一种提高鱼类免疫力的中药微生物发酵制剂及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种提高鱼类免疫力的中药微生物发酵制剂及其制备方法和用途。
【背景技术】
[0002] 由于环境保护意识不强，中国许多水质都遭到污染，需要有效治疗，改善水质。目 前大多采用包括网栏、沉淀、过滤、工程性措施等物理方法，只能清除一些可见的悬浮物 (粪便、残饵等）。药物消毒等化学方法可以有效去除部分有害物质，但如果处理操作不当， 很可能会出现药物的毒、副作用与耐药性的产生，需要寻找副作用小的改善水质的药剂。
[0003] 另一方面，由于水质遭到污染，许多鱼类的生存现状堪忧，提高鱼类免疫力非常紧 迫。目前常用的是在饲料中添加部分糖类物质或者几种灭活疫苗等措施，但是，饲料添加剂 使用不当，造成水体内饲料过剩，会污染养殖水体；部分灭活疫苗的研制，耗时长，造价高， 且对水产动物的生长存在一定的风险，需要寻找副作用小的提高鱼类免疫力的药剂。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种提高副作用小的鱼类免疫力的中药微生物发酵制剂 及其制备方法和用途。
[0005] 本发明提高鱼类免疫力的中药微生物发酵制剂，它是以中药为原料，经益生菌发 酵制备而成，其中，所述中药包括如下重量配比的组分：枸杞子13~20份、甘草3-10、五倍 子13~40份、黄芪6~10份。
[0006] 优选地，所述中药包括如下重量配比的组分：枸杞子14~17份、甘草4-6、五倍子 14~36份、黄芪6~7份。
[0007] 其中，所述益生菌的用量为中药重量的1~3%。
[0008] 所述益生菌包括如下重量配比的组分：嗜酸乳杆菌1~3份，唾液乳杆菌1~3 份，枯草芽孢杆菌1~3份，短小芽孢杆菌1~3份。优选地，所述益生菌包括如下重量 配比的组分：嗜酸乳杆菌0. 063~0. 09份，唾液乳杆菌0. 010~0. 030份，枯草芽孢杆菌 0· 021~0· 077份，短小芽孢杆菌0· 010~0· 053份。
[0009] 其中，所述益生菌包括如下重量份的组分：嗜酸乳杆菌0. 063~0. 09份，唾液乳 杆菌0. 010~0. 030份，枯草芽孢杆菌0. 021~0. 077份，短小芽孢杆菌0. 010~0. 053 份。
[0010] 它是由如下方法制备得到：
[0011] (1)按配比称取中药和益生菌；
[0012] (2)原料处理：将中药粉碎，加入中药重量35%的麦麸和7~10倍重量的水，混 匀，50~70°C恒温水浴lOmin，用7层纱布或者8层纱布过滤，得滤渣；
[0013] (3)制备菌悬液：在益生菌中加入3倍重量的水，混匀，得菌悬液；
[0014] (4)发酵：将步骤⑵的滤渣与步骤⑶的菌悬液混勾，密封，在37°C条件下培养 24h〇
[0015] 其中，所述剂型固体制剂或者液体制剂。优选地，所述固体制剂为散剂。
[0016] 本发明提高鱼类免疫力的中药微生物发酵制剂的制备方法，它包括如下操作步 骤：
[0017] (1)按配比称取中药和益生菌；
[0018] (2)原料处理：将中药粉碎，加入中药重量35%的麦麸和7~10倍重量的水，混 匀，50~70°C恒温水浴lOmin，用7层纱布或者8层纱布过滤，得滤渣；
[0019] (3)制备菌悬液：在益生菌中加入3倍重量的水，混匀，得菌悬液；
[0020] (4)发酵：将步骤⑵的滤渣与步骤⑶的菌悬液混勾，密封，在37°C条件下培养 24h〇
[0021] 本发明还提供了前述中药微生物发酵制剂在制备提高鱼类免疫力的药品中的用 途。
[0022] 本发明还提供了前述中药微生物发酵制剂在制备改善水质的药品或者日化用品 中的用途。
[0023] 本发明中药微生物发酵制剂可以提高鱼类免疫力。
[0024] 综上，本发明中药微生物发酵剂可以改善水质，同时能够提高鱼体免疫力，促进水 产动物健康成长，且本发明中药微生物发酵剂的主要成分是嗜酸乳杆菌等益生菌和中药， 副作用小，临床应用前景良好。
[0025] 以下结合附图和实施例的【具体实施方式】再对本发明的上述内容作进一步的详细 说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述 技术思想情况下，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更，均应包括 在本发明的范围内。
【附图说明】
[0026] 图1鲤鱼水池氨氮含量的变化情况
[0027] 图2鲤鱼水池亚硝酸盐变化情况
[0028] 图3鲤鱼水池溶解氧含量的变化情况
[0029] 图4鲤鱼水池硫化物含量的变化情况
[0030] 图5鲤鱼水池 pH值变化情况
【具体实施方式】
[0031] 实施例1本发明中药微生物发酵制剂的制备
[0032] I. 1材料及仪器
[0033] 中草药：枸杞子17份，甘草4份，五倍子36份，黄苗7份，均重约为2. 5g ;麦 麸2. 9g，蒸馏水92. 3g，益生菌：嗜酸乳杆菌0. 063g，唾液乳杆菌0. 030g，枯草芽孢杆菌 0.077g，短小芽孢杆菌0.053g。植物粉碎机，水浴锅，恒温培养箱。
[0034] 1. 2.方法
[0035] 将四种中草药70°C烘干4h，混合后用植物粉碎机粉碎，倒入锥形瓶，加入35%混 合中草药重量麦麸约2. 9g和7倍中草药与麦麸混合重量蒸馏水约92. 3g，混合均匀，70°C恒 温水浴lOmin，再用8层纱布过滤除去43g的蒸馏水。将四种益生菌分别混合入一个EP管 里，加入3倍益生菌重量的双蒸水约0. 6g，制成菌悬液。将菌悬液加入装有中草药的锥形瓶 中，用封口膜封住瓶口，再盖上棉塞，置恒温培养箱内37°C恒温培养24h，每隔4h将锥形瓶 置于37 °C水浴锅内轻摇Imin。
[0036] 以下通过试验例具体说明本发明的有益效果
[0037] 实验例1本发明中药微生物发酵制剂在鲤鱼养殖中的应用
[0038] 复方制剂：实施例1制备的中药微生物发酵剂。
[0039] 一、实验方法
[0040] 1. 1试验设计与饲养管理
[0041] 试验共设计4个处理对照组、A组（复方发酵制剂组）、B组（温和气单胞菌加复 方发酵制剂组）、c组（温和气单胞菌组），试验鱼均重为50g的鲤鱼60尾，随机分成四组， 放入4个不同处理的水族箱（0. 68mX0. 48mX0. 35m)中，有效体积为114L。试验前水池充 分曝气除碌7d，鲤鱼饲料驯化7d，正式试验从2014年11月6日开始，共31d。每天投喂3 次，时间为8:30、13:30、18:30，连续投喂16(1，第16-25(1之内不投喂，第26日投喂1(1，后期 均不投喂益生菌。按照复方制剂筛选时用药剂量比例，设置投菌量为16X106个/ml。试验 期间，平均水温（20±2)，每隔3d换1/3水，不吸污，除测定水样的2h前不充气外，其他时间 连续充氧。
[0042] 1 · 2水样的收集和分析
[0043] 分别在试验的5、8、12、14、16、26、31d的下午18 :00定点0. 25m水深处采取水样， 每次采集水样地点相同。取水样前2h停止充气，且将养殖水体充分混合均匀。采集水样 200ml，于4000r/min，离心5min，取上清液。采用pH-3C酸度计测定养殖水体中的pH值； 采用碘量法测定水体中溶氧含量；采用水杨酸法测定水体中氨氮含量；采用重氮-偶合法 测定水体中亚硝酸盐含量；采用DH)法测定水体中的硫化物含量。
[0044] 1. 3鲤鱼血清生理生化指标的测定
[0045] 试验第5、12、16、26、31天测定鲤鱼各种免疫指标。每次从每组挑选体重均匀的 6尾鱼，用1.0 ml注射器尾静脉取血，室温静置2h，待其凝血后用冷冻离心机4°C，4000rpm 离心10min，分离血清，将血清分为3份，0. 2ml用于测定碱性磷酸酶（AKP)、酸性磷酸酶 (ACP)、总超氧化物歧化酶（T-SOD)、过氧化氢酶（CAT)、总抗氧化能力（T-AOC)。
[0046] 采用试剂盒测定鲤鱼血清AKP、ACP、T-SOD、CAT、T-AOC活性。
[0047] 1. 4统计分析
[0048] 试验数据采用SPSS17. O软件进行单因子方差（ANOVA)分析，并用Duncan进行组 间多重比较，结果均以平均数土标准差表示，显著性差异为0. 05。
[0049] 二、实验结果
[0050] 1对水质的影响
[0051] 1. 1鲤鱼水池氨氮含量的变化情况
[0052] 表1鲤鱼水池氨氮含量的变化情
[0053]
【主权项】
1. 一种提高鱼类免疫力的中药微生物发酵制剂，其特征在于：它是以中药为原料，经 益生菌发酵制备而成，其中，所述中药包括如下重量配比的组分：枸杞子14~17份、甘草 4-6、五倍子14~36份、黄苗6~7份。
2. 根据权利要求1所述的制剂，其特征在于：所述益生菌的用量为中药重量的1~
3. 根据权利要求2所述的制剂，其特征在于：所述益生菌包括如下重量配比的组分：嗜 酸乳杆菌0. 06~0. 10g，唾液乳杆菌0.0 l~0. 04g,枯草芽孢杆菌0. 02~0. 08g,短小芽 抱杆菌〇? 01~〇? 06g。
4. 根据权利要求3所述的制剂，其特征在于：所述益生菌包括如下重量配比的组分：嗜 酸乳杆菌0. 063~0. 09份，唾液乳杆菌0. 010~0. 030份，枯草芽孢杆菌0. 021~0. 077 份，短小芽孢杆菌0. 010~0. 053份。
5. 根据权利要求1~4任意一项所述的制剂，其特征在于：它是由如下方法制备得到： (1) 按配比称取中药和益生菌； (2) 原料处理：将中药粉碎，加入中药重量35%的麦麸和7~10倍重量的水，混匀， 50~70°C恒温水浴lOmin，用7层纱布或者8层纱布过滤，得滤渣； (3) 制备菌悬液：在益生菌中加入3倍重量的水，混匀，得菌悬液； ⑷发酵：将步骤⑵的滤渣与步骤⑶的菌悬液混勾，密封，在37°C条件下培养24h。
6. 根据权利要求1~5任意一项所述的保健品或药物组合物，其特征在于：所述剂型 固体制剂或者液体制剂。
7. 根据权利要求6所述的保健品或药物组合物，其特征在于：所述固体制剂为散剂。
8. 权利要求1~7任意一项所述提高鱼类免疫力的中药微生物发酵制剂的制备方法， 其特征在于：它包括如下操作步骤： (1) 按配比称取中药和益生菌； (2) 原料处理：将中药粉碎，加入中药重量35%的麦麸和7~10倍重量的水，混匀， 50~70°C恒温水浴lOmin，用7层纱布或者8层纱布过滤，得滤渣； (3) 制备菌悬液：在益生菌中加入3倍重量的水，混匀，得菌悬液； ⑷发酵：将步骤⑵的滤渣与步骤⑶的菌悬液混勾，密封，在37°C条件下培养24h。
9. 权利要求1~8任意一项所述中药微生物发酵制剂在制备提高鱼类免疫力的药品中 的用途。
10. 权利要求1~8任意一项所述中药微生物发酵制剂在制备改善水质的药品或者日 化用品中的用途。
【专利摘要】本发明提供了一种提高鱼类免疫力的中药微生物发酵制剂，它是以中药为原料，经益生菌发酵制备而成，其中，所述中药包括如下重量配比的组分：枸杞子14～17份、甘草4-6、五倍子14～36份、黄芪6～7份。本发明中药微生物发酵剂可以改善水质，同时能够提高鱼体免疫力，促进水产动物健康成长，且本发明中药微生物发酵剂的主要成分是嗜酸乳杆菌等益生菌和中药，副作用小，临床应用前景良好。
【IPC分类】A61P37-04, A23K1-00, A61K8-99, A61K35-747, A61K35-64, A61K35-742, A61K8-97, A23K1-14, A61K36-815, A23K1-18, A61K8-98
【公开号】CN104855703
【申请号】CN201510185496
【发明人】王利, 李雪峰
【申请人】西南民族大学
【公开日】2015年8月26日
【申请日】2015年4月17日