一种复合乳酸菌发酵花生乳及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种复合乳酸菌发酵花生乳及其制备方法。本发明的产品采用这样的方法来制备的：以副干酪乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、嗜热链球菌、乳酸乳球菌乳亚种为出发菌株，经扩大培养、粉末冻干菌种制备、复合乳酸菌直投式发酵剂的复配，获得复合乳酸菌直投式发酵剂。然后将花生经烘烤、加水制浆、加糖配料、均质、超高温瞬时杀菌、接种复合乳酸菌直投式发酵剂发酵、均质、灌装而制成的富含活性乳酸菌、功能性小分子蛋白肽、更容易被肠道吸收、饮用后具有调节免疫、延缓衰老、降血压、抗过敏等多种功能的复合乳酸菌发酵花生乳。
【专利说明】一种复合乳酸菌发酵花生乳及其制备方法
(—)
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种复合乳酸菌发酵花生乳，还涉及其制备方法。
(二)
【背景技术】
[0002]花生又名长生果，含有丰富的蛋白质和不饱和脂肪酸，且富含A、B、C、E等多种维生素和Ca、P、Fe、Zn、K等矿物元素。据测定，花生每10g可食部分含蛋白质25g，脂肪44g，膳食纤维5.5g，碳水化合物16g，尼克酸18微克，钾587mg，镁17.8mg，磷324mg，硒4微克。花生蛋白中，氨基酸种类和数量丰富、比例合理，其蛋白消化率达98 %。花生营养丰富，且易被人体吸收利用。可以防止机体早衰、促进脑细胞发育、增加记忆力等作用。鉴于当前我国蛋白质资源不是十分丰富，开发植物蛋白质资源，提高我国人民膳食中蛋白质摄取量就显得十分必要。
[0003]随着人们保健意识的增强，消费者对功能性饮品的需求日益增长，1994年日本功能性饮料市场的销售额约为45亿美元，纵观世界各国软饮料的发展动态，植物蛋白饮料，尤其是乳酸菌发酵饮料必将被人们接受，并且需求量将会逐年攀升，发展前景极为广阔。
[0004]本发明采用多种乳酸菌共同发酵花生乳，不添加任何食品添加剂，制备一种富含活性乳酸菌及花生蛋白寡肽的花生乳饮料。
(三)
【发明内容】
[0005]本发明目的在于提供一种复合乳酸菌发酵花生乳及其制备方法。
[0006]本发明的目的是这样实现的:本发明中所涉及的百分比除另有注明之外为重量t匕，本发明的产品采用这样的方法来制备的:
[0007]1.乳酸菌的选择及培养基的制备
[0008]A 菌-副干酿乳杆菌 CICC20246 (Lactobacillus paracasei),培养基为:酿蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠5.0g,朽1檬酸二铵2.0g, Tween801.0g, Κ2ΗΡ042.0g, MgSO4.7Η20 0.2g, MnSO4.H2O 0.05g, CaC0320.0g，蒸馏水 1.0L, pH6.8。经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0009]B 菌-德氏乳杆菌保加利亚亚种 CICC20244(Lac tobacillus delbrueckii
subsp.bulgaricus),培养基为:酪蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠 5.0g，柠檬酸二铵 2.0g, Tween 801.0g, K2HP042.0g, MgSO4.7Η20 0.2g，MnSO4.H2O0.05g, CaC0320.0g，蒸馏水 1.0L, pH6.8，经 121°C灭菌 20 分钟冷却至 30°C备用。
[0010]C 菌-嗜热链球菌 CICC6217 (Streptococcus thermophilus)培养基为:膜蛋白胨15g,大豆蛋白5g, NaCl 5g,蒸懼水1.0L, 121°C湿热灭菌15min,冷却到约50°C,无菌条件下，添加5%去纤维蛋白的羊血，轻轻混匀，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0011]D菌-乳酸乳球菌乳亚种 CICC20399 (Lactococcus lac tis subsp.1ac tis)培养基为:酵母膏7.5g，葡萄糖10.0g,番茄汁10mL,蛋白胨7.5g，KH2P042.0g,吐温800.5mL,蒸馏水900mL，pH7.0，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0012]2.复合乳酸菌菌直投式发酵剂的制备过程
[0013]2.1原菌种活化
[0014]分别量取0.9%的生理盐水1mL于4只试管内，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C，将4株乳酸菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在30°C恒温箱中静止活化30分钟，备用。
[0015]2.2乳酸菌扩大培养
[0016]2.2.1母发酵剂的制备
[0017]分别量取4株乳酸菌培养基各200mL于4只500mL三角瓶内，121°C灭菌20分钟冷却至30°C，按培养基体积的10%接种2.1步骤中已经活化的菌种，在37°C厌氧箱内静止培养24小时，作为母发酵剂。
[0018]2.2.2生产发酵剂的制备
[0019]首先配制质量百分比浓度为10 %的脱脂奶乳浊液，分装于4只500mL三角瓶内，每瓶200mL，121°C灭菌20分钟冷却至37°C，分别按2%体积比例接种母发酵剂，37°C厌氧培养24——28小时，检测4株乳酸菌发酵液活菌数，各发酵液活菌数> 19个/mL，视同为发酵成熟，如果活菌数< 19个/mL，继续培养，直至达到19个/mL。
[0020]2.3粉末冻干菌种的制备
[0021]将成熟的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度低于1cm，加盖瓶塞后放入-30°C冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘乘装，放入冻干机进行冷冻干燥，制备粉末冻干菌种。
[0022]2.4复合乳酸菌直投式发酵剂的制备
[0023]按各粉末冻干菌种重量，取A菌粉末3-5份，B菌粉末2_3份，C菌粉末1_2份，D菌粉末2-4份，充分混匀后制成复合乳酸菌直投式发酵剂，复合乳酸菌直投式发酵剂的添加量为发酵物料重量的0.01 %。
[0024]需要进一步说明的是:本发明中选用的乳酸菌购于中国工业微生物菌种保藏管理中心，这些乳酸菌的活化、冻干方法不仅仅限于本发明所述的具体方法，培养基的成分也不限于此，其它常规技术和方法都是可以的，只要可以提高菌种的活力、并将其制备成冻干粉状而方便使用即可。
[0025]3.复合乳酸菌发酵花生乳的制备
[0026]3.1)烘烤:将花生仁放在烤箱内于150_160°C烘烤45_60分钟，取出冷却；
[0027]3.2)制浆:称取烘烤后的花生仁，用其重量2-4倍的水，水温40_70°C浸泡12_16小时，然后用磨浆机磨浆制得花生浆；
[0028]3.3)配料:按步骤3.2)制得的花生浆重量的5%添加白砂糖；
[0029]3.4)均质:将步骤3.3)制成的花生浆经过50_60MPa均质两个循环；
[0030]3.5)杀囷:将均质后的花生衆经过142 C，3秒瞬时超闻温杀囷处理；
[0031]3.6)发酵:按步骤3.5)获得的花生浆重量的0.01%添加步骤2.4)制备的复合乳酸菌直投式发酵剂，充分溶解后，37°C保温静止发酵8小时；
[0032]3.7)均质:将步骤3.6)制得的发酵花生乳经过75_80MPa均质两个循环；
[0033]3.8)灌装:将步骤3.7)均质后的发酵花生乳经-0.04-0.0Smpa真空脱气后无菌灌装，即得成品。
[0034]采用本发明制备的发酵花生乳，富含活性乳酸菌、功能性小分子蛋白肽，更容易被肠道吸收，饮用后具有调节免疫、延缓衰老、降血压、抗过敏等多种功能。
(四)
【具体实施方式】
[0035]下面结合具体实施例对本发明作更详细的描述:
[0036]实施例一:
[0037]本发明的产品采用这样的方法来制备的:
[0038]1.乳酸菌的选择及培养基的制备
[0039]A菌-副干酿乳杆菌CICC20246 (Lactobacillus paracasei,培养基为:酿蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠5.0g,梓檬酸二铵2.0g, Tween801.0g, Κ2ΗΡ042.0g, MgSO4.7Η20 0.2g, MnSO4.H2O 0.05g, CaC0320.0g，蒸馏水 1.0L, pH6.8。经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0040]B 菌-德氏乳杆菌保加利亚亚种 CICC20244(Lac tobacillus delbrueckii
subsp.bulgaricus),培养基为:酪蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠 5.0g，柠檬酸二铵 2.0g, Tween 801.0g, K2HP042.0g, MgSO4.7Η20 0.2g，MnSO4.H2O0.05g, CaC0320.0g，蒸馏水 1.0L, pH6.8，经 121°C灭菌 20 分钟冷却至 30°C备用。
[0041]C 菌-嗜热链球菌 CICC6217 (Streptococcus thermophilus)培养基为:膜蛋白胨15g,大豆蛋白5g, NaCl 5g,蒸懼水1.0L, 121°C湿热灭菌15min,冷却到约50°C,无菌条件下，添加5%去纤维蛋白的羊血，轻轻混匀，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0042]D菌-乳酸乳球菌乳亚种 CICC20399 (Lactococcus lactis subsp.1actis)培养基为:酵母膏7.5g，葡萄糖10.0g,番茄汁10mL,蛋白胨7.5g，KH2P042.0g,吐温800.5mL,蒸馏水900mL，pH7.0，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0043]2.复合乳酸菌菌直投式发酵剂的制备过程
[0044]2.1原菌种活化
[0045]分别量取0.9%的生理盐水1mL于4只试管内，经121 °C灭菌20分钟冷却至30°C，将4株乳酸菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在30°C恒温箱中静止活化30分钟，备用。
[0046]2.2乳酸菌扩大培养
[0047]2.2.1母发酵剂的制备
[0048]分别量取4株乳酸菌培养基各200mL于4只500mL三角瓶内，121°C灭菌20分钟冷却至30°C，按培养基体积的10%接种2.1步骤中已经活化的菌种，在37°C厌氧箱内静止培养24小时，作为母发酵剂。
[0049]2.2.2生产发酵剂的制备
[0050]首先配制质量百分比浓度为10 %的脱脂奶乳浊液，分装于4只500mL三角瓶内，每瓶200mL，121°C灭菌20分钟冷却至37°C，分别按2 %体积比例接种母发酵剂，37°C厌氧培养24——28小时，检测4株乳酸菌发酵液活菌数，各发酵液活菌数> 19个/mL，视同为发酵成熟，如果活菌数< 19个/mL，继续培养，直至达到19个/mL。
[0051]2.3粉末冻干菌种的制备
[0052]将成熟的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度低于1cm，加盖瓶塞后放入-30°C冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘乘装，放入冻干机进行冷冻干燥，制备粉末冻干菌种。
[0053]2.4复合乳酸菌直投式发酵剂的制备
[0054]按各粉末冻干菌种重量，取A菌粉末3份，B菌粉末2份，C菌粉末I份，D菌粉末2份，充分混匀后制成复合乳酸菌直投式发酵剂，复合乳酸菌直投式发酵剂的添加量为发酵物料重量的0.01%。
[0055]3.复合乳酸菌发酵花生乳的制备
[0056]3.1)烘烤:将花生仁放在烤箱内于150_160°C烘烤45_60分钟，取出冷却；
[0057]3.2)制浆:称取烘烤后的花生仁，用其重量2-4倍的水，水温40_70°C浸泡12_16小时，然后用磨浆机磨浆制得花生浆；
[0058]3.3)配料:按步骤3.2)制得的花生浆重量的5%添加白砂糖；
[0059]3.4)均质:将步骤3.3)制成的花生浆经过50_60MPa均质两个循环；
[0060]3.5)杀囷:将均质后的花生衆经过142 C，3秒瞬时超闻温杀囷处理；
[0061]3.6)发酵:按步骤3.5)获得的花生浆重量的0.01%添加步骤2.4)制备的复合乳酸菌直投式发酵剂，充分溶解后，37°C保温静止发酵8小时；
[0062]3.7)均质:将步骤3.6)制得的发酵花生乳经过75_80MPa均质两个循环；
[0063]3.8)灌装:将步骤3.7)均质后的发酵花生乳经-0.04-0.0Smpa真空脱气后无菌灌装，即得成品。
[0064]实施例二:
[0065]本发明的产品采用这样的方法来制备的:
[0066]1.乳酸菌的选择及培养基的制备
[0067]A菌-副干酿乳杆菌CICC20246 (Lactobacillus paracasei,培养基为:酿蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠5.0g,梓檬酸二铵2.0g, Tween801.0g, Κ2ΗΡ042.0g, MgSO4.7Η20 0.2g, MnSO4.H2O 0.05g, CaC0320.0g，蒸馏水 1.0L, pH6.8。经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0068]B 菌-德氏乳杆菌保加利亚亚种 CICC20244(Lactobacillus delbrueckii
subsp.bulgaricus),培养基为:酪蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠 5.0g，柠檬酸二铵 2.0g, Tween 801.0g, K2HP042.0g, MgSO4.7Η20 0.2g，MnSO4.H2O0.05g, CaC0320.0g，蒸馏水 1.0L, pH6.8，经 121°C灭菌 20 分钟冷却至 30°C备用。
[0069]C 菌-嗜热链球菌 CICC6217 (Streptococcus thermophilus)培养基为:膜蛋白胨15g,大豆蛋白5g, NaCl 5g,蒸懼水1.0L, 121°C湿热灭菌15min,冷却到约50°C,无菌条件下，添加5%去纤维蛋白的羊血，轻轻混匀，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0070]D菌-乳酸乳球菌乳亚种CICC20399(Lactococcus lactis subsp.lactis)培养基为:酵母膏7.5g，葡萄糖10.0g,番茄汁10mL,蛋白胨7.5g，KH2P042.0g,吐温800.5mL,蒸馏水900mL，pH7.0，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。
[0071]2.复合乳酸菌菌直投式发酵剂的制备过程
[0072]2.1原菌种活化
[0073]分别量取0.9%的生理盐水1mL于4只试管内，经121 °C灭菌20分钟冷却至30°C，将4株乳酸菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在30°C恒温箱中静止活化30分钟，备用。
[0074]2.2乳酸菌扩大培养
[0075]2.2.1母发酵剂的制备
[0076]分别量取4株乳酸菌培养基各200mL于4只500mL三角瓶内，121°C灭菌20分钟冷却至30°C，按培养基体积的10%接种2.1步骤中已经活化的菌种，在37°C厌氧箱内静止培养24小时，作为母发酵剂。
[0077]2.2.2生产发酵剂的制备
[0078]首先配制质量百分比浓度为10 %的脱脂奶乳浊液，分装于4只500mL三角瓶内，每瓶200mL，121°C灭菌20分钟冷却至37°C，分别按2 %体积比例接种母发酵剂，37°C厌氧培养24——28小时，检测4株乳酸菌发酵液活菌数，各发酵液活菌数> 19个/mL，视同为发酵成熟，如果活菌数< 19个/mL，继续培养，直至达到19个/mL。
[0079]2.3粉末冻干菌种的制备
[0080]将成熟的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度低于1cm，加盖瓶塞后放入-30°C冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘乘装，放入冻干机进行冷冻干燥，制备粉末冻干菌种。
[0081]2.4复合乳酸菌直投式发酵剂的制备
[0082]按各粉末冻干菌种重量，取A菌粉末5份，B菌粉末3份，C菌粉末2份，D菌粉末4份，充分混匀后制成复合乳酸菌直投式发酵剂，复合乳酸菌直投式发酵剂的添加量为发酵物料重量的0.01%。
[0083]3.复合乳酸菌发酵花生乳的制备
[0084]3.1)烘烤:将花生仁放在烤箱内于150_160°C烘烤45_60分钟，取出冷却；
[0085]3.2)制浆:称取烘烤后的花生仁，用其重量2-4倍的水，水温40_70°C浸泡12_16小时，然后用磨浆机磨浆制得花生浆；
[0086]3.3)配料:按步骤3.2)制得的花生浆重量的5%添加白砂糖；
[0087]3.4)均质:将步骤3.3)制成的花生浆经过50_60MPa均质两个循环；
[0088]3.5)杀囷:将均质后的花生衆经过142 C，3秒瞬时超闻温杀囷处理；
[0089]3.6)发酵:按步骤3.5)获得的花生浆重量的0.01%添加步骤2.4)制备的复合乳酸菌直投式发酵剂，充分溶解后，37°C保温静止发酵8小时；
[0090]3.7)均质:将步骤3.6)制得的发酵花生乳经过75_80MPa均质两个循环；
[0091]3.8)灌装:将步骤3.7)均质后的发酵花生乳经-0.04-0.0Smpa真空脱气后无菌灌装，即得成品。
【权利要求】
1.一种复合乳酸菌发酵花生乳的制备方法，其特征在于它是按以下步骤进行制备: .1).乳酸菌的选择及培养基的制备 A菌-副干酿乳杆菌CICC20246 (Lactobacillus paracasei),培养基为:酿蛋白腺10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠5.0g,梓檬酸二铵2.0g, Tween 801.0g，K2HPO4 2.0g，MgSO4.7H20 0.2g, MnSO4.H2O 0.05g，CaC0320.0g，蒸馏水 1.0L，pH6.8。经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。 B 菌-德氏乳杆菌保加利亚亚种 CICC20244(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus),培养基为:酪蛋白胨10.0g,牛肉膏10.0g,酵母粉5.0g,葡萄糖5.0g,乙酸钠5.0g，柠檬酸二铵 2.0g, Tween 80 1.0g, K2HPO4 2.0g, MgSO4.7H20 0.2g, MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g，蒸馏水1.0L, ρΗ6.8，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。 C菌-嗜热链球菌CICC6217 (Streptococcus thermophilus)培养基为:膜蛋白腺15g，大豆蛋白5g，NaCl 5g，蒸馏水1.0L，121°C湿热灭菌15min，冷却到约50°C，无菌条件下，添加5%去纤维蛋白的羊血，轻轻混匀，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。 D 菌-乳酸乳球菌乳亚种 CICC20399 (Lactococcus lactis subsp.1actis)培养基为:酵母膏7.5g，葡萄糖10.0g，番茄汁lOOmL，蛋白胨7.5g，KH2P04 2.0g，吐温80 0.5mL，蒸馏水900mL，pH7.0，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C备用。 .2).复合乳酸菌菌直投式发酵剂的制备过程 .2.1)原菌种活化 分别量取0.9%的生理盐水1mL于4只试管内，经121°C灭菌20分钟冷却至30°C，将4株乳酸菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9%的生理盐水中，震荡使其溶解，在30°C恒温箱中静止活化30分钟，备用。 .2.2)乳酸菌扩大培养 . 2.2.1)母发酵剂的制备 分别量取4株乳酸菌培养基各200mL于4只500mL三角瓶内，121 °C灭菌20分钟冷却至30°C，按培养基体积的10%接种2.1步骤中已经活化的菌种，在37°C厌氧箱内静止培养24小时，作为母发酵剂。 .2.2.2)生产发酵剂的制备 首先配制质量百分比浓度为10%的脱脂奶乳浊液，分装于4只500mL三角瓶内，每瓶200mL, 121°C灭菌20分钟冷却至37°C，分别按2%体积比例接种母发酵剂，37°C厌氧培养24—28小时，检测4株乳酸菌发酵液活菌数，各发酵液活菌数> 19个/mL，视同为发酵成熟，如果活菌数< 19个/mL，继续培养，直至达到19个/mL。 .2.3)粉末冻干菌种的制备 将成熟的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度低于1cm，加盖瓶塞后放入-30°C冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘乘装，放入冻干机进行冷冻干燥，制备粉末冻干菌种。 .2.4)复合乳酸菌直投式发酵剂的制备 按各粉末冻干菌种重量，取A菌粉末3-5份，B菌粉末2-3份，C菌粉末1-2份，D菌粉末2-4份，充分混匀后制成复合乳酸菌直投式发酵剂，复合乳酸菌直投式发酵剂的添加量为发酵物料重量的0.01%。 . 3).复合乳酸菌发酵花生乳的制备 . 3.1)烘烤:将花生仁放在烤箱内于150-160°C烘烤45-60分钟，取出冷却； .3.2)制浆:称取烘烤后的花生仁，用其重量2-4倍的水，水温40-70°C浸泡12-16小时，然后用磨浆机磨浆制得花生浆； . 3.3)配料:按步骤3.2)制得的花生浆重量的5%添加白砂糖； .3.4)均质:将步骤3.3)制成的花生浆经过50-60MPa均质两个循环； .3.5)杀菌:将均质后的花生浆经过142°C，3秒瞬时超高温杀菌处理； .3.6)发酵:按步骤3.5)获得的花生浆重量的0.01%添加步骤2.4)制备的复合乳酸菌直投式发酵剂，充分溶解后，37°C保温静止发酵8小时； .3.7)均质:将步骤3.6)制得的发酵花生乳经过75-80MPa均质两个循环； . 3.8)灌装:将步骤3.7)均质后的发酵花生乳经-0.04-0.0Smpa真空脱气后无菌灌装，即得成品。
【文档编号】A23C9/13GK104351339SQ201410679728
【公开日】2015年2月18日 申请日期:2014年11月25日 优先权日:2014年11月25日
【发明者】宋太坤, 李晓琴, 李巍, 郭晨, 佟晓芳, 李东刚, 陈成, 陈丹 申请人:辽宁兴坤饮品有限公司