一种浮游植物稳定同位素样品的采集制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种浮游植物稳定同位素样品的采集制备方法，具体的是一种利用水平拖网方式，使用浮游植物稳定同位素样品采集网，对海洋浮游植物进行富集性采集，并对采集的浮游植物进行处理的方法，制备的样品用于稳定同位素的检测。本发明的优点在于：本发明所述的方法具有高效简单、成本低廉的特性，能够广泛的应用于海洋、湖泊生态调查研究。本发明采集方法所用的采集网设计合理，能够比较全面的采集到海区的浮游植物，本发明的处理方法可以有效地排除杂质误差的干扰，保证了浮游植物稳定同位素的测定质量；另外本发明的方法实现了浮游植物的富集、处理现场化，保证其新鲜程度的同时有效地节省了成本。
【专利说明】一种淳游植物稳定同位素样品的采集制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物工程技术、生态学领域，特别涉及一种浮游植物稳定同位素样品 的采集制备方法。
【背景技术】
[0002] 稳定同位素探测是一种较为成熟的物质流动传递示踪技术，在国内外其他学科领 域的应用较早，如气候学、地球化学、植物生理学、考古学等，通过多年的理论论证和实践， 保证了该技术的可靠性。20世纪80年代以后，同位素质谱测试技术的进步大大拓宽了稳定 同位素的应用领域。而其在生态环境方面的应用相对较新，大多被用于取代传统的胃含物 法，进行生态系统营养谱的构建。由于捕食者的摄食偏好及其新陈代谢中的同位素分馏现 象，造成了同一生态系统中不同物种间的同位素比率差异。通过对比这些差异，我们可以得 到各个物种间食性远近关系，从而进行湿地生态系统中的生物功能群的划分、分析消费者 的食物组成、潮间带生物的食物竞争能力评估、各消费者营养级和生态类群的划分等。
[0003] 随着稳定同位素技术在生态学方面应用的不断发展，尤其是海洋生态方面的应用 不断增多，稳定同位素的检测涉及到了浮游植物。但是，由于浮游植物个体较小，分布分散， 较难达到检测要求。这就急需一种能够适用于稳定同位素检测的制备浮游植物样品的方 法。
【发明内容】
[0004] 为了克服上述问题，本发明专利提供操作步骤简单，成本低廉，适用于一般海域、 湖泊的浮游植物稳定同位素样品采集制备方法。
[0005] 本发明采用如下技术方案：
[0006] 1)在需要采集浮游植物的海区、湖泊或河流，利用水平拖网方式，使用浮游植物稳 定同位素样品采集网，对海洋浮游植物进行富集性采集；
[0007] 所述浮游植物稳定同位素样品采集网包括拉绳、网圈、网衣、富集杯和下盖，所述 采集网整体呈圆锥形，拉绳与网圈固定连接；网衣的上端与网圈连接，下端与富集杯连接； 其中网口直径为50cm、网口上的网圈为直径lcm的不锈钢条，网衣的孔径为75 μ m，从网圈 到富集杯下缘的长度为lm ;所述富集杯是由上、下两个杯圈和杯衣构成；所述杯衣的材质 与所述网衣相同；所述下盖用于封住所述富集杯的下口。
[0008] 采集时，拖网的速度为2-3节；
[0009] 每次拖网的时间为lOmin ;
[0010] 2)收集网内的浮游植物，迅速置于低温瓶中，0-5°C保存；且在24小时内处理完成 以下步骤；
[0011] 3)将低温瓶中的浮游植物样品经过显微镜镜检，剔除>500 μ m的浮游动物，以及 碎屑等干扰成分；
[0012] 对于未剔除的浮游动物，按照调查获得的当地生物量，计算精确的浮游植物比例， 公式如下：
[0013] 单个调查航次，浮游植物生物量比例
【权利要求】
1. 一种浮游植物稳定同位素样品的采集制备方法，其特征在于具体的步骤如下： 1) 在需要采集浮游植物的海区、湖泊或河流，利用水平拖网方式，使用浮游植物稳定同 位素样品采集网，对海洋浮游植物进行富集性采集； 所述浮游植物稳定同位素样品采集网包括拉绳（1)、网圈（2)、网衣（3)、富集杯（4)和 下盖（5)，所述采集网整体呈圆锥形，拉绳（1)与网圈（2)固定连接；网衣（3)的上端与网 圈（2)连接，下端与富集杯（4)连接；其中网口直径为50cm、网口上的网圈（2)为直径lcm 的不锈钢条，网衣（3)的孔径为75 μ m，从网圈（2)到富集杯（4)下缘的长度为lm;所述富 集杯⑷是由上、下两个杯圈（6)和杯衣（7)构成；所述杯衣（7)的材质与所述网衣（3)相 同；所述下盖（5)用于封住所述富集杯（4)的下口。 采集时，拖网的速度为2-3节； 每次拖网的时间为lOmin ; 2) 收集网内的浮游植物，迅速置于低温瓶中，0_5°C保存；且在24小时内处理完成以下 步骤； 3) 将低温瓶中的浮游植物样品经过显微镜镜检，剔除>500 μ m的浮游动物，以及碎屑 等干扰成分； 对于未剔除的浮游动物，按照调查获得的当地生物量，计算精确的浮游植物比例，公式 如下： 单个调查航次，浮游植物生物量比例：
要获得相对准确的浮游植物生物量比例，进一步将各航次获得的数据进行平均：
4) 将经过步骤3)的浮游植物样品分成两份，其中第一份加入lmol/L的盐酸中进行酸 化处理l-2h，之后利用纯水反复漂洗至中性；第二份不做处理； 5) 利用抽滤的方式，将步骤4)处理后的两份浮游植物样品的水分分别滤除，滤除度 >80%。 6) 将抽滤后的两份浮游植物滤饼分别移至铝箔折成的方形无盖盒中，置于烘箱烘干 12-24h，之后分别经过研钵研磨得到两份干燥的粉末状浮游植物样品。
2. -种利用权利要求1所述的方法制备的粉末状浮游植物样品。
3. 根据权利要求1所述的浮游植物样品，其特征在于所述第一份用于碳稳定同位素比 率测定；第二份用于氮稳定同位素测定。
【文档编号】G01N1/28GK104297014SQ201410593450
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月29日 优先权日:2014年10月29日
【发明者】屈佩, 王其翔, 唐学玺, 刘洪军 申请人:中国海洋大学, 山东省海洋生物研究院