专利名称：一种从枣中分级提取生物活性成分的方法
技术领域：
本发明属于天然产物提取技术领域，具体涉及一种从謇中提取多种生物活 性成分的方法。本发明釆用同时分级提取工艺技术，从舉中提取总黄酮醇溶浸 膏、謇粗多糖、核苷酸浸膏和膳食纤维。
背景技术：
枣为鼠李科多年生落叶植物枣树的成熟果实，自古就被列为"五果"(桃、 李、梅、杏、枣)之一，历史悠久。枣果实中含有各种生物活性成分(包括单双 糖类、低聚糖、多糖、蛋白质、脂肪、有机酸、矿物质、核苷酸、三雜类化合 物、类黄酮等)，具有多重的营养价值和保健功能，堪称是一座营养物质的天然 宝库。枣是传统的药食同源植物，也是我国特有的生物资源。中医认为謇有补 中益气、养血生津、安神镇疼和调节药效等功能。謇不仅营养丰富，而且味道 可口，有"百果之王"的美称。
目前国内巿场上的謇深加工产品很多，如干謇、蜜謇、譽片、謇酱、謇酒 等，这些产品在加工时改变了卑果的色、香、味、形和质地，而且舉果中的特 色营养和生物活性成分没有被充分利用。
随着枣研究开发的日益深入，关于提取枣果中多糖、核苷酸、类黄酮，以
及从舉渣中提取多糖、三雜酸工艺技术的相关报道文献也越来越多。CN1175758C 公开了一种从枣中分离提取环核苷酸糖桨、膳食纤维和舉蜡的方法，该方法采 用乙醇提取，醇提残渣蒸干后制成謇膳食纤维粉，醇提液经有机溶剂萃取，分 离出枣蜡，萃余液浓缩制成环核苷酸糖浆，实现了按謇的活性成分和理化性能 开发多种产品的目的。CN101139402A公开了一种从大卑中提取多糖的方法，该 技术将大枣用水提取，在水提液中加入澄清剂，经醇沉、分离、干燥后得到謇 多糖。
以上两项技术存在着的共性缺陷是 一、在謇活性成分的提取过程中均使 用了大量的有机溶液和化合物，不仅对环境造成了污染，最终产品中的残留也会带来食品安全问题；二、枣中富含多种活性成分，而上述技术只是各自提取
了其中的一部分，没有做到综合提取，物尽其用。
发明内容
本发明提供了一种从謇中提取总黄酮醇溶浸膏、赛粗多糖、核苷酸浸膏和 膳食纤维的方法，其目的是解决现有技术存在的有机溶液污染和枣资源得不到 物尽其用的问题，通过分级综合提取，实现了枣中所含生物活性成分尽被提取 的效果。
本发明的分级提取方法包括如下步骤 U)将枣清选、去核、水洗、干燥后，粉碎成10-40目的颗粒；
(2) 在枣颗粒中加入65~75%的乙醇提取2~3次，分离为枣渣和滤液，滤 液浓缩得含总黄酮的醇溶性浸膏；
(3) 枣渣中加入占舉渣重量10-15倍的去离子水，在pH = 4~12的条件 下进行提取，重复提取2 3次，分离为水提液和残渣；
(4) 合并水提液，调节pH值至中性后，浓缩至原体积的1/8-1/6,加入 浓缩液体积4-6倍的95%乙醇，缓慢搅拌，醇沉分离10 18h，得沉淀物和滤 液，沉淀物用98%以上的乙醇清洗2~3次，干燥得謇粗多糖，滤液经浓缩得到 含核苷酸的水溶性浸膏；
(5) 残渣干燥后，粉碎成60~ 300目的膳食纤维粉。
其中，工艺中物料的干燥可以是鼓风干燥或者真空度0. 06 ~ 0. 095MPa下的 真空干燥，在50-8(TC干燥5 20h,至物料的含水量为5 ~ 20%。
工艺中的物料提取方法可以采用常规水浴法、超声波法、微波法中的一种 或者几种的复合方式进行。其中的常规水洛法是在40 8(TC条件下提取0.5~ 5h;超声波法是在" 80。C条件下以频率25 80KHz、功率50~ 1000W的超声 波提取10-^min;微波法是在40 ~ 80。C条件下以频率30 ~ 1 OOMHz、功率50~ 1200W的微波提取10 ~ 60min。
工艺中物料的浓縮采用减压浓缩，在温度40 9(TC、压力0. 04 - 0. 095MPa的条件下进行。
本发明得到的醇溶性浸膏的主要成分是謇黄酮类物质。
本发明得到的大專粗多糖的主要成分有水溶性多糖、粗蛋白和矿物质等多 种，可以粉碎成60~100目的细粉，装入胶囊中，制备成枣果粗多糖提取物产 品。
本发明得到的水溶性浸膏主要含核苷酸、单糖、双糖、低聚糖等水溶性成 分，可以作为食品基料或与其他食品复配加工保健饮品。
最后的残渣机械粉碎至60-100目的细粉，或者先机械粗粉碎，进一步超 微细粉碎，使细度达到100-300目，此粉状物的主要成分为膳食纤维。
本发明的主要优点是(1)通过简单的提取工艺流程，实现了謇中多种活 性成分的分离提取，与现有技术相比，具有操作简单、成本低的优势；(2)提 取工艺中除使用食品加工常用的乙醇外，未使用其他任何有机溶剂，具有安全 无毒、无残留的优点；(3)分离提取的几种活性成分各有不同的生理功能，可
细分作为保健食品的原料或药品的中间体，做到物尽其用。
图1为本发明从枣中分级提取生物活性成分的工艺流程示意图。
具体实施方式
实施例1
将成熟枣果剔除病虫害腐蚀等不可食部分，用流动自来水清洗干净，手工 去核。称取1Kg舉果置于鼓风干燥箱中，于60 65'C干燥10h，至含水量10% 左右。将干燥的枣果取出，冷却后，机械粉碎成10目的颗粒。
卑果颗粒中加入65%乙醇IOL， 50。C下以频率25KHz、功率200W的超声波超 声提取40min,重复提取2次，静置分离。合并滤液，于6(TC、 0. 08MPa下减压 浓縮并回收乙醇，得到醇溶性浸膏460g,其主要成分是舉黄酮类物质。
醇提后得到的枣渣中加入10L去离子水，调节溶液pH-7，采用常规水洛法 提取，提取温度5(TC,时间1.5h,离心分离为水提液和專渣。謇渣重复提取2次，共得到水提液18. 8L,枣渣1970g。
水提液于70"、 0. 09MPa下减压浓缩至3. 2L，再加入16L的95%乙醇，缓 慢搅拌，醇沉分离10h以上，抽滤得到沉淀物32.5g，滤液18. 3L。
将沉淀物用98%以上的乙醇清洗2次，每次300tnL, 4(TC鼓风干燥，粉碎后 得到枣果粗多糖提取物29. 5g。其中多糖含量30. 6%、水分12. 1%。
滤液于5(TC、 0. 09MPa下减压浓缩并回收乙醇，浓缩至可溶性固形物含量 占65%,得到浸膏750g。浸膏中含有核苷酸、单糖、双糖、低聚糖等多种水溶 性成分，其中核苷酸含量176mg。
醇提后的残渣置于鼓风干燥箱中，于60~65匸下干燥10h，至含水量10% 以下，冷却，机械粉碎成80目的细粉120g，其中膳食纤维含量62. 3%。
实施例2
将成熟枣果剔除病虫害腐蚀等不可食部分，用流动自来水清洗干净，手工
去核。称取500g謇果置于鼓风干燥箱中，于60-65t:干燥ioh,至含水量ioy。
左右。将干燥的枣果取出，冷却后，机械粉碎成20目的颗粒。
謇果颗粒中加入70%乙醇6L, 6(TC下以频率40MHz、功率500W的微波提取 30min,重复提取2次，静置分离。合并滤液，于63匸、0. 09MPa下减压浓缩并 回收乙醇，得到醇溶性浸膏238g,其主要成分是卑黄酮类物质。
醇提后得到的枣渣中加入4.5L去离子水，调节溶液pH-5，釆用常规水浴 法提取，提取温度50。C,时间lh,调节溶液pH值为中性，离心分离为水提液和 謇渣。卑渣重复提取3次，共得到水提液12. 8L,專渣970g。
水提液于75'C、 G. 09MPa下减压浓缩至1.6L，加入9. 6L的95%乙醇，缓慢 搅拌，醇沉分离10h以上，抽滤得到沉淀物15. 5g,滤液IO. 7L。
将沉淀物用98%以上的乙醇清洗2次，每次120mL, 45'C鼓风干燥，粉碎后 得到枣果粗多糖提取物13. 8g。其中多糖含量38. 4%、水分11.7。/。。
滤液于60°C、 0. 08MPa下减压浓缩并回收乙醇，浓缩至可溶性固形物含量 占63%,得到浸膏362g。浸膏中含有核苷酸、单糖、双糖、低聚糖等多种水溶性成分，其中核苷酸含量86mg。
醇提后的残渣置于鼓风干燥箱中，于60~65匸下干燥10h，至含水量10% 以下，冷却，机械粗粉碎，进一步超微细粉碎成250目的细粉97g，其中膳食纤 维含量64. 4%。
实施例3
将成熟枣果剔除病虫害腐蚀等不可食部分，用流动自来水清洗干净，自动 去核机去核。称取lkg謇果置于鼓风干燥箱中，于60 65。C干燥12h,至含水 量8%左右。将干燥的枣果取出，冷却后，机械粉碎成40目的颗粒。
謇果颗粒中加入70%乙醇IOL，于60。C水浴提取2h。重复提取3次，静置 分离。合并滤液，于58°C、 0. 07MPa下减压浓缩并回收乙醇，得到醇溶性浸膏 505g，其主要成分是專黄酮类物质。
醇提后得到的謇渣中加入9.2L去离子水，调节溶液pH-ll,釆用微波法提 取，频率50MHz,功率800W，温度5(TC,时间30min,调pH为中性，离心分离 为水提液和謇渣。冬渣重复提取2次，共得到水提液17. 3L,謇渣1710g。
水提液于75<>C、 0. 09MPa下减压浓缩至2. 5L,再加入10L的95%乙醇，缓 慢搅拌，醇沉分离14h以上，抽滤得到沉淀物35.4g,滤液11.6L。
将沉淀物用98%以上的乙醇清洗2次，每次350mL， 45。C鼓风干燥，粉碎后 得到枣果粗多糖提取物32.9g。其中多糖含量35.4%、水分12. 6%。
滤液于6(TC、 0. 08MPa下减压浓缩并回收乙醇，浓缩至可溶性固形物含量 占73%，得到浸膏722g。浸膏中含有核苷酸、单糖、双糖、低聚糖等多种水溶 性成分，其中核苷酸含量168mg。
醇提后的残渣置于鼓风干燥箱中，于60 65。C下干燥10h，至含水量10% 以下，冷却，机械粗粉碎，进一步超微细粉碎成180目的细粉106g,其中膳食 纤维含量63. 6%。
权利要求
1. 一种从枣中分级提取生物活性成分的方法，包括如下步骤(1)将枣清选、去核、水洗、干燥后，粉碎成10～40目的颗粒；(2)在枣颗粒中加入65～75％的乙醇提取2～3次，分离为枣渣和滤液，滤液浓缩得含总黄酮的醇溶性浸膏；(3)枣渣中加入占枣渣重量10～15倍的去离子水，在pH＝4～12的条件下进行提取，重复提取2～3次，分离为水提液和残渣；(4)合并水提液，调节pH值至中性后，浓缩至原体积的1/8～1/6，加入浓缩液体积4～6倍的95％乙醇，缓慢搅拌，醇沉分离10～18h，得沉淀物和滤液，沉淀物用98％以上的乙醇清洗2～3次，干燥得枣粗多糖，滤液经浓缩得到含核苷酸的水溶性浸膏；(5)残渣干燥后，粉碎成60～300目的膳食纤维粉。
2、 根据权利要求l所述的从舉中分级提取生物活性成分的方法，其特征是 所述工艺中的干燥是在50-8(TC干燥5 20h,至物料的含水量为5~20%。
3、 根据权利要求2所述的从謇中分级提取生物活性成分的方法，其特征是 所述的干燥是鼓风干燥或者真空度0. 06 ~ 0. 095MPa下的真空干燥。
4、 根据权利要求l所述的从枣中分级提取生物活性成分的方法，其特征是 所述工艺中的物料提取方法釆用常规水洛法、超声波法、微波法中的一种或者 几种的复合方式进行。
5、 根据权利要求4所述的从謇中分级提取生物活性成分的方法，其特征是 所述的常规水洛法是在40 ~ 8(TC条件下提取0. 5 ~ 5h。
6、 根据权利要求4所述的从舉中分级提取生物活性成分的方法，其特征是 所述的超声波法是在40 80。C条件下以频率25 80KHz、功率50~ 1000W的超 声波提取10 60min。
7、 根据权利要求4所述的从卑中分级提取生物活性成分的方法，其特征是 所述的微波法是在40 80。C条件下以频率30 100MHz、功率50 1200W的微波提取10~60min。
8、根据权利要求l所述的从專中分级提取生物活性成分的方法，其特征是 所述工艺中的物料浓缩釆用减压浓缩，在温度40 9(TC、压力0.04 - 0. 095MPa 的条件下进行。
全文摘要
一种从枣中分级提取生物活性成分的方法，是将枣清选、去核、水洗、干燥、粉碎成颗粒，加入65～75％的乙醇提取2～3次，分离为枣渣和滤液；滤液浓缩得总黄酮醇溶性浸膏，枣渣中加入其重量10～15倍的去离子水提取2～3次，分离为水提液和残渣；水提液浓缩至原体积的1/8～1/6，加入浓缩液体积4～6倍的95％乙醇，醇沉分离10～18h，得沉淀物和滤液；沉淀物用98％以上的乙醇清洗2～3次，干燥得枣粗多糖，滤液经浓缩得到核苷酸水溶性浸膏；残渣干燥粉碎成膳食纤维粉。本发明方法实现了枣中多种活性成分的一次性分级提取，操作简单，除乙醇外未用其它有机溶剂，安全无毒、无残留，枣中所含生物活性成分尽被提取，物尽其用。
文档编号A23L1/308GK101288468SQ20081005515
公开日2008年10月22日 申请日期2008年5月23日 优先权日2008年5月23日
发明者丁卫英, 刘金凤, 卢健鸣, 李云龙, 春 杨, 杨碧琳, 栗红瑜, 方 陕 申请人:山西省农业科学院农产品综合利用研究所