专利名称：细菌总数测试液及其测试瓶的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种细菌的测试方法及其测试器具，特别是涉及一种水质、食品、药品、化妆品等物质中细菌总数的测试液及其测试瓶。
背景技术：
细菌总数是指水质、食品和药品等经过处理，在一定条件下培养后，所得1g或1ml检样中所含细菌菌落的总数。细菌总数主要作为判别水质、食品等被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在食品中繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。
细菌总数并不表示样品中实际存在的所有细菌的总数，细菌总数并不能区分其中细菌的种类，所以有时被称为杂菌数，需氧菌数等。
目前，水质、食品等样品中细菌总数的测试方法大多数采用传统的平皿计数法，平皿计数法中涉及到的主要仪器设备为高压蒸汽灭菌器、干热灭菌箱、生化培养箱、天平、显微放大镜或菌落计数器、pH计或精密pH试纸、灭菌试管、平皿、刻度吸管和采样瓶等。
平皿计数法的主要操作步骤为第一步采集水样即以无菌操作方法用灭菌吸管吸取一定量的水样；第二步纯水的制备；第三步器皿洗涤灭菌即将平皿、锥形瓶、烧杯、移液管等放入高压蒸汽灭菌器内，灭菌一定时间；第四步培养基的配制；第五步接种水样；第六步培养；第七步菌落计数(根据形态或颜色以仪器方式进行)；第八步计算。
传统的平皿计数法对实验室环境以及操作人员的技术要求都极为严格，包括从采样技术、实验室条件、仪器设备、器皿试剂质量、操作人员的专业知识、操作技能、实际经验直至质量控制等全部监测过程及控制程序。并且操作程序繁琐、复杂、冗长，任何一个环节的不慎都有可能造成测试结果的误差。例如，细菌通常为团块聚集体，如果操作过程中没有将细菌团块聚集体充分分散，则计数为负误差；细菌生长时出现的沉淀物、颗粒、气泡等有时很难与细菌菌落区别，则计数为正误差。
发明内容
本发明的目的克服现有技术中细菌总数测试方法中的不足，提供一种快速、简便、具有较长储存期的简易细菌总数测试液及其测试瓶。
本发明的技术方案本发明提供一种细菌总数测试液，该测试液称为液体显色培养基，以重量含量为单位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸馏水970～988‰和微量显色指示剂组成。
所述的细菌总数测试液中氯化物为氯化钠或氯化钾，显色指示剂为酚红或中性红。
一种细菌总数测试瓶，该测试瓶为带胶塞和铝皮盖的无菌、无色透明玻璃瓶，测试瓶中装有细菌总数测试液，测试液在瓶中的高度H1和留空高度H2之比为H1∶H2＝1∶0.3～0.8。
所述的细菌总数测试瓶中的测试液，以重量含量为单位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸馏水970～988‰和微量显色指示剂组成。
本发明的测试瓶可以选用5～15毫升西林瓶或口服液瓶。
使用本发明细菌总数测试液及其测试瓶测定水质中细菌的操作方法为用无菌注射器将水质样品吸取1.0(或0.5)毫升，注入到测试瓶中，摇匀后放置于37℃干燥箱或水浴锅中24小时，根据瓶中液体颜色的变化来判断阴性或阳性反应(瓶中液体颜色本身为红色，不变色为阴性，变为黄色为阳性)，此为定性分析；按此方法做2组或3组平行样，按逐级稀释法查MPN表，即可进行定量测试。食品等其它固体样品则须用水溶解或浸提，处理成液体后再按上述方法进行测定。
本发明的积极有益效果1.本发明的测试液即液体显色培养基密封贮存于玻璃瓶中，有较长贮存期，省去平皿计数法中第二、三、四的操作步骤，可以缩短1/2以上的检测时间，大大减轻了劳动强度。
2.本发明的测试方法免除了平皿计数法中必须的无菌条件，使得生化检验可以在一般环境下进行，从而可以节省大量的基础建设投资。
3.细菌代谢产物与测试液即液体显色培养基发生变色反应，以此作为阳性反应的判断依据，更加直观，从而免去平皿计数法第七步的操作步骤；同时无需使用显微镜、测试仪等仪器，使得非专业人员也可以掌握此生化检验技术。
4.细菌与测试液即液体显色培养基中试剂的特征显色反应是在无菌的细菌测试瓶中自动进行，可避免传统方法多步骤操作过程中的污染和干扰，大大减少了操作步骤；减少了操作过程中容易引起的误差，从而在很大程度上提高了检测结果的准确可靠性。
5.本发明对活性细菌总数既能进行定性测试也能进行定量测试，最低检出限符合国家水质标准要求。
6.本发明可应用于各种水质中细菌总数的简易快速测试，非专业人员数分钟即可学会操作。
7.本发明将细菌检测技术产品化、商品化，将预先配置好的测定液封装于透明玻璃瓶中，可直接用于细菌的测定，携带、使用方便，测定简单快速、准确，保存时间长。可用于水质、食品、药品、化妆品等多种物质的细菌定性、定量检测。
四
图1细菌总数测试瓶的结构示意图五具体实施例方式下面的实施例仅为了进一步说明本发明，而不是限制本发明的范围。
实施例一细菌总数测试液配方为蛋白胨5‰，氯化钠10‰，牛肉浸膏5‰，葡萄糖5‰，蒸馏水975‰，加入微量酚红显色指示剂。
将上述测试液配好后调节PH值为6.8-7.0，按每瓶4.5毫升封装于无菌、无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
细菌总数测试瓶实施方法参见图1，1为铝皮盖，2为胶塞，3为等截面玻璃瓶，4为细菌总数测试液；H1为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度H1为3厘米，留空高度H2为1.5厘米。
实施例二细菌总数测试液配方为蛋白胨15‰，氯化钠3‰，牛肉浸膏1‰，葡萄糖3‰，蒸馏水978‰，加入微量中性红显色指示剂。
将上述测试液配好后调节PH值为6.8-7.0，按每瓶4.5毫升封装于无菌、无色透明小玻璃瓶中，高压灭菌15分钟即可。
细菌总数测试瓶实施方法参见图1，1为铝皮盖，2为胶塞，3为等截面玻璃瓶，4为细菌总数测试液；H1为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度H1为2厘米，留空高度H2为1.0厘米。
实施例三细菌总数测试液配方为蛋白胨10‰，氯化钾7‰，牛肉浸膏3‰，葡萄糖2‰，蒸馏水978‰，加入微量酚红显色指示剂。
将上述测试液配好后调节PH值为6.8-7.0，按每瓶9.0毫升封装于无菌、无色透明小玻璃瓶中，高压灭菌15分钟即可。
细菌总数测试瓶实施方法参见图1，1为铝皮盖，2为胶塞，3为等截面玻璃瓶，4为细菌总数测试液；H1为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中测试瓶为9.0毫升，测试液的高度H1为3.5厘米，留空高度H2为2.8厘米。
实施例四细菌总数测试液配方为蛋白胨5‰，氯化钠3‰，牛肉浸膏2‰，葡萄糖2‰，蒸馏水988‰，加入微量中性红显色指示剂。
将上述测试液配好后调节PH值为6.8-7.0，按每瓶9.0毫升封装于无菌、无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
细菌总数测试瓶实施方法参见图1，1为铝皮盖，2为胶塞，3为等截面玻璃瓶，4为细菌总数测试液；H1为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中测试瓶为9.0毫升，测试液的高度H1为4.5厘米，留空高度H2为2.7厘米。
实施例五细菌总数测试液配方为蛋白胨7‰，氯化钾5‰，牛肉浸膏4‰，葡萄糖4‰，蒸馏水980‰，加入微量酚红显色指示剂。
将上述测试液配好后调节PH值为6.8-7.0，按每瓶4.5毫升封装于无菌、无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
细菌总数测试瓶实施方法参见图1，1为铝皮盖，2为胶塞，3为等截面玻璃瓶，4为细菌总数测试液；H1为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度H1为5.0厘米，留空高度H2为2.0厘米。
实施例六细菌总数测试液配方为蛋白胨12‰，氯化钠3‰，牛肉浸膏2‰，葡萄糖3‰，蒸馏水980‰，加入微量酚红显色指示剂。
将上述测试液配好后调节PH值为6.8-7.0，按每瓶4.5毫升封装于无菌、无色透明小玻璃瓶中，经高压灭菌即可。
细菌总数测试瓶实施方法参见图1，1为铝皮盖，2为胶塞，3为等截面玻璃瓶，4为细菌总数测试液；H1为测试液的高度，H2为留空高度，本实施例中测试瓶为4.5毫升，测试液的高度H1为4厘米，留空高度H2为1.2厘米。
权利要求
1.一种细菌总数测试液，该测试液称为液体显色培养基，其特征是以重量含量为单位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸馏水970～988‰和微量显色指示剂组成。
2.根据权利要求1所述的细菌总数测试液，其特征是所述氯化物为氯化钠或氯化钾，显色指示剂为酚红或中性红。
3.一种细菌总数测试瓶，该测试瓶为带胶塞和铝皮盖的无菌、无色透明玻璃瓶，其特征是测试瓶中装有细菌总数测试液，测试液在瓶中的高度H1和留空高度H2之比为H1∶H2＝1∶0.3～0.8。
4.根据权利要求3所述的细菌总数测试瓶，其特征是所述的测试液，以重量含量为单位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸馏水970～988‰和微量显色指示剂组成。
全文摘要
本发明涉及一种细菌总数测试液及其测试瓶。细菌总数测试液以重量含量为单位，由蛋白胨5～15‰，氯化物3～10‰，牛肉浸膏1～5‰，葡萄糖2～5‰，蒸馏水970～988‰和微量显色指示剂组成。细菌总数测试瓶为带胶塞和铝皮盖的无菌、无色透明玻璃瓶，测试瓶中装有细菌总数测试液，测试液在瓶中的高度H
文档编号C12Q1/06GK101029332SQ20061012831
公开日2007年9月5日 申请日期2006年11月30日 优先权日2006年11月30日
发明者李树华, 刘五一, 王济昌, 白莉, 崔纪周 申请人:白莉