专利名称：一种脱落酸纳米乳液及其制备方法
技术领域：
本发明属于农药剂型领域，具体涉及一种脱落酸纳米乳液及其制备方法。
背景技术：
脱落酸(Abscisic Acid，缩写为ABA)是植物五大天然生长调节剂之一。脱落酸可以刺激乙烯的产生，催促果实成熟，并抑制脱氧核糖核酸和蛋白质的合成。天然脱落酸(ABA)又名S-诱抗素，是一种具有倍半萜羧酸结构的植物天然生长调节物质，是植物体的“抗逆免疫因子”。国内外大量的研究证明，S-诱抗素能够启动植物本身的抗逆基因，诱导激活植物体内的抗逆免疫系统，提高植物自身对干旱、寒冷、病虫害、盐碱的抗性，是植物体的“抗逆免疫因子”。脱落酸作为一种新型的生物农药，它的使用可减少化学农药的施用量，提高农产品的产量和质量，保护生态资源，维护人类健康。农药纳米包埋技术属于农药微胶囊技术，是当前农药新剂型中技术含量高，且具开发前景的一种新剂型。由于脱落酸水溶液在自然环境中不稳定，易分解，所以在田间使用效果会受到自然因素的影响而降低。如通过纳米化包埋，可避免直接与光、热或空气接触，抑制其挥发、氧化、降低光(热)敏性，从而尽量减少外界环境对它的影响；另外，包埋的微胶囊还有缓释功效，可以延长脱落酸的作用时间，提升和延长其诱抗效果。目前，将脱落酸进行纳米化包埋，制成纳米级乳液的研究未见报道。现有脱落酸乳油均为微米级乳油，相关研究并没有获得药物流失少，环境污染少且能够缓释长效作用的脱落酸试剂。
发明内容
本发明解决的技术问题是现有技术存在脱落酸实际用量的较大，脱落酸的利用率不高，其在环境中过多的流失，造成土壤的污染，本发明提供一种脱落酸的纳米乳液及其制备方法，能减少脱落酸的田间使用浓度，降低脱落酸在环境中的流失量，并有效延长药物的作用时间，可更好的提高作物抗性。本发明采用如下技术方案，解决上述现有技术中存在的问题。本发明脱落酸纳米乳液，其配方包括质量分数为3(Γ75%脱落酸油相、质量分数为O. 5^3. 0%聚乙烯醇水溶液、乳化剂和稳定剂，其中3(Γ75%脱落酸油相与O. 5^3. 0%聚乙烯醇水相的体积比=1:广1:8，乳化剂为3(Γ75%脱落酸油相质量的O.广3%，稳定剂为脱落酸纳米乳液总质量的O. 2^0. 9%。其配方还包括聚乳酸乙醇酸共聚物或聚乙烯吡咯烷酮。聚乳酸乙醇酸共聚物的加入量为3(Γ75%脱落酸油相的6% ;聚乙烯吡咯烷酮的加入量为30 75%脱落酸油相的3%。乳化剂为十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、十六烷基三甲溴化铵、十六烷基溴化吡啶、十二烷基乙氧基磺基甜菜碱、十二烷基磺基甜菜碱、烷基二甲基磺乙基甜菜碱、吐温80或聚氧乙烯蓖麻油中的一种或两种以上组成。
稳定剂为黄原胶。25^70%的脱落酸油相用的溶剂为二氯甲烷及二甲基亚砜。脱落酸的纳米乳液中脱落酸颗粒粒径分布为1(Γ100纳米。本发明脱落酸的纳米乳液的制备方法，采用超声波处理法将脱落酸分散于聚乙烯醇水相中，获得纳米乳液，具体包括以下步骤
(1)将脱落酸溶解于有机溶剂中，配置成脱落酸原液；
(2)向脱落酸原液中加入乳化剂，制成脱落酸油相；
(3)将聚乙烯醇溶解于水中，制成聚乙烯醇水相；
(4)将脱落酸油相加入到聚乙烯醇水相中，采用超声波处理法进行乳化分散，制成脱落酸纳米乳液。与现有技术相比，本发明的有益效果在于
本发明将脱落酸包埋形成微胶囊，可以很好的对脱落酸形成保护并增加其作用时间；通过该方法包埋，包封率可以达到75. 0%到99. 5之间，包埋效果好。将所制备纳米乳液稀释100倍，后滴于200目喷碳铜网上，然后进行透射电子显微镜观察。透射电子显微镜为JEOL产品，型号为JEM-1230。结果表明，所制备的纳米颗粒较小，多介于KTlOOnm间，颗粒呈圆形我实心胶束，较小的颗粒更有利于脱落酸的利用。并且本发明操作简单，制得的脱落酸纳米乳液，可以缓慢释放脱落酸，减少绝对给药量，延长作用时间，并降低其流失到土壤中的量，增加了脱落酸的安全性、高效性和可靠性，是比较优良的新型农药应用体系。
具体实施例方式本发明包埋脱落酸的纳米乳液的制备方法，是以体积比为1:广1:8的脱落酸油相和聚乙烯醇水相为原料。首先，将脱落酸溶解到二氯甲烷(DCM)或二甲基亚砜(DMSO)中，并添加乳化剂(如阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、两性表面活性剂以及非离子型表面活性剂等)制备成脱落酸质量分数为3(Γ75%，乳化剂质量分数为O. Γ3%的脱落酸油相溶液,此为脱落酸油相。同时将聚乙烯醇溶解到水中，制成质量分数为O. 5^3. 0%聚乙烯醇溶液，此为聚乙烯醇水相。然后，将脱落酸油相加入到聚乙烯醇水相中，经超声处理制备成脱落酸的纳米乳液。最后，向纳米乳液中加入稳定剂黄原胶制成稳定的脱落酸纳米乳液。具体步骤如下
(O脱落酸油相配制称取一定量的脱落酸溶于有机溶剂中，制成3(Γ75%的脱落酸溶液，然后添加终浓度O. Γ3%的乳化剂，此为脱落酸的油相。(2)聚乙烯醇水相配制称取一定量的聚乙烯醇，分散于一定体积蒸馏水中，加热到8(Tl00°C使之溶解，然后定容制成终浓度O. 5^3. 0%的聚乙烯醇水相。(3)将脱落酸油相溶液与聚乙烯醇水相按一定比例混合，进行超声处理即可制成纳米乳液。超声波处理方法为功率10 40%、超声处理30s IOmin。(4)向超声后获得的纳米乳液中加入O. 2、. 9%的稳定剂。进一步，本发明所述的脱落酸的有机溶剂为二氯甲烷或二甲基亚砜。在本发明中，主要以DMSO为例进行说明。本发明所述的聚乙稀醇纯度在90. 0%与99%之间，分子量7 35万。
聚乙烯醇的溶解温度为80_100°C。本发明所述乳化剂可为十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、十六烷基三甲溴化铵、十六烷基溴化吡啶、十二烷基乙氧基磺基甜菜碱、十二烷基磺基甜菜碱、烷基二甲基磺乙基甜菜碱、吐温80或聚氧乙烯蓖麻油中的一种或两种以上组成，本发明中以吐温80为例进行说明。本发明纳米乳液制备方法为超声波处理法。向超声处理获得的纳米乳液中加入稳定剂以保持纳米乳液稳定，稳定剂为黄原胶。下面以具体实施例对本发明的技术内容做进一步说明，但本发明的保护范围不限于此
实施例I
所要制备的脱落酸纳米乳液，具体体积比为脱落酸油相/聚乙烯醇水相=1/1，制备过程如下
① 脱落酸油相配制称300克脱落酸溶于二氯甲烷中，定溶到lOOOmL，制成质量分数为30%的脱落酸溶液，然后添加吐温80使其质量分数为2%，加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP)使其质量分数为3%，此为脱落酸油相。② 聚乙烯醇水相配制称取5克聚乙烯醇，分散于SOOmL蒸馏水中，加热到80°C使之溶解，然后定容到IOOOmL,制成质量分数为0. 5%的溶液，此为聚乙烯醇水相。③将脱落酸油相溶液与聚乙烯醇水相按体积比1/1混合，进行超声处理即可制成纳米乳液。超声波处理方法为功率10%、超声处理30s。④向超声后获得的纳米乳液中加入终浓度为0. 3%的黄原胶，即可得到较稳定的脱落酸纳米乳液。实施例2 :所要制备的脱落酸纳米乳液，具体体积比为脱落酸油相/聚乙烯醇水相=1/2，制备过程如下
①脱落酸油相配制称500克脱落酸溶于二氯甲烷中，定溶到lOOOmL，制成50%的脱落酸溶液，然后添加吐温80使其质量分数为2%，此为脱落酸油相。②聚乙烯醇水相配制称取15克聚乙烯醇，分散于SOOmL蒸馏水中，加热到90°C使之溶解，然后定容到IOOOmL,制成质量分数为I. 5%的溶液，此为聚乙烯醇水相。③ 将脱落酸油相溶液与聚乙烯醇水相按体积比1/2混合，进行超声处理即可制成纳米乳液。超声波处理方法为功率25%、超声处理5 min。④ 向超声后获得的纳米乳液中加入黄原胶使其质量分数为0. 4%，即可得到较稳定的脱落酸纳米乳液。实施例3 :所要制备的脱落酸纳米乳液，具体体积比为脱落酸油相/聚乙烯醇水相=1/4，制备过程如下
①脱落酸油相配制称600克脱落酸溶于二甲基亚砜中，定溶到IOOOmL,制成60%的脱落酸溶液，然后添加吐温80使其质量分数为1%、还添加聚乳酸乙醇酸共聚物(50/50，PLGA)使其质量分数为6%，此为脱落酸油相。② 聚乙烯醇水相配制称取20克聚乙烯醇，分散于SOOmL蒸馏水中，加热到90°C使之溶解，然后定容到IOOOmL,制成质量分数为2. 0%的溶液，此为聚乙烯醇水相。
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③ 将脱落酸油相溶液与聚乙烯醇水相按体积比1/4混合，进行超声处理即可制成纳米乳液。超声波处理方法为功率40%、超声处理10 min。④ 向超声后获得的纳米乳液中加入黄原胶使其质量分数为2%，即可得到较稳定的脱落酸纳米乳液。实施例4 :所要制备的脱落酸纳米乳液，具体体积比为脱落酸油相/聚乙烯醇水相=1/4，制备过程如下
⑤脱落酸油相配制称500克脱落酸溶于二氯甲烷中，定溶到lOOOmL，制成50%的脱落酸溶液，然后添加吐温80使其质量分数为2%，此为脱落酸油相。⑥ 聚乙烯醇水相配制称取12克聚乙烯醇，分散于SOOmL蒸馏水中，加热到90°C使之溶解，然后定容到IOOOmL,制成质量分数为I. 2%的溶液，此为聚乙烯醇水相。⑦ 将脱落酸油相溶液与聚乙烯醇水相按体积比1/4混合，进行超声处理即可制成纳米乳液。超声波处理方法为功率40%、超声处理10 min。⑧ 向超声后获得的纳米乳液中加入黄原胶使其质量分数为1%，即可得到较稳定的脱落酸纳米乳液。实施例5
(I)脱落酸(ABA)标准曲线绘制
配置脱落酸(ABA)的浓度梯度溶液，取适宜浓度的溶液，于200nm-800nm间进行波长扫描，确定两种药物的特征吸收峰。在特征吸收峰下，分别测定各梯度浓度溶液的吸光值，以吸光值为横坐标，以药物浓度为纵坐标进行作图，获得标准曲线为y=0. 0125x-0. 0005 (ΑΒΑ浓度单位为g/L)。(2)包封率测定
权利要求
1.一种脱落酸纳米乳液，其特征在于其配方包括质量分数为3(Γ75%脱落酸油相、质量分数为O. 5^3. 0%聚乙烯醇水溶液、乳化剂和稳定剂，其中3(Γ75%脱落酸油相与O. 5^3. 0%聚乙烯醇水相的体积比=1: f 1:8，乳化剂为3(Γ75%脱落酸油相质量的O. Γ3%,稳定剂为脱落酸纳米乳液总质量的O. 2^0. 9%。
2.根据权利要求I所述的脱落酸纳米乳液，其特征在于其配方还包括聚乳酸乙醇酸共聚物或聚乙烯吡咯烷酮。
3.根据权利要求2所述的脱落酸纳米乳液，其特征在于聚乳酸乙醇酸共聚物的加入量为3(Γ75%脱落酸油相的6%，聚乙烯吡咯烷酮的加入量为3(Γ75%脱落酸油相的3%。
4.根据权利要求I所述的脱落酸纳米乳液，其特征在于乳化剂为十二烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、十六烷基三甲溴化铵、十六烷基溴化吡啶、十二烷基乙氧基磺基甜菜碱、十二烷基磺基甜菜碱、烷基二甲基磺乙基甜菜碱、吐温80或聚氧乙烯蓖麻油中的一种或两种以上组成。
5.根据权利要求I所述的脱落酸纳米乳液，其特征在于稳定剂为黄原胶。
6.根据权利要求I所述的脱落酸纳米乳液，其特征在于所述的25 70%的脱落酸油相用的溶剂为二氯甲烷及二甲基亚砜。
7.根据权利要求I所述的脱落酸纳米乳液，其特征在于所述脱落酸的纳米乳液中脱落酸颗粒粒径分布为 (Γιοο纳米。
8.根据权利要求1-7任一项所述的脱落酸的纳米乳液的制备方法，其特征在于采用超声波处理法将脱落酸分散于聚乙烯醇水相中，获得纳米乳液，具体包括以下步骤 (1)将脱落酸溶解于有机溶剂中，配置成脱落酸原液； (2)向脱落酸原液中加入乳化剂，制成脱落酸油相； (3)将聚乙烯醇溶解于水中，制成聚乙烯醇水相； (4)将脱落酸油相加入到聚乙烯醇水相中，采用超声波处理法进行乳化分散，制成脱落酸纳米乳液。
全文摘要
本发明公开了一种脱落酸纳米乳液及其制备方法，其配方为体积比为1:1~1:9的25~70%脱落酸油相、0.6~2.4%聚乙烯醇水相和0.1~1%稳定剂组成，其中脱落酸油相中含有0.1~2%乳化剂。本发明制备操作简单，以超声波处理法实现了水包油纳米乳液体系的建立，所获得脱落酸油滴粒径小、颗粒均匀、包封率高，可有效增强脱落酸的稳定性并有缓释作用，有较高的应用价值。
文档编号A01N25/04GK102919226SQ201210508229
公开日2013年2月13日 申请日期2012年12月3日 优先权日2012年12月3日
发明者陈兴江, 郑少清, 耿召良, 蔡刘体, 陆宁, 曹毅, 商胜华 申请人:贵州省烟草科学研究院