专利名称：一种用于原位杂交实验的试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及ー种试剂盒，具体涉及ー种用于原位杂交实验的试剂盒。
背景技术：
原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精确定量定位的过程。原位杂交可以在细胞标本或组织标本上进行。目前，在进行原位杂交实验时，需要进行试剂的配制和准备，对于实验人员来说配制和准备试剂増加了实验过程中的复杂性，并且因为制作实验试剂的过程中，实验人员的熟练程度和认知水平的不同，可能配制出的试剂也并不相同，从而不能保证实验结果的稳定性和可靠性。
实用新型内容本实用新型为解决进行原位杂交实验时，由于实验人员的熟练程度和认知水平的不同，导致实验结果的稳定性和可靠性不能得到保证的问题，进而提出一种用于原位杂交实验的试剂盒。本实用新型为解决上述问题采取的技术方案是本实用新型包括去核糖核酸酶试剂瓶、4%多聚甲醛固定液试剂瓶、1% Trion-XlOO溶液试剂瓶、预杂交液试剂瓶、杂交液试剂瓶、第一甲酰胺溶液试剂瓶、第二甲酰胺溶液试剂瓶、第一缓冲液试剂瓶、第二缓冲液试剂瓶、封闭液试剂瓶、碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体试剂瓶、碱性磷酸酶显色液试剂瓶和盒体，盒体内腔的底面设有十二个凹槽，十二个凹槽呈矩形矩阵状设置，去核糖核酸酶试剂瓶、4%多聚甲醛固定液试剂瓶、1% Trion-XlOO溶液试剂瓶、预杂交液试剂瓶、杂交液试剂瓶、第一甲酰胺溶液试剂瓶、第二甲酰胺溶液试剂瓶、第一缓冲液试剂瓶、第二缓冲液试剂瓶、封闭液试剂瓶、碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体试剂瓶、碱性磷酸酶显色液试剂瓶的底部可分别各对应插装在一个凹槽内。本实用新型的有益效果是本实用新型使原位杂交实验中的试剂能够快捷、稳定地进行原位杂交实验；使用本实用新型进行原位杂交实验，实验效率高、实验结果稳定、操作简便快速；本实用新型结构简单，制备成本低，适合实验室中使用，提高了原位杂交实验结构的可靠性和稳定性。
图I是本实用新型的整体结构示意图，图2是盒体底部的俯视图。
具体实施方式
具体实施方式
一结合图I和图2说明本实施方式，本实施方式所述ー种用于原位杂交实验的试剂盒包括去核糖核酸酶试剂瓶1、4%多聚甲醛固定液试剂瓶2、1%Trion-XlOO溶液试剂瓶3、预杂交液试剂瓶4、杂交液试剂瓶5、第一甲酰胺溶液试剂瓶6、第ニ甲酰胺溶液试剂瓶7、第一缓冲液试剂瓶8、第二缓冲液试剂瓶9、封闭液试剂瓶10、碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体试剂瓶11、碱性磷酸酶显色液试剂瓶12和盒体13，盒体13内腔的底面设有十二个凹槽13-1，十二个凹槽13-1呈矩形矩阵状设置，去核糖核酸酶试剂瓶1、4%多聚甲醛固定液试剂瓶2、I % Trion-XlOO溶液试剂瓶3、预杂交液试剂瓶4、杂交液试剂瓶5、第一甲酰胺溶液试剂瓶6、第二甲酰胺溶液试剂瓶7、第一缓冲液试剂瓶8、第二缓冲液试剂瓶9、封闭液试剂瓶10、碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体试剂瓶11、碱性磷酸酶显色液试剂瓶12的底部可分别各对应插装在一个凹槽13-1内。
具体实施方式
ニ 结合图I说明本实施方式，本实施方式所述ー种用于原位杂交实验的试剂盒的盒体13的长度L为25cm，盒体13的宽度W为10cm，盒体13的高 度H为15cm。其它组成及连接关系与具体实施方式
一相同。工作原理利用本实用新型进行原位杂交实验的操作步骤如下步骤一、制作的组织切片在4%多聚甲醛固定液试剂瓶2中的溶液固定ー小时；步骤ニ、切片用核糖核酸酶清洗液试剂瓶I的溶液清洗两次，毎次五分钟；步骤三、切片用1% Trion-XlOO溶液试剂瓶3中的溶液处理二十分钟；步骤四、切片用核糖核酸酶清洗液试剂瓶I中的溶液清洗三次，毎次五分钟；步骤五、每张切片加预杂交液试剂瓶4中预杂交液200 μ 1，放在湿盒内，室温放置十五分钟；步骤六、杂交探针85°C变性三分钟后置冰水混合物中骤冷，按I : 100浓度与杂交液试剂瓶5中的杂交液混合，每张片子上加100 μ I混合好的杂交液，55°C杂交过夜；步骤七、杂交后，在55°C条件下，用第一甲酰胺溶液试剂瓶6中的溶液清洗十五分钟，然后用第二甲酰胺溶液试剂瓶7中的溶液清洗两次，毎次三十分钟；步骤八、用第一缓冲液试剂瓶8中的溶液平衡五分钟，25°C条件下用封闭液试剂瓶10中的封闭液封闭ー小时；步骤九、加碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体试剂瓶11中的抗体，4°C孵育过夜；步骤十、用第一缓冲液试剂瓶8中的缓冲液洗三次，毎次五分钟，然后用第二缓冲液试剂瓶9中的缓冲液平衡5分钟；步骤十一、用碱性磷酸酶显色液试剂瓶12中的显色液在4°C显色；步骤十二、封片并观察結果。
权利要求1.一种用于原位杂交实验的试剂盒，其特征在于所述ー种用于原位杂交实验的试剂盒包括去核糖核酸酶试剂瓶(I)、4%多聚甲醛固定液试剂瓶(2)、I % Trion-XlOO溶液试剂瓶(3)、预杂交液试剂瓶(4)、杂交液试剂瓶(5)、第一甲酰胺溶液试剂瓶￠)、第二甲酰胺溶液试剂瓶(7)、第一缓冲液试剂瓶(8)、第二缓冲液试剂瓶(9)、封闭液试剂瓶(10)、碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体试剂瓶(11)、碱性磷酸酶显色液试剂瓶(12)和盒体(13)，盒体(13)内腔的底面设有十二个凹槽(13-1)，十二个凹槽(13-1)呈矩形矩阵状设置，去核糖核酸酶试剂瓶⑴、4%多聚甲醛固定液试剂瓶(2)、I % Trion-XlOO溶液试剂瓶(3)、预杂交液试剂瓶(4)、杂交液试剂瓶(5)、第一甲酰胺溶液试剂瓶(6)、第二甲酰胺溶液试剂瓶(7)、第一缓冲液试剂瓶(8)、第二缓冲液试剂瓶(9)、封闭液试剂瓶(10)、碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体试剂瓶(11)、碱性磷酸酶显色液试剂瓶(12)的底部可分别各对应插装在ー个凹槽(13-1)内。
2.根据权利要求I所述ー种用于原位杂交实验的试剂盒，其特征在于盒体(13)的长度(L)为25cm，盒体(13)的宽度(W)为10cm，盒体(13)的高度(H)为15cm。
专利摘要一种用于原位杂交实验的试剂盒，本实用新型涉及一种试剂盒，具体涉及一种用于原位杂交实验的试剂盒。本实用新型为了解决进行原位杂交实验时，由于实验人员的熟练程度和认知水平的不同，导致实验结果的稳定性和可靠性不能得到保证的问题。本实用新型的盒体内腔的底面设有十二个凹槽，十二个凹槽呈矩形矩阵状设置，去核糖核酸酶试剂瓶、4％多聚甲醛固定液试剂瓶、1％Trion-X100溶液试剂瓶、预杂交液试剂瓶、杂交液试剂瓶、第一甲酰胺溶液试剂瓶、第二甲酰胺溶液试剂瓶、第一缓冲液试剂瓶、第二缓冲液试剂瓶、封闭液试剂瓶、碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体试剂瓶、碱性磷酸酶显色液试剂瓶的底部可对应插装在凹槽内。本实用新型用于原位杂交实验。
文档编号C12Q1/68GK202465715SQ201220106119
公开日2012年10月3日 申请日期2012年3月20日 优先权日2012年3月20日
发明者侯晓明, 倪华 申请人:东北农业大学