专利名称：：分析脂质体的方法分析脂质体的方法本发明涉及定性和/或定量测定测试介质，优选液体测试介质中脂质囊泡或脂质体膜的形态完整性和完好性的方法。发明背景术语"脂质体"起源于希腊语，其表示"脂肪微粒(fattycorpuscle)"。脂质体是无法用光学显微镜看到的非常小的中空球体，也称为囊泡。这些囊泡由围绕水性核心的一个或多个脂双层构成。在化妆品或药物中，脂质体是作为活性成分运输系统的首选。此外，一些情况也利用了脂质体的稳定作用。另外，因为囊泡诸组分的化妆品和药学相关特性，也常使用脂质体本身。文献中首次报道的脂质体由磷脂构成(ADBangham，Adv.LipidRes.1，65-104，1963)。即使如今，大多数脂质体也由磷脂构成，例如纳米体(nanosome)。然而，脂质体也包括特殊的脂质体类型，例如神经酰胺脂质体(cerasome)(神经酰胺)、鞘脂体(sphingosome)(鞘月旨)和非离子型表面活性剂脂质体(niosome)(非离子表面活性剂)-它们均是"脂肪微粒"；脂质中的变化意味着囊泡膜具有不同特性。脂质体一般从卵磷脂制得；卵磷脂通常从大豆植物或鸡蛋获得。术语"卵磷脂"被用于描述磷脂(PL)、油及其它亲脂性成分的混合物，也可以只用于磷脂组分本身。在一些情况中，术语"卵磷脂"表示特定的磷脂，即磷脂酰胆碱(PC)。所有磷脂由亲脂性部分(脂肪酸)和亲水性头基团构成，其中脂肪酸和头基团经间隔基团，一般是甘油而酯化。由磷脂产生的脂质体的稳定性取决于它们的磷脂酰胆碱含量及其脂肪酸组成。在水性制剂和凝胶中，磷脂酰胆碱含量高(〉70%)产生稳定的脂质体。为产生囊泡，加入水合磷脂酰胆碱和/或胆固醇可提高稳定性。在化妆品和制药工业中，为增加脂质体所含活性物质的效力和稳定性，将加载了活性成分的脂质体掺入制品。许多不同的脂质体制品或制剂可以例如喷剂、凝胶、乳剂、洗剂、乳膏、油膏等形式商品化购得。特别是在药物制剂方面，稳定性和完整性的问题，即所制备制剂的形态完整性和囊泡完好性问题一再出现。在这方面，讨论中至关重要的一点是制品的各组分与脂质囊泡可能的相互作用。已知乳化剂和表面活性剂能增溶脂质囊泡或脂质体。增溶作用干扰了囊泡的膜结构，再也不能确保膜的形态完整性，从而严重影响或者甚至破坏了囊泡包裹活性成分的的优点。例如，JTSimonnet的一篇文章(JTSimonnet,Cosmetics&ToiletriesMagazine109，45-52,1994)描述了水溶液中各种表面活性剂与脂质体之间的这种相互作用。所引用的Simonnet文章中述及了各种增稠剂(生物聚合物)的保护性作用。制剂的各种功能组分可影响稳定性，因而不但可从负面而且可从正面影响脂质囊泡/脂质体的完整性。随着对高品质化妆品和药物制剂的需求不断增加，研究和评估脂质囊泡/脂质体与制剂诸组分的积极和/或消极相互作用的重要性与日倶增。对于化妆品和药物制剂的效力和效率，开发和建立能分析化妆品或药物制剂中脂质囊泡/脂质体的稳定性和完整性，即形态完整性和完好性的分析方法至关重要。然而，根据现有技术，定量测定化妆品或药物制剂中脂质囊泡/脂质体的稳定性和完整性，或形态完整性和完好性是不可能的或基本上是不能令人满意的。在这方面，可用的分析方法，例如电子显微术(EM)、静态和动态光散射实验(SLS，DLS)和不对称场流分级法(AFFF)应用有限。利用EM检验化妆品和药物制剂的冷冻样品，就可以检测脂质囊泡/脂质体并评估成像囊泡的结构(形态完整性)和大小(在理想情况下)，但利用该方法不能定量测定制品中未破坏和完好的脂质囊泡/脂质体的含量或分数。该方法的另一主要缺点在于其工艺和设备昂贵。此外，EM结果的应用十分依赖于研究人员的实验和解读经验。化妆品或医药工业采用SLS和DLS实验，例如光子相关光谱(PCS)来评估脂质囊泡/脂质体的大小和大小分布。这些方法对于脂质囊泡/脂质体的产品开发和质量控制至关重要。然而，一般而言，检测的是非常稀的脂质囊泡/脂质体乳剂，而不是正常使用的制品。在SLS和DLS方法中，必须高度稀释待检测的溶液，因为较大囊泡的存在，例如乳膏剂的脂肪滴会强烈影响和歪曲光散射实验，这些方法不适于定量和定性地检测化妆品或药物制剂中脂质囊泡/脂质体的形态完整性和完好性。虽然在最佳条件下，利用动态光反向散射操作的新开发设备，例如HoribaLB-550V(拉奇技术公司(RetschTechnologyGmbH)，德国)或ZetasizerNano系列(马尔文仪器有限公司(MalvernInstrumentsLtd),英国)能表征浓度为20%到最大40%的脂质囊泡/脂质体乳剂中的颗粒。但这些设备不能检测未稀释的样品并提供定量信息。利用AFFF定量和定性检测化妆品或药物制剂中脂质囊泡/脂质体的形态完整性和完好性会发生同样的问题。在该方法中，可将不同尺寸的囊泡分开，例如乳膏制剂中的脂质囊泡/脂质体和脂肪滴，然后独立地分析它们的大小和大小分布。待测定的脂质囊泡/脂质体的大小必须与制剂中油滴的大小有实质性差异，以使各参数不会重叠。可利用AFFF方法获得定量信息。然而，在制备样品时还是必须采取合适的稀释步骤；这些步骤不仅会改变化妆品或药物制剂的物理特性，例如粘性、流变学特性、透明度等，还会实质性地改变脂质囊泡/脂质体的物理和化学环境。因此，可以假定在这些条件下脂质囊泡/脂质体在结构上可能重组。因而这些实验结果不再能反映化妆品或药物制剂中脂质囊泡/脂质体的原始状态。发明目的本发明目的是提供一种测定在各种介质中，特别是在化妆品/药物制品中脂质囊泡/脂质体的形态完整性和完好性的方法，这种方法的使用方式不依赖于介质的理化特性并且不需要任何稀释步骤。发明详述凭借采用电子自旋共振(ESR)光谱法定性和/或定量测定在测试介质中，优选在液体测试介质中的脂质囊泡或脂质体膜的形态完整性和完好性的方法实现了本发明目的，其中a)用ESR-活性探针标记待分析的脂质囊泡/脂质体；b)将一定量的标记脂质囊泡/脂质体引入测试介质来制备样品；C)将一定量的标记脂质囊泡/脂质体引入对照介质来制备阳性对照；d)将一定量的ESR-活性探针引入测试介质来制备阴性对照；e)记录样品、阳性对照和任选的阴性对照的ESR光谱；和f)互相比较记录的ESR光谱。利用本发明方法测定在测试介质中，优选在液体测试介质中的脂质囊泡或脂质体膜的形态完整性和完好性。掺入脂质囊泡/脂质体进行研究、开发或使用的测试介质，特别是液体介质可以是任何类型。本发明所用的术语"液体介质"包括低粘度到高粘度液体介质，包括任何化妆品或药物制品等，例如水包油和油包水乳剂、水凝胶如卡波姆凝胶或海藻酸盐凝胶、和用包括防腐剂、稳定剂等在内的许多不同组分形成的复合软膏、糊剂、乳膏或洗剂。例如，掺入基质的脂质囊泡和/或脂质体可以溶解或包埋的形式存在，本发明方法可测定溶解、包埋或以其它方式存在的囊泡未受损和完好的程度如何。本发明所用的术语"脂质囊泡/脂质体"表示双层膜囊泡和多层囊泡；活性成分可以处于囊泡内部的溶液中或在诸层之间。此外，还包括称为纳米颗粒(nanoparticle)的单层囊泡。例如，如果囊泡膜受到介质或介质中的物质(例如，乳化剂、表面活性剂)影响，以致于囊泡破裂、或者膜组分从膜装配体(membraneassembly)中释放出来(例如通过从整合入膜的活性成分释放膜组分或膜碎片)，则脂质囊泡和/或脂质体的膜在形态上不再完好。如果膜的流动性增加，以致于在膜中形成孔(临时的)，介质可经这些孔穿入囊泡和/或物质可从囊泡内部放出，即进入介质，则囊泡膜也不再完好。膜以此种方式受到影响后即不再完好，因为囊泡的功能是隔离内部于外部，反之亦然(囊泡包裹)。如果从外面看膜似乎完好，因为囊泡既未破裂也未见碎片或孔，尽管看上去是完整的，但膜的流动性极大增加使得膜的屏障特性受到极大影响，以致于介质或活性成分分子可经过表面上完好的膜移动，或者各膜或活性成分分子可从膜释放，则囊泡膜也不再完好。本发明提供利用电子自旋共振(ESR)光谱法测定囊泡膜的完好性和完整性的方法。电子自旋共振(ESR)的依据是在磁场中定向的顺磁性样品能吸收微波。这是研究生物膜和人工膜的理化过程的合适光谱学方法。自旋标记能使膜特性得以表征，例如流动性和迁移性，并可使亲脂性分子与膜脂质的相互作用得以表征。为此目的，对样品进行顺磁性标记，然后使用ESR-活性探针，这种探针通常代表待检测膜中类似的脂质分子。这主要表示具有顺磁性ESR-活性基团的脂肪酸、酯、磷脂、胆固醇及其衍生物，例如脱氧(doxyl)基团(2,2-二取代4,4-二甲基-3-噃唑烷氧基)。一些所述ESR探针可市售购得。本发明所用的ESR-活性探针的实例是1-棕榈酰基-2如-脱氧)-硬脂酰基-甘油-3-磷酸胆碱，其中11=5、7、10、12、14或16;优选n=5。或者，适合于执行本发明方法的ESR-活性探针是5-脱氧胆固醇或其甲酯和n-脱氧脂肪酸或其甲酯，其中n优选5或16。可采用各种方法将ESR-活性探针形式的自旋标记加入膜。例如，当使用人工膜时，可以先将自旋标记加入脂质，再制膜(先标记)。以此方式，自旋标记分子直接均匀分布在膜中。或者，也可以通过将ESR-活性探针加入细胞(cell)或脂质体在合适的溶液配成的悬浮液、或者通过溶解将ESR-活性标记作为固体缓慢吸收来进行膜的后标记(后标记)。在后标记的情形中，必须使用极低浓度的ESR-活性探针，以便使探针能在膜中均匀分布。脂质膜是有序的流体系统，其中就迁移性而言，ESR-活性探针分子的自由度有限。这反映在光谱分布的高度各向异性中，因而产生出高度组织化(structured)的ESR信号。脂质膜有序系统中的任何紊乱会改变ESR-活性探针的定向、环境和迁移性，这表现在ESR信号的变化上。ESR-活性探针在膜中运动的各向异性自由度可描述为顺序参数(orderparameter)S33，其数值可以介于0-1之间。有序参数S越大，膜排列越有序且刚度越高。膜的流动性可用相关时间(correlationtime)TR描述。相关时间是ESR-活性探针绕其自身纵轴旋转所需的时间。在膜中，化约为10"-10'9秒。相关时间越短，膜中的流动性越强。通过量子力学参数模拟光谱分布使得特定膜中的ESR-活性探针的有序参数S33和相关时间化可以量化。该类评估需要合适的模拟或拟合程序(NNSL，弗雷德和施奈德公司(Freed&Schneider))。然而，迁移性参数对于本发明方法不是至关重要的。此外，光谱分布应能显示在特定测试介质中，例如在特定化妆品/药物制剂中有多少脂质囊泡/脂质体是未损坏和完好的而不再如此的脂质囊泡/脂质体的分数是多少。在本发明方法中，先用ESR-混杂探针标记待研究的脂质囊泡/脂质体。然后，将标记的脂质囊泡/脂质体掺入各种介质，即掺入至少一种用于阳性对照的对照介质和测试介质中，研究其对脂质囊泡/脂质体的形态完整性和完好性的影响。利用标记的脂质囊泡/脂质体，首先对脂质体系统本身进行表征，并形成阳性对照的ESR光谱(阳性光谱)，由此假定阳性对照中的脂质囊泡/脂质体100%完好。为产生阳性对照，将一定量的标记脂质囊泡/脂质体加入合适的对照介质中。对照介质优选水溶液，特别优选纯水，因为已知水不会破坏或干扰脂质囊泡/脂质体而是能稳定它，所以可以假定水性乳剂中的脂质囊泡/脂质体100%稳定，即完好。在下一步骤中，将感兴趣的脂质囊泡/脂质体掺入待研究的测试介质中。如上所述，测试介质可以是可掺入感兴趣的脂质囊泡/脂质体的凝胶、乳膏、软膏或任何其它化妆品或药物制剂。然后制作所获样品的ECR光谱(样品光谱)。此外，对于本发明方法的具体实施方式，可任选将一定量的ESR-活性探针掺入待检测的测试介质来制备阴性对照；同样记录阴性对照的ESR光谱。由于阴性对照不含脂质囊泡/脂质体，而只含有自由移动的探针，其对应的是测试介质中完好或未损坏的脂质囊泡/脂质体为0%。为测定测试介质中脂质囊泡/脂质体膜的形态完整性和完好性，将ESR光谱彼此互相比较。根据所用的比较方法，可定性或定量地确定完整性和完好性。定性确定法能测定样品光谱是否完全或基本上完全对应于阳性光谱，或者与其相异。如果基本上对应，则可以推定测试介质中所有或几乎所有的脂质囊泡/脂质体是完好的。在一些情形中，这足以评定测试介质是否适合于所用的脂质囊泡/脂质体，特别是当样品光谱和阳性光谱明显一致时。任选地，利用定性测定也可能测定样品光谱是否完全或基本上完全对应于阴性光谱，或者与其相异。如果它们对应，则可以推定测试介质中没有或几乎没有脂质囊泡/脂质体是完好的。这常足以确定测试介质不适合于所用的脂质囊泡/脂质体。如下所示，利用定量测定法可测定或计算基质中未损坏或完好的脂质囊泡/脂质体的百分比如果测试介质中阳性光谱与脂质囊泡/脂质体的光谱没有明显差异，则囊泡全部是完好的。为确定该结果，将阳性光谱和样品光谱相互扣除。如果两光谱彼此相差不明显(约100%完好)，该扣除的结果是一条基线，除背景噪声外其强度为O。如果阴性光谱与测试介质中的脂质囊泡/脂质体的光谱没有明显差异，则囊泡均不是完好的，即0%完好性。为确定该结果，将阴性光谱和样品光谱相互扣除。如果两光谱彼此相差不明显(约0%完好)，该扣除的结果是一条基线，除背景噪声外其强度为0。如果阳性光谱或阴性光谱均未获得除背景噪声外强度为o的基线，即阳性对照和阴性对照均与样品光谱明显不同，则按照本发明，为定量测定，即确定未损坏的完好的脂质囊泡/脂质体或损坏的不完好的脂质囊泡/脂质体的分数，产生或计算出一个模拟光谱。模拟光谱由各种百分比的阳性对照和阴性对照的光谱构成，其中阳性对照和阴性对照光谱的百分比的调节方式应使得模拟光谱向实验样品光谱渐进迭代(graduallyiterate)。当模拟光谱和实验样品光谱之间差异的显著性低于p=0.05，推定模拟是可接受的。阳性对照光谱对模拟光谱的贡献百分比提供了测试介质中形态上未损坏或完好的脂质囊泡/脂质体的百分比。相反，阴性对照光谱对模拟光谱的贡献百分比提供了测试介质中形态上损坏或不完好的脂质囊泡/脂质体的百分比。在本发明的方法中，明显可以使用含有已知量的完好和不完好脂质囊泡/脂质体的参比样品作出测定。将含有已知量的完好和不完好脂质囊泡/脂质体(例如，75%完好，25%不完好的脂质囊泡/脂质体)的参比样品的ESR光谱与样品的光谱作比较提供了以下信息样品中脂质囊泡/脂质体的完好性是否接近参比样品，是否仍足以在制剂中使用，或者是否超过了参比样品。当在对照介质中使用含不同量的完好和不完好脂质囊泡/脂质体的多份参比样品时(例如，90%:10%、80%:20%、70%:30%的完好:不完好脂质囊泡/脂质体)，可以作出半定量测定。ESR光谱学的技术人员明显可知，为比较和评估样品和阳性对照和阴性对照的各种ESR光谱，调整检测条件从而使得各光谱具有相当或相同的信噪比至关重要。出于该目的，优选进行适当的基础实验，使用各种ESR-活性探针、脂质囊泡/脂质体和/或介质的浓度比和数量、改变ESR检测参数，以获得相同的信噪比。例如，ESR-活性探针浓度较低可通过提高放大率和加大累积来平衡。用此方法，可核实ESR-活性探针未扩散出脂质体。此外，可以确定能掺入化妆品制剂中的脂质体的最大含量。此外，优选按照测定各光谱的整数值和标准化该光谱所用的归一整数值(unitaryintegralvalue)来标准化光谱。利用以下实施例和了本发明的其它特征和可能的特征组合以及这些其它特征和可能的特征组合带来的优点。实施例A标记脂质体在基础测试期间，采用后标记方法用ESR-活性探针标记磷脂酰胆碱脂质体；制备和检测各种摩尔比的探针和对应于载体系统的膜脂质，直至发现最佳探针浓度从而能产生具有可接受信噪比的稳定光谱。用于自旋标记的ESR-活性探针是16:0-05PCDOXYL(l-棕榈酰基-2-硬脂酰基-(5-脱氧)-sn-甘油-3-磷脂酰胆碱；得自美国亚拉巴马州亚拉巴斯特市的阿凡提极性脂质公司(AvantiPolarLipids,Inc，Alabaster,AL，USA)。首先，用96%乙醇制备浓度为4.6mM的探针溶液。将该溶液的等份试样加入所研究的脂质体中，从而使得脂质体混悬液中ESR-活性探针的终浓度为0.2mM。B制备样品、阳性对照和阴性对照对于样品，将浓度为5重量％的标记的脂质体加入待研究的测试介质中。对于阳性对照，将浓度为5重量％的标记的脂质体悬浮于水中。对于阴性对照，将10pMESR-活性探针惨入各种测试介质中。为将样品均化，连续搅拌，然后以350g短时离心6秒钟。所有样品中ESR-活性探针的终浓度是10pM。C光谱测量记录以下时间点的样品和阳性对照中标记脂质体的ESR光谱(i)脂质体搅拌后马上记录({=0)，(ii)室温(RT)放置24小时后，(iii)室温放置24小时并在40°C放置8小时后，(iv)室温放置14天后，(v)室温放置4周后，和(vi)室温放置8周后。为了测量，将样品吸入玻璃毛细吸管中(50pl)，用血细胞容量计蜡密封该毛细吸管，记录ESR光谱。利用相同的设备和相同的测量参数记录所有光谱设备ESRMS200(德国柏林的磁技术公司(Magnetech)，Berlin);测量参数3360G平均场，IOOG扫描幅度，10mW衰减，20秒扫描，300倍放大，1G调制幅度，40累积。D光谱的定性比较为确定阳性光谱是否与相应测试介质中的脂质体光谱明显不同，将阳性光谱和样品光谱相互扣除。当两光谱彼此相差不明显时，该扣除的结果产生一条基线。E光谱的定暈比较为定量测定脂质体稳定性，将光谱归一化，即各光谱除以吸收光谱的强度。为进行各评估，叠加阳性光谱、阴性光谱和实验样品光谱(制剂中的标记脂质体)。如果样品中产生异质状况，即样品中部分脂质体是完好的，另一部分不完好，则相应的样品光谱与阳性光谱和阴性光谱都有偏差。通过加和阳性光谱和阴性光谱信号的百分比贡献，获得计算(模拟)光谱，该光谱通过调节相应的百分比贡献而向实验样品光谱迭代。然后从实验光谱中扣除最佳可能迭代模拟光谱。当各信号区域中的差异的显著性在p二0.05以下时，可推定模拟明显代表了样品中完好和不完好脂质体的百分比贡献。F结果图la到ld显示了各种测试介质(la:凝胶，lb:乳膏l，1C:乳膏2，ld:香波)中样品、阳性对照和阴性对照的叠加ESR光谱。如上所述记录ESR光谱。图la显示了凝胶中脂质体的光谱，其中光谱并未明显不同于阳性光谱(H20中的脂质体)。这是凝胶中脂质体未受损和完好的证据。类似地，凝胶中脂质体的光谱与凝胶中游离ESR-活性探针的阴性光谱(凝胶中的16:0-05PCDOXYL)有实质性区别。图ld显示了测试介质，即香波的实例，其中脂质体不稳定，即受到损坏、不完整。类似地，香波中脂质体的光谱与阴性光谱(香波中的16:0-05PCDOXYL)没有实质性区别。图lb(乳膏l)和lc(乳膏2)显示了中间情况，其中乳膏中脂质体的光谱与阳性光谱和相应的阴性光谱明显不同。因此，为定量测定探针中完整和不完整的脂质体，加和阳性光谱和阴性光谱的不同百分比直至得到的模拟光谱与实验光谱没有实质性区别。图2a和2b显示了测试介质乳膏l和乳膏2的这些模拟结果。在以下时间点对所有测试介质中的脂质体光谱实施了该方法(i)脂质体搅拌后马上实施(t-O)，(ii)室温(RT)放置24小时后，(iii)室温放置24小时并在40t:放置8小时后，(iv)放置14天后，(v)放置4周后，和(vi)放置8周后。这些结果总结于表l，图示于图3。^±1_—定时期后四种不同制剂中完整脂质体的百分比<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>1)具有以下INCI组成的凝胶制剂水、山梨醇聚醚-30(sorbeth-30)、聚山梨醇、卡波姆、防腐剂；2)市售乳膏制剂；3)市售香波制剂；4)具有以下INCI组成的乳膏制剂水、水合希蒙得木油、硬脂醇聚醚-2(steareth-2)、甘油、PPG-15、硬脂酰基醚、水合芥花籽油(hydratecanolaoil)、己二酸二辛酯、硬脂醇聚醚-21、二辛酰基醚、牛油树脂、环甲基硅酮、聚丙烯酰胺、C13-14-异链垸烃、月桂醇聚醚-7(laureth-7)、黄原胶、透明质酸钠、防腐剂。权利要求1.一种采用电子自旋共振(ESR)光谱法定性和/或定量地测定在测试介质中，优选在液体测试介质中脂质囊泡或脂质体膜的形态完整性和完好性的方法，其中a)用ESR-活性探针标记待分析的脂质囊泡/脂质体；b)将一定量的标记脂质囊泡/脂质体引入测试介质来制备样品；c)将一定量的标记脂质囊泡/脂质体引入对照介质来制备阳性对照；和任选地d)将一定量的ESR-活性探针引入测试介质来制备阴性对照；e)记录样品、阳性对照和任选的阴性对照的ESR光谱；和f)互相比较所记录的ESR光谱。2.如权利要求l所述的方法，其特征在于，所述ESR-活性探针是脂肪酸残基被脱氧基团(2,2-二取代的4,4-二甲基-3-3噁唑烷氧基)取代的磷脂。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述ESR-活性探针选自a)l-棕榈酰基-2-(n-脱氧)-硬脂酰基-甘油-3-磷酸胆碱，其中n=5、7、10、12、14或16;优选11=5;b)5-脱氧胆固醇或其甲酯；和c)n-脱氧脂肪酸或其甲酯，其中n优选5或16。4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，阳性对照介质中形态上未受损的脂质囊泡/脂质体的分数是100%。5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，阳性对照的介质是水性介质，优选水。6.如权利要求l-5中任一项所述的方法，其特征在于，为定量测定在测试介质中脂质囊泡/脂质体的形态完整性和完好性，利用样品和阳性对照的光谱和/或样品和阴性对照的光谱获得差异光谱。7.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其特征在于，为定量测定在测试介质中脂质囊泡/脂质体的形态完整性和完好性，计算模拟光谱，其中将阳性对照的百分比贡献和阴性对照的百分比贡献相加获得模拟光谱，其中所述百分比贡献加到一起最高达100%，并将该模拟光谱与样品的实验光谱作比较。8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，将所述模拟光谱与样品的实验光谱作比较，其中通过光谱扣除形成差异光谱。9.如权利要求7或8所述的方法，其特征在于，改变百分比贡献直至模拟光谱基本上与样品的实验光谱一致，或通过扣除产生的差异光谱基本上形成一条基线。10.如权利要求1-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述测试介质选自液体和凝胶，优选化妆品或药物制品，特别优选水包油乳剂、油包水乳剂、水凝胶、软膏、糊剂、乳膏和洗剂。全文摘要本发明涉及一种采用电子自旋共振(ESR)光谱法定性和/或定量测定在测试介质中，优选在液体测试介质中脂质囊泡或脂质体膜的形态完整性和完好性的方法。按照所述方法，a)用ESR-活性探针标记待分析的脂质囊泡/脂质体，b)将一定量的标记脂质囊泡/脂质体引入测试介质来制备样品，c)将一定量的标记脂质囊泡/脂质体引入阳性介质来制备阳性对照，d)将一定量的ESR-活性探针引入测试介质来制备任选的阴性对照，e)记录样品、阳性对照和任选的阴性对照的ESR光谱；和f)互相比较记录的ESR光谱。文档编号G01N24/00GK101218502SQ200680023979公开日2008年7月9日申请日期2006年6月28日优先权日2005年7月1日发明者D·泰尔奇穆勒,G·布鲁蒙,K·郑,M·扎赫尔申请人:若维有限公司化妆品原材料两合公司;角麦曲阿测试实验室有限公司