鹧鸪茶种子萌发方法以及用于鹧鸪茶种子萌发的培养基与流程

本发明涉及农业技术领域，具体涉及一种鹧鸪茶种子萌发方法以及一种用于鹧鸪茶种子萌发的培养基。

背景技术：

鹧鸪茶[Mallotusoblongifolius(Miq.)Muell-Arg]也叫山苦茶、毛茶和禾姑茶，系大戟科野桐属植物。鹧鸪茶在海南岛主要分布在文昌、万宁和陵水，也在三亚、乐东、白沙、定安、东方、琼中、保亭和昌江等地有分布，其中以文昌铜鼓岭和万宁东山岭的出产的鹧鸪茶最为有名。此外，在我国广东、云南、广西，以及中印半岛和苏门答腊岛也有野生分布。鹧鸪茶叶圆味甘，是一种奇特的野生茶叶，其叶片等植物体干燥后具有浓郁的零陵香气；冲泡饮用时别具风味、甘冽爽口，被历代文人墨客誉为"灵芝草"。鹧鸪茶是海南具有浓郁地方和民族特色的代茶饮料植物，已成为海南地方茶的一大文化特色。

鹧鸪茶具有显著的保健作用和药用功效，是海南重要的民间中药材，利用历史悠久。鹧鸪茶的提取物中富含茶多糖、茶多酚、没食子酸和多酚类等多种有效成分。现代药理学研究表明，鹧鸪茶中的有效成分具有清除氧自由基、抗动脉粥样硬化、促进胆汁分泌、抑制病菌活性、抗疲劳衰老与镇静止痛等功效。另外，作为重要的中药材，海南民间用鹧鸪茶的根治疗牙痛有良好的效果。

目前，鹧鸪茶资源的开发利用尚停留在利用野生资源的水平上，产业发展所需的鹧鸪茶人工规模种植和配套栽培技术尚处于空白。亦今为止，海南岛内外或国内外尚没有建立鹧鸪茶产品商业化生产的大规模种植基地，几乎所有市场上流通的鹧鸪茶产品均是直接从野生植物上获取。除了个别农户有零星的庭院式种植外，制作鹧鸪茶产品所需的原材料几乎全部依赖掠夺式地从野生植株上获取叶片。受到经济利益的驱使，目前鹧鸪茶野生资源已经逐年减少。由于鹧鸪茶的市场需求量较大，且随着“海南国际旅游岛”的发展，鹧鸪茶原叶的需求量也将会急剧增加。

鹧鸪茶是雌雄异株植物，在自然居群中以雄株多而雌株少为普遍现象。自然授粉条件下，鹧鸪茶的平均结实率(成熟种子/雌花数)不足5％，因此如何利用好鹧鸪茶种子是开展野外居群恢复或野生材料驯化研究中首要解决的问题。然而，鹧鸪茶种子具有短期后熟现象，而此阶段气温高、雨水较多，在自然状态下种子极易腐败；另外，鹧鸪茶种子具有坚硬的外种皮，种子萌发过程中胚根很难突破外种皮，而发芽失败；此外，鹧鸪茶种子萌发初期需要避光环境。由于上述多种不利因素导致鹧鸪茶种子发芽率极低，在自然条件或人工撒播到土壤中，其发芽率均低于5％。

技术实现要素：

本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种鹧鸪茶种子萌发方法，操作简单，发芽率高，填补了鹧鸪茶种子人工萌发的空白。本发明还提供了一种用于鹧鸪茶种子萌发的培养基。

本发明的第一个方面是提供一种鹧鸪茶种子萌发方法，包括以下步骤：

步骤1，选取饱满无损伤的成熟鹧鸪茶种子；

步骤2，将种子洗净后，消毒；

步骤3，破除种子外种皮，清洗除去壳屑；

步骤4，再消毒，清洗；

步骤5，接种到种子培养基中，所述培养基为添加了25-35g/L蔗糖和5-10g/L卡拉胶的MS培养基；

步骤6，避光培养至种子开始萌发，去除避光，继续培养10-20天。

优选地，步骤5中所述培养基为添加了30g/L蔗糖和7g/L卡拉胶的MS培养基。

优选地，步骤2中消毒采用乙醇消毒。

进一步优选地，步骤2中消毒为：将种子在70-80％的乙醇中浸泡3-8分钟。

优选地，步骤4中再消毒采用过氧化氢消毒液。

进一步优选地，步骤4中再消毒为采用25-35％的过氧化氢消毒液消毒5-15分钟。

优选地，步骤6培养温度为22-28℃。

本发明的第一个方面是提供一种用于鹧鸪茶种子萌发的培养基，所述培养基为添加了25-35g/L蔗糖和5-10g/L卡拉胶的MS培养基。

优选地，所述培养基为添加了30g/L蔗糖和7g/L卡拉胶的MS培养基。

本申请发明人为解决现有技术中的不足，反复摸索，成功获得鹧鸪茶种子萌发的有效方法，该方法操作简单，鹧鸪茶的种子发芽率高达95％以上，且培养周期短，填补了鹧鸪茶种子人工萌发的空白。

说明书附图

图1为采用本发明萌发方法的鹧鸪茶种子的发芽过程，其中，1为第5天发芽状态，2为第7天发芽状态，3为第10天发芽状态，4为15天小苗，5为25天小苗；6为35天小苗；

图2为采用水培法的鹧鸪茶种子的变化过程，其中，A为水培第一天的状态，B为水培第5天的状态，C为水培第13天的状态。

具体实施方式

下面结合具体的实施方式对本发明作进一步的说明，以更好地理解本发明。

实施例1

(1)取材：选取饱满无损伤的成熟鹧鸪茶种子；

(2)初消毒：将种子洗净后于75％的乙醇中浸泡5分钟；

(3)破壳：在无菌工作台上破除外种皮；

(4)清洗：用水离子水洗除壳屑；

(5)再消毒：加入30％的过氧化氢消毒液消毒10分钟；

(6)再清洗：用无菌水洗4-5遍；

(7)接种培养基：接种到种子培养基中(MS+30g/L蔗糖+7g/L卡拉胶)；

(8)避光培养：恒温25度培养箱避光培养5天；

(9)正常培养：避光培养至种子开始萌发，去除避光，继续培养。在该过程中对发芽过程进行观察，结果如图1所示，在第5天始种子开始萌发，去除避光后，继续培养，芽长势良好，在第15天时形成小苗，继续培养，小苗存活率高，而且培养至20天左右发芽率达95％以上。

实施例2

(1)取材：选取饱满无损伤的成熟鹧鸪茶种子；

(2)初消毒：将种子洗净后于70％的乙醇中浸泡8分钟；

(3)破壳：在无菌工作台上破除外种皮；

(4)清洗：用水离子水洗除壳屑；

(5)再消毒：加入35％的过氧化氢消毒液消毒5分钟；

(6)再清洗：用无菌水洗4-5遍；

(7)接种培养基：接种到种子培养基中(MS+25g/L蔗糖+10g/L卡拉胶)；

(8)避光培养：22-28℃培养箱避光培养5天；

(9)正常培养：第5天始种子开始萌发，去除避光，培养至20天左右发芽率达95％以上。

实施例3

(1)取材：选取饱满无损伤的成熟鹧鸪茶种子；

(2)初消毒：将种子洗净后于80％的乙醇中浸泡3分钟；

(3)破壳：在无菌工作台上破除外种皮；

(4)清洗：用水离子水洗除壳屑；

(5)再消毒：加入25％的过氧化氢消毒液消毒15分钟；

(6)再清洗：用无菌水洗4-5遍；

(7)接种培养基：接种到种子培养基中(MS+35g/L蔗糖+5g/L卡拉胶)；

(8)避光培养：22-28℃培养箱避光培养5天；

(9)正常培养：第5天始种子开始萌发，去除避光，培养至20天左右发芽率达95％以上。

对比例

选取饱满无损伤的成熟鹧鸪茶种子，分别采用与3个实施例相同的处理方法，区别之处在于，采用水培法和土培法进行培养。在培养第5-7天时，种子均开始霉变，在第13天左右时，种子完全霉变，无法发芽。水培结果如图2所示。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。