专利名称：石蜡组织芯片制备方法
技术领域：
本发明涉及一种石蜡组织芯片制备方法。
背景技术：
现有的石蜡组织芯片制备，设备价格贵，方法复杂，难操作，制作 效果不理想。
发明内容
本发明的目的在于提供一种方法简便、易操作，实验效果好的石蜡 组织芯片制备方法。
本发明的技术解决方案是
一种石蜡组织芯片制备方法，其特征是包括下列步骤
(1) 定制石蜡模外观呈矩形多孔立方体。按横向多排孔、纵向 二排孔形式制作石蜡模，石蜡模外壁上设有与组织阵列孔板匹配的凹形 吻合口；可用于定制组织芯片石蜡也可制作普通石蜡包埋块。其厚度有 多种模式。
(2) 定制组织阵列孔板阵列孔板板体一端呈喙样凸与石蜡模凹 相互凸凹匹配；其另一端设有将阵列孔板与石蜡模固定的固定固定螺 丝；阵列孔板纵向上设有上下分隔的二组阵列，每组阵列仅排列方式不 同，每组阵列的面积与石蜡模的孔匹配；
(3) 定制芯棒呈多节状直径不等的实心圆柱体，插在阵列孔板上的孔中，与阵列孔板和石蜡模联合匹配使用制作石蜡组织芯片受体石 蜡块；
(4) 定制采样针采样针采用针管中穿装活动式针芯的形式；用 于对存档石蜡或新鲜组织的取样。
(5) 制作受体组织芯片阵列石蜡块
1. 将组织阵列孔板安装在石蜡模上并将固定螺丝旋紧；石蜡模的两 端下方用木条垫高，以便芯棒伸入；
2. 向组织阵列孔板上的孔依次插入与其孔径匹配的芯棒，并直到布 满或按预设二维阵列排布表按序插入；
3. 用一平板压在芯棒粗端形成的平面，组成含芯棒的从下到上的石 蜡模+组织阵列孔板+平板的"三明治"样结构；
4. 然后，将其倒置，此时最上方为石蜡模的正面和从其孔中伸出的 芯棒细端平面；
5. 临注蜡时用电吹风吹拂芯棒细端平面进行预加热，然后，再向芯 棒平面注入85。C左右的液态石蜡，使其充满每根芯棒杆的周围，连续注 蜡直至需要的厚度即可；
6. 在石蜡刚呈固态时，倒翻恢复到原来的石蜡模+组织阵列孔板+ 平板"三明治"样结构，而此时最下面是芯棒细端阵列平面；将平板从 芯棒粗端平面取下转移到芯棒细端阵列平面，即"三明治"样结构最下 方，形成含芯棒的由下到上的平板+石蜡模+组织阵列孔板的结构，其最 上面是芯棒粗端横截面形成的平面；
7. 双手握牢石蜡模+组织阵列孔板组合结构，轻轻用力向下压，使石蜡模的最下面的平面达到平板，而顶在平板上的芯棒细端平面受其反 作用力使芯棒的阵列向上运动，此时芯棒的芯棒粗端平面突出于组织阵 列孔板上方的平面，形成芯棒粗端平面(下方)与组织阵列孔板上方平 面间的间隙，因此，暴露出芯棒粗端平面下方的芯棒杆；
8. 用镊子快速伸向芯棒粗端平面的下方，向上稍用力依次将芯棒全 部拨出，
9. 旋松固定螺丝，拿开组织阵列孔板，退出石蜡块，
10. 再用医用缝合线按芯棒节段的距离，缠绕其厚度侧一周，在绕线 的启始端；线的一端固定不动，把握另一端并将着力点稳定在绕线的启
始端，稍用力将绕线全部拉出，可获所需芯穴直径的石蜡块。即受体石
蜡组织芯片阵列蜡块； 一次操作可获得相同阵列，不同直径，〉2个的 受体组织芯片石蜡块；
(6)供体石蜡块的采样及其组织芯片石蜡块的制备 搜集或制备供体石蜡组织块将供体石蜡块常规石蜡切片和HE染
色，阅片确定有典型病变的石蜡块及其拟定的采样部位或区域并记录存
档；
取一块石蜡模放在平板上，然后，将制成的受体组织芯片石蜡块放
入石蜡模的孔中待用； 采样和植入
对石蜡组织的采样方法为取采样针，先拨出针芯并用采样针管对 供体石蜡块的拟定采样部位进行采样，即将采样针管压入供体石蜡块 中，使供体组织蜡芯进入针管内；将采样针针管插进采样针管，再均匀用力推动针芯柄将供体组织蜡芯从针管中推出，依次插入受体石蜡块的
芯片穴位中；直到完成预设的二维组织芯片阵列；
对于新鲜组织的采样方法为取采样针，先拨出针芯并用采样针管 对新鲜组织的拟定采样部位进行采样，即将采样针管压入新鲜组织中， 使新鲜组织进入针管内，再用针芯将采样新鲜组织推出，然后按常规石
蜡组织制片方法到浸蜡结束后，取出组织蜡芯待用；植入时选取待用组 织蜡芯用镊子放入受体石蜡块的芯片穴位中；直到完成预设的二维组织 芯片阵列；此时，石蜡组织芯片蜡块芯片种植完成，即可进入待熔合阶 段；
熔合震动"石蜡模+石蜡组织芯片蜡块+玻璃板"组合结构，使种 植的全部组织蜡芯片在同一平面，再放到约50 — 55T:烘箱中，使组织蜡 芯与受体石蜡块互相融合；
修整取出石蜡块，用玻璃片轻压含有组织蜡芯柱的一面，尽量使
所有组织芯片的组织蜡芯的横截面保持在一个平面上，放冰箱待用。
芯棒采用有》2 3段不同直径段的芯棒模式。 本发明工具简单、方法简便、易操作，实验效果好，并且，初学者 容易学习和掌握。
下面结合附图和实施例对本发明作进一步说明。 图l是石蜡模的结构示图。
图2是组织阵列孔板的结构示图。 图3是一种芯棒的结构示图。图4是另一种多节段芯棒的结构示图。 图5是采样针的结构示图。图6是受体石蜡组织芯片阵列蜡块的结构示图。
具体实施例方式一种石蜡组织芯片制备方法，包括下列步骤(1) 定制石蜡模外观呈矩形多孔立方体。按横向多排孔、纵向 二排孔形式制作石蜡模，石蜡模外壁上设有与组织阵列孔板匹配的凹形 吻合口；可用于定制组织芯片石蜡也可制作普通石蜡包埋块。其厚度有 多种模式。(2) 定制组织阵列孔板阵列孔板整体纵向外侧面略似呈U形， 其板体一端呈喙样凸与石蜡模凹相互凸凹匹配；其另一端设有将阵列孔 板与石蜡模固定的固定固定螺丝；阵列孔板纵向上设有上下分隔的二组 阵列，每组阵列仅排列方式不同，每组阵列的面积与石蜡模的孔匹配；(3) 定制芯棒呈多节状直径不等的实心圆柱体。插在阵列孔板 上的孔中，与阵列孔板和石蜡模联合匹配使用制作石蜡组织芯片受体石 蜡块。(4) 定制采样针采样针采用针管中穿装活动式针芯的形式；用 于对存档石蜡或新鲜组织的取样。(5) 制作受体组织芯片阵列石蜡块1. 将组织阵列孔板安装在石蜡模上并将固定螺丝旋紧；石蜡模的两端下方用木条垫高，以便芯棒伸入；2. 向组织阵列孔板上的孔依次插入与其孔径匹配的芯棒，并直到布满或按预设二维阵列排布表按序插入；3. 用一平板压在芯棒粗端形成的平面，组成含芯棒的从下到上的石 蜡模+组织阵列孔板+平板的"三明治"样结构；4. 然后，将其倒置，此时最上方为石蜡模的正面和从其孔中伸出的 芯棒细端平面；5. 临注蜡时用电吹风吹拂芯棒细端平面进行预加热，然后，再向芯 棒平面注入85'C左右的液态石蜡，使其充满每根芯棒杆的周围，连续注 蜡直至需要的厚度即可；6. 在石蜡刚呈固态时，倒翻恢复到原来的石蜡模+组织阵列孔板+ 平板"三明治"样结构，而此时最下面是芯棒细端阵列平面；将平板从 芯棒粗端平面取下转移到芯棒细端阵列平面，即"三明治"样结构最下 方，形成含芯棒的由下到上的平板+石蜡模+组织阵列孔板的结构，其最 上面是芯棒粗端横截面形成的平面；7. 双手握牢石蜡模+组织阵列孔板组合结构，轻轻用力向下压，使 石蜡模的最下面的平面达到平板，而顶在平板上的芯棒细端平面受其反 作用力使芯棒的阵列向上运动，此时芯棒的芯棒粗端平面突出于组织阵 列孔板上方的平面，形成芯棒粗端平面(下方)与组织阵列孔板上方平 面间的间隙，因此，暴露出芯棒粗端平面下方的芯棒杆；8. 用镊子快速伸向芯棒粗端平面的下方，向上稍用力依次将芯棒全 部拨出，9. 旋松固定螺丝，拿开组织阵列孔板，退出石蜡块，10. 再用医用缝合线按芯棒节段的距离，缠绕其厚度侧一周，在绕线的启始端；线的一端固定不动，把握另一端并将着力点稳定在绕线的启 始端，稍用力将绕线全部拉出，可获所需芯穴直径的石蜡块。即受体石 蜡组织芯片阵列蜡块； 一次操作可获得相同阵列，不同芯穴直径，》2
个的受体组织芯片石蜡块。
(6)供体石蜡块的采样及其组织芯片石蜡块的制备 搜集或制备供体石蜡组织块将供体石蜡块常规切片和HE染色，
阅片确定有典型病变的石蜡块及其拟定的采样部位或区域并记录存档；
取一块石蜡模放在平板上，然后，将制成的受体组织芯片石蜡块放
入石蜡模的孔中待用；
采样和植入
对石蜡组织的采样方法为取采样针，先拨出针芯并用采样针管对 供体石蜡块的拟定采样部位进行采样，即将采样针管压入供体石蜡块 中，使供体组织蜡芯进入针管内；将采样针针管插进采样针管，再均匀 用力推动针芯柄将供体组织蜡芯从针管中推出，依次插入受体石蜡块的 芯片穴位中；直到完成预设的二维组织芯片阵列；
对于新鲜组织的采样方法为取采样针，先拨出针芯并用采样针管
对新鲜组织的拟定采样部位进行采样，即将采样针管压入新鲜组织中， 使新鲜组织进入针管内，再用针芯将采样新鲜组织推出，然后按常规石
蜡组织制片方法到浸蜡结束后，取出组织蜡芯待用；植入时选取待用组 织蜡芯用镊子放入受体石蜡块的芯片穴位中；直到完成预设的二维组织 芯片阵列；此时，石蜡组织芯片蜡块芯片种植完成，即可进入待熔合阶 段；熔合震动"石蜡模+石蜡组织芯片蜡块+玻璃板"组合结构，使种 植的全部组织蜡芯片在同一平面，再放到约50 — 55"C烘箱中，使组织蜡 芯与受体石蜡块互相融合；
修整取出石蜡块，用玻璃片轻压含有组织蜡芯柱的一面，尽量使 所有组织芯片的组织蜡芯的横截面保持在一个平面上，放冰箱待用。
芯棒采用有^2 3节段不同直径段的芯棒模式。
权利要求
1、一种石蜡组织芯片制备方法，其特征是包括下列步骤(1)定制石蜡模按横向多排孔、纵向二排孔形式制作石蜡模，外形呈矩形多孔立方体，石蜡模外壁上设有与组织阵列孔板匹配的凹形吻合口；(2)定制组织阵列孔板板体一端呈喙样凸与石蜡模凹形吻合口相互凸凹匹配，其另一端设有将阵列孔板与石蜡模吻合的固定螺丝；阵列孔板纵向设有上下分隔的二组阵列，每组阵列排列方式不同，每组阵列的面积与石蜡模的孔匹配；(3)定制芯棒呈多节状直径不等的实心圆柱体，插在阵列孔板上的孔中，与阵列孔板和石蜡模联合匹配使用制作石蜡组织芯片受体石蜡块；(4)定制采样针采样针采用针管中穿装活动式针芯的形式；(5)制作受体组织芯片阵列石蜡块将组织阵列孔板安装在石蜡模上并将固定螺丝旋紧；石蜡模的两端下方用木条垫高，以便芯棒伸入；向组织阵列孔板上的孔依次插入与其孔径匹配的芯棒，插满或按预设二维阵列排布表按序插入；用一平板压在芯棒粗端形成的平面，组成含芯棒的从下到上的石蜡模+组织阵列孔板+平板的“三明治”样结构；然后，将其倒置，此时最上方为石蜡模的正面和从其孔中伸出的芯棒细端平面；临注蜡时用电吹风吹拂芯棒细端平面进行预加热，然后，再向芯棒平面注入85℃左右的液态石蜡，使其充盈每根芯棒杆的周围，连续注蜡直至需要的厚度即可；在石蜡刚呈固态时，倒翻恢复到原来的石蜡模+组织阵列孔板+平板“三明治”样结构，而此时最下面是芯棒细端阵列平面；将平板从芯棒粗端平面取下转移到芯棒细端阵列平面，即“三明治”样结构最下方，形成含芯棒的由下到上的平板+石蜡模+组织阵列孔板的结构，其最上面是芯棒粗端横截面形成的平面；双手握牢石蜡模+组织阵列孔板组合结构，轻轻用力向下压，使石蜡模的最下面的平面达到平板，而顶在平板上的芯棒细端平面受其反作用力使芯棒的阵列向上运动，此时芯棒的芯棒粗端平面突出于组织阵列孔板上方的平面，形成芯棒粗端平面与组织阵列孔板上方平面间的间隙，因此，暴露出芯棒粗端平面下方的芯棒杆；用镊子快速伸向芯棒粗端平面的下方，向上稍用力依次将芯棒全部拨出，旋松固定螺丝，拿开组织阵列孔板，退出石蜡块，再用医用缝合线按芯棒节段的距离，缠绕其厚度侧一周，在绕线的启始端；线的一端固定不动，把握另一端并将着力点稳定在绕线的启始端，稍用力将绕线全部拉出，可获取所需芯穴直径的石蜡块，即受体石蜡组织芯片阵列蜡块；(6)供体石蜡块的采样及其组织芯片石蜡块的制备搜集或制备供体石蜡组织块将供体石蜡块常规切片和HE染色，阅片确定有典型病变的石蜡块并拟定可采样部位或区域，最后记录存档；取一块石蜡模放在玻璃平板上，然后，将制成的受体组织芯片石蜡块放入石蜡模的孔中待用；采样和植入对石蜡组织的采样方法为取采样针，先拨出针芯并用采样针管对供体石蜡块的拟定采样部位进行采样，即将采样针管压入供体石蜡块中，使供体组织蜡芯进入针管内；将采样针针管插进采样针管，再均匀用力推动针芯柄将供体组织蜡芯从针管中推出，依次插入受体石蜡块的芯片穴位中；直到完成预设的二维组织芯片阵列；对于新鲜组织的采样方法为取采样针，先拨出针芯并用采样针管对新鲜组织的拟定采样部位进行采样，即将采样针管压入新鲜组织中，使新鲜组织进入针管内，再用针芯将采样新鲜组织推出，然后按常规石蜡组织制片方法到浸蜡结束后，取出组织蜡芯待用；植入时选取待用组织蜡芯用镊子放入受体石蜡块的芯片穴位中；直到完成预设的二维组织芯片阵列；此时，石蜡组织芯片蜡块芯片种植完成，即可进入待熔合阶段；熔合轻轻震动“石蜡模+石蜡组织芯片蜡块+玻璃板”组合结构，使种植的全部组织蜡芯片在同一平面，再放到约50-55℃烘箱中，使组织蜡芯与受体石蜡块互相融合；修整取出石蜡块，用玻璃片轻压含有组织蜡芯柱的一面，尽量使所有组织芯片的组织蜡芯的横截面保持在一个平面上，放冰箱待用。
2、根据权利要求1所述的石蜡组织芯片制备方法，其特征是芯 棒釆用有》2 3段不同直径段的芯棒模式。
全文摘要
本发明公开了一种石蜡组织芯片制备方法，包括定制石蜡模、定制组织阵列孔板、定制芯棒、定制采样针、制作受体组织芯片阵列石蜡块、供体石蜡块的采样及其组织芯片石蜡块的制备等步骤。本发明方法简便、易操作，实验效果好。
文档编号G01N33/48GK101319971SQ200810022170
公开日2008年12月10日 申请日期2008年7月1日 优先权日2008年7月1日
发明者群 鄂, 鄂裘恺, 莉 陈 申请人:南通大学