一种芭蕉根的质量检测方法
【专利摘要】本发明公开了一种芭蕉根质量检测方法，使用超高效液相色谱法分别测定芭蕉根中羽扇豆酮和β-谷甾醇的含量。采用本发明的方法，能有效检测芭蕉根中的活性成分，对于控制芭蕉根的药材质量具有十分重要的意义。
【专利说明】一种苗蕉根的质量检测方法
【技术领域】
[0001]本发明属于中药原材料【技术领域】，具体而言，涉及一种芭蕉根的质量检测方法。
【背景技术】
[0002]糖尿病是一种由于胰岛素分泌缺陷及(或)其生物学作用障碍引起的以高血糖为特征的代谢性疾病，糖尿病已经成为世界上继肿瘤、心脑血管病之后第三位严重危害人类健康的慢性疾病。因此应以积极预防为主，其中芭蕉根具有良好的抗糖尿病的作用。
[0003]但芭蕉根药材如果没有严格的质量标准，得到的产品不能确保其质量，结果必将影响该药物的临床疗效；所以为控制芭蕉根的治疗糖尿病作用，确保用药的安全、有效及产品质量的稳定，制定一个严格可靠的检测方法成为保证药品质量的基本要求。目前有测定芭蕉根中多糖及皂苷的含量报道，而本专利中检测的羽扇豆酮和β_谷留醇均为抗糖尿病的活性成分，通过检测芭蕉根药材中羽扇豆酮和β_谷留醇的含量，从而确保芭蕉根药材的质量，目前未见研究报道。此外，由于芭蕉根中的成分复杂，如何采用合适的条件来检测羽扇豆酮和β_谷留醇的含量也存在技术上的难题。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种芭蕉根质量检测方法，为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案。
[0005]本发明一方面涉及一种芭蕉根质量检测方法，其特征在于包括如下步骤:
[0006](I)对照品溶液的制备:分别精密称取羽扇豆酮对照品和谷甾醇对照品，加甲醇制成每ImL各含0.4032mg和0.4480.mg的对照品溶液；
[0007](2)供试品溶液的制备:取芭蕉根粉末1.0g，精密称定，置IOOmL圆底烧瓶中，加甲醇溶液50mL，回流提取90分钟，过滤，再加甲醇50mL，加热回流90min，过滤，合并滤液，放冷，水浴蒸干，残余物加甲醇使溶解，转移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
[0008](3)测定:分别精密吸取对照品溶液0.5μ L与供试品溶液I μ L，注入超高效液相色谱仪，测定；色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，AgilentC18column (2.1mmX 10Omm, 1.8 μ m);以甲醇:0.1% 乙酸水=100:4 为流动相;流速0.1mL.mirT1 ;检测波长为206nm ;柱温为50。。。
[0009]在本发明的一个优选实施方式中，所述的检测是定量检测。
[0010]采用本发明的方法，能有效检测芭蕉根中的活性成分，对于控制芭蕉根的药材质量具有十分重要的意义。
【具体实施方式】
[0011]实施例1:
[0012]芭蕉根药材中羽扇豆酮和β -谷甾醇的检测[0013](I)仪器与试药
[0014]仪器:超高效液相色谱仪(安捷伦1290)、HH_6数显恒温水浴锅(常州澳华仪器有限公司)、天平(AB204-S)。
[0015]试剂:乙腈(美国TEDIA公司)色谱纯、甲醇(美国TEDIA公司)色谱纯、娃哈哈纯净水。
[0016]对照品:羽扇豆酮对照品(经高效液相法检测纯度大于98%) ； β -谷甾醇对照品(上海源叶生物科技有限公司，批号为20120214，纯度大于98%)。
[0017]样品:本发明药材(芭蕉根，贵阳中医学院生药实验室自行采集)。
[0018](2)对照品溶液的制备
[0019]分别精密称取羽扇豆酮对照品和谷甾醇对照品，加甲醇制成每ImL各含
0.4032mg和0.4480mg的对照品溶液。
[0020](3)色谱条件优选
[0021]色谱波长的优选:分别比较210nm、206nm、204nm、254nm等波长下色蕉根中羽扇豆酮和β-谷留醇的分离度和理论塔板数及其峰面积，结果证明在波长206nm处，芭蕉根中羽扇豆酮和β -谷留醇的分离度最好，峰面积最大，干扰因素最小。
[0022]色谱柱温度的优选:本实验比较了 25°C、35°C、45°C、50°C、55°C等柱温对芭蕉根中羽扇豆酮和谷甾醇的影响，实验结果表明50°C柱温条件下，分离度好，保留时间短，理论塔板数高。
[0023]流动相的选择:本实验参照2010版《中国药典》方法比较甲醇-乙腈、乙腈-0.1%醋酸、甲醇-水等不同组分、不同比例的流动相，芭蕉根中羽扇豆酮和谷留醇都不能达到完全分离。而本实验设计甲醇-1%醋酸水的等度洗脱，可达到两个成分间的完全分离。最终确定最佳的色谱条件为:甲醇:0.1%乙酸水=100:4为流动相，流速为0.1mL 检测波长为206nm，柱温为50°C。
[0024](4)系统适应性试验
[0025]供试品溶液的制备:取芭蕉根粉末1.0g，精密称定，置IOOmL圆底烧瓶中，加甲醇溶液50mL，回流提取90分钟，过滤，再加甲醇50mL，加热回流90min，过滤，合并滤液，放冷，水浴蒸干，残余物加甲醇使溶解，转移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
[0026]空白溶液的制备:于IOOmL圆底烧瓶中，加甲醇溶液50mL，回流提取90分钟，过滤，再加甲醇50mL，加热回流90min，过滤，合并滤液，放冷，水浴蒸干，残余物加甲醇使溶解，转移至IOmL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0027]测定方法:分别精密吸取对照品溶液0.5 μ L、供试品溶液I μ L、空白溶液I μ L，注入超高效液相色谱仪，测定，即得。
[0028]由图谱可知，在上述色谱条件下进样分析，羽扇豆酮和谷留醇与相邻色谱峰的分离度均大于1.5。理论塔板数以羽扇豆酮和谷留醇峰计算不低于6000。
[0029](5)供试品溶液的制备方法选择
[0030]Α.提取溶剂的选择
[0031]分别取经干燥芭蕉根药材粉末约1.0g，精密称定，置于2个IOOmL圆底烧瓶中，分别加入甲醇、无水乙醇、50%甲醇和50%乙醇和各50mL回流提取90min，滤过，再分别加甲醇、无水乙醇、50%甲醇和50%乙醇各50mL，再次回流90min，滤过，合并滤液，水浴蒸干，残余物分别加甲醇使溶解，转移至IOmL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。结果见表1。
[0032]B.提取方式的选择
[0033]分别取经干燥芭蕉根药材粉末约1.0g，精密称定，置于2个IOOmL圆底烧瓶中，分别超声提取和回流提取1.5h，滤过，再分别加甲醇各50mL，回流提取90min，滤过，分别合并滤液，水浴蒸干，残余物分别加甲醇使溶解，转移至IOmL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。结果见表1。
[0034]表1不同溶剂和提取方式的提取效率
[0035]
【权利要求】
1.一种芭蕉根质量检测方法，其特征在于包括如下步骤: (1)对照品溶液的制备:分别精密称取羽扇豆酮对照品和β-谷甾醇对照品，加甲醇制成每ImL各含0.4032mg和0.4480mg的对照品溶液； (2)供试品溶液的制备:取芭蕉根粉末1.0g，精密称定，置IOOmL圆底烧瓶中，加甲醇溶液50mL，回流提取90分钟，过滤，再加甲醇50mL，加热回流90min，过滤，合并滤液，放冷，水浴蒸干，残余物加甲醇使溶解，转移至IOmL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液； (3 )测定:分别精密吸取对照品溶液0.5 μ L与供试品溶液I μ L，注入超高效液相色谱仪，测定；色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，AgilentC18column (2.1mmX 10Omm, 1.8 μ m);以甲醇:0.1% 乙酸水=100:4 为流动相;流速0.1mL.mirT1 ;检测波长为206nm ;柱温为50。。。
2.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于所述的检测方法是定量检测。
【文档编号】G01N30/02GK103823000SQ201410082999
【公开日】2014年5月28日 申请日期:2014年3月7日 优先权日:2014年3月7日
【发明者】王祥培, 徐峰, 吴红梅 申请人:贵阳中医学院