心肌钙蛋白i快速检测试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001] 本实用新型涉及体外诊断技术领域，特别涉及免疫测定，具体是指一种心肌钙蛋 白I快速检测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 人心肌钙蛋白I(CTnI)是一个分子量为22. 5KD的心肌蛋白，它与肌钙蛋白 T(TnT)、肌钙蛋白C(TnC)-起形成一个心肌钙蛋白复合物，共同完成细胞内肌动蛋白间相 互作用的钙信号传递的基本功能。心肌肌钙蛋白I(cTnl)在心肌组织中表达，在胎儿、健 康人或疾病状态的成人骨骼肌中不表达，因而对心肌具有高度特异性。由于肌钙蛋白具有 组织特异性强、诊断窗口期长、测定方法快速、在血中出现早等优点，使其在急性心肌梗死 (AMI)诊断中的作用越来越受到人们关注，cTnl被认为是目前最好的确定标志物，正逐步 取代CK-MB成为AMI的诊断"金标准"。
[0003] CTnI在临床应用领域较为广泛。其在医学上的价值正得到广泛验正和承认。现将 其临床意义综述如下：
[0004] 1、心肌损伤的临床诊断、预后估计和危险分层
[0005] CTnI不受骨骼肌受损伤的影响，且在患者发病后出现较早，持续时间长，具有其独 特的心肌特异性和诊断窗口期较长的优势，是目前诊断心肌损伤较好的确定标志物。
[0006] CTnI不仅有助于早期诊断AMI，并对其预后估计和危险分层也有一定的帮助。有 研宄证实，cTnl在AMI症状出现后12h，对危险分层最为适宜。
[0007] 2、估计心肌梗死面积
[0008] 心肌梗死的面积与心室功能的减弱和室性心率失常的发生有密切的关系，所以估 计心肌梗死面积可帮助评价预后。cTnl的释放与心肌梗死面积呈线性相关，AMI后9h相关 性最好，AMI后9hcTnl的浓度可估计心肌梗死的面积
[0009] 3、非缺血性心衰心肌溶解的检测
[0010] 有研宄通过检测cTnl来评价心肌细胞溶解在非缺血性心衰中的作用。结果表明， cTnl升高与二尖瓣活动受限、左室向心性重塑以及左室壁张力的相关生化标志物（如增高 的心钠素）有关，认为微小的心肌溶解可能部分与左室张力的显著增加有关，认为cTnl将 是检测非缺血性心衰的心肌溶解，非常有发展前景的方法。
[0011] 4、监测心脏手术造成的心肌损伤
[0012] 由于cTnl对检测微小心肌损伤具有较高的敏感性和特异性，可用于心脏围手术 期的监测。已有研宄表明，cTnl是冠脉成形术后微小心肌损伤非常敏感的标志物，在cTnl 不正常的患者中，有38%的患者在支架置入术后发生分支闭塞。Harris等对cTnl、cTnl 和CK-MB在检测经皮穿刺冠状动脉成形术（PTCA)、支架术（stent)、冠脉动脉内斑块旋切术 (RA)等心脏介入手术后心肌损害的敏感性进行比较，同样发现，cTnl对术后微小心肌损伤 的预测价值最高。
[0013] 5、原发性尚血压病左室肥厚的新标志
[0014] Siciliano等对原发性高血压病伴左室肥厚组、原发性高血压病无左室肥厚组和 正常对照组的cTnl进行检测发现，第一组的23例患者中，有12例cTnl大于正常高限值 (0. 5yg/L)，后两组的cTnl均低于0. 5yg/L，认为血清cTnl浓度是原发性高血压患者左室 肥厚的新标志
[0015] 6、骨骼肌损伤或慢性肾衰伴有心肌损伤的鉴别
[0016] 由于CK-MBXK和Mb不仅存在于心肌组织中，也存在于非心肌组织中，在骨骼肌损 伤或慢性肾衰时，可不同程度的升高；作为Tn之一的cTnl在慢性肾衰、横纹肌溶解患者中 也常呈不同程度的增高，而cTnl具有唯一的心肌特异性，可鉴别骨骼肌损伤或慢性肾衰患 者是否伴有心肌损伤
[0017] cTnl的测定始于20世纪80年代中期，多采用双抗体竞争放射免疫法和竞争性 ELISA测定法。但由于过去cTnl的检测方法较为落后，假阳性很高，影响了它在临床上的价 值，近几年来，由于检测技术的更新，测定cTnl的快速、简便和可靠的方法已迅速建立。
[0018] cTnl的检测方法市面上常见为胶体金法和化学发光法，胶体金虽成本低但一般只 能半定量或者定性，存在着检测灵敏度低、精密性差等局限性，化学发光可以做定量但成本 尚。
[0019] 所以需要提供一种新的CTnI检测方法和检测工具，以解决现有技术中的存在的 问题。 【实用新型内容】
[0020] 本实用新型的目的是为了克服上述现有技术中的缺点，提供一种检测结果稳定， 准确率高、成本低，灵敏度高，精密性好，检测范围宽、适用临床推广的心肌钙蛋白I快速检 测试剂盒。
[0021] 为了实现上述目的，本实用新型提供了一种心肌钙蛋白I快速检测试剂盒，其特 点在于，其包括盒盖、盒体、第一试剂单元、第二试剂单元、第三试剂单元，其中，
[0022] 所述的第一试剂单元、所述的第二试剂单元、所述的第三试剂单元都由可密封的 试剂瓶组成，所述的盒盖和所述的盒体连接，所述的第一试剂单元、所述的第二试剂单元、 所述的第三试剂单元都按顺序放置于所述的盒体中。
[0023] 较佳地，所述的盒体的形状为长方体形状。
[0024] 较佳地，所述的第一试剂单元为装有包被有活性分子的发光微球的试剂瓶，所述 的第二试剂单元为装有已标记生物素的活性分子的试剂瓶，所述的第三试剂单元为装有内 部带有染料的纳米级感光微球的试剂瓶。
[0025] 采用本实用新型的心肌钙蛋白I快速检测试剂盒，在均相条件下，将内部带有染 料的感光微球（纳米级）、标记生物素的活性分子以及包被有活性分子并且内部带有发光 化合物的发光微球（纳米级）的混合物作为试剂和检测样品混合。此时纳米感光微球与标 记生物素的活性分子形成连接物再和包被有活性分子的纳米发光微球可迅速有效地捕捉 待测样本中的靶分子，在近距离内，三者形成免疫夹心复合物。激发光照射后，纳米感光微 球中的染料（光敏氰基化合物）被诱导激活，并释放高能态的活性氧离子（单线态氧）。该 高能态的活性氧离子被近距离的纳米发光微球俘获，从而传递能量以激活所述发光微球中 的发光化合物（稀土螯合物）。数微秒后，发光微球中的发光化合物将释放出高能级红光。 用光子计数器测定这些高能级光子，并通过电脑将光子数换算为目标分子浓度，光子数的 多少即精确地反映了目标分子的浓度。而当样本不含靶分子时，无法在近距离形成免疫夹 心复合物，活性氧离子也无法传递至发光微球表面。活性氧离子在液相中迅速衰减，检测时 则无光能级红光产生。其采用全液相的反应模式，液态均相的模式使各测试间的一致性更 好，使产品具有更好的重复性与一致性。且免冲洗，避免反应中引入不必要的干扰物及其它 不确定因素，使得检测结果更为稳定。可以快速诊断领域引入独特的化学发光技术，使整体 检测性能更优。
【附图说明】
[0026] 图1为本实用新型心肌钙蛋白I快速检测试剂盒的结构示意图。
[0027] 图2为本实用新型心肌钙蛋白I快速检测试剂盒微球结合形成二聚体的原理图。
[0028] 图3为本实用新型心肌钙蛋白I快速检测试剂盒微球微粒未结合时的原理图。
[0029] 图4为本实用新型心肌钙蛋白I快速检测试剂盒单线态氧随微粒距离衰减时的曲 线图。
[0030] 图5为本实用新型实施例的的检测结果与进口CTnI试剂盒检测结果的平行比较 图。
【具体实施方式】
[0031] 为了能够更清楚地理解本实用新型的技术内容，下面对本实用新型的具体实施方 法作进一步说明。
[0032] 如图1所示的一种心肌钙蛋白I快速检测的试剂盒，其包括盒盖1、盒体2、第一试 剂单元3、第二试剂单元4、第三试剂单元5,其中，
[0033] 第一试剂单元3、第二试剂单元4、第三试剂单元5都由可密封的试剂瓶组成，盒盖 1和盒体2连接，第一试剂单元3、第二试剂单元4、第三试剂单元5都按顺序放置于盒体中。
[0034] 盒体2的形状为长方体形状。
[0035] 第一试剂单元3为装有包被有活性分子的发光微球的试剂瓶，第二试剂单元4为 装有已标记生物素的活性分子的试剂瓶，第三试剂单元5为装有内部带有染料的纳米级感 光微球的试剂瓶。活性分子为cTnl抗体。
[0036] 其检测原理如图2~图3所示。其单线态样随微粒举例衰减时的曲线图如图4所 不O
[0037] 在下述实施例中使用的原料、试剂、仪器来源如下：
[0038]
【主权项】
1. 一种心肌钙蛋白I快速检测试剂盒，其特征在于，其包括盒盖、盒体、第一试剂单元、 第二试剂单元、和第三试剂单元，其中， 所述的第一试剂单元、所述的第二试剂单元、和所述的第三试剂单元都由可密封的试 剂瓶组成，所述的盒盖和所述的盒体连接，所述的第一试剂单元、所述的第二试剂单元、和 所述的第三试剂单元都按顺序放置于所述的盒体中。
2. 根据权利要求1所述的心肌钙蛋白I快速检测试剂盒，其特征在于，所述的盒体的形 状为长方体形状。
3. 根据权利要求1所述的心肌钙蛋白I快速检测试剂盒，其特征在于，所述的第一试剂 单元为装有包被有活性分子的发光微球的试剂瓶，所述的第二试剂单元为装有已标记生物 素的活性分子的试剂瓶，所述的第三试剂单元为装有内部带有染料的纳米级感光微球的试 剂瓶。
【专利摘要】本实用新型涉及一种心肌钙蛋白I快速检测试剂盒，其特征在于，其包括盒盖、盒体、第一试剂单元、第二试剂单元、和第三试剂单元，其中，第一试剂单元、第二试剂单元、和第三试剂单元都由可密封的试剂瓶组成，盒盖和盒体连接，第一试剂单元、第二试剂单元、和第三试剂单元都按顺序放置于盒体中。采用本实用新型的心肌钙蛋白I快速检测试剂盒，检测结果稳定，准确率高、成本低，灵敏度高，精密性好，检测范围宽、适用临床推广。
【IPC分类】G01N33-68
【公开号】CN204495840
【申请号】CN201520079542
【发明人】张伟, 卫君超, 郑东, 葛望舒
【申请人】上海丰汇医学科技股份有限公司
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年2月4日