一种食用菌的培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及食用菌的培养方法，具体涉及一种用含有高锰酸钾的溶液浸泡食用菌后继续培养的方法。
【背景技术】
[0002]食用菌菌种分离培养是十分重要的研宄领域，每年需要的食用菌菌种数以百万吨计。野生菌种的分离、纯化和栽培菌种的保存、三级扩繁、提纯复壮都需要制备母种、原种、栽培种，传统的制备母种的方法都是斜面试管种，200?500元/支，试管口为棉塞、化纤塞、硅胶塞等，很容易污染、松动、脱落，菌种量特别少，再接种时去棉塞、化纤塞、硅胶塞等不方便，很容易再污染，试管太长不方便取、接菌种，并且不能保证菌种的纯度，有无杂菌(如细菌等无色杂菌)肉眼很难判断。
[0003]在传统培养工艺中，一般都添加防霉剂、抗生素等，并且有10%左右因培养失败而报废，菌种的菌株与植物的品种一样是宝贵的资源，分离、纯化、培养、复壮在很多科研课题中是关键性技术，如种子发芽菌、冬虫夏草菌、内生菌、共生菌、肠道有益菌、土壤有益菌、病虫害的致病菌、特殊天然产物菌等，只要能分离、纯化、培养、复壮，进一步的研宄就有了可靠的基础。
[0004]专利文献CN104012576A公开了一种养殖食用菌用的消毒剂，所述消毒剂的组分包括:以体积份计，高锰酸钾溶液2-5mL、过氧乙酸6-12mL、乙醇溶液23_28mL、二氯异氰尿酸钠7-13mL、乙二胺四乙酸钠0.5-1.2mL、去离子水40_50mL，将所述各组分在常温常压下搅拌一定时间，并分装、塑封即得到所述消毒剂。通过上述方式，本发明的养殖食用菌用的消毒剂，可以对细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等多种食用菌菌种制培过程中会出现的杂菌有消除和预防作用；但是，其发明仅为一种消毒剂，而且处方组份复杂，其发明没有公开所述消毒剂在菌种培养过程中是如何使用的，没有具体操作方案及使用效果，对已经生长杂菌的菌种进行局部消毒，不能对菌种本身和培养基消毒，与单用乙醇消毒没有本质的区别，没有处理菌种本身的能力，没有事先预防、处理菌种的意义，没有改变食用菌的培养方式和过程，没有产生积极的影响。该发明中除了高锰酸钾外还含有大量的其它化学物质，对于食用菌菌种而言，防霉剂、抗生素或多种化学物质的添加、使用会影响菌种本身的健康，不利于菌种的生长。
[0005]同时，虽然现有技术报道了高锰酸钾可以用于食用菌培养过程中的消毒，但那是与甲醛溶液反应产生蒸汽用于环境、空气、器皿熏蒸消毒，与本发明有本质的区别。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是克服现有技术的缺陷，提供一种简便、高效培养食用菌的方法。
[0007]具体而言，本发明提供的方法包括以下步骤:在全开放条件下，用含有0.3?0.8%高锰酸钾的溶液浸泡食用菌菌种60?120min，继续培养食用菌菌种；在浸泡过程中，每30min更换一次高锰酸钾溶液，可以避免有机物过多使高锰酸钾溶液失效，从而使消毒尽可能彻底。
[0008]本发明所述食用菌菌种包括球孢虫草菌菌种-子座、茯苓菌菌种、灵芝菌菌种、天麻发芽菌菌种、蜜环菌菌种、香菇菌菌种、平菇菌菌种等；本发明提供的方法对于野外采集的食用菌菌种、受污染的食用菌菌种、长杂菌的食用菌菌种的培养效果尤为显著。
[0009]本发明使用的高锰酸钾溶液为强氧化剂，在各行各业有着十分广泛的用途，杀菌谱广、杀菌力强而短暂，破坏力不强，易受有机物和还原剂的影响，见光、有机物、还原剂分解，因此，高锰酸钾溶液不残留、不持久，浓度适当时对菌种没有伤害，不必用蒸馏水反复冲洗，可以添加进入培养基中，培养过程中可以添加高锰酸钾溶液浸泡消毒，转瓶培养时可以添加高锰酸钾溶液浸泡消毒，有效期约为2小时，2小时以后自动失效。高锰酸钾溶液对细菌、真菌、病毒、病虫害等病原体都有很好的杀灭作用，比多菌灵、代森锰锌好，而且可以作为钾肥、锰肥，环保、安全、方便，用于食用菌菌种分离培养材料表面浸泡消毒非常合适，应用自如，环保、安全、方便、彻底。在本发明中，将高锰酸钾用常水或蒸馏水、纯净水配制成0.3%?0.8%的高锰酸钾溶液，临用时配制，有条件的用蒸馏水、纯净水配制，没有条件或大量使用时用常水配制即可。用于菌种分离培养材料表面浸泡消毒，材料可以不经过清洗，消毒后材料可以不经过漂洗，可以连同高锰酸钾溶液一起加入培养基中。
[0010]当所述食用菌菌种为野外采集的食用菌菌种时，所述方法包括以下步骤:
[0011](I)在固体或半固体培养基中加入0.3?0.8%丙酸钠，加水溶解完全后，分装于组培瓶中，120?125°C下灭菌25?35分钟，放凉后取出，盖紧，冷却至室温后，即得培养基;
[0012](2)从野外采集食用菌菌种，在全开放条件下，在5?10倍于菌种体积的0.5?0.8%高锰酸钾溶液中浸泡60?120min，每30min更换一次含有高锰酸钾的溶液，浸泡结束后不使用清水漂洗；
[0013](3)在全开放条件下，将经步骤(2)处理后的菌种接入步骤(I)所得培养基中，在15?25°C下培养5?7天，即得扩增繁殖的食用菌菌种；所得菌种的污染率低。
[0014]当所述食用菌菌种为在长期储存过程中受污染的食用菌菌种时，所述方法包括以下步骤:
[0015](I)在固体或半固体培养基中加入0.3?0.8%丙酸钠，加水溶解完全后，分装于组培瓶中，120?125°C下灭菌25?35分钟，放凉后取出，盖紧，冷却至室温后，即得培养基;
[0016](2)取受污染的食用菌菌种，在全开放条件下，在5?10倍于菌种体积的0.5?0.8%高锰酸钾溶液中浸泡60?120min，每30min更换一次含有高锰酸钾的溶液，浸泡结束后不使用清水漂洗；
[0017](3)在全开放条件下，将经步骤(2)处理后的菌种接入步骤(I)所得培养基中，在15?25°C下培养5?7天，即得；所得菌种的污染率显著降低，且菌种可以健康生长。
[0018]本发明将培养容器限定为培养瓶。对于本发明提供的技术方案，培养容器要求使用方便，从高温灭菌、通气培养、购买、运输、保存、再接种等各个环节避免杂菌的污染；要将培养材料表面的微生物杀死，对材料本身要无伤害或伤害很轻微，不残留，安全、环保，本发明选择组培瓶培养的效果优于斜面培养，量大，使用方便。
[0019]培养基中加入0.3%?0.8%的丙酸钠。在食品工业领域，丙酸钠用于面包、糕点防霉，安全无毒。在培养基中添加0.3?0.8%丙酸钠，加水加热溶解完全后，与其他半固体、固体培养基一起分装于组培瓶中，120?125°C下灭菌25?35分钟，放凉后取出，盖紧，冷却至室温后，本发明可以采用全开放式接种，也可以于接种箱内无菌接种。
[0020]如果在培养过程中由于意外情况出现长杂菌现象，所述食用菌菌种为培养过程中长杂菌的食用菌菌种，所述方法包括以下步骤:
[0021]取长杂菌的食用菌菌种，在全开放条件下，在培养菌种的容器中加入含有0.3?0.4%高锰酸钾和0.3?0.4%丙酸钠的混合溶液，将菌种和培养基共同浸泡60?120min，每30min更换一次混合溶液，浸泡结束后，倒出混合溶液，继续培养，所得食用菌的含杂菌率显著降低，且菌种可以继续健康地生长。
[0022]本发明所述高锰酸钾和丙酸钠的浓度单位％的含义均为g/100ml。
[0023]本发明提供的方法具有以下显著优点:1、组培瓶代替试管斜面培养，优点很多，从高温灭菌、通气培养、购买、运输、保存、取、接菌种等各个环节避免了杂菌的污染，使用方便；2、培养基加丙酸钠，安全无毒，可以全开放式接种不长杂菌，操作方便；3、菌种不管有无杂菌用高锰酸钾溶液浸泡消毒，野外菌种和长杂菌的菌种用高锰酸钾溶液浸泡消毒，安全无毒，操作方便，材料不必反复清洗，不受消毒时间的限制，高锰酸钾溶液消毒后也不必用蒸馏水反复冲洗，无菌滤纸吸干等复杂的操作步骤，对菌种没有伤害，可以添加进入培养基中，培养过程中