作为饲料添加剂的二肽的制作方法

专利名称：作为饲料添加剂的二肽的制作方法
作为饲料添加剂的二肽介绍本发明涉及新的甲硫氨酸结合的非天然和天然二肽，其为诸如赖氨酸、苏氨酸和色氨酸的必需、限制性氨基酸以及含硫氨基酸半胱氨酸和胱氨酸的二肽，以及它们的合成和用作饲料添加剂用于饲养有益动物，如鸡、猪、反刍动物，但是还特别是水产养殖中的鱼和甲壳动物。
现有技术必需氨基酸(EAA)甲硫氨酸、赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸和精氨酸以及两种含硫氨基酸半胱氨酸和胱氨酸是动物饲料的非常重要的成分，并且在诸如鸡、猪和反刍动物的有益动物的经济饲养中起着重要作用。特别地，EAA 的优化配置和充足供应是决定性的。因为来自诸如大豆、玉米和小麦的天然蛋白来源的饲料一般缺少某些EAA，所以用合成的EAA，例如DL-甲硫氨酸、L-赖氨酸、L-苏氨酸或L-色氨酸进行特别补充一方面允许动物的更快生长或来自高产奶牛的更高牛奶产量，另一方面还更高效地利用总饲料。这提供了可观的经济优势。饲料添加剂市场具有可观的工业和经济重要性。此外，它们是强劲增长的市场，归因于诸如中国和印度的国家增加的重要性。对于许多动物物种，L-甲硫氨酸((S)-2_氨基-4-甲硫基丁酸)代表所有 EAA的第一限制性氨基酸，并且因此在动物营养和作为饲料添加剂中具有最重要的作用 (Rosenberg et al.，J. Agr. Food Chem. 1957，5，694—700)。然而，在经典化学合成中，甲硫氨酸是作为外消旋物形成的，是D-和L-甲硫氨酸的50 50混合物。然而，这种外消旋 DL-甲硫氨酸可以直接用作饲料添加剂，因为在一些动物物种中，在体内条件下有将甲硫氨酸的非天然D-对映体转变为天然L-对映体的转化机制。首先通过非特异性D-氧化酶将D-甲硫氨酸脱去氨基为α -酮-甲硫氨酸，然后通过L-氨基转移酶转化为L-甲硫氨酸(Baker,D. H. in" Amino acids in farm animal nutrition" ,D' Mello, J. P. F. (ed.), Wallingford(UK), CAB hternational，1994，37-61)。结果体内 L-甲硫氨酸的可用量增加，然后可供动物用于生长。D-甲硫氨酸至L-甲硫氨酸的酶促转化已在鸡、猪和牛中，而且特别在鱼、虾和对虾中发现。例如，Sveier et al. (Aquacult. Nutr. 2001，7 (3)，169-181) 和 Kim et al. (Aquaculture 1992，101 (1-2)，95-103)显示 D-甲硫氨酸至 L-甲硫氨酸的转化在食肉的大西洋鲑和虹鳟中是可能的。Robinson et al. (J. Nutr. 1978，108 (12)， 1932-1936)和 Schwarz et al. (Aquaculture 1998，161，121-129)显示对于诸如鲶鱼和鲤鱼的杂食鱼种类是相同的。此外，Forster 和 Dominy(J. World Aquacult. Soc. 2006,37(4), 474-480)能够显示，在用物种凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的杂食虾的饲养测试中，DL-甲硫氨酸与L-甲硫氨酸是同样有效的。2007年，全世界生产了超过70000吨的结晶 DL-甲硫氨酸或外消旋、液体甲硫氨酸-羟基-类似物(MHA，rac-2-羟基-4-(甲硫基)丁酸(HMB))和固体钙-MHA，并且成功地直接用作饲料添加剂用于单胃动物，例如家禽和猪。与甲硫氨酸相比，赖氨酸、苏氨酸和色氨酸在各自情况下仅L-对映体可以用作饲料添加剂，因为这三种必需和限制性氨基酸分别的D-对映体不可以通过身体在生理条件下转化为相应的L-对映体。因此，2007年例如对于猪的第一限制性氨基酸L-赖氨酸单独的世界市场为超过1，000，000吨。对于另外两种限制性必需氨基酸L-苏氨酸和L-色氨酸， 2007年世界市场分别为超过100，OOOt和刚刚低于3000t。在单胃动物的情况下，例如家禽和猪，通常DL-甲硫氨酸、MHA,以及L-赖氨酸、 L-苏氨酸和L-色氨酸直接用作饲料添加剂。相比之下，用诸如甲硫氨酸、赖氨酸、苏氨酸的EAA或者还有MHA补充饲料对于反刍动物是无效的，因为大部分被反刍动物瘤胃中的微生物分解。由于这种降解，仅部分补充的EAA进入动物的小肠(吸收入血液一般在这里发生)。在EAA中，主要是甲硫氨酸在反刍动物中起着决定性作用，因为高产奶量仅由最佳供应保证。为了甲硫氨酸可供反刍动物高效利用，必需使用瘤胃抗性的保护形式。有几种可能的方式将这些特性赋予DL-甲硫氨酸或rac-MHA。一种可能性是通过运用合适的保护层或者通过将甲硫氨酸分布在保护基质中来获得高瘤胃抗性。结果甲硫氨酸可以通过瘤胃， 几乎没有损失。随后，例如在皱胃中通过酸水解去除保护层，然后释放的甲硫氨酸可以在反刍动物的小肠中被吸收。可商购的产品为例如来自Evonik Degussa公司的Mepron 和来自Adisseo公司的Smartamine 。甲硫氨酸的生产和/或包被一般是技术复杂和费力的过程，并且因此是昂贵的。此外，成品颗粒的表面包被可以很容易地被饲料加工期间的机械应力和磨损破坏，这可以导致保护的减少甚至完全丧失。因此也不可能将保护的甲硫氨酸颗粒加工为更大的混合饲料颗粒，同样因为保护层会被机械加载破碎。这限制了这样的产品的用途。增加瘤胃稳定性的另一个可能性是甲硫氨酸和MHA的化学衍生。在这种情况下， 用合适的保护基衍生化分子的官能团。例如这可以通过用羧酸和醇酯化的功能来实现。结果，瘤胃中通过微生物的降解可以减少。具有化学保护的可商购的产品为例如MHA的外消旋异丙酯(HMBi)Metasmart 。W000/28835公开了反刍动物中HMBi至少50 %的生物利用率。甲硫氨酸或MHA的化学衍生常具有生物利用率较差和活性物质含量相对较低的缺点。除了在反刍动物中诸如甲硫氨酸、赖氨酸或苏氨酸的补充EAA的瘤胃降解问题， 在鱼和甲壳动物中用EAA补充饲料也可以有各种问题。由于在高度工业化的水产养殖中鱼和甲壳动物饲养的快速经济发展，必需和限制性氨基酸的优化、经济和高效补充方式在这个特定领域已变得越来越重要(Food and Agriculture Organization of the United Nations (FAO) Fisheries Department" State of World Aquaculture 2006" , 2006,Rome. International Food Policy Research Institute (IFPRI) " Fish 2020 :Supply and Demand in Changing Markets"，2003，Washington，D. C.)。然而，与鸡和猪相比，当使用结晶EAA作为饲料添加剂用于某些种类的鱼和甲壳动物时，可能出现各种问题。因此，Rumsey 和Ketola(J. Fish. Res. Bd. Can. 1975，32，422-426)报道了使用大豆粉联合单独补充的结晶氨基酸在虹鳟的情况下不导致生长的任何增加。Murai et al. (Bull. Japan. Soc. Sci. Fish. 1984，50 (11)，1957)能够显示具有高比例的补充的、结晶氨基酸的鱼饲料的日常饲养在鲤鱼中具有超过40 %的游离氨基酸通过腮和肾排泄的结果。由于食物摄入不久之后补充的氨基酸的快速吸收，在鱼的血浆中氨基酸的浓度有非常快速的上升(快速响应)。然而， 在这个时候，来自诸如大豆粉的天然蛋白来源的其他氨基酸尚未在血浆中，这可以导致所有重要氨基酸的同时可用性的不同步。结果部分高度浓缩的氨基酸被快速地排泄或者迅速地在体内代谢并且例如纯粹作为能源利用。因此，在鲤鱼中当用结晶氨基酸作为饲料添加剂时，生长即使有任何增加也是很少的(Aoe et al.，Bull. Japa. Soc. Sci. Fish. 1970，36，407-41 。在甲壳动物的情况下，补充的结晶EAA还可以导致其他问题。因为某些甲壳动物缓慢的摄食行为，例如物种凡纳滨对虾，饲料保持在水下的长时间导致补充的水溶性EAA 的浸出，这引起水的富营养化，而不是动物生长的增加Alam et al.，Aquaculture 2005， M8，13-16)。因此，对于某些物种和应用，在水产养殖中对鱼和甲壳动物的有效供应需要 EAA的特别的产物形式，例如适当化学或物理保护的形式。目的是，首先该产物在水环境中饲养期间应该保持足够稳定并且不从饲料浸出；第二，最终被动物摄入的氨基酸产物应该能够在动物机体中被优化和高效地利用。过去，在发展适合鱼和甲壳动物的饲料添加剂，特别是基于必需氨基酸甲硫氨酸和赖氨酸，付出了很多努力。例如，W08906497描述了使用二肽和三肽作为饲料添加剂用于鱼和甲壳动物。目的是为了促进动物的生长。然而，优选使用来自非必需以及非限制性氨基酸的二肽和三肽，例如甘氨酸、丙氨酸和丝氨酸，其非常充足地存在于许多植物蛋白来源中。作为含有甲硫氨酸的二肽，仅描述了 DL-丙氨酰-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-DL-甘氨酸。然而，这表示该二肽仅有效地含有50%活性物质(mol/mol)，从经济观点这被视为是非常不利的。W002088667描述了来自MHA和诸如甲硫氨酸的氨基酸的寡聚物的对映选择性合成和使用，其作为饲料添加剂用于鱼和甲壳动物等。这应该导致更快的生长。所述寡聚物通过酶催化反应形成并且单个寡聚物的链长度分布很广。因而该方法的实施和纯化是非选择性、昂贵和费力的。在US20030099689中Dabrowski et al.描述了使用合成肽作为饲料添加剂用于促进水生动物的生长。在这种情况下，该肽可以占总饲料配方重量的6-50%。 该合成肽优选由EAA组成。然而，这些合成寡肽和多肽的对映选择性合成是非常费力、昂贵的，并且难以放大。此外，单个氨基酸的多肽的效果是有争议的，因为通常在生理条件下它们仅非常缓慢地转化为游离氨基酸，或者根本不转化。例如，Baker et al. (J. Nutr. 1982， 112,1130-1132)显示，因为在水中完全不溶，聚L-甲硫氨酸在鸡中没有生物利用率，因为其不可以被身体吸收。除了使用EAA的新化学衍生物之外，如含有甲硫氨酸的肽和寡聚物，已研究了各种物理保护方法，例如将EAA包被或包埋在保护基质中。例如，Alam et al. (Aquacult. Nutr. 2004，10,309-316 and Aquaculture 2005，248，13-19)显示包被的甲硫氨酸和赖氨酸与未包被的产物相比，对幼日本对虾(kuruma shrimp)生长具有非常有益的影响。虽然使用特别包被能够防止甲硫氨酸和赖氨酸从饲料颗粒浸出，其具有一些严重的缺点。氨基酸的生产和包被一般是技术复杂和费力的过程，并且因此是昂贵的。此外，成品包被氨基酸的表面包被可以很容易地被饲料加工期间的机械应力和磨损破坏，这可以导致物理保护的减少甚至完全丧失。此外，包被或使用基质物质降低了氨基酸的含量，使其经常变得不经济。本发明要解决的技术问题普遍问题是为动物营养提供基于新的含有甲硫氨酸的取代物的饲料或饲料添加剂，其中甲硫氨酸共价结合至必需和限制性氨基酸，例如L-赖氨酸、L-苏氨酸和L-色氨酸，并且其可以用作饲料添加剂用于饲养有益动物，如鸡、猪、反刍动物，虽然特别还有水产养殖中的鱼和甲壳动物。以现有技术的缺点为背景，问题主要是从DL-甲硫氨酸加上诸如L-赖氨酸、L-苏氨酸和L-色氨酸的EAA的共价结合组合提供化学保护的产物用于各种有益动物，如鸡、猪和反刍动物，还用于生活在咸水或淡水中的许多杂食、食草和食肉物种的鱼和甲壳动物。除了其作为甲硫氨酸来源的功能之外，所述产物还应该作为所有其他EAA的来源发挥功能。 特别地，所述产物应该具有“缓释”机制，并且因此在生理条件下提供游离甲硫氨酸和EAA 的缓慢和持续释放。此外，由甲硫氨酸和EAA组成的该产物的化学保护形式应该是瘤胃抗性的，并且因此应该适合所有反刍动物。为了作为饲料添加剂用于鱼和甲壳动物的应用，该产物的形式应该在水中具有从总饲料颗粒浸出或挤出的低趋势。另一个问题是寻找具有非常高生物利用率的结晶EAA的取代物作为饲料或作为饲料添加剂，其应该在混合饲料加工，特别是制粒和挤压的通常条件下具有良好的操作性能和储存能力和稳定性。这样，例如应该向鸡、猪、反刍动物、鱼和甲壳动物提供结晶EAA和其他必需氨基酸的有效来源，尽可能没有已知产物的缺点或者仅具有减少程度的缺点。此外，应该开发各种新的和灵活的合成路线用于仅含有一个甲硫氨酸残基的二肽，特别是用于L-EAA-DL-甲硫氨酸(I)和DL-甲硫氨酰-L-EAA(II)。来自商业DL-甲硫氨酸生产过程的典型前体和副产物应该用作原材料用于合成路线。发明描述用含有二肽或其盐的饲料添加剂解决了问题，其中所述二肽的一个氨基酸残基为 DL-甲硫氨酰残基，并且所述二肽的另一个氨基酸残基为L-构型的氨基酸，其选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的组。优选所述饲料添加剂含有通式DL-甲硫氨酰-L-EAA ( = D-甲硫氨酰-L-EAA和 L-甲硫氨酰-L-EAA的混合物)和/或L-EAA-DL-甲硫氨酸(=L-EAA-D-甲硫氨酸和 L-EAA-L-甲硫氨酸的混合物)的二肽，其中L-EAA为L-构型的氨基酸，其选自包含赖氨酸、 苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的组。本发明还涉及含有所述饲料添加剂的饲料混合物。含有L-EAA-DL-甲硫氨酸和/或DL-甲硫氨酰-L-EAA及其盐的饲料添加剂适合在饲料混合物中作为饲料添加剂用于家禽、猪、反刍动物，而且特别是用于水产养殖中的鱼和甲壳动物。 优选所述饲料混合物含有0. 01-5wt. %，优选0. 05-0. 5wt. % L-EAA-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-L-EAA。使用L-EAA-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-L-EAA已证实特别有利，因为由于低溶解度，这些二肽具有良好的浸出行为。此外，所述化合物在饲料生产中表现出良好的制粒和挤压稳定性。二肽 L-EAA-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-L-EAA在与通常组分和饲料的混合物中是稳定的，例如谷物(例如玉米、小麦、小黑麦、大麦、小米等)、植物或动物蛋白载体(例如大豆和油菜以及来自它们深加工的产物，豆科植物(例如豌豆、菜豆、羽扇豆等)，鱼粉等)和结合补充的必需氨基酸、蛋白质、肽、碳水化合物、维生素、矿物质、脂肪和油。另一个优点是因为L-EAA-DL-甲硫氨酸和DL-甲硫氨酰-L-EAA每kg物质的高比例活性物质，与DL-甲硫氨酸和L-EAA相比，每摩尔L-EAA-DL-甲硫氨酸或DL-甲硫氨酰-L-EAA节约1摩尔水。
L-EAA-DL-甲硫氨酸(I)具有两个非对映异构体L-EAA-D-Met (LD-I)和 L-EAA-L-Met (LL-I)。相似地，二肽DL-甲硫氨酰-L-EAA (II)具有两个不同的立体异构体 D-Met-L-EAA(DL-II)和 L-Met-L-EAA (LL-II)。仅两个非对映异构体 L-EAA-L-Met (LL-I)和 L-Met-L-EAA (LL-II)是天然的，但是另外两个 L-EAA-D-Met (LD-I)和 D-Met-L-EAA (DL-II) 是非天然的(参见方案1)。在一优选应用中，所述饲料混合物含有蛋白质和碳水化合物，优选基于鱼粉、大豆粉或玉米粉，并且可以补充必需氨基酸、蛋白质、肽、维生素、矿物质、碳水化合物、脂肪和油。特别地，对于DL-甲硫氨酰-L-EAA和L_EAA_DL_甲硫氨酸，优选以单独的D-甲硫氨酰-L-EAA、L-甲硫氨酰-L-EAA、L-EAA-D-甲硫氨酸或L-EAA-L-甲硫氨酸的形式，以彼此的混合物的形式，或者还以与D-甲硫氨酰-D-EAA、L-甲硫氨酰-D-EAA、D-EAA-D-甲硫氨酸或D-EAA-L-甲硫氨酸的混合物的形式存在于饲料混合物中，优选在每种情况下额外地与DL-甲硫氨酸混合，优选与0. 01-90wt. %，优选0. l-50wt. %，特别优选l-30wt. %比例的DL-甲硫氨酸混合，优选在每种情况下额外地与诸如L-赖氨酸的L-EAA混合，优选与 0. 01-90wt. %，优选 0. l-50wt. %，特别优选 l-30wt. % 比例的 L-EAA 混合。在一优选应用中，水产养殖中的动物为淡水和海水鱼和甲壳动物，其选自包含鲤鱼、鳟鱼、鲑鱼、鲶鱼、鲈鱼、比目鱼、鲟、金枪鱼、鳗鱼、鳊鱼、鳕鱼、虾、磷虾和对虾的组， 特另1J 是鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)、锦鲤 (Cyprinus carpio)禾口缠鱼(Aristichthysnobilis)、铜P鱼(Carassius carassius)、厚唇鱼巴 (Catla catla)、露斯塔野鲮(Labeo rohita)、太平洋和大西洋鲑(大西洋鲑(Salmo salar) 禾口银鲑(Oncorhynchus kisutch))、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、美洲It鱼(Ictalurus punctatus) > ^yiflltil (Clarias gariepinus) > IeLIt ( fl| 1 IeLIt (Pangasius bocourti) 禾口 Pangasius hypothalamus)、尼罗罗 __ 鱼(Oreochromis niloticus)、遮巨鱼(Chanos chanos)、军曹鱼(Rachycentron canadum)、南美白对虫下(凡纳滨对虫下(Litopenaeus vannamei))、黑虎虫下(斑节对虫下(Penaeus monodon))禾口罗氏沼虫下(Macrobrachium rosenbergii)。根据本发明，L-EAA-DL-甲硫氨酸(L-EAA-DL-Met) (I)和DL-甲硫氨酰-L-EAA(DL-Met-L-EAA) (II)或其碱和碱土盐，例如微溶的钙盐或锌盐，以D-甲硫氨酰-L-EAA, L-甲硫氨酰-L-EAA、L-EAA-D-甲硫氨酸或L-EAA-L-甲硫氨酸的形式或者在各自的非对映异构混合物中，单独或与DL-甲硫氨酸混合，单独或与L-EAA混合，在饲料混合物中用作添加剂，优选用于家禽、猪、反刍动物，并且特别优选用于鱼和甲壳动物
权利要求
1.含有二肽或其盐的饲料添加剂，其特征在于所述二肽的一个氨基酸残基为DL-甲硫氨酰残基，并且所述二肽的另一个氨基酸残基为选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、 缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的组的L-构型氨基酸。
2.权利要求1的饲料添加剂，其含有通式DL-甲硫氨酰-L-EAA和/或L-EAA-DL-甲硫氨酸的二肽，其特征在于L-EAA为选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的组的L-构型氨基酸。
3.饲料混合物，其含有权利要求1或2的饲料添加剂。
4.权利要求3的饲料混合物，其含有DL-甲硫氨酰-L-EAA和/或L-EAA-DL-甲硫氨酸， 所述DL-甲硫氨酰-L-EAA和/或L-EAA-DL-甲硫氨酸的形式为单独的D-甲硫氨酰-L-EAA、 L-甲硫氨酰-L-EAA、L-EAA-D-甲硫氨酸或L-EAA-L-甲硫氨酸，或者是彼此的混合物，还或者是与D-甲硫氨酰-D-EAA、L-甲硫氨酰-D-EAA、D-EAA-D-甲硫氨酸或D-EAA-L-甲硫氨酸的混合物，优选在每种情况下额外地与DL-甲硫氨酸混合，优选与0. 01-90wt. %, 优选0. l-50wt. %，特别优选l_30wt. %比例的DL-甲硫氨酸混合，优选在每种情况下额外地与诸如L-赖氨酸的L-EAA混合，优选与0. 01-90wt. %，优选0. l-50wt. %，特别优选 l-30wt. %比例的L-EAA混合。
5.通式DL-甲硫氨酰-DL-EAA或DL-EAA-DL-甲硫氨酸的二肽或其盐，其特征在于EAA 为氨基酸，优选为L-构型，其选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的组。
6.产生式DD/LL/DL/LD-I或DD/LL/DL/LD-II的仅含有一个甲硫氨酰残基的二肽的方法
7.权利要求6的方法，其特征在于甲硫氨酸乙内酰脲或选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸的组的氨基酸的乙内酰脲被用作起始产物或形成为中间体。
8.权利要求6或7的方法，其特征在于含有甲硫氨酸乙内酰脲和水的溶液与所述氨基酸在碱性条件下反应，或者含有选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、 异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸的组的氨基酸的乙内酰脲和水的溶液与甲硫氨酸在碱性条件下反应。
9.权利要求6-8中任一项的方法，其特征在于将含有所述脲衍生物的溶液的pH值调整至7-14和/或在30-200°C的温度下进行所述反应和/或在2-100巴的压力下进行所述反应。
10.权利要求6-9中任一项的方法，其特征在于预先以化合物III、IV和V的一种或多种形成含有甲硫氨酸乙内酰脲和水的溶液或者含有选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸的组的氨基酸的乙内酰脲和水的溶液。
11.权利要求6的方法，其包含以下步骤a)式III、IV或V的脲衍生物与所述氨基酸反应至哌嗪二酮VI，式为，
12.权利要求11的方法，其特征在于所述脲衍生物与所述氨基酸反应至所述哌嗪二酮的反应在20°C _200°C的温度和/或在压力下，优选在2-90巴的压力下发生。
13.权利要求11-12中任一项的方法，其特征在于所述脲衍生物与所述氨基酸反应至所述哌嗪二酮在碱存在下发生，所述碱优选选自包含含氮碱、NH4HCO3、(NH4)2CO3^ KHCO3、 K2CO3> NH4OHAD2混合物、氨基甲酸盐、碱和碱土碱的组。
14.权利要求11-13中任一项的方法，其特征在于至所述哌嗪二酮的反应通过脲衍生物与氨基酸反应来发生，其中脲衍生物式为，
15.权利要求11-14中任一项的方法，其特征在于所述哌嗪二酮至式I和II的二肽混合物的反应通过酸水解发生，优选在选自包括无机酸、HCUH2CO3^ C02/H20、、磷酸、羧酸和羟基羧酸的组的酸存在下。
16.权利要求11-14中任一项的方法，其特征在于所述哌嗪二酮至式I和II的二肽混合物的反应通过碱水解发生，优选在PH 7-14下，并且优选利用选自包含含氮碱、NH4HC03、 (NH4)2CO3^ NH4OHAD2混合物、氨基甲酸盐、KHC03、K2CO3、碳酸盐、碱和碱土碱的组的碱进行。
17.权利要求6-16中任一项的方法，其特征在于所述脲衍生物III至V为D-构型、 L-构型或者D-和L-构型的混合物，如果所述脲衍生物来源于甲硫氨酸(ΙΠη至Vn)，优选为D-和L-构型的混合物，或者其特征在于所述脲衍生物III至V为D-构型、L-构型或者D-和L-构型的混合物，如果所述脲衍生物III至V来源于选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、 异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸的组的氨基酸，优选为L-构型。
18.通过从根据权利要求16获得的碱性反应溶液结晶来分离式I和II的二肽的非对映异构混合物的方法，优选其中将所述溶液用酸调整至PH值为2-10，特别优选至ρΗ值为 3-9，尤其特别优选至式I或II各自二肽的相应等电点，并且ρΗ调整优选用选自包含无机酸、HCUH2CO3^ C02/H20、、磷酸、羧酸和羟基羧酸的组的酸进行。
19.通过从根据权利要求15获得的酸性反应溶液结晶来分离式I和II的二肽的非对映异构混合物的方法，优选其中通过加入碱将所述溶液调整至PH值为2-10，特别优选至ρΗ 值为3-9，尤其特别优选至式I或II各自二肽的相应等电点，其特征在于所述碱优选选自包含NH4HC03、(NH4)2CO3、含氮碱、ΝΗ40Η、氨基甲酸盐、KHC03、K2CO3、碳酸盐、碱和碱土碱的组。
20.权利要求6的化合物I和II的用途，其作为饲料添加剂用于有益动物，优选用于家禽、猪、反刍动物、淡水或海水鱼、甲壳动物或宠物。
全文摘要
本发明涉及包含二肽或其盐的饲料添加剂，其中所述二肽的一个氨基酸残基为DL-甲硫氨酰残基，并且所述二肽的另一个氨基酸残基为L-构型的氨基酸，其选自包含赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、组氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、精氨酸、半胱氨酸和胱氨酸的组。本发明还涉及包含所述添加剂的饲料混合物以及产生所述二肽的方法。
文档编号A23K1/165GK102378580SQ201080015021
公开日2012年3月14日 申请日期2010年3月22日 优先权日2009年3月31日
发明者C·科布勒, C·韦克贝克, K·克尔姆, T·豪斯纳尔 申请人:赢创德固赛有限公司