一种土壤烟草黑胫病发病潜力的预测方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植烟土壤发病潜力预测技术领域，具体涉及一种土壤烟草黑胫病发病 潜力的预测方法。
【背景技术】
[0002] 烟草黑腔病是由烟草疫霉flicoiiaflae)引起的土传病害，自然 条件下，以菌丝体、卵孢子及厚垣孢子在土壤中的植株残体上越冬。集约化育苗，基本可 以控制苗期病害，大田则是病害防治的主要场所。目前，从土壤中分离鉴定以及计数烟草 疫霉菌的方法已有较多报道。如叶片诱饵法和土壤稀释平板法(罗文富等土壤中烟草 疫霉的分离与量化测定中国烟草学报，1999, 5 (4): 29-31)、土壤稀释平板法和PCR验 证法(王晗等一种土壤中烟草疫霉菌的快速分离鉴定及计数方法中国农学通报，2012， 28(9) :163-168)、荧光定量PCR技术（中国发明专利申请号CN 201110402300. 9;潘明森 等土壤中黑胫病菌荧光定量PCR快速检测体系的建立及初步应用江西农业大学学报， 2015,37 (4) :712-718)等方法。叶片诱饵法可以检测以游动孢子形式存在的疫霉菌，进行相 对定量；土壤稀释平板法可以获得活菌株，定量土壤中的疫霉菌，加上PCR验证可更有效， 但不能区别疫霉菌存在的形式；荧光定量PCR方法可以快捷地对疫霉菌进行鉴定及计数， 但无法区分死细胞和活细胞，而且技术难度大、成本高，不能在生产第一线推广。生产第一 线使用的仍然是以中国烟草行业标准YC/T 341为主的方法，但该方法时间跨度大，涉及整 个生产季节，而且主要通过历年的发病情况结合气象条件进行预测，不涉及烟草疫霉菌的 数量。因此，很有必要建立一种相对准确、简单易推广、成本低、适用于生产第一线应用的烟 草黑胫病预测方法。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种土壤烟草黑胫病发病潜力的预测方法。
[0004] 本发明的目的是这样实现的：所述土壤烟草黑胫病发病潜力的预测方法，包括 土壤样品的采集与处理、指示烟草的假植培养以及病害调查与发病趋势预测工序，具体包 括： A、 土壤样品的采集与处理：在预备种植烟草的地块，五点取样挖取土壤样品，取样深度 15~20 cm，每点取样I. 0~1. 5 kg，合并、混匀，剔除杂物，辗碎成土壤颗粒，装入筛筐内，将筛 筐置于托盘中，在托盘中注入水，湿润土壤，以土壤潮润、不粘连为宜； B、 指示烟草的假植培养：指示烟草按常规漂浮育苗方式培育至5~6片真叶苗，挑选长 势整齐的烟苗，剪切烟苗根土，移栽至装有土壤样品的筛筐中，假植烟苗的筛筐置于盛水托 盘中，维持土壤湿润，在25~28°C，相对湿度75%以上，12小时光照12小时黑暗交替的人工 气候室中培养； C、 病害调查与发病趋势预测：假植后第2~3天观察发病情况，每6~8天调查1次病情， 不少于5次，烟草黑胫病以株为单位调查，以产生明显病斑至烟苗凋萎记作发病，以无病 斑、烟苗直立、生长正常记作不发病，调查所有烟株，以发病率记录病情，根据田间病害流行 规律预测发病潜力。
[0005] 本发明所述预测方法由于采用易感病品种的成苗作为指示植物，通过剪切伤根， 假植托盘湿润培养，在控温、保湿、光照相对恒定的人工可控环境条件下可有效模拟田间自 然发病，一个月的病害调查结合田间病害流行规律可预测土壤黑胫病的发病潜力，为不同 抗性品种的布局、田间筛查病害病圃、减少发病风险奠定基础。预测过程简单易学，可程序 化，准确可靠，快捷高效，可在烟草种植区域内大范围推广应用。
【具体实施方式】
[0006] 下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制， 基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
[0007] 本发明所述土壤烟草黑胫病发病潜力的预测方法，包括土壤样品的采集与处理、 指示烟草的假植培养以及病害调查与发病趋势预测工序，具体包括： 所述土壤样品的采集与处理工序是指：在预备种植烟草的地块，五点取样挖取土壤样 品，取样深度15~20 cm，每点取样I. 0~1. 5 kg，合并、混勾，剔除杂物，辗碎成土壤颗粒，装入 筛筐内，将筛筐置于托盘中，在托盘中注入水，湿润土壤，以土壤潮润、不粘连为宜； 所述指示烟草的假植培养工序是指：指示烟草按常规漂浮育苗方式培育至5~6片真叶 苗，挑选长势整齐的烟苗，剪切烟苗根土，移栽至装有土壤样品的筛筐中，假植烟苗的筛筐 置于盛水托盘中，维持土壤湿润，在25~28°C，相对湿度75%以上，12小时光照12小时黑暗 交替的人工气候室中培养； 所述病害调查与发病趋势预测工序是指：假植后第2~3天观察发病情况，每6~8天调查 1次病情，不少于5次，烟草黑胫病以株为单位调查，以产生明显病斑至烟苗凋萎记作发病， 以无病斑、烟苗直立、生长正常记作不发病，调查所有烟株，以发病率记录病情，根据田间病 害流行规律预测发病潜力。
[0008] 步骤A所述土壤颗粒的粒径为0· 5~L 0 cm。
[0009] 步骤A所述在托盘中注入水，湿润土壤，托盘中水的深度为筛筐中土壤高度的 1/3~1/2〇
[0010] 步骤A所述湿润土壤的时间为2~3天。
[0011] 步骤B所述指示烟草是指易感病的烟草品种，可以是红花大金元、翠碧1号、 KRK26、白肋21或小黄金1025中的任一种。
[0012] 步骤B所述挑选长势整齐的烟苗，移栽至装有土壤样品的筛筐内中，需剪切 1/4~1/3的烟苗根土。
[0013] 步骤B所述挑选长势整齐的烟苗，移栽至装有土壤样品的筛筐内中，每筐烟苗数 至少24株。
[0014] 步骤B所述假植的烟苗置于盛水托盘中，维持土壤湿润，托盘中水的深度为筛筐 中土壤高度的1/3~1/2。
[0015] 步骤A、B所述的水可以是自来水、纯净水或蒸馏水中的任一种。
[0016] 步骤C所述病害调查与发病趋势预测，是在假植后第3天观察发病情况，每7天调 查1次病情，共5次。
[0017] 步