专利名称：食品中水溶性偶氮染料快速检测方法
技术领域：
本发明涉及食品安全检测领域，尤其涉及一种食品中水溶性偶氮染料快速检测方法。
背景技术：
国内批准使用的色素主要有天然色素和合成色素两类，其中允许使用的合成色素包括胭脂红、日落黄和苋菜红等低毒偶氮染料。合理地使用食用色素能使食品色泽鲜艳诱人，令人食欲大振，然而在利益的驱使下，不法商贩超范围滥用合成色素甚至违法使用工业染料，不断爆发“苏丹红”、“染色馒头”等食品安全事件。目前，国内外对食品中禁用、限用偶氮染料及工业色素的快速检测方法较少，很多色素使用不符合标准的食品无法被扼杀在生产领域，因此建立相关快速检测方法至关必要。现有技术中，关于食品中偶氮染料快速测定的研究大部分是基于着色能力定性、层析分离、光谱吸收等理论基础建立的，针对的是脂溶性偶氮染料，检测方法主要包括:
1)用环已烷等有机溶剂萃取样品中脂溶性色素，酸性条件下高锰酸钾氧化天然色素，还原剂盐酸羟胺除去过量氧化剂，然后再根据处理前后有机层颜色能否保持作为阳性判定依据；
2)纯净水萃取样品色素，聚酰胺或羊毛制成的吸附薄片酸性条件下进行吸附，纯净水净化后用氨水乙醇溶出，与木纤维制成的显色薄片对折，根据显色与否作为阳性判定的依据；
3)将纺织样品参照GB/T17592-2006进行还原处理后，甲基叔丁醚提取脱色，再在室温下用亚硝酸重氮化-偶联显色，根据有无颜色进行阳性判定。对于检测方法I)，在现有的技术(专利申请号200710027591.1)中，由于酸性高锰酸钾具有强氧化性，对从样品中提取的有机物会发生反应，可能生成有色物质从而造成干扰；表2显不加标的实际样品反应处理后有机层颜色存在明显变化，有别于表I空白加标的实验结果。以上实验结果可能是三种原因造成的，一是氧化过程中可能会存在氧化不彻底的副反应生成有色物质，改变有机层的颜色，二是样品中不能被氧化的有色物质进入有机层显色，三是有机层中有机物被彻底氧化导致加标样品处理前后颜色变浅。该方法既未对脂溶性天然色素进行干扰验证实验，亦未进行与仪器方法的假阳性率对照验证，更未对表2的实验现象阐明其原因。因而该方法在应用过程中，单凭有机层在处理前后有无颜色作为判定依据可能存在假阳性误判的情况，不利于准确定性样品是否违法使用脂溶性色素。对于检测方法2)，在现有的技术(专利申请号20081002995.9)中，吸附薄片所用的聚酰胺或羊毛量较少，对色素的板载量有限，当样品合成色素含量低时不利于富集和显色，易发生漏判。色素经吸附薄片富集后，部分吸附能力强的天然色素(如姜黄素、红曲红等)单凭纯净水不能达到完全除去的目的，最终会影响阳性判定的结果。对于检测方法3)，在现有的技术(专利申请号201110350255.7)中，纺织品的快速显色测试操作过程复杂，且由于重氮化-偶联反应一般要在1_5°C下进行，室温下亚硝酸及重氮化中间体易分解，不利于后续的显色反应，可能会存在漏判的情况。因此，现有的检测方法存在容易受干扰物的干扰，准确性差，操作复杂，检测时间长、需要复杂分析仪器等缺点，且无法针对水溶性偶氮染料进行快速检测。
发明内容
为解决现有技术中存在的问题，发明人预料不到地发现，通过氨水溶液提取样品中的色素，经聚酰胺柱富集并用甲醇和乙酸的混合液净化，乙醇和氨水的混合液洗脱分离水溶性偶氮染料后，再通过锌粉及醋酸铵体系还原脱色、可以进行水溶性偶氮染料的快速定性检测。本发明提供的食品中水溶性偶氮染料快速检测方法通过现场检测，即可及时有效地进行可疑样品的快速筛查，不依赖于大型仪器设备，可在最短时间内给不法分子严厉的打击；此外，本发明还具有检测时间短，适用范围广，检测准确性高，检出限低，本底干扰小，抗干扰能力强等优点。一种食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，包括如下步骤:
A)样品提取:取待测样品，加入稀氨水溶液，水浴中摇匀，静置后取上清液，往该上清液中加入柠檬酸调PH至5 7，得到样品提取液；
B)聚酰胺柱富集和净化:将所述样品提取液转移至聚酰胺柱中，分离滤液，使色素富集在聚酰胺柱上，取甲醇和乙酸的混合液洗涤该聚酰胺柱；
C)色素的洗脱:取乙醇和氨水的混合液洗脱所述聚酰胺柱，收集洗脱液，将洗脱液的颜色与标准比对液的颜色进行比较；
D)定性检测:若洗脱液的颜色比标准比对液的颜色更深，将所述洗脱液等量分成对照组和检测组，往该检测组中加入0.5^3 mL的醋酸铵溶液及0.09、.1lg锌粉，摇匀、过滤后，与对照组比较，观察该检测组颜色是否褪去，若颜色褪去，则判定检测结果为阳性。采用上述技术方案，本发明可及时有效地进行可疑样品的快速筛查，不依赖于大型仪器设备，可在最短时间内给不法分子严厉的打击；此外，还具有检测时间短，适用范围广，检测准确性高，检出限低，本底干扰小，抗干扰能力强等优点。本发明的检测原理为:水溶性偶氮染料在酸性条件下保留并富集在聚酰胺柱中，碱性条件下从聚酰胺柱中洗脱分离，通过锌粉及醋酸铵的协同作用，所得洗脱液在室温条件下迅速发生还原反应，若颜色褪去，则判定检测结果为阳性。通过聚酰胺柱的富集和净化，可有效排除天然色素等干扰物的干扰，可广泛用于现场快速检测食品中的柠檬黄、日落黄、胭脂红、亮蓝、苋菜红、诱惑红、酸性橙I1、酸性大红、酸性金黄G等水溶性偶氮染料。锌粉及醋酸铵发生协同作用，还原柠檬黄色素的反应式如下:
权利要求
1.一种食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，其特征在于:包括如下步骤: A)样品提取:取待测样品，加入稀氨水溶液，水浴中摇匀，静置后取上清液，往该上清液中加入柠檬酸调PH至5 7，得到样品提取液； B)聚酰胺柱富集和净化:将所述样品提取液转移至聚酰胺柱中，分离滤液，使色素富集在聚酰胺柱上，取甲醇和乙酸的混合液洗涤该聚酰胺柱； C)色素的洗脱:取乙 醇和氨水的混合液洗脱所述聚酰胺柱，收集洗脱液，将洗脱液的颜色与标准比对液的颜色进行比较； D)定性检测:若洗脱液的颜色比标准比对液的颜色更深，将所述洗脱液等量分成对照组和检测组，往该检测组中加入0.5^3 mL的醋酸铵溶液及0.09、.1lg锌粉，摇匀、过滤后，与对照组比较，观察该检测组颜色是否褪去，若颜色褪去，则判定检测结果为阳性。
2.根据权利要求1所述的食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，其特征在于:所述稀氨水的pH为9 10。
3.根据权利要求1所述的食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，其特征在于:所述水溶性偶氮染料包括柠檬黄、日落黄、胭脂红、亮蓝、苋菜红、诱惑红、酸性橙I1、酸性大红和酸性金黄G。
4.根据权利要求1所述的食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，其特征在于:所述醋酸铵溶液为饱和醋酸铵溶液。
5.根据权利要求1所述的食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，其特征在于:所述聚酰胺柱采用装填有0.2^0.3g聚酰胺粉的色谱柱，所述聚酰胺粉的粒径为20(Γ300目。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，其特征在于:所述甲醇和乙酸的混合液中，甲醇和乙酸的体积比为6:4。
7.根据权利要求1至5中任一项所述的食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，其特征在于:所述乙醇和氨水的混合液中，乙醇和氨水的体积比为7:3，其中氨水由浓氨水与水以2:1的体积比混匀而得。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，其特征在于:所述锌粉的加入量为0.lg。
全文摘要
本发明提供一种食品中水溶性偶氮染料快速检测方法，包括如下步骤A)样品提取；B)聚酰胺柱富集和净化；C)色素的洗脱；D)定性检测。本发明可及时有效地进行可疑样品的快速筛查，不依赖于大型仪器设备，可在最短时间内给不法分子严厉的打击；此外，本发明还具有检测时间短，适用范围广，检测准确性高，检出限低，抗干扰能力强等优点。
文档编号G01N21/78GK103091314SQ20131001550
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月16日 优先权日2013年1月16日
发明者黎绍学, 郑彦婕, 黄小龙, 黎永乐, 曾泳艇, 陈素娟, 胡书玉 申请人:深圳市计量质量检测研究院