植物抗氧化相关蛋白SsPETE1及其编码基因和应用的制作方法

文档序号:602603阅读:659来源:国知局
专利名称:植物抗氧化相关蛋白SsPETE1及其编码基因和应用的制作方法
技术领域
本发明涉及本发明属于基因工程领域,具体涉及一种植物抗氧化相关蛋白SsPETEI及其编码基因和应用。
背景技术
碱蓬(Suaeda salsa)是一种具有高度耐盐碱能力的真盐生植物,主要分布在我国北部的荒漠和沿海地区的盐碱地等处,是我国最重要的盐生植物之一。由于碱蓬具有高度的耐逆能力,其耐逆分子机制的研究具有重要的理论意义和应用前景。冷、热、干旱、盐、强光等非生物胁迫都会产生同一种次级胁迫——氧化胁迫,植物在受到非生物胁迫的时候,基因的表达会发生相应的变化,这些变化是通过信号转导完成的,其中ROS信号通路能受各种非生物胁迫的诱导。由于ROS具有很强的氧化能力,在细胞中的过多积累会导致脂膜氧化、DNA及蛋白质的氧化、酶活性的抑制、细胞程序性死亡等。然而一定浓度的ROS对于植物的生长发育、激素信号转导、非生物胁迫的应答反应等过程有重要的调控作用。植物通过ROS信号传导最终产生一些抗氧化酶类和非酶类的小分子抗氧化物来消除氧化胁迫给细胞带来的威胁。作为光合作用的场所,叶绿体与其它细胞器相比更容易遭受氧化胁迫的伤害,是细胞内产生ROS的主要区域。叶绿体中的ROS清除体系主要包括类囊体上的“水-水循环”和基质中的抗坏血酸-谷胱甘肽循环。此外ROS含量的降低还可以通过改变电子传递链的方式来实现,主要包括=NDH介导的循环电子传递和质子梯度蛋白PGR5介导的循环电子传递。虽然这两种循环电子传递并不是直接把电子传递给R0S,而是传递给02,但是从源头上防止ROS的产生与去除已产生的ROS —样重要。质体蓝素蛋白(Plasto cyanin)是高等植物中为细胞色素b6/f复合体(Cytb6/f)与光系统I(PSI)之间传递电子的一种含铜原子的蛋白质,位于类囊体膜内表面,是光合链中的重要成员。已有研究表明,结合Cytb6/f的质体蓝素可能是烟草中调控电子传递速率的一种重要组分。

发明内容
本发明的目的是提供一种植物抗氧化相关蛋白SsPETEI及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质,来源于碱蓬属盐地碱蓬(Suaeda salsa),命名为SsPETEI蛋白,是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列I所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗氧化相关的由序列I衍生的蛋白质。为了使(a)中的蛋白质便于纯化,可在由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表I所示的标签。表I标签的序列
权利要求
1.一种蛋白质,是如下(a)或(b): (a)由序列表中序列I所示的氨基酸序列组成的蛋白质; (b)将序列表中序列I所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗氧化相关的由序列I衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白的基因。
3.如权利要求2所述的基因,其特征在于:所述基因是如下(I)或(2)或(3)或(4)或(5)所述的DNA分子: (1)序列表中序列2自5’末端第46至549位核苷酸所示的DNA分子; (2)序列表中序列2自5’末端第46至552位核苷酸所示的DNA分子; (3)序列表中序列2所示的DNA分子; (4)在严格条件下与(I)至(3)中任一限定的DNA序列杂交且编码植物抗氧化相关蛋白的DNA分子; (5)与(I)至(3)中任一限定的DNA序列至少具有90%以上同源性且编码植物抗氧化相关蛋白的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.如权利要求4所述的重组载体,其特征在于:所述重组载体是将权利要求2或3所述基因插入载体pPZP-GFP的多克隆位点得到的重组质粒。
6.一种培育转基因植物的方法,是将权利要求2或3所述基因导入目的植物中,得到抗氧化能力高于所述目的植物的转基因植物。
7.如权利要求6所述的方法,其特征在于:权利要求2或3所述基因通过权利要求4或5所述重组载体导入所述目的植物中。
8.如权利要求6或7所述的方法,其特征在于:所述抗氧化能力高表现为如下(I)、(II )、(III)和(IV)中的至少一种: (I)在氧化胁迫下转基因植物的根长高于所述目的植物; (II )在氧化胁迫下转基因植物的鲜重高于所述目的植物; (III)在氧化胁迫下转基因植物的叶绿素含量高于所述目的植物; (IV )在氧化胁迫下转基因植物的H2O2含量低于所述目的植物。
9.如权利要求6至8中任一所述的方法,其特征在于:所述目的植物为双子叶植物或单子叶植物;所述双子叶植物具体为拟南芥。
10.权利要求1所述蛋白在调控植物抗氧化能力中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种植物抗氧化相关蛋白SsPETE1及其编码基因和应用。本发明提供的蛋白质,来源于碱蓬属盐地碱蓬,命名为SsPETE1蛋白,是如下(a)或(b):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;(b)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物抗氧化相关的由序列1衍生的蛋白质。本发明不仅为研究SsPETE1蛋白在植物抗氧化胁迫过程中的作用奠定了基础,而且为利用基因工程方法提高作物耐逆能力提供了新方法。
文档编号C12N5/10GK103254300SQ20121004145
公开日2013年8月21日 申请日期2012年2月21日 优先权日2012年2月21日
发明者仲乃琴, 马银平, 王昉, 夏桂先 申请人:中国科学院微生物研究所
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