来自样品的靶的尺寸排阻层析分离或脱盐中的并行分离和清洗的制作方法

文档序号:19350285发布日期:2019-12-06 21:18阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于在系统中执行来自样品的靶的尺寸排阻层析分离(sec)或脱盐的方法,包括:

i)为系统提供至少三个柱(a、b、c、…)的步骤,所述至少三个柱中的至少两个能够同时串联连接;

ii)使容纳所述靶的柱与所述柱中的另一柱串联连接的步骤,

ii)在通过缓冲液流而将所述靶从容纳所述靶的所述柱输送到所述柱中的所述另一柱的同时利用清洗流体来清洗至少一个另外的柱的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法进一步包括如下的随后的步骤:使所述另一柱的出口连接到被清洗的所述另外的柱的入口,并且随后从被清洗的所述柱的所述出口收集所述靶。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法进一步包括如下的步骤:将所述靶从所述另一柱的所述出口按照任何顺序连续地输送通过被清洗的所述另外的柱和一个或多个额外的柱,并且最终从最后一个所述额外的柱或被清洗的所述另外的柱收集所述靶。

4.根据权利要求1或权利要求3所述的方法,其用于尺寸排阻层析(sec)或脱盐系统,其特征在于,所述至少三个柱包括用于使靶从样品中分离的四个柱,其中,所述靶在被收集之前穿过三个或四个柱,其中,各个柱具有入口和出口,所述入口和所述出口能够流体地连接到阀组件,以用于选择性地同时地使串联的所述至少两个层析柱和其它层析柱中的一个连接到清洗流体流,其中,所述阀组件包括用于输入缓冲液溶液的第一入口、用于输入清洗流体的第二入口、用于从所述层析柱接收流体的入口以及通向阀部件以用于使流体转向到废物组件或靶收集组件的第一出口;

所述系统进一步包括:

用于检测所述靶物质的存在的第一检测器;

用于检测所述靶物质的存在的第二检测器;

用于泵送缓冲液和清洗流体的一个或多个泵;

第一缓冲液溶液的源;

所述清洗流体的源;以及,

用于将样品注射到sec柱中的部件。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法进一步包括以下步骤:

a)i)操作所述阀组件,使得第三柱的所述入口连接到清洗流体的源,第一柱的所述出口连接到第二柱的所述入口,所述第一柱的所述入口以及任选地第四柱的所述入口连接到所述第一缓冲液的所述源,并且,所述第二柱、所述第三柱以及所述第四柱的所述出口被引导至废物组件,

ii)将所述检测器布置于所述第一柱的所述出口与所述第二柱的所述入口之间,

iii)将包含所述靶物质的样品s注射到所述第一柱的所述入口中;

iv)随后,将清洗流体泵送到所述第三柱中,并且将第一缓冲液泵送到至少所述第一柱以及任选地所述第四柱的所述入口中,直到所述靶分子已经过所述检测器并且已进入所述第二柱为止;

b)i)操作所述阀组件,使得所述第二柱的所述出口连接到所述第三柱的所述入口,所述第二柱的所述入口以及任选地所述第一柱的所述入口连接到所述第一缓冲液的所述源,所述第四柱的所述入口连接到清洗流体的所述源,

ii)将所述检测器布置于所述第二柱的所述出口与所述第三柱的所述入口之间,

iii)随后,在将第一缓冲液泵送到至少所述第二柱的所述入口中的同时将清洗流体泵送到所述第四柱中,直到所述靶分子已经过所述检测器并且已进入所述第三柱为止;

c)i)操作所述阀组件,使得所述第三柱的所述出口连接到所述第四柱的所述入口,所述第三柱的所述入口以及任选地所述第二柱的所述入口连接到所述第一缓冲液的所述源,所述第一柱的所述入口连接到清洗流体的所述源,

ii)将所述检测器布置于所述第三柱的所述出口与所述第四柱的所述入口之间,

iii)随后,在将第一缓冲液泵送到至少所述第三柱的所述入口中的同时将清洗流体泵送到所述第一柱中,直到所述靶分子已经过所述检测器并且已进入所述第四柱为止,

d)i)操作所述阀组件,使得所述第四柱的所述出口连接到阀部件,以用于使流体转向到废物组件或靶收集组件,所述第三柱的所述入口连接到清洗流体的所述源,所述第一柱的所述出口连接到所述第二柱的所述入口,并且,所述第二柱和第三柱的所述出口连接到所述废物组件;

ii)将所述第一检测器布置于所述第一柱的所述出口与所述第二柱的所述入口之间,并且将所述第二检测器布置于所述第四柱的所述出口与所述收集组件的所述入口之间,

iii)将清洗流体泵送到所述第三柱中,并且将第一缓冲液泵送到至少所述第四柱的所述入口中,直到所述靶分子已经过所述检测器并且已进入所述收集组件为止。

6.根据权利要求1或权利要求2所述的方法,其用于包括用于使靶从样品中分离的四个柱的尺寸排阻层析(sec)或脱盐系统,其特征在于,所述靶在被收集之前穿过三个柱,其中,各个柱具有入口和出口,并且能够流体地连接到阀组件,例如多位置阀,所述阀组件布置成用于选择性地同时地使串联的所述层析柱中的仅两个和其它层析柱中的一个连接到清洗流体流,其中,所述阀包括用于输入缓冲液溶液的第一入口端口、用于输入清洗流体的第二入口端口、用于从所述层析柱接收流体的入口端口、通向阀部件以用于使流体转向到废物组件或靶收集组件的第一出口端口;

所述系统进一步包括:

用于检测所述靶物质的存在的第一检测器;

用于检测所述靶物质的存在的第二检测器;

用于泵送缓冲液和清洗流体的多个泵;

第一缓冲液溶液的源;

所述清洗流体的源;以及,

用于将样品注射到sec柱中的部件,

其中,所述方法包括以下步骤:

a)i)将所述阀组件定位成使得第三柱的所述入口连接到清洗流体的源,第一柱的所述出口连接到第二柱的所述入口,所述第一柱的所述入口以及任选地所述第四柱的所述入口连接到所述第一缓冲液的所述源,并且,所述第二柱、所述第三柱以及所述第四柱的所述出口被引导至废物组件,

ii)将所述检测器布置于所述第一柱的所述出口与所述第二柱的所述入口之间,

iii)将包含所述靶物质的样品s注射到所述第一柱的所述入口中;

iv)随后,将清洗流体泵送到所述第三柱中,并且将第一缓冲液泵送到至少所述第一柱以及任选地所述第四柱的所述入口中,直到所述靶分子已经过所述检测器并且已进入所述第二柱为止;

b)i)将所述阀定位成使得所述第二柱的所述出口连接到所述第三柱的所述入口,所述第二柱的所述入口以及任选地所述第一柱的所述入口连接到所述第一缓冲液的所述源,所述第四柱的所述入口连接到清洗流体的所述源,

ii)将所述检测器布置于所述第二柱的所述出口与所述第三柱的所述入口之间,

iii)随后,在将第一缓冲液泵送到至少所述第二柱的所述入口中的同时将清洗流体泵送到所述第四柱中,直到所述靶分子已经过所述检测器并且已进入所述第三柱为止;

c)i)将所述阀定位成使得所述第三柱的所述出口连接到阀部件,以用于使流体转向到废物组件或靶收集组件,所述第三柱的所述入口连接到缓冲液的所述源,所述第四柱的所述出口连接到所述第一柱的所述入口,并且,所述第一柱和第二柱的所述出口连接到所述废物组件;

ii)将所述第一检测器布置于所述第四柱的所述出口与所述第一柱的所述入口之间,并且将所述第二检测器布置于所述第三柱的所述出口与所述收集组件的所述入口之间;

iii)将清洗流体泵送到所述第二柱中,并且将第一缓冲液泵送到至少所述第三柱的所述入口中,直到所述靶分子已经过所述检测器并且已进入所述收集组件为止。

7.根据权利要求5或权利要求6所述的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:

重复所述方法的步骤,其中,在每次重复中,各个柱的标号在基数四中减小一,使得所述第二柱被重新指定为所述第一柱,所述第一柱被重新指定为所述第四柱,所述第三柱被重新指定为所述第二柱,并且,所述第四柱被重新指定为所述第三柱。

8.根据前述权利要求中的任一项所述的方法,其特征在于,进入各个柱中的流速被控制成基本上相同。

9.一种包括能够互连以用于执行层析分离的多个柱的层析系统,其特征在于,所述系统包括:

至少三个基本上相同的sec或脱盐柱(a、b、c…),各个柱具有入口(ai、bi、ci…)和出口(ao、bo、co、…),并且能够流体地连接到阀组件,以用于在任何时间选择性地使串联的所述层析柱中的仅两个连接,其中,所述阀包括用于输入缓冲液溶液的第一入口端口、用于输入缓冲液溶液的第二入口端口、用于输入清洗溶液的第三入口端口、通向废物组件的第一出口端口、通向靶收集组件的第二出口端口、能够同时地连接到所述四个柱中的三个的第三输出端、第四输出端以及第五输出端;

所述系统进一步包括:

用于检测所述靶物质的存在的第一检测器,

用于检测所述靶物质的存在的第二检测器,

用于将流体注射到所述第一入口端口中的第一泵;

用于将流体注射到所述第二入口端口中的第二泵;

用于将流体注射到所述第三入口端口中的第三泵;

第一缓冲液溶液的源;

所述清洗溶液的源;以及,

用于将样品装载到柱中的部件。

10.根据权利要求9所述的系统,其特征在于,所述系统包括n个柱,并且,设有布置成监测所述检测器并且控制所述泵和用于将样品装载到柱中的部件的控制部件。

11.根据权利要求10所述的系统,其特征在于,所述控制部件适应于执行分离循环,其中,所述分离循环布置成通过串联的n-1个柱而执行,并且,剩余的柱在所述分离循环期间经受清洗。

12.根据权利要求10所述的系统,其特征在于,所述控制部件适应于执行分离循环,其中,所述分离循环布置成通过串联的n个柱而执行,并且,至少一个柱在所述分离循环期间经受清洗。


技术总结
提供了用于在模拟移动床层析系统中执行分离的同时在该系统中执行柱的清洗的系统和方法。

技术研发人员:C.O.艾瑞克森
受保护的技术使用者:通用电气健康护理生物科学股份公司
技术研发日:2018.02.23
技术公布日:2019.12.06
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