一种抗氧化能力遗传风险评估的基因检测方法

专利名称：：一种抗氧化能力遗传风险评估的基因检测方法
技术领域：
：本发明涉及一种抗氧化能力遗传风险评估的基因检测方法，用于评估个体抗氧化能力的强弱，针对性地提示受检者面对各种可能导致氧化损伤的外界因素时应采取的恰当应对措施，属于分子生物学
技术领域：
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背景技术：
：人体内存在着一个非常重要的平衡系统氧化一还原系统，这一系统调节着体内氧自由基的产生和代谢，维持着体内适当的氧化能力和氧自由基的清除能力，从而保障了生命活动的进行。氧化作用为人体提供生命活动所需要的能量，而随之产生的"副产品"_氧自由基的过多积累却会在分子水平上损伤机体的正常机能，体内氧化一还原系统功能的失衡会导致人体一系列的疾病，氧化一还原系统失衡、过多氧自由基的积累会引起一系列的心脑血管、神经系统、消化系统等疾病以及过早的衰老，因此抗氧化能力在人的生命活动中十分重要。无论是氧自由基还是活性氧均来自氧分子，氧分子进行单电子还原反应生成氧自由基或活性氧，在生物体内氧自由基或活性氧主要通过自然氧化、酶氧化、线粒体、毒物作用等途径产生，正常情况下自由基的形成量极少，寿命也短，故不会构成对机体的危害，即使有所增多，由于机体具有自由基的清除系统，因此也不会造成严重的损害，氧自由基和活性氧的清除主要通过两大系统1、低分子清除剂均为一些低分子化合物，具有抗氧化作用，又称低分子抗氧化剂，这些物质包括维生素E、A、C、还原型谷胱甘肽(GSH)、N0等等；2、酶性清除剂大致有超氧化物歧化酶(S0D)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶等几种。正常机体内不时地产生着自由基和活性氧，正常情况下起着代谢储能、转化排泄、防御杀菌和抗肿瘤作用；过多的自由基对机体造成很明显的损害作用1、将不饱和脂肪酸转变成过氧化脂质，导致生物膜的流动性下降和变形能力下降，脆性增加，膜受体、离子通道等功能均受影响；膜的通透性升高，细胞内外离子分布异常；2、自由基会引起蛋白质的非正常交联、聚合和肽链的断裂，也可以使蛋白质与脂质结合生成聚合物，丧失蛋白功能；也可能修饰酶上氨基酸，使酶活性异常；3、与碱基加成反应，引起基因突变、DNA断裂；还能引起染色体畸变；4、使得细胞外基质的胶原蛋白发生交联，降解透明质酸，引起基质疏松和弹性下降，衰老时的皱纹与此有关。氧自由基在体内如果不能及时清除，会参与多种疾病的发生，自1954年Haraian提出衰老自由基理论以来，越来越多实验从分子水平说明自由基引起衰老生理变化，研究表明自由基与70多种疾病致病有关，自由基会参与肿瘤、早衰和皮肤病、冠心病、糖尿病、白内障、辐射病、消化道溃疡、乙肝及肝硬化、肾脏疾病等，同时，吸烟危害健康，其相当一部分危害亦是由自由基造成，自由基对细胞和组织的损伤是其致病的基础。抗氧化易感遗传风险缺陷可造成自由基在体内的过量蓄积，而过量的自由基会严重危害人体的健康，例如1.自由基摧毁细胞膜，导致细胞膜发生变性，使细胞不能从外部吸收营养，也排泄不出细胞内的代谢废物，并走失了对细菌和病毒的抵御能力；2.自由基攻击正在复制中的基因，造成基因突变诱发癌症发生；3.自由基激活人体的免疫系统，使人体表现出过敏反应，或出现如红斑狼疮等的自体免疫疾病；4.自由基侵蚀机体组织，可激发人体释放各种炎症因子，导致出各种非菌性炎症；5.自由基侵蚀脑细胞，使人得早老性痴呆的疾病；6.自由基氧化血液中的脂蛋白造成胆固醇向血管壁的沉积，引起心脏病和中风；7.自由基引起关节膜及关节滑液的降解，从而导致关节炎；8.自由基侵蚀眼睛晶状体组织引起白内障；9.自由基侵蚀胰脏细胞引起糖尿病。不同的人在相同的环境下抗氧化能力是不同的，因此遗传体质不同的人有着不同水平的抗氧化能力，面对着不同的抗氧化能力缺陷风险，应对风险需要采取不同的策略，因此，综合利用现代科学研究成果，开发一项基于分子遗传基础的抗氧化易感遗传风险检测及个性化干预提示产品会对由于抗氧化能力缺陷而引起疾病的发生起到预警、个性化防治的提示作用，具有很强的社会意义和市场前景。
发明内容本发明的目的是提供一种抗氧化能力遗传风险评估的方法，可以让受检者了解自身基因抗氧化能力的强弱，加强对可能发生基因损伤的环境的辨别能力，采取适当措施防止或降低基因损伤的程度，从而有效减少由于基因损伤带来的疾病风险。为实现以上目的，本发明的技术方案是提供一种DNA损伤修复能力遗传风险评估的方法，其特征在于，其方法为步骤l.检测的样品类型与采样方法用采样拭在20-30个被测者口腔中分别左右两腮至少需要各上下刮40次以上，以保证采集到足量的细胞样本；步骤2.基因组DNA的抽提方法采用硅胶吸附法抽提每一个口腔上皮细胞样本的基因组DNA，时间为2小时一2.5小时，共抽提20—30个被测者样本，经电泳检测后，用肉眼可见清晰白色条带即可判断获得的DNA能进入下一步检测；步骤3:荧光定量PCR反应将每一个被测者样本分别放入5个反应孔，同时检测5个位点，即过氧化氢酶(CAT)SEQIDN01:rs769214、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDN02:rs4673、内皮型一氧化氮合成酶(N0S3)SEQIDN03、胞外过氧化物岐化酶(S0D3)SEQIDN04:rsl799895、对氧磷酯酶1(P0N1)SEQIDN05:rs662;20—30个被测者样本就有100-150个反应孔，另外根据实验需要增设不含DNA模版的NTC空白对照孔，每一个反应孔的基因分型根据下表的引物和探针设计，采用TaqMan"MGB技术，进行检测试剂合成；在每一个反应孔中加入试剂为荧光定量PCR反应体系，总体积为10W，即浓度为20ng/pl的DNA模板、1^110X荧光定量PCR反应缓冲液ABITaqmanMGB、0.25raMdNTP合成DNA的四种脱氧核苷酸底物、0.25mMMgCl2溶液、0.02h4(5units/W)TaqDNA聚合酶、去离子水5.43W、5个位点分别采用不同的正向引物(20,，0.225W)、反向引物(20,，0.225W)、VIC荧光探针(IO幽，0.和FAM荧光探针(IO幽，0.工具进行检测，详见下表；<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>将反应板放在ABI9700型PCR扩增仪上进行反应，先进行预热50°C、2分钟，95°C、IO分钟，然后再进行60个循环的95。C、30秒，60°C、1分钟、反应结束后取出后再放入ABI7900型荧光定量PCR仪上读取样品荧光量，并自动将20—30个被测者样本检测5个点位的数据对号入座到5个图中，同时生成5张图，即过氧化氢酶(CAT)SEQIDN01:rs769214图、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDN02:rs4673图、内皮型一氧化氮合成酶(N0S3)SEQIDN03:rsl799983图、胞外过氧化物岐化酶(S0D3)SEQIDN04:rsl799895图、对氧磷酯酶1(P0N1)SEQIDN05:rs662图；步骤4:SNP基因型分析将ABI7900型荧光定量PCR仪上显示的最终样本荧光信号的5个表和一个NTC空白对照进行比较，每个位点理论上存在三种不同的信号，纯VIC荧光信号、VIC和FAM杂合荧光信号以及纯FAM荧光信号，分别代表该位点三种不同的基因型；1、过氧化氢酶(CAT)SEQIDN01:rs769214在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.4-0.5Y:0.3-0.4)区域为空白对照、坐标轴(X:0.3-0.4Y:1.0-1.3)区域为M基因型、坐标轴(X:0.7-0.9Y:0.7-1.1)区域为AG基因型、坐标轴(X:0.7-0.8Y:0.3-0.4)区域为GG基因型，其中，AG、M为风险基因型，携带风险基因型时过氧化氢酶表达减少，机体抗氧化能力下降；2、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDN02:rs4673在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.4-0.5Y:0.3-0.4)区域为空白对照、坐标轴(X:0.3-0.4Y:1.0-1.3)区域为CC基因型、坐标轴(X:0.7-0.9Y:0.7-1.1)区域为TC基因型、坐标轴(X:0.7-0.8Y:0.3-0.4)区域为TT基因型，其中，CT、CC为风险基因型，携带风险基因型时还原型辅酶叶绿醇结合能力降低，机体抗氧化能力下降。3、内皮型一氧化氮合成酶(N0S3)SEQID跳rsl799983在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.2-0.4Y:0.5-0.7)区域为空白对照、坐标轴(X:0.2-0.5Y:3.7-4.2)区域为GG基因型、坐标轴(X:1.7-1.9Y:3.5-3.7)区域为GT基因型、坐标轴(X:1.7-1.9Y:0.5-0.7)区域为TT基因型(该基因型在中国人群中频率很低，图330个样本中未检出该基因型)，其中，GT、TT为风险基因型，携带风险基因型时内皮型一氧化氮合成酶活性降低，降低了机体有益自由基生成。4、胞外过氧化物岐化酶(S0D3)SEQIDN04:rsl799895在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.0-0.1Y:0.1-0.3)区域为空白对照、坐标轴(X:0.0-0.1Y:1.1-1.3)区域为CC基因型、坐标轴(X:0.2-0.3Y:0.9-1.2)区域为CG基因型、坐标轴(X:0.35-0.45Y:0.4-0.6)区域为GG基因型，其中，GG、CG为风险基因型，携带风险基因型时过氧化物岐化酶在体内的分布发生变化，罹患心脑血管疾病风险上升。5、对氧磷酯酶l(P0N1)SEQIDN05:rs662在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.0-0.1Y:0.1-0.3)区域为空白对照、坐标轴(X:0.0-0.1Y:1.4-1.6)区域为AA基因型(该基因型在中国人群中频率很低，上图30个样本中未检出该基因型)、坐标轴(X:0.7-0.9Y:1.4-1.6)区域为AG基因型、坐标轴(X:0.7-1.2Y:0.3-0.5)区域为GG基因型，其中，GG、AG为风险基因型，携带风险基因型时对氧磷酯酶1活性降低，加重了机体自由基损伤。每一个被测者的5个点落在5个表上哪个区域，即可知道被测者DNA损伤修复能力的遗传风险；本发明通过同时检测过氧化氢酶(catalase，CAT)的单核苷酸多态性(SNP)位点、还原型辅酶叶绿醇(cytochromeb_245，alphapolyp印tide，CYBA)的单核苷酸多态性位点、内皮型一氧化氮合成酶(nitricoxidesynthase3,N0S3)的单核苷酸多态性位点、胞外过氧化物岐化酶(Superoxidedismutase,extracellular,S0D3)的单核苷酸多态性位点、与对氧磷酯酶1(paraoxonase1，P0N1)的单核苷酸多态性位点来评估个体对抗氧化能力的遗传风险，并根据遗传风险评估结果进行个性化健康指导，针对性地提示受检者面对各种可能导致基因损伤的外界因素时应采取的恰当应对措施。目前，经证实并且机理研究清楚的与抗氧化能力密切相关的基因有过氧化氢酶(CAT)、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)、内皮型一氧化氮合成酶(N0S3)、胞外过氧化物歧化酶S0D3、对氧磷酯酶l(P0N1)。在不同人群中与抗氧化有显著相关性的基因位点包括CATA844G、CYBAC242T、N0S3G894T、S0D3C1354G和P0N1glnl92arg。以上位点有国内外大量的关联分析数据支持。一、过氧化氢酶(CAT)CAT全称catalase，即过氧化氢酶，编码此酶的基因位于llp13，全长33130bp，包含13个外显子，mRNA长2294bp，编码528个氨基酸。过氧化氢酶是人体内一种天然的、很重要的抗氧化酶，在ROS的清除过程中作为SOD(超氧化物岐化酶)的下游抗氧化蛋白，通过催化超氧阴离子自由基的自身氧化还原反应，有效清除自由基，维持体内自由基和氧化还原状态的动态平衡，以避免损伤机体的组织细胞。随着对许多疾病的研究深入，研究者发现体内的氧化还原状态与常见的一些疾病关系发生有着越来越紧密的联系，如高血压、动脉粥样硬化、亨廷顿氏综合症(Hungtington's)、阿尔茨海默病(Alzhemeimer)等。由于其抗氧化的特性，过氧化氢酶基因目前已成为心血管疾病研究的候选基。rs769214是位于过氧化氢酶基因启动子区域上的一个A/G多态，即A-844G多态，在世界人群中该多态的分布为G:A=0.40:0.60。有研究表明，此位点的多态性可导致下游过氧化氢酶的表达水平的不同，从而影响与原发性高血压的发病有关的脂质过氧化等生理生化反应。邢之华等人的研究发现，高血压病患者血清CAT、S0D、GSH-PX活性水平随着血压升高而显著降低，且与病情进展有关，患者血清CAT、S0D、GSH-PX活性明显低于正常组，且随分级提高而进一步明显下降。综合前人MuzykantovVR的发现，应用外源性S0D和过氧化氢酶，可以保护内皮细胞功能，促使NO释放，松弛血管平滑肌，作者认为由于长期高血压的影响，CAT、S0D、GSH-PX活性下降，体内脂质过氧化作用增强，进而损伤细胞和组织，使血压进一步升高，各组织、器官病变逐步加重，进而加速Em级向2级的转化，直至发展到3级。因此，对EH患者除积极控制血压外，可适当补充外源性CAT、S0D、GSH-PX或其他氧自由基清除剂，加强体内抗氧化损害能力，减少脂质过氧化作用。这对稳定和改善EH患者的病情是有益的。金力等人通过分别将含有-844A和-844G的的CAT基因启动子的片断克隆到pGL3载体中，转染293细胞，再进行荧光素酶检测，最后发现此多态性位点为G时的荧光素酶表达水平比为A时要高，而且具有显著性差异。关于这种由A和G造成的转录调控水平的差异，作者猜测可能是由于两种启动子结合了两种不同的转录因子，或对同一种转录因子的亲和力不同。A等位基因含有MZF1和AP2的结合位点，AP2调节表皮和神经特异基因的表达，而MZF1参与造血过程的调节；G等位基因含有Ikaros-2和LYK-l的结合位点，Ikaros-2是淋巴细胞发育的主要调节因子。此项研究表明此多态性位点的存在会影响下游过氧化氢酶的表达。关联分析也为功能研究提供了一系列的统计证据。二、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)CYBA为NAD(P)H氧化酶编码基因，是血管平滑肌细胞和内皮细胞氧自由基最重要的来源。由氧自由基诱发的氧化应激反应，参与了高血压、动脉粥样硬化、心肌梗死等心血管病的发生发展。现有的研究发现，CYBA基因上第242位核苷酸的C点突变为T，使氨基酸序列第72位组氨酸被酪氨酸取代，与NADPH氧化酶功能降低密切相关，而NAD(P)H氧化酶在冠心病等心脑血管疾病发生发展中起着重要的作用。关联性研究表明，该位点多态现象与动脉硬化、冠心病等疾病有显著相关性。CYBA编译的酶是中胚层来源的多种细胞膜上的一组酶类。它不仅存在于巨噬细胞、神经细胞，而且还存在于心血管系统的内皮细胞、平滑肌细胞和血管外膜成纤维细胞。NAD(P)H氧化酶系统是一个多个亚单位组成的酶的复合体，包括P22phox、P47phox、P67phox、Rac和gp91phox或其他Nox家族。而在戶jf有的NAD(P)H氧化酶中P22phox亚单位是决定酶活性的关键部分。NADP在NAD(P)H氧化酶作用下形成NAD(P)H，并通过P22phox将电子传递给氧，形成超氧阴离子或其衍生物，此过程是血管壁上活性氧的主要来源途径。细胞色素CYBA(P22phox)作为NAD(P)H氧化酶的一个亚单位，在传递电子及产生超氧阴离子方面起着重要作用，P22phoxC242T基因多态性可能与冠心病等心脑血管疾病发生有关。rs4673是位于第16号染色体上CYBA基因上的一个C/T多态，引起基因编码蛋白的第72个氨基酸由His变为Tyr。在世界人群频率C:0.72T:0.28;亚洲人群中C:0.93T:0.07。CYBA基因第242位核苷酸的C点突变为T，使氨基酸序列第72位组氨酸被酪氨酸取代，组氨酸是血红蛋白的结合位点，C—T突变与NAD(P)H氧化酶功能降低密切相关，而NAD(P)H氧化酶在冠心病等心脑血管疾病发生发展中起着重要的作用。1998年，InoueN等人的研究发现，P22phox基因第242位核苷酸的C点突变为T，使氨基酸序列第72位组氨酸被酪氨酸取代，组氨酸是血红蛋白的结合位点，与NAD(P)H氧化酶功能密切相关。2002年，CHANNOKM等人的研究发现，NAD(P)H氧化酶是中胚层来源的多种细胞膜上的一组酶类。它不仅存在于巨噬细胞、神经细胞，而且还存在于心血管系统的内皮细胞、平滑肌细胞和血管外膜成纤维细胞。NAD(P)H氧化酶系统是一个多个亚单位组成的酶的复合体，包括P22phox、P47phox、P67phox、Rac和gp91phox或其他Nox家族。而在所有的NAD(P)H氧化酶中P22phox亚单位是决定酶活性的关键部分。1988年，BellaviteP等人的研究发现，NADP在NAD(P)H氧化酶作用下形成NAD(P)H，并通过P22phox将电子传递给氧，形成超氧阴离子或其衍生物，此过程是血管壁上活性氧的主要来源途径。此外一系列的功能研究和关联统计结果证实这些结论。三、内皮型一氧化氮合成酶(N0S3)N0S3艮卩nitricoxidesynthase3(endothelialcell),常用名eN0S，中文名称内皮一氧化氮合成酶。eN0S主要分布于冠状血管及心腔面的内膜，主要功能是参与精氨酸和脯氨酸代谢，并催化生成N0，一氧化氮是一种内皮松弛因子，具有舒张血管、调节血流、抑制血管平滑肌细胞增殖、抑制血小板和白细胞粘附等重要功能，参与了多种疾病的病理生理过程。在该基因第7外显子上，894位碱基G突变成T(G894T，rsl799983)，相应蛋白产物第298位上的谷氨酸则被替换成天冬氨酸(Glu298Asp)，这个位点的突变导致eN0S功能受损，N0产生减少，血管紧张性增高而引起高血压。2004年，vanOnna等人发现了在动脉动脉粥样硬化患者中，eNOS基因298Asp多态要明显高于对照组(0R=1.44，95%CI=1.00-2.09)。动脉粥样硬化与高血压经常是相伴发生的；而且催化的动脉血管，更是诱发高血压的原因。2005年，Zhu等人在美国人群中，证实了eN0S基因的298Asp多态，可以影响到高血压发生的性别偏向和发病年龄，以及高血压发病风险的增加。Pereira等人于2006年的最新发表的研究显示，eNOS基因的298Asp多态在高血压患者中的分布，依据血压高低有区别。在血压值高于正常血压的50%的病人中，298Asp多态表现除了显著的相关性。同时，他们还指出，298Asp多态会严重影响到病人的血脂含量。最后，他们得到结论是，298Asp多态会影响到血脂的量，并调节血压。贾崇奇等对中国人群研究了内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)基因第7外显子G894T(Glu298Asp)变异与超重交互作用对早发冠心病的影响。发现eNOS基因G894T变异与超重在早发冠心病的患病中存在明显的正相加模型交互作用，使早发冠心病患病危险性增加近3倍；G894T变异与超重同时存在时，早发冠心病患病危险性中约27%是由于两者交互作用所导致，齐霁等又分析了这一突变与吸烟的关系。四、胞外过氧化物岐化酶(SOD3)S0D3(Superoxidedismutase，extracellular)基因为胞外过氧化物岐化酶编码基因。S0D3是SOD同工酶的一种，与其他S0D同工酶一样，可以消除体内代谢产生的反应氧族，抵御内外环境中超氧离子的损伤，作为唯一可在胞外表达的S0D，其在脉管系统抵御氧自由基所造成损伤方面起到重要作用，与冠心病、动脉粥样硬化、高血压等心脑血管疾病密切相关。S0D3以Cu2+、Zn"为辅基，属于CuZn-SOD，分布于血液、淋巴、滑膜液及组织中。rsl799895是位于第四号染色体上S0D3基因第3个外显子处的一个G/C多态，引起S0D3基因编码的蛋白第231个氨基酸由Arg变为Gly，目前研究表明该氨基酸位于构成S0D3肝磷脂结合功能域的阳性氨基酸残基的C末端群的中心位置。变异C没有影响到S0D3的酶活力，但使其对于肝磷脂的结合能力下降，使得S0D3从组织间隙释放入脉管的速度大为增加。这样最终导致了S0D3在血浆中的浓度上升了10-30倍。相应的，S0D3在血液中的活性大为提高，而同时伴随着组织内活性的下降。在世界人群中的该多态的频率分布，G占O.05，C占O.95左右。SandstromJ等人在1994年发现S0D3第213位的Arg被Gly替代后，S0D3与肝磷脂表面结合的能力大为下降，使得其在组织内及血管中的浓度及活性分布发生显著改变。DemchenkoIT等在2002年以S0D3高表达和低表达的转基因小鼠，研究氧诱导的脑血管收縮，发现S0D3存在与否对N0的舒张血管作用的发挥起到非常重要的作用。证明了S0D3通过清除超氧离子，保证了NO能够发挥舒张血管的作用。五、对氧磷酯酶l(P0N1)P0N1全称paraoxonase1(I型二乙基对氧磷酸酯酶)位于第七号染色体7q21.3位置。P0Nl基因全长26.9kb，mRNA全长2393bp，含9个外显子，8个内含子，编码含356个氨基酸的蛋白质。人血清对氧磷酶主要由肝脏分泌，在哺乳动物体内还广泛分布于血液，肾脏，脾脏及脑组织等。它是一种广谱非专一酯酶，可以水解有机磷酸酯、芳香族碳酸酯和氨基甲酸酯等，在有机磷神经毒剂解毒中起重要作用。其主要功能为(1)保护LDL免受氧化修饰，降低氧化型LDL(ox-LDL)水平。ox-LDL被认为是致动脉粥样硬化的关键作用物，PON与HDL上的血小板活化因子-乙酰水解酶(PAF-AH)协同发挥抑制氧化修饰的作用，防止氧化产物在LDL的堆积，破坏和减少LDL在氧化过程中产生的具有细胞毒作用的溶血磷脂，PON可能以酶作用的方式抑制LDL的氧化，使磷脂类降解产物水解或再酰基化，从而降低ox-LDL的毒性。值得一提的是，研究显示PON保护LDL免受氧化的作用与其芳香酯酶活性无关。另外P0N可将脂质过氧化物水解为无活性的乙醇和羧酸，从而抑制醛类活性物质的生成；(2)防止HDL免受氧化修饰。HDL氧化修饰后磷酯、胆固醇酯和apoA-I发生改变，使HDL丧失原有的抗动脉粥样硬化作用，促进AS的发生；(3)抑制T2DM患者DNA的氧化修饰，防止内皮细胞的损伤。P0N1基因多态性与脑卒中、动脉粥样硬化、冠心病及2型糖尿病发病等有密切关系。rs662是位于第7号染色体上P0Nl基因第632位的一个A/G多态，引起基因编码蛋白的第192个氨基酸由Gln变为Arg。血清对氧磷酶的多态分布已被证实，在德国、英国、丹麦、加拿大、美国和中国人中都有发现。血清对氧磷酶至少在2个位点具有多态性192位的谷氨酸(Glu)/精氨酸(Arg)多态和55位的蛋氨酸(Met)/亮氨酸(Leu)多态性。第192位点的多态性使酶出现2种对对氧磷酶水解活力不同的同型异构体，A型192位点为精氨酸，活力低；B型192位点为谷氨酸，具有高活力。第55位点的多态性使酶出现M型(蛋氨酸)和L型(亮氨酸)，此变化影响血清中对氧磷酶的含量，但未发现其影响酶的活力。ItoT等人在对214例冠状动脉痉挛病人和212例对照人群的研究中发现，P0Nl的Q192R多态位点上的R单倍型在病例组中的分布明显高于对照组(65y。vs53%;p=0.0005)。多因素logistic回归分析表明P0Nl的192R单倍型是动脉痉挛的独立危险因子(p^.0016，OR=2.52)。王旭东等使用T叫man特异性等位基因鉴别法检测93例冠心病患者和138例健康对照者的基因组DNA，测定该基因Q192R多态性的基因型和等位基因组成的单体型。统计分析两组间基因型和单体型频率分布差异性，以及不同基因型与血脂水平的相关性。结果证明患者中Q192R位点的QQ基因型携带者明显少于健康对照者(7.5%:18.1%,p<0.05)。Osei-HyiamanD等应用SSCP技术对华中地区432例11型糖尿病患者(其中201例经冠状动脉造影确诊为冠心病)进行P0N1基因192位多态性测定，发现B等位基因频率在合并冠心病患者及单纯II型糖尿病患者中分别为21.5%和12.0%，B等位基因与II型糖尿病合并冠心病显著相关(OR值1.97，95%CI=1.362.86)，为中国II型糖尿病合并冠心病的独立危险因素。本发明所需检测的DNA可以利用口腔粘膜上皮细胞进行抽提获得。采用口腔粘膜上皮细胞采样方法和器材进行样本采集。样本的DNA抽提利用硅胶吸附法进行口腔上皮细胞的DNA抽提并进行DNA浓度和纯度的测定。本发明5个位点的基因分型可以采用TaqMan^MGB技术对这些位点进行基因分型。经重复实验验证，基因分型的准确率达到了99%以上，重复性达到了100%。除此之外，基因测序技术等技术也可以作为备选的基因分型手段。本发明的优点是-1.在疾病发生之前，从遗传角度提示受检者与自由基相关的疾病发生风险，提高受检者的自我保健意识，积极采用合理的干预手段，达到降低疾病发生可能的目的。2.从分子机理角度分析疾病的致病因素以及发病机理，加深对疾病的认识，并可促进相应诊疗措施的制定，提高治疗效果。图1为过氧化氢酶(CAT)SEQIDN01:rs769214示意图；图2为还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDN02:rs4673示意图；图3为内皮型一氧化氮合成酶(N0S3)SEQIDN03:rsl799983示意图；图4为胞外过氧化物岐化酶(S0D3)SEQIDN04:rsl799895示意图;图5为对氧磷酯酶1(P0N1)SEQIDN05:rs662示意图。具体实施例方式以下结合附图和实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种DNA损伤修复能力遗传风险评估的方法为步骤l.检测的样品类型与采样方法用采样拭在26个被测者口腔中分别左右两腮至少需要各上下刮45次，以保证采集到足量的细胞样本；步骤2.基因组副A的抽提方法采用硅胶吸附法抽提每一个口腔上皮细胞样本的基因组DNA，时间为2小时，共抽提26个被测者样本，并用肉眼可见清晰白色条带即可判断获得的DNA能进入下一步检测；步骤3:荧光定量PCR反应将每一个被测者样本分别放入5个反应孔，同时检测5个位点，即过氧化氢酶(CAT)SEQIDN01:rs769214、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDN02:rs4673、内皮型一氧化氮合成酶(N0S3)SEQIDN03:rsl799983、胞外过氧化物岐化酶(S0D3)SEQID跳rsl799895、对氧磷酯酶1(P0N1)SEQIDN05:rs662;26个被测者样本就有130个反应孔，另外根据实验需要增设不含DNA模版的NTC空白对照孔；在每一个反应孔中加入试剂为荧光定量PCR反应体系，总体积为10W，即浓度为20ng/W的DNA模板、1W10X荧光定量PCR反应缓冲液ABITaqmanMGB、0.25mMdNTP合成DNA的四种脱氧核苷酸底物、0.25raMMgCl2溶液、0.(5units/W)TaqDNA聚合酶、20MM的有义引物1和2各0.225^1、20幽的反义引物1和2各0.225W、10MM的荧光探针1和2各0.25W，去离子水5.43W;采用5个位点的正向引物、反向引物、VIC荧光探针和FAM荧光探针工具进行检测；本发明5个位点的基因分型可以根据下表的引物和探针设计，采用TaqMan-MGB技术，进行检测试剂合成。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>将反应板放在ABI9700型PCR扩增仪上进行反应，先进行预热50°C、2分钟，95°C、IO分钟，然后再进行60个循环的95'C、30秒，60°C、1分钟检测，经重复实验验证，基因分型的准确率达到了99%以上，重复性达到了100%。反应结束后取出后再放入ABI7900型荧光定量PCR仪上读取样品荧光量，并自动将26个被测者样本检测5个点位的数据对号入座到5个图中，同时生成5张图，如图l为过氧化氢酶(CAT)SEQIDN01:rs769214图、图2为还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDN02:rs4673图、图3为内皮型一氧化氮合成酶(N0S3)SEQIDN03:rsl799983图、图4为胞外过氧化物岐化酶(S0D3)SEQIDN04-rsl799895图、图5为对氧磷酯酶1(P0N1)SEQIDN05:rs662采用仪器为ABIPrism7900型荧光定量PCR仪，检出率可达99%以上，可重复性达到100%。每小时可进行10000个SNP多态性终点检测分析，可满足从中通量到高通量的SNP多态性实验的需求。步骤4:SNP基因型分析将ABI7900型荧光定量PCR仪上显示的最终样本荧光信号的5个表和一个NTC空白对照进行比较，每个位点理论上存在三种不同的信号，纯VIC荧光信号、VIC和FAM杂合荧光信号以及纯FAM荧光信号，分别代表该位点三种不同的基因型；1、过氧化氢酶(CAT)SEQIDN01:rs769214在检测结果图1中，共有27个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.4-0.5Y:0.3-0.4)区域为空白对照、坐标轴(X:0.3-0.4Y:1.0-1.3)区域为AA基因型，有12个被测者样本在这个区域，坐标轴(X:0.7-0.9Y:0.7-1.1)区域为AG基因型，有9个被测者样本在这个区域，坐标轴(X:0.7-0.8Y:0.3-0.4)区域为GG基因型，有4个被测者样本在这个区域，其中，AG、AA为风险基因型，携带风险基因型时过氧化氢酶表达减少，机体抗氧化能力下降；2、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDN02:rs4673在检测结果图2中，共有27个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.4-0.5Y:0.3-0.4)区域为空白对照、坐标轴(X:0.3-0.4Y:1.0-1.3)区域为CC基因型，有12个被测者样本在这个区域，坐标轴(X:0.7-0.9Y:0.7-1.1)区域为TC基因型，有9个被测者样本在这个区域，坐标轴(X:0.7-0.8Y:0.3-0.4)区域为TT基因型，有4个被测者样本在这个区域，其中，CT、CC为风险基因型，携带风险基因型时还原型辅酶叶绿醇结合能力降低，机体抗氧化能力下降。3、内皮型一氧化氮合成酶(NOS3)SEQIDN03:rsl799983在检测结果图3中，共有27个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.2-0.4Y:0.5-0.7)区域为空白对照、坐标轴(X:0.2-0.5Y:3、7-4.2)区域为GG基因型，有26个被测者样本在这个区域，坐标轴(X:1.7-1.9Y:3.5-3.7)区域为GT基因型、坐标轴(X:1.7-1.9Y:0.5-0.7)区域为TT基因型，GT基因型和TT基因型在中国人群中频率很低，图326个样本中未检出该基因型，，其中，GT、TT为风险基因型，携带风险基因型时内皮型一氧化氮合成酶活性降低，降低了机体有益自由基生成。4、胞外过氧化物岐化酶(S0D3)SEQIDN04:rsl799895在检测结果图4中，共有27个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.0-0.1Y:0.1-0.3)区域为空白对照、坐标轴(X:0.0-0.1Y:1.1-1.3)区域为CC基因型、有5个被测者样本在这个区域，坐标轴(X:0.2-0.3Y:0.9-1.2)区域为CG基因型，有15个被测者样本在这个区域，坐标轴(X:0.35-0.45Y:0.4-0.6)区域为GG基因型，有6个被测者样本在这个区域，其中，GG、CG为风险基因型，携带风险基因型时过氧化物岐化酶在体内的分布发生变化，罹患心脑血管疾病风险上升。5、对氧磷酯酶l(P0N1)SEQIDN05:rs662在检测结果图5中，共有27个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X:0.0-0.1Y:0.1-0.3)区域为空白对照、坐标轴(X:0.0-0.1Y:1.4-1.6)区域为AA基因型，坐标轴(X:0.7-0.9Y:1.4-1.6)区域为AG基因型，AA基因型和AG基因型在中国人群中频率很低，26个样本中未检出该基因型，坐标轴(X:0.7-1.2Y:0.3-0.5)区域为GG基因型，有26个被测者样本在这个区域，其中，GG、AG为风险基因型，携带风险基因型时对氧磷酯酶1活性降低，加重了机体自由基损伤。每一个被测者的5个点落在5个表上哪个区域，即可知道被测者抗氧化能力的遗传风险；步骤5，根据检测结果给予个性化指导建议，主要有以下几点一、减少自由基的生成来降低体内抗氧化系统的负担-I防止紫外线照射和电离辐射，在户外作业时采取防护措施；II避免接触农药、食品添加剂等，洗菜时清洗干净，避免食用富含食品添加剂的食物III戒烟并避免二手烟的危害；IV避免炒菜时的油烟；V保持心情平和，少生气或情绪激动等等。二、通过补充抗氧化剂来增加其抗氧化易感遗传风险(1)可多吃富含维生素A、C、E的食物，维生素C大量存在于生食的蔬菜以及水果中，尤其是柑橘类水果，但要注意加热过程会迅速破坏这种维生素，故应生吃。|3-萝卜素存在于红色、橙色、黄色的蔬菜和水果之中，但其是脂溶性维生素，生吃并不容易吸收。维生素E存在于"种子"类食物中，包括坚果、种子和植物油以及豌豆、蚕豆、玉米等中。此外，经常吃甘薯、胡萝卜、豆瓣菜、豌豆和花椰菜是增加人体抗氧化易感遗传风险的好办法。当然，前提是不要对这些食物进行煎炸烹制。(2)中草药抗氧化剂中药抗氧化机制包括清除氧自由基和羟自由基，抑制脂质过氧化反应，抑制生物膜不饱和脂肪酸过氧化反应，缓解氨基多糖的解聚作用等。这些中草药抗氧化剂的有效成分有黄酮类、皂甙类、生物碱类、鞣质类、多糖类、苯酚类等。具有抗氧化作用的单味药有很多，如人参、西洋参、党参、太子参、黄芪、枸杞子、灵芝、丹参、三七、当归、生脉散、五味子、何首乌、甘草、女贞子、附子等等。三、药物如别嘌呤醇是黄嘌呤氧化酶的抑制剂，能降低02的生成，是心肌缺血再灌注氧自由基抑制剂，但只有在灌注前用药，才能收到明显效果；二甲亚砜及甘露醇两者均具有清除'OH的作用。二甲亚砜近年来已用于抗脑水肿；钙拮抗剂尼可地平、硝苯啶、维拉帕米和硫氮卓铜等有保护细胞和升高GSH的作用；白细胞功能抑制剂前列环素(PGI2)是血管内皮细胞产生的花生四烯酸主要代谢物，能抑制血小板聚集，保护冠状动脉。它还能阻止中性粒细胞激活，减少自由基生成；N-乙酰半胱氨酸是小分子氨基酸衍生物，除了它本身是抗氧化剂外，它还是细胞内合成GSH的原料；普罗布可(Probucol):是一种很强的脂溶性抗氧化剂或自由基清除剂，该药有延缓泡沫细胞发生的能力，可用于动脉粥样硬化的辅助治疗。位点序列的确定根据文献提供的位点序列信息和rs号，在NCBISNP数据库中进行检索比对，获得以上5个位点的参考序列如下1.CATA844GSEQIDN01:rs769214GCACCTGAGGAGGTGTAGAAATCATTCAAACTCTTTGATTACAATGACAA50ACTAGTCAGTAACTTACTMATATTGTACTATATATTACTMGTATTTTA100CTCTTCAACATAGCTTTTTAMGACACAAAGCTTTTCMAATTCCTGCTT150ACCTGGG157A/GSNPGTAMATTTGGGGAAGCAGATTTCTCCAGTGTTTAAAGAAGCCAATTTGG207CAGTGTACCAGAGTTGMTACATTTTTCCCATCACAAGGGMTACATTTT257TCCCATCTAAGTTMGTTGTTTTTCTCTGGTAAAGGAGGAAATCAACACC307CATCTGTACGGAGAT嵐CGTTTCAGAGTGTTTTTATATTMATAATTAG357TATACTAGTCTAGTAAGTGATAATCCACGAATAAGTTMGMGAGCTMG4072.CYBAC242TSEQIDN02:rs4673GCTTGGTTTCTCACTTGGAGGCTCCGGMCCAACCCTTTGGTGCTTGTGG50GTAAACCAAGGCCGGTGCCTGCCCGGTGTGTTTTGTGGGAGGAMGAGGC100CTGGGTGCCCTGGGGTGGTCAGCAGGGCAGCAAAGGAGTCCCGAGTGGGA150GAGGCCCAGCCGCGCCGTCTCGCCTTCCTCCCTCCCCCAGGGGACAGMG200C/TSNPACATGACCGCCGTGGTGAAGCTGTTCGGGCCCTTTACCAGGAATTACTAT250GTTCGGGCCGTCCTGCATCTCCTGTGAGTCCCCGTCCCGCACCCCCTCTA300GGGCTCAGGAGGGCTTGGAGCCGACCCTCCCCACTGTCCCACCGGCCGGG350CTGCCTGGACAGGAGCCACC(XCACTTACCTCAGTGTTTTTCCAAACAAA400GGATTTGTAAGGATCCACTCCAAATCCGAGGAGCTCCGATCCGTCGCCAG4503.NOS3G894TSEQIDN03:rsl799983GGAGCCTCGGTGAGATMAGGATGAAAAACACCMAGGAGGGGTGCCTGG50GTGGTCACGGAGACCCAGCCAATGAGGGACCCTGGAGATGMGGCAGGAG100ACAGTGGATGGAGGGGTCCCTGAGGAGGGCATGAGGCTCAGCCCCAGMC150CCCCTCTGGCCCACTCCCCACAGCTCTGCATTCAGCACGGCTGGACCCCA200GGAAACGGTCGCTTCGACGTGCTGCCCCTGCTGCTGCAGGCCCCAGATGA250G/TSNPCCCCCAGAACTCTTCCTTCTGCCCCCCGAGCTGGTCCTTGAGGTGCCCCT300GGAGCACCCCACGTGAGCACCMAGGGATTGACTGGGTGGGATGGAGGGG350GCCATCCCTGAGCCTCTCAAGMGGGCCTGCAAGGGGGTGCTGATCCCAC400ACCCCMCACCCCCAGGCTGGAGTGGTTTGCAGCCCTGGGCCTGCGCTGG4504.SOD3C1354GSEQIDN04:rsl799895GTGGGCCGGGCCGTGGTCGTCCACGCTGGCGAGGACGACCTGGGCCGCGG50CGGCAACCAGGCCAGCGTGGAGAACGGGAACGCGGGCCGGCGGCTGGCCT100GCTGCGTGGTGGGCGTGTGCGGGCCSGGGCTCTGGGAGCGCCAGGCGCGG150GAGCACTCAGAGCGCAAGAAGmC/GSNPGGCGGCGCGAGAGCGAGTGCMGGCCGCCTGAGCGCGGCCCCCACCCGGC221GGCGGCCAGGGACCCCCGAGGCCCCCCTCTGCCTTTGAGCTTCTCCTCTG271CTCCAACAGACACCYTCCACTCTGAGGTCTCACCTTCGCCTYTGCTGMG321TCTCCCCGCAGCCCTCTCCACCCAGAGGTCTCCCTATACCGAGACCCACC3715.P0N1G859ASEQ:ID跳rs662CTAGCACGAAGGCTCCATCCCATATCTTGATTTTAGGMTAGACAGTGAG50GMTGCCAGTTAATAATCCTGTAATGTTCAATACCTTCACCTTATATATT100ATGTGTGTATGTTTTAATTGCAGTTTGAATGATATTGTTGCTGTGGGACC150TGAGCACTTTTATGGCACAAATGATCACTATTTTCTTGACCCCTACTTAC200A/GSNPATCCTGGGAGATGTATTTGGGTTTAGCGTGGTCGTATGTTGTCTACTATA250GTCCAAGTGAAGTTCGAGTGGTGGCAGMGGATTTGATTTTGCTMTGGA300ATCAACATTTCACCCGATGGCAAGTATGTGAACTCTCTGAAATGTAGTGG350ATTTACTCAGATTCTCAGGAGATATCTTGGMTATATTCTTTTTTTMGT400AATATGATACATTTTAACATGTTACCCTAGTGAGAT嵐ATTAGGAAMA450TGTAAAATGTCTTAATTTTTCAGGGGGTGAAATTTATCAAATCAAMATT500权利要求1.一种抗氧化能力遗传风险评估的基因检测方法，其特征在于，其方法为步骤1.检测的样品类型与采样方法用采样拭在20-30个被测者口腔中分别左右两腮至少需要各上下刮40次以上，以保证采集到足量的细胞样本；步骤2.基因组DNA的抽提方法采用硅胶吸附法抽提每一个口腔上皮细胞样本的基因组DNA，时间为2小时-2.5小时，共抽提20-30个被测者样本，经电泳检测后，用肉眼可见清晰白色条带即可判断获得的DNA能进入下一步检测；步骤3荧光定量PCR反应将每一个被测者样本分别放入5个反应孔，同时检测5个位点，即过氧化氢酶(CAT)SEQIDNO1rs769214、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDNO2rs4673、内皮型一氧化氮合成酶(NOS3)SEQIDNO3rs1799983、胞外过氧化物岐化酶(SOD3)SEQIDNO4rs1799895和对氧磷酯酶1(PON1)SEQIDNO5rs6625个位点；20-30个被测者样本就有100-150个反应孔，并增设不含DNA模版的NTC空白对照孔；每一个反应孔的基因分型可以根据下表的引物和探针设计，采用id="icf0001"file="A2008100420240002C1.tif"wi="15"he="3"top="162"left="21"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>-MGB技术，进行检测试剂合成；在每一个反应孔中加入试剂为荧光定量PCR反应体系，总体积为10μl，即浓度为20ng/μl的DNA模板2μl、1μl10X荧光定量PCR反应缓冲液ABIid="icf0002"file="A2008100420240002C2.tif"wi="12"he="3"top="179"left="157"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>id="icf0003"file="A2008100420240002C3.tif"wi="2"he="2"top="186"left="21"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>MGB、0.1μl25mMdNTP合成DNA的四种脱氧核苷酸底物、0.5μl25mMMgCl2溶液、0.02μl(5units/μl)TaqDNA聚合酶、去离子水5.43μl、5个位点分别采用不同的正向引物(20μM，0.225μl)、反向引物(20μM，0.225μl)、VIC荧光探针(10μM，0.25μl)和FAM荧光探针(10μM，0.25μl)工具进行检测；将反应板放在ABI9700型PCR扩增仪上进行反应，先进行预热50℃、2分钟，95℃、10分钟，然后再进行60个循环的95℃、30秒，60℃、1分钟检测，经重复实验验证，基因分型的准确率达到了99％以上，重复性达到了100％。反应结束后取出后再放入ABI7900型荧光定量PCR仪上读取样品荧光量，并自动将26个被测者样本检测5个点位的数据对号入座到5个图中，同时生成5张图，即过氧化氢酶(CAT)SEQIDNO1rs769214图、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDNO2rs4673图、内皮型一氧化氮合成酶(NOS3)SEQIDNO3rs1799983图、胞外过氧化物岐化酶(SOD3)SEQIDNO4rs1799895图、对氧磷酯酶1(PON1)SEQIDNO5rs662图；采用仪器为ABIid="icf0004"file="A2008100420240003C1.tif"wi="12"he="3"top="78"left="61"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>7900型荧光定量PCR仪，检出率可达99％以上，可重复性达到100％。每小时可进行10000个SNP多态性终点检测分析，可满足从中通量到高通量的SNP多态性实验的需求；步骤4SNP基因型分析将ABI7900型荧光定量PCR仪上显示的最终样本荧光信号的5个表和一个NTC空白对照进行比较，每个位点理论上存在三种不同的信号，纯VIC荧光信号、VIC和FAM杂合荧光信号以及纯FAM荧光信号，分别代表该位点三种不同的基因型；(1)、过氧化氢酶(CAT)SEQIDNO1rs769214在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X0.4-0.5Y0.3-0.4)区域为空白对照、坐标轴(X0.3-0.4Y1.0-1.3)区域为AA基因型、坐标轴(X0.7-0.9Y0.7-1.1)区域为AG基因型、坐标轴(X0.7-0.8Y0.3-0.4)区域为GG基因型，其中，AG、AA为风险基因型，携带风险基因型时过氧化氢酶表达减少，机体抗氧化能力下降；(2)、还原型辅酶叶绿醇(CYBA)SEQIDNO2rs4673在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X0.4-0.5Y0.3-0.4)区域为空白对照、坐标轴(X0.3-0.4Y1.0-1.3)区域为CC基因型、坐标轴(X0.7-0.9Y0.7-1.1)区域为TC基因型、坐标轴(X0.7-0.8Y0.3-0.4)区域为TT基因型，其中，CT、CC为风险基因型，携带风险基因型时还原型辅酶叶绿醇结合能力降低，机体抗氧化能力下降；(3)、内皮型一氧化氮合成酶(NOS3)SEQIDNO3rs1799983在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X0.2-0.4Y0.5-0.7)区域为空白对照、坐标轴(X0.2-0.5Y3.7-4.2)区域为GG基因型、坐标轴(X1.7-1.9Y3.5-3.7)区域为GT基因型、坐标轴(X1.7-1.9Y0.5-0.7)区域为TT基因型(该基因型在中国人群中频率很低，图330个样本中未检出该基因型)，其中，GT、TT为风险基因型，携带风险基因型时内皮型一氧化氮合成酶活性降低，降低了机体有益自由基生成；(4)、胞外过氧化物岐化酶(SOD3)SEQIDNO4rs1799895在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X0.0-0.1Y0.1-0.3)区域为空白对照、坐标轴(X0.0-0.1Y1.1-1.3)区域为CC基因型、坐标轴(X0.2-0.3Y0.9-1.2)区域为CG基因型、坐标轴(X0.35-0.45Y0.4-0.6)区域为GG基因型，其中，GG、CG为风险基因型，携带风险基因型时过氧化物岐化酶在体内的分布发生变化，罹患心脑血管疾病风险上升；(5)、对氧磷酯酶1(PON1)SEQIDNO5rs662在检测结果图中，共有21-31个点，每个点代表一个被测者样本的检测结果，坐标轴(X0.0-0.1Y0.1-0.3)区域为空白对照、坐标轴(X0.0-0.1Y1.4-1.6)区域为AA基因型(该基因型在中国人群中频率很低，上图30个样本中未检出该基因型)、坐标轴(X0.7-0.9Y1.4-1.6)区域为AG基因型、坐标轴(X0.7-1.2Y0.3-0.5)区域为GG基因型，其中，GG、AG为风险基因型，携带风险基因型时对氧磷酯酶1活性降低，加重了机体自由基损伤；每一个被测者的5个点落在5个表上哪个区域，即可知道被测者抗氧化能力的遗传风险。全文摘要本发明公开了一种抗氧化能力遗传风险评估的基因检测方法，其特征在于，通过同时检测分析个体的CAT基因、CYBA基因、NOS3基因、SOD3基因、PON1基因SNPs位点基因携带型为所有的受检者提供抗氧化能力的遗传风险评估、相关疾病风险规避的个性化健康指导。本发明的优点是在疾病发生之前，从遗传角度提示受检者与自由基相关的疾病发生风险，提高受检者的自我保健意识，积极采用合理的干预手段，达到降低疾病发生可能的目的；从分子机理角度分析疾病的致病因素以及发病机理，加深对疾病的认识，并可促进相应诊疗措施的制定，提高治疗效果。文档编号C12Q1/26GK101560548SQ20081004202公开日2009年10月21日申请日期2008年8月25日优先权日2008年8月25日发明者傅咏南,张同燕,毛丹丹申请人:上海中优医药高科技有限公司