专利名称：一种灵芝啤酒的制造方法
技术领域：
本发明涉及一种灵芝啤酒的制造方法，尤其是一种低醇灵芝啤酒的制造方法。
背景技术：
众所周知，啤酒是以麦芽、大米(或其他谷物原料)、啤酒花、酵母菌等为原料，以特定的工艺制造而成的含低度酒精的饮料。由于啤酒中含有丰富的人体所需的氨基酸如赖氨酸、丙氨酸、胱氨酸等，含多种维生素和微量元素如钙、磷、铁、锌等，且口感好，营养成分又易被人体吸收，同时还具有消暑解渴、利尿解毒之功效，因而深受广大消费者所喜爱。传统的啤酒工艺正在随着人类的生活水平的日益改善和不断提高而发生着改变，各种保健啤酒相继出现，其中以功能性保健啤酒尤为受宠。基于灵芝中含多糖体、有机锗、氨基酸等多种营养成分和药用成分，具有降血压、降血脂、延缓衰老、预防及治疗呼吸、消化系统等多种疾病的功能，尤其适合在炎热的夏天饮用。又基于灵芝子实体通常不能直接食用，因为其不但味苦，为一般人所不能接受，而且由于粗纤维等的干扰会影响有效成分的吸收利用。
中国发明专利授权公告号CN1053695C，公布了“一种灵芝啤酒的的制造方法”，它是将一定比例的麦芽汁、灵芝液与啤酒花混合，然后接种酵母菌发酵而成。从工艺来看，该方法是将灵芝液作为一种原料加入的，因此，灵芝的营养成分不能有效地发挥，因为灵芝液的主要成分为糖类、氨基酸和灵芝酸等，当接入酵母菌进行发酵时，在此发酵过程中酵母菌会在一定程度上吸收、利用或者破坏灵芝的有效成分，使最终所得的啤酒成品中灵芝的营养成分大打折扣；再者，对使用灵芝液来说，不论是自制还是购入，制备灵芝液的工艺较为繁琐。例如，要想尽可能地浸出购入的灵芝中的营养成分，则必须具备良好的提纯设备和辅以高效的提纯工艺，然而，这样会大大增加工业化的成本；由于这种灵芝液通常是采用灵芝的子实体制得的，因此不仅会使所得的啤酒具有辛苦味，以致口感较差；而且该工艺由于灵芝耗用量大，市售的灵芝价格又昂贵，因此不宜大批量生产。另外，该专利所公开的的制造方法工艺周期长，其前发酵降温并保持一定压力后，需停止发酵并保持2个月后才能进入成品处理，即，将灵芝啤酒发酵液与啤酒冻干粉按比例均匀混合调和，再过滤除去酵母，这必将对工业化大生产造成制约因素。
中国发明专利授权号CN1084382C，公开了“一种灵芝啤酒及其制造方法”，它是以麦芽、大米、灵芝、水、酒花、酵母为原料，其中灵芝与麦芽的比例为1∶50～70，灵芝经选料、粉碎，用温水浸泡后煮沸。麦芽、谷物粉碎后加入灵芝及煮出液，加水糖化，得到麦芽汁、麦芽渣，经过滤后的滤液煮沸加入酒花，待分离后的麦芽汁冷却后加酵母进行发酵即得灵芝啤酒。该方法也是将灵芝子实体经粉碎、温水浸泡后煮沸成灵芝液，灵芝中的有效成分不能充分溢出到灵芝液中，从而存在着对灵芝原料利用率低而造成浪费，所得的灵芝啤酒价值不高、保健作用的发挥欠佳的缺陷。
发明内容
本发明的目的是要提供一种灵芝啤酒的制造方法，该方法步骤简单、节省灵芝原料、成本低廉、所制得的灵芝啤酒无辛苦味、口感好且富含灵芝营养成分而具营养价值及保健功能。
本发明的目的是这样来达到的，一种灵芝啤酒的制造方法，其由以下步骤组成(1)将灵芝孢子悬液与啤酒酵母菌悬液按体积比为2∶1的比例混合，然后氮芥诱变5～15分钟，再用紫外线进行诱变5～10分钟，得到灵芝真菌与酵母真菌互生菌株；(2)将所得到的互生菌株接种到麦芽汁液体培养基中，制成灵芝酵母菌混合种子液；(3)将灵芝酵母菌混合种子液接种至由麦芽汁、啤酒花为基本原料并添加少量谷物而制成的发酵培养基中进行发酵，接种量为15％(W/V)，发酵分为三个阶段，该三个阶段的时间分别为24～36h、36～48h、48～72h，该三个阶段的温度分别控制为8～15℃、15～20℃、7～12℃，发酵结束即得发酵液；(4)对发酵液进行离心或过滤分离，离心所得的上清液或过滤所得的滤液经消毒灭菌、冷却后即得灵芝啤酒。
本发明所述的灵芝孢子悬液浓度为2×107～5×107个/ml，而所述的啤酒酵母菌悬液浓度为1×107～1×108个/ml。
本发明方法所述的紫外线诱变是用紫外灯垂直照射，照射距离为25cm。
本发明方法所述的离心分离的转速为2500～3500n/min，时间为5～15分钟。
本发明方法所述的过滤液是指使用滤纸过滤或先用纱布过滤后再用滤纸过滤中的任意一种所滤取的滤液。
本发明方法所述的滤纸过滤为单层纤维素定性滤纸过滤。
本发明方法所述的纱布为8～12层医用无菌纱布。
本发明方法所述的消毒灭菌为巴氏消毒灭菌。
本发明方法的优点先用灵芝孢子悬液与啤酒酵母菌悬液经处理后所得到的互生菌株接种到麦芽汁液体培养基中制得灵芝酵母菌混合种子液，再将其接种到由麦芽、啤酒花为基本原料，并添加有少量谷物而制成的发酵培养基中进行发酵，使得制造步骤简便。由于无需象现有的技术那样以繁琐的工艺制取灵芝液并且造成对灵芝有效成分的破坏、浪费，因此有助于节省灵芝原料；由于摒弃了已有技术中的以灵芝浸出液为原料直接与麦芽汁、啤酒花相混合的做法，因此能使灵芝孢子中的营养成分充分释放，并且所得的灵芝啤酒无辛苦味、口感好、色泽优，营养价值极高。
附图为本发明的工艺流程图具体实施方式
实施例1(1)将由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)提供的灵芝菌(菌种编号为5.0533)制作成灵芝孢子悬液10ml(孢子浓度为2×107～5×107个/ml)与啤酒厂(如中国江苏常熟沙家浜啤酒有限公司)提供的啤酒酵母菌制作的啤酒酵母菌悬液5ml(酵母菌悬液浓度为1×107～1×108个/ml)混合，然后用诸如由天津科技出版社出版的编者为杜连祥等编著的《工业微生物实验技术》一书所介绍的氮芥诱变处理方法对混合液处理5分钟，处理过程如以该书所教导的，配制活化剂和解毒剂称取碳酸氢钠68mg，加入蒸馏水10ml，即为活化剂；称取碳酸氢钠136mg，甘氨酸120mg，溶解在200ml的蒸馏水中，即为解毒剂。再将一只小瓶和橡皮塞灭菌、烘干、称取10mg的氮芥盐酸盐放入瓶中，再加入灭菌蒸馏水2ml，使之成为每毫升含有5mg的氮芥盐酸盐溶液。然后，吸取上述的灵芝孢子与酵母混合菌悬液1ml于另一灭过菌的小瓶中，加入0.9％的生理盐水0.6ml，再加入0.4ml上述的氮芥盐酸盐溶液，将橡皮塞盖紧，摇匀。最后，加入氮芥盐酸盐溶液30秒后开始计时间，达到所需要的时间即5分钟后，用1ml注射器吸取0.1ml处理液加到9.9ml的解毒剂中，使氮芥作用停止，此时，氮芥诱变处理完毕。接着用15w紫外线灯对混合菌悬液进行垂直照射诱变10分钟，紫外线灯离混合菌悬液的距离为25cm，最后筛选出稳定的灵芝真菌与啤酒酵母真菌的互生菌株。所谓的稳定菌株是指菌种传代次数达10次，还能保持其遗传特征的稳定性；(2)将筛选出的互生菌株接种到麦芽汁液体培养基中，制得灵芝酵母菌混合种子液；
(3)将混合种子液接种至由麦芽汁、啤酒花为基本原料并添加少量谷物而制成的发酵培养基中进行发酵，接种量为15％(W/V)，发酵分为三个阶段，该三个阶段的时间分别掌握为36h、48h、72h，发酵温度分别控制为8℃、15℃、7℃，发酵结束即得发酵液；(4)用离心机将上述发酵液离心，离心机转速控制为3500n/min，时间为5分钟，然后用无菌的且行业中常用的单层纤维素定性滤纸过滤，或者先用8～12层医用无菌纱布过滤，再用单层滤纸过滤，最后对滤液用巴氏消毒灭菌法进行消毒、灭菌，冷却即得灵芝啤酒成品。该成品颜色呈轻度青色，色泽均匀一致，具有本品固有的灵芝清香清醇，无苦涩味，风味独特，营养价值及保健功效好。
实施例2仅将步骤(1)的氮芥诱变处理时间改为10分钟、紫外线诱变时间改为5分钟和将步骤(3)的发酵的三个阶段时间改为30h、42h、60h，三个发酵阶段的温度控制改为12℃、18℃、9℃以及将步骤(4)的离心转速改为3000n/min，离心时间改为10分钟，其余同实施例1。
实施例3仅将步骤(1)的氮芥处理时间改为7分钟、紫外线诱变时间改为8分钟和将步骤(3)的发酵的三个阶段时间改为24h、36h、48h，三个发酵阶段的温度控制改为15℃、20℃、12℃以及将步骤(4)的离心转速改为2500n/min，离心时间改为15分钟，其余同实施例1。
权利要求
1.一种灵芝啤酒的制造方法，其特征在于它由以下步骤组成(1)将灵芝孢子悬液与啤酒酵母菌悬液按体积比为2∶1的比例混合，然后氮芥诱变5～15分钟，再用紫外线进行诱变5～10分钟，得到灵芝真菌与酵母真菌互生菌株；(2)将所得到的互生菌株接种到麦芽汁液体培养基中，制成灵芝酵母菌混合种子液；(3)将灵芝酵母菌混合种子液接种至由麦芽汁、啤酒花为基本原料并添加少量谷物而制成的发酵培养基中进行发酵，接种量为15％(W/V)，发酵分为三个阶段，该三个阶段的时间分别为24～36h、36～48h、48～72h，该三个阶段的温度分别控制为8～15℃、15～20℃、7～12℃，发酵结束即得发酵液；(4)对发酵液进行离心或过滤分离，离心所得的上清液或过滤所得的滤液经消毒灭菌、冷却后即得灵芝啤酒。
2.根据权利要求1所述的灵芝啤酒的制造方法，其特征在于所述的灵芝孢子悬液浓度为2×107～5×107个/ml，而所述的啤酒酵母菌悬液浓度为1×107～1×108个/ml。
3.根据权利要求1所述的灵芝啤酒的制造方法，其特征在于所述的紫外线诱变是用紫外灯垂直照射，照射距离为25cm。
4.根据权利要求1所述的灵芝啤酒的制造方法，其特征在于所述的离心分离的转速为2500～3500n/min，时间为5～15分钟。
5.根据权利要求1所述的灵芝啤酒的制造方法，其特征在于所述的过滤液是指使用滤纸过滤或先用纱布过滤后再用滤纸过滤中的任意一种所滤取的滤液。
6.根据权利要求5所述的灵芝啤酒的制造方法，其特征在于所述的滤纸过滤为单层纤维素定性滤纸过滤。
7.根据权利要求5所述的灵芝啤酒的制造方法，其特征在于所述的纱布为8～12层医用无菌纱布。
8.根据权利要求1所述的灵芝啤酒的制造方法，其特征在于所述的消毒灭菌为巴氏消毒灭菌。
全文摘要
一种灵芝啤酒的制造方法，(1)将灵芝孢子悬液与啤酒酵母菌悬液混合，然后氮芥诱变，再用紫外线进行诱变，得到灵芝真菌与酵母真菌互生菌株；(2)将所得到的互生菌株接种到麦芽汁液体培养基中，制成灵芝酵母菌混合种子液；(3)将灵芝酵母菌混合种子液接种至由麦芽汁、啤酒花为基本原料并添加少量谷物而制成的发酵培养基中进行发酵，发酵结束即得发酵液；(4)对发酵液进行离心或过滤分离，离心所得的上清液或过滤所得的滤液经消毒灭菌、冷却后即得灵芝啤酒。优点步骤简单、节省灵芝原料、成本低廉、所制得的灵芝啤酒无辛苦味、口感好且富含灵芝营养成分。
文档编号C12C5/00GK1687353SQ20051003898
公开日2005年10月26日 申请日期2005年4月18日 优先权日2005年4月18日
发明者梁剑光, 徐正军, 陈义勇, 葛长江, 陈静, 郁达, 苏永春, 吴金男, 任露, 王彦凌 申请人:常熟理工学院