专利名称：一种耐高温褐牙鲆新品种的选育方法
技术领域：
本发明涉及一种耐高温褐牙鲆新品种的选育方法，属农业海水养殖技术领域。
背景技术：
褐牙鲆QParalich thys olivaceus )，也称牙鲆，俗称牙片、偏口、比目鱼，是名贵的 海产鱼类，又是重要的海水增养殖鱼类之一，属鲽形目、鲽亚目、鲆科、牙鲆亚科、牙鲆属。具 有生长快、个体大、繁殖力强、洄游性小的特点，是开展近海网箱和池塘养殖及工厂化养殖 的适宜品种。目前我国北方从20世纪90年代开始进行了大规模人工育苗及工厂化养殖， 取得了显著的经济效益。浙江海域也逐渐形成规模，但由于夏季水温高，只能利用秋季到春 季适宜的水温期间进行阶段性的养殖，养殖周期短，当水温25V以上时，其生长、摄食等生 理、生态行为便会受到影响，水温大于27°C便停止摄食。经浙江沿海池塘养殖试验，夏季高 温期的成活率仅在30%-40%左右。因此，发明一种耐高温褐牙鲆的选育方法，培育出耐高温 的褐牙鲆新品种，有效解决褐牙鲆“度夏”难的问题，将会极大的带动牙鲆养殖产业在我国 南方沿海地区的发展。
发明内容
为克服上述现有技术的不足，本发明目的是提供一种耐高温褐牙鲆新品种的选育 方法。为实现上述发明目的，本发明采用的技术步骤为一、选择个体较大、健康无病的 4-5龄野生驯养褐牙鲆作为后备亲本，采用PIT (Passive Integrated Transponder)电子 标记识别。二、用人工授精的方法，以1雌配1-2雄的原则建立50个牙鲆全同胞家系，其中 包括20个母系半同胞家系。在各家系Fl代染料标记识别前，分家系隔离培育。三、对Fl代 家系染料注射标记加以区别，而后各家系各取50尾在同一池混养，养殖至4月龄。四、以每 天升高0. 2°C的缓慢升温方式对混养池水进行加温，当达到32°C即牙鲆半致死温度时停止 升温，并维持该水温至混养池中牙鲆死亡数量达到50%后，以每天降低1°C的速度，缓慢恢 复至正常水温，统计各家系的死亡率。五、各家系按死亡率从小到大顺序排列，将排名前10 位且死亡率小于50%的家系定义为耐高温家系，死亡率大于50%的家系为不耐高温家系，其 余为较耐高温家系。保留耐高温和较耐高温家系Fl代各100尾，在6-7月份放入池塘度夏 养殖，池塘养殖期水温8-30°C，盐度M%。- %。，投喂饲料为新鲜、冷冻的小杂鱼，养成期为 3年至牙鲆性成熟。六、淘汰在池塘养成期存活率小于5%的家系，最终在各剩余家系Fl代 中分别培育出5-10尾作为亲鱼，进行PIT标记，并且利用家系识别标记追溯上一代耐高温 家系和较耐高温家系亲本，共同作为耐高温育种的优良基础群体。七、通过剩余的Fl代家 系间的杂交以及与上一代亲本的回交再建立褐牙鲆F2代家系50个左右，建立方法参照步 骤二。八、重复步骤三至七，2次以上包括2次，进行家系耐高温筛选试验，最终获得耐高温 牙鲆新品种。
本发明的优点是1、亲本采用电子标记识别，遗传背景清晰，有效避免了选育过程 中近交现象的发生。2、家系建立以1雌配1-2雄的原则，可为褐牙鲆各项遗传参数计算及选 育分析提供极好的实验材料，加快选育进展。3、耐高温选择时期涉及幼鱼期及池塘养成期2 个阶段，充分考虑到褐牙鲆不同生长时期对温度的耐受性，选择的个体更具有耐高温特性。
具体实施例本发明的实施按以下步骤操作
1、选择个体较大、健康无病的4-5龄野生驯养褐牙鲆200尾作为后备亲本，进行PIT电 子标记；标记后强化培养，性腺促熟；
2、选择性腺成熟度好，个体健康的亲鱼，用人工授精的方法，以1雌配1-2雄的原则建 立50个牙鲆全同胞家系，其中包括20个母系半同胞家系，在各家系Fl代染料标记识别前， 分家系隔离培育，养殖环境应保持一致；
3、对全长IOcm左右的各家系鱼苗进行染料标记，通过染料的注射部位及染料颜色的 不同对家系加以区分，从所有家系中各取50尾在同一池中养殖，养殖至4月龄；
4、以每天升高0.2V的缓慢升温方式对混养池进行加温，当达到32°C牙鲆半致死温度 时停止升温，并维持该水温至混养池中牙鲆死亡数量达50%后，以每天降低1°C的速度，缓 慢恢复至正常水温，统计各家系的死亡率；
5、各家系按死亡率从小到大顺序排列，将排名前10位且死亡率小于50%的家系定义为 耐高温家系，死亡率大于50%的家系为不耐高温家系，其余为较耐高温家系。保留耐高温和 较耐高温家系Fl代各100尾，在6-7月份放入池塘度夏养殖，池塘养殖期水温8-30°C，盐度 24%o - %。，投喂饲料为新鲜、冷冻的小杂鱼，养成期为3年至牙鲆性成熟；
6、淘汰在池塘养成期存活率小于5%的家系，最终在各剩余家系Fl代中分别培育出 5-10尾作为亲鱼，进行PIT标记，并且利用家系识别标记追溯上一代耐高温家系和较耐高 温家系亲本，共同作为耐高温育种的优良基础群体；
7、利用各耐高温和较耐高温家系Fl代培育出的亲鱼及上一代保留的亲鱼进行家系杂 交和回交，构建新的耐高温家系50个，建立方法参照步骤2 ；构建时做好亲鱼个体识别和谱 系认定，避免近交；
8、重复步骤3-7，2次以上包括2次，进行家系耐高温筛选，最终获得适合我国南方池塘 养殖“度夏”的褐牙鲆新品种。
权利要求
1. 一种耐高温褐牙鲆新品种的选育方法，其特征在于按下列步骤操作(1)选择个体较大、健康无病的4-5龄野生驯养褐牙鲆作为后备亲本，进行PIT电子标记；(2)用人工授精的方法，以1雌配1-2雄的原则建立褐牙鲆半同胞及全同胞家系；(3)对全长IOcm左右的各家系鱼苗进行染料标记，通过染料的注射部位及染料颜色的 不同对家系加以区分，从所有家系中各取50尾在同一池中养殖，养殖至4月龄；(4)以每天升高0.2°C的缓慢升温方式对混养池进行加温，当达到32°C牙鲆半致死温 度时停止升温，并维持该水温至混养池中牙鲆死亡数量达50%后，以每天降低1°C的速度， 缓慢恢复至正常水温，统计各家系的死亡率；(5)各家系按死亡率从小到大顺序排列，将排名前10位且死亡率小于50%的家系定 义为耐高温家系，死亡率大于50%的家系为不耐高温家系，其余为较耐高温家系；保留耐 高温和较耐高温家系Fl代各100尾，在6-7月份放入池塘度夏养殖，池塘养殖期年水温在 8-30°C，盐度M%。- %。，投喂饲料为新鲜、冷冻的小杂鱼，养成期为3年至牙鲆性成熟；(6)淘汰在池塘养成期存活率小于5%的家系，最终在各剩余家系Fl代中分别培育出 5-10尾作为亲鱼，进行PIT标记，并且利用家系识别标记追溯上一代耐高温家系和较耐高 温家系亲本，共同作为耐高温育种的优良基础群体；(7)利用各耐高温和较耐高温家系Fl代培育出的亲鱼及上一代保留的亲鱼进行家系 杂交和回交，再构建新的F2代耐高温家系50个；(8)重复步骤(3)-(7)，重复2次以上包括2次，最终选育出耐高温褐牙鲆新品种。
全文摘要
本发明涉及一种耐高温褐牙鲆新品种的选育方法，属农业海水养殖技术领域。本发明通过构建谱系清晰的褐牙鲆半同胞及全同胞家系，选择在半致死温度下对褐牙鲆家系的多代选育，充分考虑到选育过程中可能出现的近交和褐牙鲆在幼鱼和成鱼期不同生长阶段对致死温度的耐受性，重复2次以上包括2次筛选，可有效选育出耐高温褐牙鲆新品种，解决褐牙鲆在我国南方部分省份养殖“度夏难”问题。
文档编号A01K61/00GK102144587SQ201110077779
公开日2011年8月10日 申请日期2011年3月30日 优先权日2011年3月30日
发明者史会来, 徐冬冬, 李三磊, 楼宝, 毛国民, 程丽娜, 程国宝, 耿智, 詹炜, 辛俭 申请人:浙江省海洋水产研究所