(Ant1-Flk-1 antibody)、抗-g Iy-A抗体(Ant1-g Iy-Aantibody)、抗-HLA-DR抗体(Ant1-HLA-DR antibody)以及其等的组合。
[0008]使用时，可让含有细胞的混合液进入到细胞分离腔，并通过涂布有各种抗体的滤膜层，组织液、血水和其他细胞先通过滤膜由出料口流出，而带有为抗体所辨识的特定细胞标记的细胞将会被滤膜层上的抗体所捕捉，而使得表现有特定细胞标记的细胞(包含所欲的脂肪干细胞)附着于滤膜层上，之后再以溶液冲刷已附着于滤膜层上的脂肪干细胞，作为阳性细胞分选。
[0009]优选地，分离腔内设置有三个滤膜，从靠近进料口处依次为第一滤膜、第二滤膜和第三滤膜。
[0010]优选地，第一滤膜和第二滤膜的滤孔直径为220-350nm，第三滤膜的滤孔直径为400_500nmo
[0011 ]进一步地，进料口与流体传动部件相连接。
[0012]进一步地，螺旋搅拌桨表面涂布有脂肪干细胞特异捕获抗体层，螺旋搅拌桨可与含有脂肪干细胞的组织液进行充分的接触，在其表面涂布抗体层，更能有效结合脂肪干细胞，从而进一步提尚分尚效率。
[0013]更进一步地，第一个滤膜上安装有压力检测装置，进一步地，分离腔靠近进料口处还设有进液管道，进液管道上设置有限速开关。
[0014]更进一步地，分离腔的腔体为双层中空结构，中空结构内设有温控装置，使整个脂肪干细胞分离过程处于恒温状态，有利于维持干细胞活性。
[0015]本实用新型所提供的脂肪干细胞分离装置，结构简单合理，安装有搅拌桨，可对进入到分离腔内的组织液进行有效搅拌，解决由于组织液的重量差异而通过滤膜的不均匀性，从而导致待分离脂肪肝干细胞与特异捕获抗体层之间的结合率较低，滤膜使用效率低的问题;搅拌桨为螺旋状，增加搅拌效率，减少对细胞的损伤的概率。
【附图说明】
[0016]图1.实施例1脂肪干细胞分离装置的局部透视结构示意图；
[0017]图2.实施例2脂肪干细胞分离装置的局部透视结构示意图；
[0018]图3.实施例3脂肪干细胞分离装置的局部透视结构示意图。
【具体实施方式】
[0019]下面结合附图和实施例对本实用新型作进一步的描述。
[0020]实施例1:
[0021]如图1所示，本实施例提供一种脂肪干细胞分离装置，包含设置有进料口101和出料口 102的细胞分离腔I，细胞分离腔I内设置有至少一滤膜2，细胞分离腔I的进料口与第一个滤膜2之间安装有螺旋搅拌浆4，螺旋搅拌浆4中轴线与细胞分离腔I中轴线位于同一纵截面上。
[0022]滤膜2上涂布有脂肪干细胞特异捕获抗体层，使用时，可将经消化的脂肪组织液自进料口传动至细胞分离腔内，使脂肪组织通过各滤膜层，而带有为抗体所辨识的特定细胞标记的脂肪干细胞细胞，会被涂布于滤膜上的特异捕获抗体层所捕捉，而使得表现该等细胞标记的细胞得以附着于滤膜上，之后再以溶液冲刷已附着于各滤膜上的脂肪干细胞。
[0023]本实施例的脂肪干细胞分离装置，安装有搅拌桨，可对进入到分离腔内的组织液进行有效搅拌，解决由于组织液的重量差异而通过滤膜的不均匀性，从而导致待分离脂肪肝干细胞与特异捕获抗体层之间的结合率较低，滤膜使用效率低的问题;搅拌桨为螺旋状，增加搅拌效率，减少对细胞的损伤的概率。
[0024]实施例2:
[0025]如图2所示，本实施例所提供的脂肪干细胞分离装置，与实施例1区别在于，进一步限定，进料口 101与流体传动部件3相连接，进料口连接有流体传动部件，对进入细胞分离腔内的流体的流速和流量有效控制，进一步提高分离效率。
[0026]实施例3:
[0027]如图3所示，本实施例所提供的脂肪干细胞分离装置，与实施例1区别在于，进一步限定，细胞分离腔内设置有三个滤膜2，从靠近进料口处依次为第一滤膜201、第二滤膜202和第三滤膜203，第一滤膜201和第二滤膜202的滤孔直径为220-350nm，第三滤膜203的滤孔直径为400-500nm，第三滤膜还可涂布有与脂肪干细胞特异捕获抗体相连接的抗体大分子蛋白层。
[0028]脂肪干细胞分离过程中，会有一部分脂肪干细胞特异捕获抗体与脂肪干细胞相结合后，未能继续附着在滤膜上，而是随其他杂质通过滤孔过滤下来，增加滤膜层数，增加干细胞收集效率;其中第三滤膜还可涂覆有可与脂肪干细胞特异捕获抗体相连接的抗体大分子蛋白，这样随杂质过滤下来的结合脂肪干细胞的特异捕获抗体与抗体大分子蛋白进一步连接，分子量大大增加，从而不能通过滤膜的滤孔，进一步增加干细胞收集率。
[0029]进一步限定，第一滤膜201上安装有压力检测装置，细胞分离腔I靠近进料口101处还设有进液管道301，进液管道301上设置有限速开关302。
[0030]压力检测装置的设置，可实时监测分离腔内的压力，当压力超过一定范围时，所述滤膜已经超过负荷，需要更换;或者组织液浓度过大，需要对组织液进行稀释等，使所提供的干细胞分离装置更加智能化;细胞分离腔上设置进液管道，可向分离腔内注入消化液、清洗液或稀释液等，进一步增加分离效率、提高分离准确性。
[0031]以上实施例仅为对本实用新型的优选实施方式进行描述，并非对本实用新型的范围进行限定，在不脱离本实用新型设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本实用新型的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本实用新型的权利要求书确定的保护范围内。
【主权项】
1.一种脂肪干细胞分离装置，包含设置有进料口(101)和出料口(102)的细胞分离腔(I)，所述细胞分离腔(I)内设置有至少一滤膜(2)，其特征在于，所述细胞分离腔(I)的进料口(101)与第一个滤膜(2)之间安装有螺旋搅拌浆(4)，所述螺旋搅拌浆(4)中轴线与所述细胞分离腔(I)中轴线位于同一纵截面上。2.如权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，所述螺旋搅拌浆(4)表面涂布有脂肪干细胞特异捕获抗体层。3.如权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，所述进料口(101)连接有流体传动部件(3)。4.如权利要求1所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，所述细胞分离腔内设置有三个滤膜(2)，从靠近进料口处依次为第一滤膜(201)、第二滤膜(202)和第三滤膜(203)。5.如权利要求4所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，所述第一滤膜(201)和第二滤膜(202)的滤孔直径为220-350nm，所述第三滤膜(203)的滤孔直径为400-500nmo6.如权利要求4所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，所述第一滤膜(201)上安装有压力检测装置。7.如权利要求6所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，所述细胞分离腔(I)靠近进料口(101)处还设有进液管道(301)，所述进液管道(301)上设置有限速开关(302)。8.如权利要求1-7任一所述的脂肪干细胞分离装置，其特征在于，所述细胞分离腔(I)的腔体为双层中空结构，所述中空结构内设有温控装置。
【文档编号】C12M1/34GK205687938SQ201620417536
【公开日】2016年11月16日
【申请日】2016年5月9日 公开号201620417536.8, CN 201620417536, CN 205687938 U, CN 205687938U, CN-U-205687938, CN201620417536, CN201620417536.8, CN205687938 U, CN205687938U
【发明人】董白翔, 付静娟
【申请人】北京银丰鼎诚生物工程技术有限公司