专利名称：检测三聚氰胺的试纸卡的制作方法
技术领域：
本实用新型属于免疫化学速测技术领域，具体涉及一种三聚氰胺检测试纸卡。
背景技术：
三聚氰胺(Melamine)三聚氰胺简称三胺，是一种重要的氮杂环有机化工原料，白 色结晶粉末，动物长期或反复大量摄入三聚氰胺可能对肾与膀胱产生影响，导致产生结石， 亦在动物源食品中形成残留，威胁人们的健康。目前三聚氰胺检测方法有气相色谱质谱法(GC-MS)，液相色谱串联质谱法 (LC-MS-MS)，液相色谱法等。这些方法操作复杂、成本较高，推广使用受到限制。另一种为 免疫学方法，如酶联免疫吸附法(ELISA)。它的缺点是检测时间长，费用较高，不利于在基层 单位推广使用。而且，这两种方法都需要专业技术人员进行操作。
实用新型内容本实用新型的目的提供一种灵敏度高、成本低、操作简单、检测时间短的试纸卡。本实用新型的试纸卡包括塑料盒体和盒体内的试纸条，塑料盒体上带有加样孔和 观察窗，试纸条由底板、附着在底板上依次紧密相连的样本吸收垫、结合物释放垫、反应膜 和吸水垫等组成，与常规试纸条不同的是，其中的结合物释放垫不是完全覆盖在样本吸收 垫之下，而是部分区域覆盖于样本吸收垫之下，结合物释放垫的二分之一至三分之一区域 覆盖于样本吸收垫之下，优选结合物释放垫的三分之一区域覆盖于样本吸收垫之下。这样做的好处是可以延长检测结果观察时间，样本吸收垫也可以将检测液体充分 吸收与金标抗体完全接触充分反应，再层析至反应膜上进行反应，可以有效的减少误差。还 可以防止检测样本中一些干扰成份使金标抗体中的蛋白失去活性，影响金标抗体与包被原 的结合。所述反应膜上分别包被有三聚氰胺_载体蛋白偶联物构成的检测线印迹“ I ”和包 被羊抗鼠IgG构成的质控线印迹“ I ”，检测线位于距离结合物释放垫一侧0. 5cm处，检测线 和质控线平行。从而可以用于三聚氰胺检测。本实用新型试纸卡塑料盒体上带有加样孔和观察窗，盒体内试纸条的底板为可 PVC板或者是其它硬质而不吸水的材料；反应膜可为硝酸纤维素膜或者醋酸纤维素膜；样 本吸收垫可由玻璃棉或聚酯材料制成；结合物释放垫可由纤维制成，结合物释放垫层包被 有三聚氰胺抗体-胶体金结合物。偶联三聚氰胺载体蛋白可用卵血清蛋白、牛血清白蛋白或甲状腺蛋白等，在反应 膜上的检测线印迹和质控线的对照印迹组合排列可为“ 11”本实用新型试纸卡具有如下有益效果1.特异性强，灵敏度高。三聚氰胺快速检测试纸卡以胶体金标记高亲和力的单克 隆为基础制备而成，金标抗体中金颗粒与抗体分子之间无价健形成，二者通过异性电荷间 的范德华力相结合，胶体金对单克隆特异性和亲和力影响很小，且具有较高的标记率。因此，快速检测试纸卡具有较高的特异性和灵敏度。试纸卡检测灵敏度可达0. 2mg/L。2.操作简便快速。使用快速检测试纸卡时无需任何其它试剂，只要将样本用滴管 滴入试剂卡加样孔内，滴加4滴，加样后计时，3 5min内观察结果。3.显示检测结果形象、直观准确。快速检测试纸卡以显示红线色“ I ”及“ I I ”印迹 作为检测线的阳性和阴性标记，即在硝酸纤维素膜上显示一条红线“ I ”印迹表示在被检测 样本液中三聚氰胺含量大于等于0. 2mg/L，两条红线“ I I，，印迹表示在被检测样本中三聚氰 胺含量低于0. 2mg/L，结果判定形象、直观、准确、简单明了，不容易出现结果误判。4.成本低，投资少。使用快速检测试纸条，不需另配仪器设备及其他试剂，使现场 检测一步到位，成本低廉，投资少，见效快。5.易于大范围推广应用。快速检测试纸卡操作简单，能较好满足不同层次人员的 需要，如专业化验、海关检疫、卫生防疫、质量监测、集化养殖到个体养殖等，具有广阔的市 场前景和较大的经济、社会效益。
图1为三聚氰胺检测试纸条结构示意图，其中，1、样本吸收垫；2、结合物释放垫； 3、反应膜；4、吸水垫；5、检测线；6、质控线；7、底板；图2为三聚氰胺检测试纸卡俯视结构示意图，其中，8、塑料盒体；9、加样孔；10、观
察窗；图3为三聚氰胺快速检测试纸卡阴性(图3. a)、阳性(图3. b)、无效(图3. c)显 色示意图，其中T检测线，C为质控线。
具体实施方式
以下结合附图做进一步说明1、三聚氰胺检测试纸卡样本吸收垫1由玻璃棉制成，结合物释放垫2为吸附有胶体金标记的三聚氰胺单 克隆抗体的纤维层，反应膜3为硝酸纤维素膜，吸水垫4为吸水材料层制成，检测线5包被 有三聚氰胺-载体蛋白偶联物，质控线6包被有羊抗鼠IgG，PVC背衬7为支持层由塑料薄 片条制成，在PVC背衬7上按顺序粘附硝酸纤维素膜3、吸水垫4、结合物释放垫2和样本垫 1，将样本垫覆盖在结合物释放垫三分之一处，组成试纸条封装于带有加样孔9和观察窗10 的特制的塑料盒体8中。2、试纸卡的使用(1)样本前处理牛奶取50 μ 1牛奶样本加入牛奶稀释液450 μ 1混勻，取样检测。(2)用试纸卡检测将样本用滴管滴入试剂卡加样孔内，滴加4滴，加样后计时，3 5min内观察结果。3、检测结果分析三聚氰胺在样本中浓度高于0. 2mg/L时，胶体金标记的三聚氰胺抗体与三聚氰胺 药物全部结合，从而在检测区内因为竞争反应不会与三聚氰胺偶联抗原结合而不出现红色条带。阴性样本在检测过程中由于缺少抗体抗原竞争反应，将会在检测区与质控区内出现 红色条带。阴性当质控区显示一条红色条带，检测区同时也显示出一条红色条带，且检测区 颜色接近或浅于质控区时，快速检测试纸卡以显示红线色为“ I I ”，判为阴性，如图3. a所
7J\ ο阳性当质控区显示一条红色条带，而检测区不显色，快速检测试纸卡以显示红线 色“I ”，判为阳性，如图3. b图所示。无效当质控区不显示出红色条带，则无论检测区显示出红色条带与否，该试纸卡 判为无效，如图3. c所示。
权利要求一种检测三聚氰胺的试纸卡，其特征在于试纸卡包括塑料盒体和盒体内的试纸条，试纸条由底板、附着在底板上依次紧密相连的样本吸收垫、结合物释放垫、反应膜和吸水垫，结合物释放垫的二分之一至三分之一区域覆盖于样本吸收垫之下。
2.如权利要求1所述的试纸卡，其特征在于塑料盒体上带有加样孔和观察窗。
3.如权利要求1所述的试纸卡，其特征在于结合物释放垫的三分之一区域覆盖于样本 吸收垫之下。
4.如权利要求1所述的试纸卡，其特征在于所述反应膜上具有包被有三聚氰胺-载体 蛋白偶联物构成的检测线和包被羊抗鼠IgG构成的质控线。
5.如权利要求4所述的试纸卡，其特征在于所述的检测线与质控线平行。
6.如权利要求4所述的试纸卡，其特征在于检测线位于距离结合物释放垫一侧0.5cm处。
7.如权利要求1或2所述的试纸卡，其特征在于所述底板为PVC板，所述反应膜为硝酸纤维素膜。
8.如权利要求1或2所述的试纸卡，其特征在于所述的样本吸收垫由玻璃棉或聚酯材 料制成，所述的结合物释垫层由纤维制成。
9.如权利要求1或2所述的试纸卡，其特征在于所述的结合物释放垫为包被有三聚氰 胺抗体-胶体金结合物。
专利摘要本实用新型提供了一种三聚氰胺检测试纸卡，包括塑料盒体和盒体内的试纸条，试纸条由底板、附着在底板上依次紧密相连的样本吸收垫、结合物释放垫、反应膜和吸水垫组成，结合物释放垫的二分之一至三分之一区域覆盖于样本吸收垫之下。在反应膜层上具备包被有三聚氰胺-载体蛋白偶联物构成的检测线和包被有羊抗鼠IgG构成质控线；结合物释放垫包被有胶体金标记的三聚氰胺抗体。本实用新型试纸卡具有便携性好，灵敏度高，误差小、检测时间短等特点，可以在牛奶样本中三聚氰胺的检测中发挥重要作用。
文档编号G01N33/52GK201740785SQ201020284169
公开日2011年2月9日 申请日期2010年8月6日 优先权日2010年8月6日
发明者万宇平, 何丽霞, 何方洋, 冯才伟, 冯才茂, 汪善良, 王建霞, 罗晓琴, 赵正苗 申请人:北京望尔生物技术有限公司;北京望尔康泰生物技术有限公司