一种混菌固态发酵海参饵料的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及微生物发酵技术，特别是设及一种混合几种有益菌固态发酵制备海参 发酵巧料的方法。
【背景技术】
[0002] 近年来，刺参养殖业在我国北方沿海各地迅猛发展，具有巨大的市场潜力，并逐渐 成为我国海水养殖的重要产业之一，取得了显著的经济效益和社会效益。在传统养殖过程 中，为了降低饲料中微生物的携带量或提高疾病治疗的效果，养殖户往往在饲料中添加抗 生素，大量抗生素的使用不仅使刺参本身的免疫力下降、诱导致病菌产生耐药性，而且还带 来了药物残留等严重问题，危害到食品安全和人类健康。
【发明内容】
[0003] 为了解决上述问题，本发明提供一种混菌包括酿酒酵母、芽抱杆菌和乳酸菌固态 发酵制备海参发酵巧料的方法，本方法饲料在经过有益微生物（乳酸菌、酵母菌和芽抱杆 菌等）发酵处理后，原料中的抗营养因子被分解或转化，产生易被养殖动物采食、消化、吸 收且无毒害作用的小分子营养物质。并且，饲料经益生菌发酵后含有更多的活性益生菌菌 体、各种酶、各级代谢产物、多种维生素、蛋白质分解产物、活性小肤、氨基酸、抑菌物质、免 疫增强因子、促生长因子等，起到促进生长、维持动物肠道菌群平衡的作用。因此，发酵饲料 是一种生态健康型饲料。固态发酵是微生物在没有或基本没有游离水的固态基质上的发酵 方式，具有水分活度低，基质水不溶性高，微生物易生长，酶活力高，酶系丰富；发酵过程粗 放，不需严格无菌条件；设备构造简单、投资少、能耗低、易操作；后处理简便、污染少，基本 无废水排放等优点，对海参的健康和绿色养殖起着重要的推动作用。
[0004] 本发明通过W下技术方案实现： 阳〇化]一种混菌固态发酵制备海参发酵巧料的方法，包括W下步骤：
[0006] 步骤a.制备发酵菌：分别用YTO培养基、肉汤培养基和MRS培养基液态培养 酿酒酵母、芽抱杆菌和乳酸菌；培养结束后酿酒酵母、芽抱杆菌、乳酸菌菌液菌数均达到 l〇S-l〇9c化/mL;所述芽抱杆菌来源于海参肠道中；
[0007] 步骤b.配制海参巧料：按照重量百分比计由W下原料组成，马尾藻粉20%、海青 粉20%、发酵豆巧4%、鱼粉3%、邮粉4%、扇贝边粉2%、脱胶海带粉32%、玉米粉6%、破 壁啤酒酵母粉5%、预混料4%，采用上述配方配制海参巧料，混合均匀；
[0008] 步骤C.接种：步骤a制备的发酵菌总量按照巧料重3~5%的比例添加到步骤b 制备的巧料中；
[0009] 步骤d.加水：使步骤C得到的巧料的含水量达到40~45 %，混合均匀，达到手握 成团，落地松散的程度；
[0010] 步骤e.装袋密封：将步骤d得到的海参巧料放入包装袋中密封；
[0011] 步骤f.发酵：25~30°C发酵6-8天，期间每天翻转一次密封包装袋。
[0012] 其中，步骤a中采用的芽抱杆菌能产生高活性淀粉酶。
[0013] 进一步地，在上述技术方案中，步骤a中采用乳酸菌为干酪乳酸菌。
[0014] 进一步地，在上述技术方案中，酿酒酵母优选菌株号为CGMCC2. 4。
[0015] 进一步地，在上述技术方案中，芽胞杆菌优选菌株号为MCCC1A00791。
[0016] 进一步地，在上述技术方案中，干酪乳杆菌优选菌株号为CICC6244。
[0017] 进一步地，在上述技术方案中，肉汤培养基优选LB肉汤培养基。
[0018] 进一步地，在上述技术方案中，所述预混料优选由按重量份数由W下原料组成：维 生素A、0. 25份；维生素D3、0. 05份；维生素E、l. 13份；维生素K3、0. 20份；维生素B1、0. 13 份；维生素B2、0. 22份；维生素B6、0. 16份；维生素B12、0. 04份；烟酸、0. 68份；泛酸、0. 39 份；叶酸、0. 05份；生物素、0. 08份；维生素C、3. 13份；氯化胆碱、75. 00份；肌醇、1. 50份； 无水硫酸铜、0. 60份；一水硫酸亚铁、4. 75份；一水硫酸儘、2. 38份；一水硫酸锋、4. 25份； 舰酸巧、1. 75份；氯化钻、0. 78份；亚砸酸钢、0. 19份；赖氨酸、25. 00份；抗氧化剂、2. 50份； 沸石粉、159. 83份；憐酸氨巧、125. 00份；稻壳粉、90. 00份。
[0019] 进一步地，在上述技术方案中，步骤C中发酵菌中酿酒酵母：芽抱杆菌：乳酸菌菌 液的质量比例为1:2:2。
[0020] 进一步地，在上述技术方案中，步骤e中密封包装袋为带有单项排气阀的包装袋。
[0021] 发明有益效果
[0022] 1、本发明采用微生物发酵技术，接种酿酒酵母、芽抱杆菌和乳酸菌通过固态发酵 的形式制备海参发酵巧料，提高了海参巧料的消化利用率和海参的生长性能；
[0023] 2、芽抱杆菌能分泌各种胞外酶W分解蛋白质、脂肪、碳水化合物等大分子物质，使 发酵产品中含有氨基酸、有机酸、寡聚糖等多种被人体吸收的成分，而且该菌株分泌的淀粉 酶显著高于其他芽抱杆菌分泌的淀粉酶活性，因而其具有更好的发酵效果；
[0024] 3、本发明生产工艺简单易于操作，生产原料来源广泛、成本低易于推广，生产周期 短，产品质量好，易于应用和推广；
[0025] 4、该产品在海参养殖中应用后，可提高海参成活率和生长性能、可改善养殖池水 体的生态环境、净化水质，是一种理想的、优质海参用微生物发酵巧料。
【具体实施方式】
[00%] 下述非限制性实施例可W使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明， 但不W任何方式限制本发明。其中，酿酒酵母菌株号为CGMCC2.4;芽胞杆菌菌株号为MCCC1A00791 ;干酪乳杆菌菌株号为CICC6244。预混料按重量份数由W下原料组成：维生素 A、0. 25份；维生素D3、0. 05份；维生素E、1. 13份；维生素K3、0. 20份；维生素B1、0. 13份； 维生素B2、0. 22份；维生素B6、0. 16份；维生素B12、0. 04份；烟酸、0. 68份；泛酸、0. 39份； 叶酸、0. 05份；生物素、0. 08份；维生素C、3. 13份；氯化胆碱、75. 00份；肌醇、1. 50份；无水 硫酸铜、0. 60份；一水硫酸亚铁、4. 75份；一水硫酸儘、2. 38份；一水硫酸锋、4. 25份；舰酸 巧、1. 75份；氯化钻、0. 78份；亚砸酸钢、0. 19份；赖氨酸、25. 00份；抗氧化剂、2. 50份；沸 石粉、159. 83份；憐酸氨巧、125. 00份；稻壳粉、90. 00份。 阳〇27] 实施例1
[0028] 步骤a、制备发酵菌：用YTO培养基30°C培养酿酒酵母24h;LB肉汤培养基30°C培 养芽抱杆菌24h;MRS培养基37°C培养乳酸菌48h。培养结束后酿酒酵母菌数为108c化/mL， 芽抱杆菌菌数为5X108c化/mU乳酸菌菌数为2X108c化/mL;
[0029] 其中YTO培养基、肉汤培养基和MRS培养基配方如下：
[0030] YPD培养基：葡萄糖20g，蛋白腺20g，酵母膏lOg，蒸馈水lOOOmL，自然抑。
[00川 LB肉汤培养基：膜蛋白腺lOg，酵母浸粉5g，氯化钢lOg，蒸馈水lOOOmL，pH 6. 9 + 0. 1。 阳03引 MRS乳酸培养基：葡萄糖20g，蛋白腺lOg，牛肉膏lOg，酵母