一种超高效液相色谱-质谱测定地表水中多种有机磷酸酯的方法与流程

本发明涉及测定地表水中多种有机磷酸酯的方法，尤其涉及一种超高效液相色谱-质谱测定地表水中多种有机磷酸酯的方法。

背景技术：

有机磷酸酯(organophosphateesters，opes)是一类人工合成的新型有机物，其价格低廉，与高分子材料有较好的相容性，常作为添加型阻燃剂和增塑剂。有机磷酸酯按照其结构与用途可以分为三类：烷基取代的有机磷酸酯主要用作增塑剂、消泡剂以及添加剂；卤代烷基取代和芳基取代的有机磷酸酯主要用作家具、纺织品、床垫、电子产品以及儿童相关产品(婴儿推车、睡衣、婴儿服装)的阻燃剂，该类有机磷酸酯具有持久性，在环境中难降解，很容易在环境中残留下来。据欧洲阻燃剂协会的数据统计，自2001年至2006年，作为阻燃剂的有机磷酸酯，其需求量与生产量逐年增加，其主要以化学添加的方式与其它化合物混合并非通过化学键合的方式与其它污染物连接在一起，因此在各种转运过程中很容易释放到环境中，随着其环境释放量的增加，其引起的环境问题正逐渐引起关注，对有机磷酸酯的检测技术仍需进一步的开发与完善。

目前研究表明：有机磷酸酯并不是一种环境安全物质，多种有机磷酸酯具有毒性。相比于非卤代有机磷酸酯，卤代有机磷酸酯有更强的致癌性、神经毒性和基因毒性。2006年欧盟发布的风险草案认为tcep具有致癌性、高毒性和环境持久性，1998年世界卫生组织的研究表明tdcpp具有致癌性，tcep和tdcpp具有潜在的神经毒性，而且对水体生物具有急性或者慢性不利影响。tcpp是一种可疑的致癌物。欧盟将tcep列为第二类优先污染物，将tcpp和tdcpp列为第四类优先污染物，欧洲于20世纪90年代中期己经禁止使用tcep，并用tcpp来代替使用tcep。对于非卤代有机磷酸酯，tmp具有遗传毒性，tnbp具有神经毒性。tphp和ehdpp对水生态系统具有潜在生物富集性和潜在毒性。tphp可以抑制人体内的羧酸酯酶，从而容易引起皮炎，此外室内灰尘中的该类物质会抑制人体内荷尔蒙水平并显著降低男性精液水平。

由于有机磷酸酯的氢取代基团不同，造成不同类别取代基团有机磷酸酯的理化特性差别很大，如极性、挥发性、水溶解度、辛醇-水分配系数等，因此给有机磷酸酯的分析检测也带来了很大的困扰。目前，水体中有机磷酸酯的前处理方法主要是固相萃取，该方法可以较好的萃取饮用水以及地下井水等杂质干扰较少的的水体中的目标物，但对于河流这种杂质干扰较严重的水体，其可能会造成堵塞现象，杂质干扰严重；固相萃取小柱的极性保留范围有限，不能完成更多种类有机磷酸酯的萃取工作；此外前处理过程中萃取与净化不能一步完成，操作复杂，灵敏度与选择性较差。

目前有机磷酸酯的检测方法主要有气相色谱法和液相色谱法，气相色谱方法主要有气相-氮磷检测器法(gc-npd)和气相色谱-质谱法(gc-ei-ms)两种，虽然gc-npd的方法对含磷化合物具有较好的选择性，但该方法稳定性较差，需要定期更换检测器中的铷珠；gc-ei-ms的方法能够减弱基质效应对定量过程的影响，但bjorklundj等在2004年的rapidcommunicationsinmassspectrometryrcm一文中指出应用gc-ms分析时会产生过多碎片，尤其是分析脂肪族三酯时，这些opes会产生3次麦氏重排，使得ei-ms光谱信号相当地弱，基峰为m/z99，与质子化的磷酸根一致，所以基质组分会干扰低质量离子。液相色谱法主要有液相色谱-质谱法(lc-ms)，用该方法检测opes相比于gc-ms具有更高的选择性和灵敏度，可直接检测水样中的opes，不需要将目标物转移到有机溶剂中，并可同时测定其它极性更强的化合物，然而目前开发的lc-ms的方法有两个缺陷：一是可以同时分析的有机磷酸酯的种类较少，二是样品的分析时间过长，平均20分钟甚至达到30分钟，因此关于opes的萃取-分析测定方法仍需不断地改进。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服已有技术的缺点，提供一种简单快捷省时高效的超高效液相色谱-质谱测定地表水中多种有机磷酸酯的方法。

本发明所采用的技术方案是：

一种超高效液相色谱-质谱测定地表水中多种有机磷酸酯的方法，包括以下步骤：

(1)配制标准混合工作液：

(a)用10μl微量移液枪分别吸取10μl的浓度为100mg/l的磷酸三乙酯、磷酸三正丙酯、磷酸三正丁酯、磷酸三异辛酯、磷酸三苯酯、磷酸三甲苯酯、磷酸三(2-乙基己基二苯基)酯、磷酸三(丁氧基乙基)酯、磷酸三(2-氯乙基)酯、磷酸三(2-氯丙基)酯、磷酸三(1，3-二氯异丙基)酯标准储备液，然后均滴入一个2ml色谱瓶中混合，再在2ml色谱瓶中加入890μl的甲醇，振荡得到1ml的1mg/l的标准混合工作液；

(b)用微量移液枪分别吸取0.5μl、1μl、2μl、5μl、10μl、20μl、50μl、200μl、500μl的1mg/l的标准混合工作液，得到九种体积的标准混合工作液，各自用甲醇稀释到1ml，振荡混匀得到九种不同浓度的标准混合工作液：0.5μg/l、1μg/l、2μg/l、5μg/l、10μg/l、20μg/l、50μg/l、200μg/l、500μg/l标准混合工作液各1ml；

(2)样品预处理：

量取500ml经过过滤的水样，向水样中加入替代物，用50ml的萃取溶剂萃取水样两次，合并萃取液，用干燥剂无水硫酸钠干燥萃取液，干燥后的萃取液旋转蒸发浓缩至1ml，浓缩液转移到色谱瓶，用二氯甲烷少量多次洗涤旋蒸瓶，将洗涤液转移到2ml色谱瓶中，用氮气吹扫浓缩液至近干并在2ml色谱瓶中滴入hplc级甲醇0.5ml定容作为样品溶液；

(3)以超高效液相色谱-串联质谱测定标准混合工作液和样品溶液；

(4)以标准混合工作液浓度为横坐标，与该标准混合工作液浓度对应的色谱峰面积为纵坐标建立一条标准曲线，然后通过超高效液相色谱-串联质谱测定样品溶液，得到样品溶液的色谱峰面积，通过标准混合工作液的标准曲线得到样品液的实际浓度。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

采用液液萃取法对地表水中目标化合物进行萃取，操作简单、耗时短；使用超高效液相色谱-质谱的方法建立了11种有机磷酸酯的定性分析与定量检测方法，通过优化液相条件与质谱条件解决了传统方法分析时间较长的问题，使该方法有更好的选择性和灵敏度，运用该方法可实现有机磷酸酯的快速定量测定。

本发明采用液液萃取的方法对地表水中的有机磷酸酯进行萃取，可以避免固相萃取过程中由于杂质较多引起的小柱堵塞问题，同时所用萃取溶剂极性选择范围宽，可以完成较多种类有机磷酸酯的萃取。

本方法优化超高效液相色谱条件，有效减少了分析时间，提高了分析速率，同时结合串联的三重四级杆质谱在定量反应监测模式下测定有机磷酸酯，大大提高了分析方法的灵敏度和选择性，降低了检出限，适用于环境中痕量有机磷酸酯的定量检测。

本发明可以对11种有机磷酸酯进行有效分离、准确定性和精确定量，11种有机磷酸酯的线性范围为2-200μg/l，标准曲线的相关系数(r²)均大于0.99，加标回收率为70％-120％(除磷酸三乙酯为63％)，检出限为0.08-1.8ng/l。

附图说明

图1为本发明的一种超高效液相色谱-质谱测定地表水中多种有机磷酸酯的方法流程示意图；

图2是tep的色谱图；

图3是tprp的色谱图；

图4是tnbp的色谱图；

图5是tehp的色谱图；

图6是tcep的色谱图；

图7是tcpp的色谱图；

图8是tdcpp的色谱图；

图9是tphp的色谱图；

图10是tcrp的色谱图；

图11是ehdpp的色谱图；

图12是tbep的色谱图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施例对本发明加以说明。

如附图所示的本发明的一种超高效液相色谱-质谱测定地表水中多种有机磷酸酯的方法，包括以下步骤：

(1)配制标准混合工作液：

(a)用10μl微量移液枪分别吸取10μl的浓度为100mg/l的磷酸三乙酯tep、磷酸三正丙酯tprp、磷酸三正丁酯tnbp、磷酸三异辛酯tehp、磷酸三苯酯tphp、磷酸三甲苯酯tcrp、磷酸三(2-乙基己基二苯基)酯ehdpp、磷酸三(丁氧基乙基)酯tbep、磷酸三(2-氯乙基)酯tcep、磷酸三(2-氯丙基)酯tcpp、磷酸三(1，3-二氯异丙基)酯tdcpp标准储备液，然后均滴入一个2ml色谱瓶中混合，再在2ml色谱瓶中加入890μl的甲醇，振荡得到1ml的1mg/l的标准混合工作液；

(b)用微量移液枪分别吸取0.5μl、1μl、2μl、5μl、10μl、20μl、50μl、200μl、500μl的1mg/l的标准混合工作液，得到九种体积的标准混合工作液，各自用甲醇稀释到1ml，振荡混匀得到九种不同浓度的标准混合工作液：0.5μg/l、1μg/l、2μg/l、5μg/l、10μg/l、20μg/l、50μg/l、200μg/l、500μg/l标准混合工作液各1ml。

(2)样品预处理：

量取500ml经过过滤的水样，向水样中加入替代物，用50ml的萃取溶剂萃取水样两次，合并萃取液，用干燥剂无水硫酸钠干燥萃取液，干燥后的萃取液旋转蒸发浓缩至1ml，浓缩液转移到色谱瓶，用二氯甲烷少量多次洗涤旋蒸瓶，将洗涤液转移到2ml色谱瓶中，用氮气吹扫浓缩液至近干并在2ml色谱瓶中滴入hplc级甲醇0.5ml定容作为样品溶液。

(3)以超高效液相色谱-串联质谱测定标准混合工作液和样品溶液，液相色谱-串联质谱仪采用市场有售的标注超高效的仪器即可。

(4)基于一定浓度的标准混合工作液得到一定的色谱峰面积，通过测定不同浓度的标准混合工作液可以得到一系列的色谱峰面积，以标准混合工作液浓度为横坐标，与该标准混合工作液浓度对应的色谱峰面积为纵坐标可以建立一条标准曲线，然后通过超高效液相色谱-串联质谱测定样品溶液，得到样品溶液的色谱峰面积，通过标准混合工作液的标准曲线得到样品液的实际浓度。

所述分析的有机磷酸酯包括四种烷基代有机磷酸酯：磷酸三乙酯、磷酸三丙酯、磷酸三正丁酯、磷酸三异辛酯；三种氯代烷基代有机磷酸酯：磷酸三(2-氯乙基)酯、磷酸三(2-氯丙基)酯、磷酸三(1，3-二氯异丙基)酯；三种芳基代有机磷酸酯：磷酸三苯酯、磷酸三甲苯酯、磷酸三(2-乙基己基二苯基)酯和磷酸三(丁氧基乙基)酯。

所述步骤(2)过滤优选的采用0.45μm微孔滤膜过滤。

所述步骤(2)替代物是指氘代磷酸三苯酯、氘代磷酸三正丁酯、氘代磷酸三乙酯、氘代磷酸三(2-氯乙基)酯中的一种，优选的为氘代磷酸三苯酯，优点是来源广泛，价格便宜。

所述步骤(2)萃取溶剂是二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯中的一种，优选的为二氯甲烷，优点是价格便宜，对被分析物的萃取效果好。

所述步骤(3)超高效液相色谱-质谱条件为：

液相色谱条件：agilentinfinity6420高效液相色谱系统；

色谱柱：zorbaxeclipseplusc18柱，柱温为40℃，柱规格大小为：2.1mm×50mm；i.d,1.8μm；

流动相：a：体积比为1:1000的甲酸水溶液，b：纯甲醇，流动相流速为0.4ml/min。流动相梯度洗脱条件如下：0-3min内保持体积比a：b＝60％：40％，3-4.5min内保持体积比a：b＝50％：50％，6.5-8.5min内保持体积比a：b＝45％：55％，8.5-9min内保持体积比a：b＝30％：70％，9-11min内保持体积比a：b＝20％：80％，11-12min内保持体积比a：b＝10％：90％，12-15.5min内保持体积比a：b＝0％：100％，15.5-18.5min内保持体积比a：b＝60％：40％。

进样体积为10μl。

质谱条件：

agilent6460三重四级杆质谱检测器；

离子源：esi，离子源温度：300℃，电离模式：正离子模式；干燥气流速:7l/min；雾化器压力：45psi；鞘气温度：350℃，鞘气流速：11l/min；碰撞电压：3.5kv；喷嘴电压：0kv；采集方式：定量反应监测模式。

有关各有机磷酸酯单体的超高效液相色谱-质谱参数如下：

测定磷酸三(2-氯乙基)酯时：母离子质荷比为285，定量子离子的质荷比为99，定性子离子的质荷比为63.1；

测定磷酸三(2-氯丙基)酯时：母离子质荷比为327，定量子离子的质荷比为99，定性子离子的质荷比为174.9；

测定磷酸三(1,3-二氯异丙基)酯时：母离子质荷比为428.9，定量子离子的质荷比为99.1，定性子离子的质荷比为208.9；

测定磷酸三乙酯时：母离子质荷比为183，定量子离子的质荷比为99，定性子离子的质荷比为126.9；

测定磷酸三丙酯时：母离子质荷比为225.3，定量子离子的质荷比为99，定性子离子的质荷比为140.9；

测定磷酸三正丁酯时：母离子质荷比为267.3，定量子离子的质荷比为99，定性子离子的质荷比为211；

测定磷酸三异辛酯时：母离子质荷比为435.4，定量子离子的质荷比为99，定性子离子的质荷比为113；

测定磷酸三甲苯酯时：母离子质荷比为369.1，定量子离子的质荷比为91.1，定性子离子的质荷比为165；

测定磷酸三苯酯时：母离子质荷比为327，定量子离子的质荷比为77.1，定性子离子的质荷比为214.9；

测定磷酸三(2-乙基己基二苯基)酯时：母离子质荷比为363.2，定量子离子的质荷比为251，定性子离子的质荷比为77.1；

测定磷酸三(丁氧基乙基)酯时：母离子质荷比为399.3，定量子离子的质荷比为199，定性子离子的质荷比为299.1。

实施例1

运用本发明对天津市海河干流水体中的有机磷酸酯进行分析。

1.配制标准工作液：

(a)用10μl微量移液枪分别吸取10μl的浓度为100mg/l的磷酸三乙酯tep、磷酸三正丙酯tprp、磷酸三正丁酯tnbp、磷酸三异辛酯tehp、磷酸三苯酯tphp、磷酸三甲苯酯tcrp、磷酸三(2-乙基己基二苯基)酯ehdpp、磷酸三(丁氧基乙基)酯tbep、磷酸三(2-氯乙基)酯tcep、磷酸三(2-氯丙基)酯tcpp、磷酸三(1，3-二氯异丙基)酯tdcpp标准储备液，将它们滴入2ml色谱瓶中混合，再在2ml色谱瓶中加入890μl的甲醇，振荡得到1ml的1mg/l的标准混合工作液；

(b)用微量移液枪分别吸取0.5μl、1μl、2μl、5μl、10μl、20μl、50μl、200μl、500μl的1mg/l的标准混合工作液，得到九种体积的标准混合工作液，各自用甲醇稀释到1ml，振荡混匀得到九种不同浓度的标准混合工作液：0.5μg/l、1μg/l、2μg/l、5μg/l、10μg/l、20μg/l、50μg/l、200μg/l、500μg/l标准混合工作液各1ml。

2.样品预处理：将500ml的分液漏斗置于分液漏斗架上，用烧杯量取500ml的地表水水样加入其中，用微量移液枪加入20ng氘代磷酸三苯酯，用50ml的二氯甲烷液液萃取两次，每次萃取应充分振荡摇匀，合并有机相，用无水硫酸钠干燥后，将萃取液转移到250ml的旋蒸瓶中，旋转蒸发到1ml，浓缩液转移到色谱瓶，用二氯甲烷少量多次洗涤旋蒸瓶，洗涤液转移到色谱瓶中，色谱瓶中的浓缩液氮吹至近干，用甲醇定容至0.5ml，得样品溶液。

3.以超高效液相色谱-质谱测定标准工作液和样品溶液：

液相色谱条件：agilentinfinity6420高效液相色谱系统；色谱柱：zorbaxeclipseplusc18柱，柱温为40℃，流动相：a：体积比为0.1％甲酸水溶液，b：纯甲醇，流动相流速为0.4ml/min。流动相梯度洗脱条件如下：0-3min内保持体积比a：b＝60％：40％，3-4.5min内保持体积比a：b＝50％：50％，6.5-8.5min内保持体积比a：b＝45％：55％，8.5-9min内保持体积比a：b＝30％：70％，9-11min内保持体积比a：b＝20％：80％，11-12min内保持体积比a：b＝10％：90％，12-15.5min内保持体积比a：b＝0％：100％，15.5-18.5min内保持体积比a：b＝60％：40％。进样体积为10μl。

质谱条件：agilent6460三重四级杆质谱检测器；离子源：esi，离子源温度：300℃，电离模式：正离子模式；干燥气流速:7l/min；雾化器压力：45psi；鞘气温度：350℃，鞘气流速：11l/min；碰撞电压：3.5kv；喷嘴电压：0kv；采集方式：定量反应监测模式。

将标准混合工作液进样后，得到各有机磷酸酯单体对应的色谱图，以色谱图为依据进行定量。磷酸三乙酯的色谱图如图2所示：保留时间为3.220min，响应值6.3×10²；磷酸三丙酯的色谱图如图3所示：保留时间9.899min，响应值2.8×10⁴；磷酸三正丁酯的色谱图如图4所示：保留时间为13.075min，响应值2.2×10⁴；磷酸三异辛酯的色谱图如图5所示：保留时间为16.370min，响应值7.8×10³；磷酸三(2-氯乙基)酯的色谱图如图6所示：保留时间为5.314min，响应值0.98×10³；磷酸三(2-氯丙基)酯的色谱图如图7所示：保留时间为10.245min，响应值1.5×10³；磷酸三(1,3-二氯异丙基)酯的色谱图如图8所示：保留时间为12.382min，响应值3.6×10²；磷酸三甲苯酯的色谱图如图9所示：保留时间为13.928min，响应值4.6×10³；磷酸三苯酯的色谱图如图10所示：保留时间为12.464min，响应值5.3×10³；磷酸三(2-乙基己基二苯基)如图11所示：保留时间为14.283min，响应值2.3×10³；磷酸三(丁氧基乙基)酯如图12所示：保留时间为13.441min，响应值9.8×10³。

4.基于一定浓度的标准混合工作液得到一定的色谱峰面积，通过测定不同浓度的标准混合工作液可以得到一系列的色谱峰面积，以标准混合工作液浓度为横坐标，与该标准混合工作液浓度对应的色谱峰面积为纵坐标可以建立一条标准曲线，然后通过超高效液相色谱-串联质谱测定样品溶液，得到样品溶液的色谱峰面积，通过标准混合工作液的标准曲线得到海河干流样品中有机磷酸酯的实际浓度。

5.沿海河共在25个地点采集了水样，每个地点采集1l水样，将采集的每个地点的水样分别重复上述步骤2-4，得到25个样品浓度值，将这些样品浓度先加和然后除以样品数量，得到海河样品的平均值；浓度范围是将25个样品浓度值由小到大进行排列，用两端的最值表示，如下表所示。

表：海河干流地表水中有机磷酸酯的浓度水平

通过本实验可以得出如下结论：海河有机磷酸酯污染的主要种类是氯代烷基代有机磷酸酯tcep(67.45ng/l)、tcpp(78.48ng/l)和烷基代有机磷酸酯tep(63.15ng/l)、tnbp(86.58ng/l),这两类有机磷酸酯由于具有持久性，在环境中难降解，不易水解、光解和生物降解，因此容易在水体中残留下来，造成水体污染，应当引起重视，加强相关地区的监管措施；芳基代有机磷酸酯的水体浓度很低，该类有机磷酸酯半衰期很短，很容易降解，不容易造成水体污染。

实施例2方法空白值和空白回收率实验。

1.配制标准工作液：

(a)用10μl微量移液枪分别吸取10μl的浓度为100mg/l的磷酸三乙酯tep、磷酸三正丙酯tprp、磷酸三正丁酯tnbp、磷酸三异辛酯tehp、磷酸三苯酯tphp、磷酸三甲苯酯tcrp、磷酸三(2-乙基己基二苯基)酯ehdpp、磷酸三(丁氧基乙基)酯tbep、磷酸三(2-氯乙基)酯tcep、磷酸三(2-氯丙基)酯tcpp、磷酸三(1，3-二氯异丙基)酯tdcpp标准储备液，将它们滴入2ml色谱瓶中混合，再在2ml色谱瓶中加入890μl的甲醇，振荡得到1ml的1mg/l的标准混合工作液；

(b)用微量移液枪分别吸取0.5μl、1μl、2μl、5μl、10μl、20μl、50μl、200μl、500μl的1mg/l的标准混合工作液，得到九种体积的标准混合工作液，各自用甲醇稀释到1ml，振荡混匀得到九种不同浓度的标准混合工作液：0.5μg/l、1μg/l、2μg/l、5μg/l、10μg/l、20μg/l、50μg/l、200μg/l、500μg/l标准混合工作液各1ml。

2.样品预处理：将500ml的分液漏斗置于分液漏斗架上，用烧杯量取500ml的蒸馏水水样加入其中，用微量移液枪加入20ng氘代磷酸三苯酯，用50ml的二氯甲烷液液萃取两次，每次萃取应充分振荡摇匀，合并有机相，用无水硫酸钠干燥后，将萃取液转移到250ml的旋蒸瓶中，旋转蒸发到1ml左右，浓缩液转移到色谱瓶，用二氯甲烷少量多次洗涤旋蒸瓶，洗涤液转移到色谱瓶中，色谱瓶中的浓缩液氮吹至近干，用甲醇定容至0.5ml，得样品溶液。

3.以超高效液相色谱-质谱测定标准工作液和样品溶液：

液相色谱条件：agilentinfinity6420高效液相色谱系统；色谱柱：zorbaxeclipseplusc18柱，柱温为40℃，流动相：a：体积比为0.1％甲酸水溶液，b：纯甲醇，流动相流速为0.4ml/min。流动相梯度洗脱条件如下：0-3min内保持体积比a：b＝60％：40％，3-4.5min内保持体积比a：b＝50％：50％，6.5-8.5min内保持体积比a：b＝45％：55％，8.5-9min内保持体积比a：b＝30％：70％，9-11min内保持体积比a：b＝20％：80％，11-12min内保持体积比a：b＝10％：90％，12-15.5min内保持体积比a：b＝0％：100％，15.5-18.5min内保持体积比a：b＝60％：40％。进样体积为10μl。

质谱条件：agilent6460三重四级杆质谱检测器；离子源：esi，离子源温度：300℃，电离模式：正离子模式；干燥气流速:7l/min；雾化器压力：45psi；鞘气温度：350℃，鞘气流速：11l/min；碰撞电压：3.5kv；喷嘴电压：0kv；采集方式：定量反应监测模式。

将标准混合工作液进样后，得到各有机磷酸酯单体对应的色谱图，以色谱图为依据进行定量。磷酸三乙酯的色谱图如图2所示：保留时间为3.220min，响应值6.3×10²；磷酸三丙酯的色谱图如图3所示：保留时间9.899min，响应值2.8×10⁴；磷酸三正丁酯的色谱图如图4所示：保留时间为13.075min，响应值2.2×10⁴；磷酸三异辛酯的色谱图如图5所示：保留时间为16.370min，响应值7.8×10³；磷酸三(2-氯乙基)酯的色谱图如图6所示：保留时间为5.314min，响应值0.98×10³；磷酸三(2-氯丙基)酯的色谱图如图7所示：保留时间为10.245min，响应值1.5×10³；磷酸三(1,3-二氯异丙基)酯的色谱图如图8所示：保留时间为12.382min，响应值3.6×10²；磷酸三甲苯酯的色谱图如图9所示：保留时间为13.928min，响应值4.6×10³；磷酸三苯酯的色谱图如图10所示：保留时间为12.464min，响应值5.3×10³；磷酸三(2-乙基己基二苯基)如图11所示：保留时间为14.283min，响应值2.3×10³；磷酸三(丁氧基乙基)酯如图12所示：保留时间为13.441min，响应值9.8×10³。

4.基于一定浓度的标准混合工作液得到一定的色谱峰面积，通过测定不同浓度的标准混合工作液可以得到一系列的色谱峰面积，以标准混合工作液浓度为横坐标，与该标准混合工作液浓度对应的色谱峰面积为纵坐标可以建立一条标准曲线，然后通过超高效液相色谱-串联质谱测定样品溶液，得到样品溶液的色谱峰面积，通过标准混合工作液的标准曲线可得出用该方法萃取测定得到的蒸馏水中各有机磷酸酯单体含量，此时的单体含量即为空白值。

5.重复步骤2-4，且在步骤2处用微量移液枪加入20ng氘代磷酸三苯酯外还加入50μl的500μg/l标准混合工作液，这时通过标准混合工作液的标准曲线可得出用该方法萃取测定得到的各有机磷酸酯单体含量，用此时测得的浓度值除以进样前理论上色谱瓶中的浓度50μg/l所得到的比值即为空白加标回收率。

表：方法空白值和空白加标回收率(n＝5)

通过本实验可以看出：各有机磷酸酯单体的空白值很低甚至未检测到，证明用该种方法进行有机磷酸酯单体的监测时所引入的方法干扰很低，可以忽略；此外使用该方法测定各种类有机磷酸酯，其回收率均大于60％，证明该种方法可靠性很高，可以推广使用。