专利名称：兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒，特别是涉及一种并行联合检测如克伦特罗、磺胺类、氯霉素、土霉素、己烯雌酚及恩诺沙星等多种兽药组分的酶联免疫试剂盒。
背景技术：
食品中残留兽药的分析检测是保证食品安全性的重要手段。兽药残留分析技术是复杂混合物中的痕量分析技术，现阶段，气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及与质谱(MS)联用(GC/MS、LC/MS)等仪器法分析技术是残留兽药分析和定量测定的主要手段。仪器法定量准确，灵敏度高，但其专业性强，需要昂贵庞大的设备和较长的样品处理时间，耗费时间长、费用高，不易被基层单位工作人员掌握，不适合小规模、分散的畜禽产品生产与销售体系中经常性的现场快速检测，往往分析结果出来，肉奶蛋等早已被食用。为防止高残毒的肉、奶、蛋等食品进入居民餐桌，需一种快速、简便、安全、可靠、基层单位易掌握的检测技术。、酶免疫检测分析方法(enzyme immunoassays，EIA)是利用抗原与抗体的特异性结合作用来选择性识别和测定可以作为抗体或抗原的待测物的方法，由于样品中存在的其它干扰物不会产生免疫识别，因此免疫分析具有高特异性和高分辨率，应用十分广泛。
目前在兽药残留分析中应用最多的是酶联免疫吸附检测技术(enzyme-linked immunosorbent Assay，ELISA)，即通过在合适的载体上，酶标记的限定量抗原与未知抗原(兽药)竞争固相抗体结合位点或固相抗原与未知抗原竞争限定量的酶标记抗体结合位点，形成抗原抗体复合物。在一定底物参与下，复合物上的酶催化底物，使其水解，氧化或还原成另一种带色产物。根据有色产物的出现，客观反映酶的存在，即酶标抗原-抗体或酶标抗体-抗原复合物的存在。由于酶的降解底物水平与显色程度成正比，通过眼观或分光光度计测定，即可定性或定量检测未知抗原。
免疫检测技术虽有取样量少、前处理简单、容量大、仪器化程度低、分析成本低、效率高、灵敏等优点，但是ELISA也存在着一些缺陷，如对试剂的选择性很高，对结构类似的化合物有一定程度的交叉反应，分析分子量很小的化合物或很不稳定的化合物有一定的困难；鉴于兽药品种繁多，在动物源性食品中的残留兽药可能为多种组分兽药的同时残留，现行商品化的兽药残留ELISA试剂盒的最大的缺点就在于目前所有的该类试剂盒都只能分析单一成分(含单一类别)的残留兽药，而不能在现场、在活体、在同一时间内快速分析检测多种组分、多种类别的残留兽药。
发明内容
本发明的目的是要提供一种兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒，可快速检测多组分(含多类别)残留兽药(如克伦特罗、磺胺类、氯霉素、土霉素、己烯雌酚及恩诺沙星等)，通过并行联合检测，不仅可以在现场、在活体、在同一时间内快速分析检测多种组分、多种类别的残留兽药，还可以提供各种组分、各种类别的兽药在动物源性食品中具体的残留量数值及超标情况。适用于各级兽药及饲料监察所、进出口检验检疫局及大型食品生产加工企业等单位对动物源性食品中残留兽药的检测及监控。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为这种兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒由载体盒、酶标板条及配套试剂组成，所述载体盒含载体盒盖板及载体盒背板，载体盒背板内设有可以放置酶标板条的载体槽，酶标板条由8孔或12孔酶标板孔所构成，其每孔内均包有合适的抗原(如克伦特罗等)或抗体(如抗克伦特罗等的抗体)，配套试剂包括样品前处理试剂、酶联抗体或酶联抗原、标样、清洗液、底物液及终止液，载体盒背板内设有12个以上载体槽，载体槽内分别放置有能检测出2到12种多组分残留兽药(如克伦特罗、磺胺类、氯霉素、土霉素、己烯雌酚及恩诺沙星等六组分)的、用不同颜色或记号标记的酶标板条。
所述的载体盒背板内的载体槽中还可以增设多于12个、可检测其它组分残留兽药的酶标板条。
本发明的兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒可利用多组分免疫检测技术集成化、高通量、并行化的原理，将这些各组分或各类别酶标板条以平行方式任意组合，集成在一起，能一次性同时检测动物源性食品中的多种组分残留兽药。通过大量采用该类试剂盒，可实现对大量样品多组分残留兽药的同时检测，不仅改进了采用HPLC等仪器法用于兽药残留检测时所具有的操作不便、费时、价格昂贵等不足，而且比从单组份酶联免疫检测试剂盒所获得的信息丰富而全面，能实现一次性检测出多种组分的残留兽药，因此在各级兽药及饲料监察所、进出口检验检疫局及大型食品生产加工企业等进行动物源性食品中残留兽药的检测及监控中具有很高的使用价值。
下面结合附图对本发明实施例作进一步的表述。
图1为兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒的载体盒的结构示意图。
图2为兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒的酶标板条的结构示意图。
图3为兽药残留多组分酶联免疫试剂盒载体盒的底座的结构示意图。
具体实施例方式
图1、图2和图3中，本发明的兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒由载体盒1和酶标板条5组成，载体盒1含载体盒盖板2和载体盒背板3，载体盒背板3呈长方型，载体盒1内设有可以放置12个(也可更多)酶标板条5的载体槽4，酶标板条5包含8个或12个酶标板孔6，其每孔内均包被有合适的抗原或抗体，载体槽4内根据需要，至少可分别放置能检测出2到12种多组分残留兽药(如克伦特罗、磺胺类、氯霉素、土霉素、己烯雌酚及恩诺沙星等六组分)的、用不同颜色或记号标记的酶标板条5，用于同时检测动物源性食品，如肉类、奶类及水产品类等食品中的多组分残留兽药。
使用时，将要检测的肉、奶及水产品等样品经样品前处理试剂处理后，按照说明书要求，于酶标板孔6中同时加入待测样品及合适浓度的酶标抗体，在同一条酶标板条6的其他板孔中加入同时加入不同浓度的标样及合适浓度的酶标抗体，于37℃下孵育1小时，加入底物液显色，再加入终止液终止反应后，即可肉眼观察酶标板孔6的显色情况进行定性检测，或置于酶标仪中进行读数进行定量检测。
以同时检测猪肉中的克伦特罗、磺胺类、氯霉素、土霉素、己烯雌酚及恩诺沙星等6种残留兽药为例，将猪肉样品分别经样品前处理试剂处理后，于1#酶标板条6的1#、2#板孔中均同时加入50μl待测样品及100μl用酶标记的抗克伦特罗抗体，于3#至8#板孔中均同时加入50μl不同浓度的克伦特罗标样及100μl酶标记的抗克伦特罗抗体，同理，2#、3#、4#、5#及6#酶标板条6中对应的标样及酶标记抗体分别为磺胺类标样/抗磺胺类酶标记抗体、氯霉素标样/抗氯霉素酶标记抗体、土霉素标样/抗土霉素酶标记抗体、己烯雌酚标样/抗己烯雌酚酶标记抗体及恩诺沙星标样/抗恩诺沙星酶标记抗体。之后，将此6条酶标板条6置于同一载体槽4中，于37℃下孵育1小时后，加入底物液显色，再加入终止液终止反应后，即可置于酶标仪中进行分析读数，根据每条酶标板条6中3#至8#标样显色情况所作标线即可查出1#及2#对应待测样品的浓度值。这样就可以一次性地同时检测到猪肉样品中克伦特罗、磺胺类、氯霉素、土霉素、己烯雌酚及恩诺沙星等6种残留兽药的残留浓度值。
应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。上述实施例中未注明具体条件的实施方法，通常按照常规条件如实验室手册中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
权利要求
1.一种兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒，其特征在于其由载体盒(1)和酶标板条(5)组成，载体盒(1)含载体盒盖板(2)和载体盒背板(3)，酶标板条(5)包含有8个或12个酶标板孔(6)，载体盒内设有12个以上(包括12个)存放能检测2～12种多组分残留兽药的、用不同颜色或记号标记的酶标板条(5)的载体槽(4)。
2.根据权力要求书1所述的兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒，其特征在于所述的载体盒背板(3)内的载体槽(4)中还可以增设多于12个、可检测其它组分残留兽药的酶标板条(5)。
全文摘要
本发明公开了一种兽药残留多组分酶联免疫检测试剂盒，由载体盒和酶标板条组成，载体盒含载体盒盖板和载体盒背板，酶标板条包含有酶标板孔，载体盒内设有存放用不同颜色或记号标记的酶标板条的载体槽。这种检测试剂盒可快速检测多组分(含多类别)残留兽药，不仅可以在现场、在活体、在同一时间内快速分析检测多种组分、多种类别的残留兽药，还可以提供各种组分、各种类别的兽药在动物源性食品中具体的残留量数值及超标情况。适用于各级兽药及饲料监察所、进出口检验检疫局及大型食品生产加工企业等单位对动物源性食品中残留兽药的检测及监控。
文档编号G01N21/00GK1896739SQ20051001091
公开日2007年1月17日 申请日期2005年7月15日 优先权日2005年7月15日
发明者王允军 申请人:昆明十度科技有限公司