一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法与流程

文档序号:12667199阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于具体步骤如下:

a、初代培养材料的剪取:5-6月份,选连续晴天的第3或第4天的早晨,选取苹果砧木1-2年生、健壮的春梢顶芽和顶芽下面的第一侧芽,切取1.2-1.5 cm长的带芽茎段,剪去叶子,放入盛有无菌水的密闭培养瓶内,备用;

b、材料的清洗和杀菌:将带芽茎段在2‰的84消毒液中浸泡5-10分钟后在流水下冲洗2-5 min,放入洗洁精稀释液中清洗5-10 min,后放入脱脂纱布在流水中冲洗下冲洗1.5-2 h,控干水分后装入干净的烧杯,在超净工作台上用酒精浸泡20-22ms后无菌水冲洗2-3次,然后在汞溶液中处理4-5min,处理时不断搅动使药液均匀浸到处理材料表面,处理完成后移到无菌水中冲洗4-5次,然后切0.4-0.5cm带芽茎段,将做好的培养基分装到培养瓶中,每瓶25-30ml,灭菌,每瓶接2个芽,移入培养室培养;

c、培养室温湿度管理:移入培养室的初代培养瓶苗先进行暗培养,用遮光布遮光,温度21-23℃,湿度70%-75%,暗培养5-7天后去掉遮光布,在1500-1800Lx的光照下培养,温度21-23℃,新芽萌发长到0.5-0.8cm时剪取新芽0.4-0.6cm转接,每瓶接2个芽,转接后光照增加到2200-2500Lx,温度21-23℃,20-25天后等新芽基部长出从生芽时进行常规扩繁转接培养。

2.根据权利要求1所述的一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于:所述步骤b中防褐变培养基的配方为:MS+BA0.3mg/L+NAA0.05mg/L+VC80mg/L+白砂糖30g/L+琼脂4.5g/L,pH为5.8。

3.根据权利要求1或2所述的一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于:所述步骤b中灭菌为将做好的培养基放置高压锅中在137-140MPa大气压下灭菌20-25分钟,取出放置2-3天接种。

4.根据权利要求1或2所述的一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于:所述步骤b中每个培养瓶中培养基为每瓶25-30ml。

5.根据权利要求4所述的一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于:所述步骤a中用消过毒的手术刀片切取1.2-1.5 cm长的带芽茎段。

6.根据权利要求5所述的一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于:所述步骤b中洗洁精稀释液为1L水加入2-3ml洗洁精。

7.根据权利要求1或5所述的一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于:所述步骤b中流水的流速均为0.66-0.7米/秒。

8.根据权利要求7所述的一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于:所述步骤b中酒精的质量分数为75%。

9.根据权利要求7所述的一种苹果砧木组培初代培养防褐变的方法,其特征在于:所述步骤b中汞溶液质量分数为0.1%。

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