一种测定奥西替尼有关物质的方法与流程

本发明属于药物分析技术领域，具体来说，涉及一种测定奥西替尼有关物质的方法。

背景技术：

表皮生长因子受体酪氨酸激酶(egfr-tk)是肿瘤治疗的重要靶分子。egfr-tkis)具有高度敏感性，吉非替尼和厄洛替尼是其代表药物，据相关研究显示，吉非替尼和厄洛替尼的有效率能够达到70％—80％，中位pfs7.7-13.3个月。因此，已经被指南推荐为egfr突变阳性晚期nsclc患者的一线治疗方案。然而，经过9-14个月的治疗后，大多数egfr突变阳性初始对egfr-tki敏感的患者会出现疾病进展，其中大约50％的耐药突变是由获得性t790m突变引起的。

奥西替尼(泰瑞沙，azd9291)是由英国阿斯利康公司研发的能够同时针对egfr初始突变及t790m突变位点的第三代egfr-tki，也是全球首个批准上市的第3代egfr—tki，已于2017年5月在我国上市，用于治疗接受egfr－tkis治疗后出现egfr－t790m突变的非小细胞肺癌。克服了第1代egfr—tkis耐药、第2代egfr－tki耐药及选择性问题，同时具有高靶向性低adr的优点。该药也有望成为egfr－t790m阳性nsclc患者(伴有脑转移)的一线治疗药物。但目前仅少量文献报道了奥西替尼原料药含量测定及质量标准研究，为加强奥西替尼的质量控制，研发一种测定奥西替尼中的有关物质的方法已非常迫切。

技术实现要素：

针对奥西替尼质量控制的技术问题，本发明提供了一种测定奥西替尼有关物质的方法，采用hplc测定奥西替尼原料药含量的方法，所建方法操作简便、快速，重复性好，可用于奥西替尼原料药的质量控制及制剂生产。

为实现上述目的，本发明采用的技术发方案是：

一种测定奥西替尼有关物质的方法，采用高效液相色谱分析方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以质量浓度0.05％的醋酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为0.9-1.2ml/min，柱温为30-32℃；0.05％的醋酸铵溶液和乙腈按以下比例进行梯度洗脱：85-90％：10-15％，0-5min；40-55％：45-60％，25-35min；85-90％:10-15％，36-46min。

本发明所述的测定奥西替尼有关物质的方法，所述的醋酸铵溶液采用盐酸调ph值至8-9。

本发明将样品先用流动相溶液预溶解后，再进行梯度洗脱。

优选地，所述用于预溶解的流动相溶液中，醋酸铵溶液与乙腈的体积比为30：70。

本发明的检测波长为240～260nm；进样量为20μl。

本发明所述0.05％的醋酸铵溶液和乙腈按以下比例进行梯度洗脱：90％：10％，0-5min；40％：60％，25-35min；90％:10％，36-46min。

本发明的有益效果是：

1、本发明根据样品的溶解度，对温度和ph的敏感程度综合考虑设计了该相关物质的测定，调节奥西尼有关物质hplc的各种条件，并对所涉及条件进行了完整验证，已证实可令标准溶液及样品检测达到专属，准确，精密，定量和稳定的分析目的。

2、可有效分离出奥西替尼中的杂质，基线无干扰，专属性强，方法有效、可靠；可严格控制奥西替尼原料药质量，重现性100％。

附图说明

图1是本发明测定方法得到的奥西替尼原料药中有关物质的hplc色谱图。a是空白溶剂色谱图，b是奥西替尼供试品。

具体实施方式

下面结合附图对本发明的实施例进行详细说明。

实施例1

一种测定奥西替尼有关物质的方法，采用高效液相色谱分析方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以质量浓度0.05％的醋酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为0.9ml/min，柱温为30℃；0.05％的醋酸铵溶液和乙腈按以下比例进行梯度洗脱：85％：15％，0-5min；40％：60％，25-35min；85％:15％，36-46min。

实施例2

一种测定奥西替尼有关物质的方法，采用高效液相色谱分析方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以质量浓度0.05％的醋酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1.2ml/min，柱温为32℃；0.05％的醋酸铵溶液和乙腈按以下比例进行梯度洗脱：90％：10％，0-5min；55％：45％，25-35min；90％:10％，36-46min。

所述的醋酸铵溶液采用盐酸调ph值至8。

实施例3

一种测定奥西替尼有关物质的方法，采用高效液相色谱分析方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以质量浓度0.05％的醋酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1ml/min，柱温为31℃；0.05％的醋酸铵溶液和乙腈按以下比例进行梯度洗脱：88％：12％，0-5min；50％：50％，25-35min；88％:12％，36-46min。

所述的醋酸铵溶液采用盐酸调ph值至9。

样品先用流动相溶液预溶解后，再进行梯度洗脱。

实施例4

一种测定奥西替尼有关物质的方法，采用高效液相色谱分析方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以质量浓度0.05％的醋酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1ml/min，柱温为30℃；0.05％的醋酸铵溶液和乙腈按以下比例进行梯度洗脱：90％：10％，0-5min；45％：55％，25-35min；90％:10％，36-46min。

所述的醋酸铵溶液采用盐酸调ph值至8.5。

样品先用流动相溶液预溶解后，再进行梯度洗脱。

所述用于预溶解的流动相溶液中，醋酸铵溶液与乙腈的体积比为30：70。

实施例5

一种测定奥西替尼有关物质的方法，采用高效液相色谱分析方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以质量浓度0.05％的醋酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为1.1ml/min，柱温为32℃；所述0.05％的醋酸铵溶液和乙腈按以下比例进行梯度洗脱：90％：10％，0-5min；40％：60％，25-35min；90％:10％，36-46min。

所述的醋酸铵溶液采用盐酸调ph值至8。

样品先用流动相溶液预溶解后，再进行梯度洗脱。

所述用于预溶解的流动相溶液中，醋酸铵溶液与乙腈的体积比为30：70。

检测波长为240～260nm；进样量为20μl。

本发明分别量取流动相和供试品溶液各20μl，在本测定方法的相同色谱条件下进样，记录色谱图(图1)。奥西替尼与9个杂质峰之间分离良好，空白溶剂对测定无干扰。

以上所述实施例仅表达了本发明的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

技术特征：

技术总结
本发明公开了一种测定奥西替尼有关物质的方法，采用高效液相色谱分析方法，选用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以质量浓度0.05%的醋酸铵溶液‑乙腈为流动相进行梯度洗脱，流速为0.9‑1.2ml/min，柱温为30‑32℃；0.05%的醋酸铵溶液和乙腈按以下比例进行梯度洗脱：85‑90%：10‑15%，0‑5min；40‑55%：45‑60%，25‑35min;85‑90%:10‑15%，36‑46min。所建方法操作简便、快速，重复性好，可用于奥西替尼原料药的质量控制及制剂生产。

技术研发人员：王元忠;曾祥燕
受保护的技术使用者：重庆化工职业学院
技术研发日：2019.08.15
技术公布日：2019.10.25