一种补中益气合剂HPLC指纹图谱的建立方法与流程

文档序号:11806481阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种补中益气合剂HPLC指纹图谱的建立方法,其特征在于,精密量取补中益气合剂样品1-3ml,置10ml容量瓶中,加甲醇3-7ml,超声处理8-12分钟,取出,放冷,用甲醇稀释至刻度,摇匀,取溶液适量,置离心管中,以每分钟4000-6000转离心5分钟,取上清液,临用前用微孔滤膜滤过;照高效液相色谱法建立指纹图谱;

所述梯度洗脱程序中流动相A与流动相B的体积比浓度为:0-5min:0%,100%;5-40min:0%→25%,100%→75%;40-80min:25%→40%,75%→60%;80-85min:100%,0%;85.01min:0%,100%;95min:0%,100%。

2.根据权利要求1所述的一种补中益气合剂HPLC指纹图谱的建立方法,其特征在于:

(a)供试品溶液制备:精密量取补中益气合剂样品2ml,置10ml容量瓶中,加甲醇5ml,超声处理10分钟,取出,放冷,用甲醇稀释至刻度,摇匀,取溶液适量,置离心管中,以每分钟5000转离心5分钟,取上清液,临用前用微孔滤膜滤过,即得供试品溶液;

(b)色谱条件:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,4.6mm × 250mm,5μm;流动相A为乙腈;流动相B为水;检测波长254nm;流速:1.0ml/min;洗脱程序为梯度洗脱程序;所述梯度洗脱程序中流动相A与流动相B的体积比浓度为:0-5min:0%,100%;5-40min:0%→25%,100%→75%;40-80min:25%→40%,75%→60%;80-85min:100%,0%;85.01min:0%,100%;95min:0%,100%;

(c)测定:精密吸取供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,照高效液相色谱法测定,即得补中益气合剂的指纹图谱。

3.根据权利要求1或2所述的一种补中益气合剂HPLC指纹图谱的建立方法,其特征在于:所述微孔滤膜是用0.45μm的微孔滤膜。

4.根据权利要求1或2所述的一种补中益气合剂HPLC指纹图谱的建立方法,其特征在于:所述补中益气合剂指纹图谱中有9个特征共有峰,图谱总长度为95min。

5.根据权利要求1或2所述的一种补中益气合剂HPLC指纹图谱的建立方法,其特征在于:使用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统” 2004版对所述指纹图谱进行相似度评价,其相似度应大于0.9;指纹图谱相似度计算参数设置为:时间宽度为0.5秒;校正方式采用多点校正,校正色谱峰的匹配点为共有峰。

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