一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法
【专利摘要】本发明属于药品生产【技术领域】，涉及一种用于测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，建立薄膜包衣预混剂中柠檬黄铝色淀、胭脂红铝色淀、日落黄铝色淀的含量的测定方法,有效控制薄膜包衣预混剂中色淀的含量，解决了目前包衣剂中无法准确测定食用色淀中色淀含量的技术难题，一种高效液相色谱法测定薄膜包衣预混剂中三种色淀含量，操作简单，可操作性强，结果准确可靠，费用低，可用于控制薄膜包衣预混剂中的色淀含量，具有较高的实际应用价值。
【专利说明】一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于药品生产【技术领域】，涉及一种用于测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法。
【背景技术】
[0002]目前，国标或文献还没有一种操作简便、准确度高的方法测定包衣剂中食用色淀的含量，有报道称对食用色淀的含量测定方法的研究:刮取的薄膜衣放入50ml烧杯中，力口硫酸(I — 20) 1ml溶解，试样溶液加饱和碳酸钠溶液条pH值到6，将试样溶液移入离心管中，容器用水冲洗，洗液并入离心管，离心(4000r -min-1, 10分钟)，取上清液，沉淀用水洗涤再离心，重复2-3次合并所有上清液，加热至60°C，将3g聚酰胺粉加少许湿调成粥状，倒入上清溶液中，搅拌均匀，以G3垂熔漏斗抽滤，用60°C、pH4的水洗涤3-5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液(6:4)洗漆3-5次,再用水冲洗至中性,用无水乙醇-氨水-水(7:2:1)混合溶液解吸3-5次,每次5ml,收集解吸液,加乙酸中和,蒸发至近干,加水溶解定容至5.0ml。
其不足为:前处理操作步骤繁琐，加硫酸(1 — 20) 1ml溶解后，试样溶液需调节pH、多次离心、加热、用聚酰胺吸附法提取色素、抽滤、多次洗涤、再把吸附的色素进行解吸、蒸干、溶解、定容等，总之，制备样品步骤多增加实验人员的工作强度和分析误差，需用试剂多使检测成本增高、检验周期长数据不及时。
【发明内容】
[0003]为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种新的测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，采用高效液相色谱法测定包衣剂中三种色淀含量，操作简单，所用的试剂少，准确度高，检验周期短，节省人力、物力，适用于包衣剂中食用色淀含量的测定。
[0004]为了实现本发明的目的，采用的技术方案简述如下:
一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，所述测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法为:
(1)供试品溶液的制备:称取样品，精密称定，加浓度为1°/Γ10%的硫酸溶液，搅拌均匀后，加入浓度为0.Γ1.0mol/L的乙酸铵溶液定容并摇匀，取该溶液离心，上清液经滤膜过滤，滤液即为供试品溶液；
(2)标准溶液的制备:将柠檬黄、胭脂红、日落黄色素标准品用水配制成溶液；
(3)测定方法:精密量取取供试品溶液和对照品溶液，分别注入高效液相色谱色谱仪，按照色谱条件，记录图谱，色淀的含量以色素计，按外标法计算各色素的含量。
[0005]所述一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，所述的供试品溶液的制备具体为:称取样品约0.Γ2.0g,精密称定，置烧杯中，加f 1ml浓度为1°/Γ10%的硫酸溶液，用玻璃棒研磨搅拌1(Γ60分钟，向烧杯中逐滴加入1-1Oml浓度为0.Γ?.0 mol/L乙酸铵溶液，边加边搅拌，将其转移至容量瓶中，用0.Γ1.0 mol/L乙酸铵溶液洗涤烧杯及玻璃棒，洗液并入量瓶中，最后用0.Γ1.0 mol/L乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀，取该溶液离心，取上清液经滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。
[0006]所述一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，所述的标准溶液的制备方法具体为:将柠檬黄、胭脂红、日落黄色素标准品用水配制成每Iml含柠檬黄、胭脂红、日落黄5?50 μ g的溶液。
[0007]所述一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，所述的测定方法中注入高效液相色谱仪的标准溶液和供试品溶液的量为1-100 μ I。
[0008]所述一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，其具体的色谱条件为:(I)色谱柱:C18柱；
(2)紫外检测器，检测波长包括254、420、480和500nm；
(3)流动相A:乙酸铵溶液；流动相B:甲醇和乙腈中的一种或两种混合液。
[0009](4)流速范围:0.I?2ml/min ；
(5)洗脱方式为梯度洗脱和等度洗脱。
[0010]与现有技术相比，本发明具有的积极效果是:建立薄膜包衣预混剂中柠檬黄铝色淀、胭脂红铝色淀、日落黄铝色淀的含量的测定方法，有效控制薄膜包衣预混剂中色淀的含量，解决了目前包衣剂中无法准确测定食用色淀中色淀含量的技术难题，一种高效液相色谱法测定薄膜包衣预混剂中三种色淀含量，操作简单，可操作性强，结果准确可靠，费用低，可用于控制薄膜包衣预混剂中的色淀含量，具有较高的实际应用价值。
【具体实施方式】
[0011]下面结合【具体实施方式】对本发明做进一步的说明。
[0012]示例 I
1.仪器与试剂高效液相色谱仪；
0.94mol/L硫酸溶液；
1.45mol/L乙酸铵溶液；
0.02mol/L乙酸铵溶液；
色谱甲醇。
[0013]2.色谱条件与系统适用性试验
(1)色谱柱:C18柱，150mm*4.6um ；
(2)紫外检测器，检测波长为254nm；
(3)流动相A:0.05 mol/L乙酸铵溶液，用冰乙酸调pH值4.0±0.2 ；
流动相B:甲醇(色谱纯)。
[0014](4)柱温:25°C;
(5)流速:0.8ml/min ；
(6)梯度洗脱:
时间/min流动相A/%流动相B/%
O9010
67030
12703012.1298
22298
22.19010
279010
精密量取取标准溶液20 μ I注入色谱仪，出峰顺序为柠檬黄、胭脂红、日落黄，且每相邻的两个峰之间的分离度不小于1.5。
[0015]3.操作步骤
(I)样品溶液的制备:称取样品约0.25g,精密称定，置50ml小烧杯中，加5ml浓度为5%的硫酸溶液，用玻璃棒研磨搅拌30分钟，向烧杯中逐滴加入5ml浓度为0.45 mol/L乙酸铵溶液，边加边搅拌，将其转移至25ml容量瓶中，用0.45 mol/L乙酸铵溶液洗涤烧杯及玻璃棒，洗液并入量瓶中，最后用0.45 mol/L乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀。取该溶液约1ml置离心管中，以4000rin/min离心20分钟，取上清液经0.45um滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。
[0016](2)标准溶液的制备:将柠檬黄、胭脂红、日落黄色素标准品用水配制成每Iml含柠檬黄、胭脂红、日落黄20 μ g的溶液。
[0017](3)测定方法
精密量取取供试品溶液和对照品溶液各20 μ 1，分别注入高效液相色谱色谱仪，按照色谱条件，记录图谱，色淀的含量以色素计，按外标法计算各色素的含量。
[0018]示例 2
1.仪器与试剂高效液相色谱仪；
0.94mol/L的硫酸溶液；
1.46mol/L乙酸铵溶液；
0.02mol/L乙酸铵溶液；
色谱甲醇。
[0019]2.色谱条件与系统适用性试验
(1)色谱柱:C18柱，150mm*4.6um ；
(2)流动相A:0.05 mol/L乙酸铵溶液，用冰乙酸调pH值4.0±0.2 ；
流动相B:甲醇(色谱纯)；
(3)紫外检测器，检测波长见梯度洗脱与波长程序；
(4)柱温:25°C；
(5)速:0.8ml/min ；
梯度洗脱与波长程序:
时间/min流动相A/%流动相B/%
O9010
67030
127030
12.1298
2229822.19010
279010
时间/min波长/nm
O420
5.2500
9.5480
12.1420
27420
精密量取取标准溶液20ul注入色谱仪，出峰顺序为柠檬黄、胭脂红、日落黄，且每相邻的两个峰之间的分离度不小于1.5。
[0020]3.操作步骤
(I)样品溶液的制备:称取样品约1.0Og,精密称定，置50ml小烧杯中，加5ml浓度为5%的硫酸溶液，用玻璃棒研磨搅拌30分钟，向烧杯中逐滴加入5ml浓度为0.45 mol/L乙酸铵溶液，边加边搅拌，将其转移至25ml容量瓶中，用0.45 mol/L乙酸铵溶液洗涤烧杯及玻璃棒，洗液并入量瓶中，最后用0.45 mol/L乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀。取该溶液约1ml置离心管中，以4000rin/min离心20分钟，取上清液经0.45um滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。
[0021](2)标准溶液的制备:将柠檬黄、胭脂红、日落黄色素标准品用水配制成每Iml含柠檬黄、胭脂红、日落黄20ug的溶液。
[0022](3)测定方法
精密量取取供试品溶液和对照品溶液各20ul，分别注入高效液相色谱色谱仪，按照色谱条件，记录图谱，色淀的含量以色素计，按外标法计算各色素的含量。
[0023]示例 3
1.仪器与试剂高效液相色谱仪；
0.94mol/L的硫酸溶液；
1.47mol/L乙酸铵溶液；
0.02mol/L乙酸铵溶液；
色谱乙腈。
[0024]2.色谱条件与系统适用性试验
(1)色谱柱:C18柱，150mm*4.6um ；
(2)紫外检测器，检测波长为254nm；
(3)流动相A:0.05 mol/L乙酸铵溶液，用冰乙酸调pH值4.0±0.2 ；
流动相B:乙腈(色谱纯)。
[0025](4)柱温:25°C;
(5)流速:0.8ml/min ；
(6)梯度洗脱:
时间/min流动相A/%流动相B/%
O94678530
158530
15.1298
23298
23.1946
29946
精密量取取标准溶液20 μ I注入色谱仪，出峰顺序为柠檬黄、胭脂红、日落黄，且每相邻的两个峰之间的分离度不小于1.5。
[0026]3.操作步骤
(I)样品溶液的制备:称取样品约0.25g,精密称定，置50ml小烧杯中，加5ml浓度为5%的硫酸溶液，用玻璃棒研磨搅拌30分钟，向烧杯中逐滴加入5ml 0.45 mol/L乙酸铵溶液，边加边搅拌，将其转移至25ml容量瓶中，用0.45 mol/L乙酸铵溶液洗涤烧杯及玻璃棒，洗液并入量瓶中，最后用0.45 mol/L乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀。取该溶液约1ml置离心管中，以4000rin/min离心20分钟，取上清液经0.45um滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。
[0027](2)标准溶液的制备:将柠檬黄、胭脂红、日落黄色素标准品用水配制成每Iml含柠檬黄、胭脂红、日落黄20 μ g的溶液。
[0028](3)测定方法
精密量取取供试品溶液和对照品溶液各20 μ 1，分别注入高效液相色谱色谱仪，按照色谱条件，记录图谱，色淀的含量以色素计，按外标法计算各色素的含量。
[0029]示例4—交联右旋糖酐的制备
1.仪器与试剂
高效液相色谱仪；
0.94mol/L硫酸溶液；
1.48mol/L乙酸铵溶液；
0.02mol/L乙酸铵溶液；
色谱乙腈。
[0030]2.色谱条件与系统适用性试验
(1)色谱柱:C18柱，150mm*4.6um ；
(2)紫外检测器，检测波长见“(6)梯度洗脱与波长程序”；
(3)流动相A:0.05 mol/L乙酸铵溶液，用冰乙酸调pH值4.0±0.2 ；
流动相B:乙腈(色谱纯)。
[0031](4)柱温:25°C;
(5)流速:0.8ml/min ；
(6)梯度洗脱与波长程序:
时间/min 流动相A/%流动相B/%时间/min波长/nm
O9460420
785305.5500
15853010.5480
15.1298154202329829420
23.1946-----------------------
29946
精密量取取标准溶液20 μ I注入色谱仪，出峰顺序为柠檬黄、胭脂红、日落黄，且每相邻的两个峰之间的分离度不小于1.5。
[0032]3.操作步骤
(I)样品溶液的制备:称取样品约0.25g,精密称定，置50ml小烧杯中，加5ml浓度为5%的硫酸溶液，用玻璃棒研磨搅拌30分钟，向烧杯中逐滴加入5ml 0.45 mol/L乙酸铵溶液，边加边搅拌，将其转移至25ml容量瓶中，用0.45 mol/L乙酸铵溶液洗涤烧杯及玻璃棒，洗液并入量瓶中，最后用0.45 mol/L乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀。取该溶液约1ml置离心管中，以4000rin/min离心20分钟，取上清液经0.45um滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。
[0033](2)标准溶液的制备:将柠檬黄、胭脂红、日落黄色素标准品用水配制成每Iml含柠檬黄、胭脂红、日落黄20 μ g的溶液。
[0034](3)测定方法
精密量取取供试品溶液和对照品溶液各20 μ 1，分别注入高效液相色谱色谱仪，按照色谱条件，记录图谱，色淀的含量以色素计，按外标法计算各色素的含量。
[0035]此处叙述的示例方案仅仅是对本发明原理的解释，及本发明较佳的实施例，不应以任何方式，利用上面的叙述限制本发明的范围。本领域的专业人士，可以利用本发明的原理，设计各种不同的实施方案，而不超出本发明的范围。
【权利要求】
1.一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，所述测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法为: (1)供试品溶液的制备:称取样品，精密称定，加浓度为1°/Γ10%的硫酸溶液，搅拌均匀后，加入浓度为0.Γ1.0mol/L的乙酸铵溶液定容并摇匀，取该溶液离心，上清液经滤膜过滤，滤液即为供试品溶液； (2)标准溶液的制备:将柠檬黄、胭脂红、日落黄色素标准品用水配制成溶液； (3)测定方法:精密量取取供试品溶液和对照品溶液，分别注入高效液相色谱色谱仪，按照色谱条件，记录图谱，色淀的含量以色素计，按外标法计算各色素的含量。
2.所述一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，所述的供试品溶液的制备具体为:称取样品约0.Γ2.0g,精密称定，置烧杯中，加f 1ml浓度为1°/Γ10%的硫酸溶液，用玻璃棒研磨搅拌1(Γ60分钟，向烧杯中逐滴加入1-1Oml浓度为0.Γ?.0 mo I/L乙酸铵溶液，边加边搅拌，将其转移至容量瓶中，用0.Γ1.0 mol/L乙酸铵溶液洗涤烧杯及玻璃棒，洗液并入量瓶中，最后用0.Γ1.0 mol/L乙酸铵溶液稀释至刻度，摇匀，取该溶液离心，取上清液经滤膜过滤，滤液即为供试品溶液。
3.所述一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，所述的标准溶液的制备方法具体为:将柠檬黄、胭脂红、日落黄色素标准品用水配制成每Iml含柠檬黄、胭脂红、日落黄5?50 μ g的溶液。
4.所述一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，所述的测定方法中注入高效液相色谱仪的标准溶液和供试品溶液的量为1-100 μ I。
5.所述一种测定薄膜包衣剂中色淀含量的方法，其特征在于，其具体的色谱条件为:(I)色谱柱:C18柱； (2)紫外检测器，检测波长包括254、420、480和500nm； (3)流动相A:乙酸铵溶液；流动相B:甲醇和乙腈中的一种或两种混合液； (4)流速范围:0.1?2ml/min ； (5)洗脱方式为梯度洗脱和等度洗脱。
【文档编号】G01N30/02GK104198606SQ201410455539
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月10日 优先权日:2014年9月10日
【发明者】徐永丽, 黄悦 申请人:天津爱勒易医药材料有限公司