专利名称：一种检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型属于病毒检测的技术领域，更详细说涉及一种检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒。
背景技术：
高致病性禽流感是高致病性禽流感病毒所引起的禽类烈性传染病，发病急、传播快、致死率高，对养殖业可造成致命性打击，高致病性禽流感病毒的亚型通常为H5和H7，2004年发生于中国和亚洲其他国家和地区的禽流感病毒为H/N1亚型，由于该亚型不仅对亚洲养殖业造成严重经济损失，而且在泰国、越南还造成了人的死亡，因而又具有重要的公共卫生学意义，在禽流感控制环节中最重要的是快速诊断，及时划定疫点、疫区并采取封锁等控制措施，防止疫情扩散，因此建立一种灵敏、快速的诊断方法具有重要意义。
禽流感病毒检测目前主要采用的技术方法有HA、HI、ELISA、琼脂扩散试验、免疫荧光技术、RT-PCR、荧光RT-PCR以及病毒的分离鉴定等。比较快速准确的技术是ELISA和荧光RT-PCR，但这两种技术都需要特殊的仪器设备，并且检测时间在2小时以上，检测价格较贵。所有这些技术方法都不能在基层生产场、检疫站和临床等现场使用，必须有专门的实验室；免疫金胶体层析技术虽然是一种较成熟的技术，但对不同的抗原抗体系统的应用有差异，包括原料来源、试剂配制、生产工艺等都不同，需要新的设计和试验。
发明内容
本实用新型的目的是根据免疫金胶体层析技术特点和禽流感抗原抗体系统特点，设计一种检测鸡血液中禽流感病毒抗体的装置为达到本实用新型的目的采用如下技术方案一种检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒，包括盒底、试剂条、盒盖，其特征是试剂条由在PVC板上用不干胶且相互之间按次序首尾搭接固定有A，B，E，D四部分吸水材料A，在吸水材料A一侧设置由含有抗鸡IgG抗体标记的金胶体颗粒和鼠IgG标记的金胶体颗粒的液体物质干燥脱水而成的胶体金垫B，在胶体金垫B一侧设置硝酸纤维素膜区E，硝酸纤维素膜区E其中包被有禽流感病毒特异的抗原物质(T线)和用于实验对照用的羊抗鼠IgG抗体(C线)，在硝酸纤维素膜区E一侧设置吸水材料D组成；试剂条放入盒底上的支撑肋上，试剂条的吸水材料A对应盒盖上的S，盒盖上的凸柱嵌入盒底上的凸起孔中，在盒盖上面印有C、T、S字母，C代表对照用的羊抗鼠IgG抗体的质控线；T代表包被有禽流感病毒特异的抗原物质的反应线；S代表与试剂条的玻璃纤维膜区对齐用于指示加样位置；C/T窗口用于显示检测结果构成。
所述的检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒，其特征在于，试剂条吸水材料A可选择玻璃纤维膜、无纺布或其它类似吸水材料；吸水材料D可选择吸水纸、无纺布或其它类似吸水材料。
所述的检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒，其特征在于，盒盖是采用塑料注塑一体形成的，盒盖的长、宽、高以试剂条的长、宽、高配合设置，在盒盖位于其中心线左侧上设置长形孔为反应区孔，在反应区孔一侧设置圆形孔为加样孔，在反应区孔、加样孔两侧对应有间隔地设置多个凸柱，以便与盒底上的凸起孔配合连接，在盒盖上反应区孔上面印有C、T字母，加样孔上面印有S字母，C代表对照用的羊抗鼠IgG抗体的质控线；T代表包被有禽流感病毒特异的抗原物质的反应线；S代表与试剂条的A区对齐用于指示加样位置；C/T窗口用于显示检测结果；盒底是采用塑料注塑一体形成的，盒底的长、宽、高以试剂条的长、宽、高配合设置，在盒底位于其中心线上设置类似“[”形状的凸起框为限位板10，限位板10的宽度以试剂条的宽度为限，限位板10的凸起框以高于支撑肋低于凸起孔为限，在限位板10一侧设置多条低于限位板10能满足于可放置试剂条的长、宽、高的支撑肋，在支撑肋另一端的两侧设置限位板8，限位板8的高与限位板10一样高，长度有一段即可，也可设置与限位板10连通的形式，在限位板8两侧对应有间隔地设置多个凸起孔，以便与盒盖上的凸柱配合连接试剂盒的组装将检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂条放入盒底的支撑肋上，盒盖上S孔与试剂条的A区对齐，然后再将盒盖上的凸柱插入盒底上的凸起孔中，即为完成试剂盒的组装。
所述的检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒，其特征在于，样品稀释液是由不影响装置反应，但能很好的溶解样本和胶体金的缓冲液，比如PBS，生理盐水等装入塑料滴瓶中。
此试剂盒不需要任何仪器设备，简便快速；适用于现场快速测定禽流感疫情。反应即灵敏又反应完全、可靠。
图1是本实用新型的检测血液抗体试剂条的结构示意图。
图2是本实用新型的检测血液抗体试剂盒的盒盖俯视图。
图3是本实用新型的检测血液抗体试剂盒的阴性反应状态示意图。
图4是本实用新型的检测血液抗体试剂盒的阳性反应状态示意图。
图5是本实用新型的检测血液抗体试剂盒的反应无效状态示意图。
图6是本实用新型的检测血液抗体试剂盒的盒盖仰视图。
图7是本实用新型的检测血液抗体试剂盒的盒底俯视图。
1盒盖 2加样孔3凸柱 4反应区孔5盒底 6凸起孔7吸水材料槽8限位板9支撑肋10限位板C/T检测显示区 S加样孔C质控线T反应线A样品加入区B胶体金垫E膜区 D吸水材料具体实施方式
以下结合附图详细说明本实用新型的检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒结构。如图1-图7所示，本实用新型的检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒是由盒盖1、盒底5、抗体胶体金快速试剂条、样品稀释液构成。盒盖1是采用塑料注塑一体形成的，盒盖1的长、宽、高以试剂条的长、宽、高配合设置，在盒盖1位于其中心线左侧上设置长形孔为反应区孔4，在反应区孔4一侧设置圆形孔为加样孔2，在反应区孔4、加样孔2两侧对应有间隔地设置多个凸柱3，以便与盒底5上的凸起孔6配合连接，在盒盖1上反应区孔4上面印有C、T、S字母，C代表对照用的羊抗鼠IgG抗体的质控线；T代表包被有禽流感病毒特异的抗原物质的反应线；S代表与试剂条的A区对齐用于指示加样位置；C/T窗口用于显示检测结果。
盒底5是采用塑料注塑一体形成的，盒底5的长、宽、高以试剂条的长、宽、高配合设置，在盒底5位于其中心线上设置类似“[”形状的凸起框为限位板10，限位板10的宽度以试剂条的宽度为限，限位板10的凸起框以高于支撑肋9低于凸起孔6为限，在限位板10一侧设置多条低于限位板10能满足于可放置试剂条的长、宽、高的支撑肋9，在支撑肋9另一端的两侧设置限位板8，限位板8的高与限位板10一样高，长度有一段即可(也可设置与限位板10连通的形式)，在限位板8两侧对应有间隔地设置多个凸起孔6，以便与盒盖1上的凸柱3配合连接。
试剂条的结构如图1所示，由A，B，E，D四部分组成，样品加入区A可选择玻璃纤维膜、无纺布或其它类似吸水材料，本实施例由玻璃纤维膜构成。胶体金垫B由含有抗鸡IgG抗体标记的金胶体颗粒和鼠IgG标记的金胶体颗粒的液体物质干燥脱水而成。膜区E为硝酸纤维素膜区，其中包被有禽流感病毒特异的抗原物质(T线)和用于实验对照用的羊抗鼠IgG抗体(C线)。D为吸水材料区，本实施例由吸水纸构成。各部分用不干胶固定在PVC板上，且相互之间按次序首尾搭接，以保证液体在虹吸作用下从A流向D。
试剂盒的组装将检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂条放入盒底5的支撑肋9上，S孔与试剂条的A区对齐，然后再将盒盖1上的凸柱3插入盒底5上的凸起孔6中，即为完成试剂盒的组装。
样品稀释液是由不影响装置反应，但能很好的溶解样本和胶体金的缓冲液比如PBS，生理盐水等用塑料滴瓶装。
实施例检测过程通过S孔向A区加入10μl的鸡血清、血浆或全血液，再滴加50～100μl稀释液进入S孔。
稀释液将样品稀释后首先流向B区，与其中的金胶体等物质溶解，然后流向E区的硝酸纤维薄膜。样品中的鸡IgG将首先与金胶体标记的抗鸡IgG形成复合物鸡IgG-抗鸡IgG-金胶体颗粒。
当以上复合物液体流经膜区时，如果鸡IgG中有特异的抗禽流感病毒IgG抗体，则会在T线处形成红色的沉淀线，复合物液体继续流向T线，则其中的鼠IgG标记的金胶体会与T线中的羊抗鼠IgG抗体结合而形成红色沉淀线。
由于鸡感染禽流感病毒后，短期即会在血液中生成抗禽流感病毒抗体，因而该装置可方便快速地检测鸡是否感染禽流感病毒。
抗体快速检测板采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析技术定性检测及血清中是否含有禽流感抗体。检测时，将10μl鸡血或血清加入检测板加样孔(S)中，再加一滴稀释液，样本中的禽流感抗体与标记的羊抗鸡胶体金相结合，在毛细效应下向上层析。在反应区(T)与包被在膜上的特异性禽流感抗原反应，呈现出一条紫红色反应线(T)。反应区同时包被有一条质控线(C)作为对照。故当出现一条紫红色质控线(C)和一条反应线T时该检测结果为阳性。如样本中无禽流感抗体，仅出现一条质控线(C)，此检测结果为阴性。
此方法不需要任何仪器设备，简便快速；适用于现场快速测定禽流感疫情，反应即灵敏又反应完全、可靠。
权利要求1.一种检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒，包括盒底、试剂条、盒盖，其特征是试剂条由在PVC板上用不干胶且相互之间按次序首尾搭接固定有(A)，(B)，(E)，(D)四部分吸水材料(A)，在吸水材料(A)一侧设置由含有抗鸡IgG抗体标记的金胶体颗粒和鼠IgG标记的金胶体颗粒的液体物质干燥脱水而成的胶体金垫(B)，在胶体金垫(B)一侧设置硝酸纤维素膜区(E)，硝酸纤维素膜区(E)其中包被有禽流感病毒特异的抗原物质(T线)和用于实验对照用的羊抗鼠IgG抗体(C线)，在硝酸纤维素膜区(E)一侧设置吸水材料(D)组成；试剂条放入盒底上的支撑肋上，试剂条的吸水材料(A)对应盒盖上的(S)，盒盖上的凸柱嵌入盒底上的凸起孔中，在盒盖上面印有(C)、(T)、(S)字母，(C)代表对照用的羊抗鼠IgG抗体的质控线；(T)代表包被有禽流感病毒特异的抗原物质的反应线；(S)代表与试剂条的玻璃纤维膜区对齐用于指示加样位置；(C/T)窗口用于显示检测结果构成。
2.根据权利要求1所述的检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒，其特征在于，试剂条吸水材料(A)可选择玻璃纤维膜、无纺布或其它类似吸水材料；吸水材料(D)可选择吸水纸、无纺布或其它类似吸水材料。
3.根据权利要求1所述的检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒，其特征在于，盒盖是采用塑料注塑一体形成的，盒盖的长、宽、高以试剂条的长、宽、高配合设置，在盒盖位于其中心线左侧上设置长形孔为反应区孔，在反应区孔一侧设置圆形孔为加样孔，在反应区孔、加样孔两侧对应有间隔地设置多个凸柱，以便与盒底上的凸起孔配合连接，在盒盖上反应区孔上面印有C、T字母，加样孔上面印有S字母，C代表对照用的羊抗鼠IgG抗体的质控线；T代表包被有禽流感病毒特异的抗原物质的反应线；S代表与试剂条的A区对齐用于指示加样位置；C/T窗口用于显示检测结果；盒底是采用塑料注塑一体形成的，盒底的长、宽、高以试剂条的长、宽、高配合设置，在盒底位于其中心线上设置类似“[”形状的凸起框为限位板(10)，限位板(10)的宽度以试剂条的宽度为限，限位板(10)的凸起框以高于支撑肋低于凸起孔为限，在限位板(10)一侧设置多条低于限位板(10)能满足于可放置试剂条的长、宽、高的支撑肋，在支撑肋另一端的两侧设置限位板(8)，限位板(8)的高与限位板(10)一样高，长度有一段即可，也可设置与限位板(10)连通的形式，在限位板(8)两侧对应有间隔地设置多个凸起孔，以便与盒盖上的凸柱配合连接试剂盒的组装将检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂条放入盒底的支撑肋上，盒盖上(S)孔与试剂条的(A)区对齐，然后再将盒盖上的凸柱插入盒底上的凸起孔中，即为完成试剂盒的组装。
专利摘要本实用新型涉及一种检测鸡血液中禽流感病毒抗体的试剂盒，其试剂条由在PVC板上用不干胶按次序首尾搭接固定有四部分吸水材料(A)，在吸水材料(A)一侧设置由含有抗鸡IgG抗体标记的金胶体颗粒和鼠IgG标记的金胶体颗粒的液体物质干燥脱水而成的胶体金垫(B)，在胶体金垫(B)一侧设置硝酸纤维素膜区(E)，硝酸纤维素膜区(E)其中包被有禽流感病毒特异的抗原物质和用于实验对照用的羊抗鼠IgG抗体，在硝酸纤维素膜区(E)一侧设置吸水材料(D)组成；试剂条放入盒底上的支撑肋上，盒盖上的凸柱嵌入盒底上的凸起孔中构成，此试剂盒简便快速；适用于现场快速测定禽流感疫情，反应即灵敏又反应完全、可靠。
文档编号G01N33/544GK2862033SQ20062002517
公开日2007年1月24日 申请日期2006年1月19日 优先权日2006年1月19日
发明者李洲, 许诚, 刘辉 申请人:天津中新科炬生物制药有限公司