共生培养制备富含虾青素的饲料添加剂的方法_2

文档序号:9849687阅读:来源:国知局
骤如下:
[0052] a、将红发夫酵母接种于活化培养基I中,20°C活化培养24h,制得活化红发夫酵母;
[0053] b、将步骤a制得的活化红发夫酵母接种于摇瓶培养基I中,在20 °C、200r/min条件 下,培养24h,制得红发夫酵母一级种子;
[0054] c、将步骤b制得的红发夫酵母一级种子按5%的体积百分含量接种于种子培养基I 中,调节通气量为0.5vvm,通气搅拌速度为150rpm、温度为25°C培养24h,制得红发夫酵母的 种子液。经检测,菌体浓度为2.5 X 108个/ml。
[0055]进一步优选的,所述活化培养基I每升组分如下:
[0056] 葡萄糖20g,蛋白胨10g,海水晶5g,磷酸氢二钾0.5g,水定容至1L,pH4.5。
[0057]进一步优选的,所述摇瓶培养基I每升组分如下:
[0058]葡萄糖20g,蛋白胨5g,酵母浸粉5g,海水晶5g,磷酸氢二钾lg,无水硫酸镁lg,水定 容至lL,pH 4.5。
[0059] 进一步优选的,所述种子培养基I每升组分如下:
[0000]葡萄糖25g,蛋白胨10g,酵母浸粉5g,海水晶2g,氯化铵2g,磷酸氢二钾10g,无水硫 酸镁〇.5g,水定容至lL,pH 4.5。
[0061 ] 所述步骤(2)中,含有浓度为7.5 X 108个/ml的海洋红酵母种子液,制备步骤如下:
[0062] A、将海洋红酵母接种于活化培养基II中,20°C活化培养24h,制得活化海洋红酵 母;
[0063] B、将步骤A制得的活化海洋红酵母接种于摇瓶培养基II中,在20°C、200r/min条件 下,培养24h,制得海洋红酵母一级种子;
[0064] C、将步骤B制得的海洋红酵母一级种子按5%的体积百分含量接种于种子培养基 II中,调节通气量为0.5vvm,通气搅拌速度为150rpm、温度为25°C培养24h,制得海洋红酵母 的种子液。经检测,菌体浓度为7.5 X 108个/ml。
[0065] 进一步优选的,所述活化培养基II每升组分如下:
[0066] 葡萄糖20g,酵母浸粉5g,磷酸氢二钾1 · 0g,无水硫酸镁0 · 5g,水定容至1L,pH4 · 0。
[0067]进一步优选的,所述摇瓶培养基II每升组分如下:
[0068]葡萄糖22g,蛋白胨12g,酵母浸粉6g,海水晶17g,磷酸氢二钾1.2g,无水硫酸镁 〇.7g,水定容至 lL,pH4.2。
[0069] 进一步优选的,所述种子培养基II每升组分如下:
[0070]葡萄糖20g,蛋白胨10g,酵母浸粉5g,海水晶7g,氯化铵5g,磷酸氢二钾7g,无水硫 酸镁lg,水定容至lL,pH 4.0。
[0071] 所述步骤(1)和步骤(2)中流加碳源溶液的质量浓度为50g/L,流加氮源溶液的质 量浓度为3g/L。
[0072] 所述步骤(1)和步骤(2)中碳源选自葡萄糖;氮源选自蛋白胨。
[0073] 实施例2
[0074] 共生培养制备富含虾青素的饲料添加剂的方法,步骤如下:
[0075] (1)将含有2.0X108个/ml的红发夫酵母的种子液按体积百分比6%接种于液体发 酵培养基中,在温度26°(:、通气量1.2^ 111、?!14.8的条件下,搅拌发酵,发酵期间流加碳源溶 液和氮源溶液,使发酵罐中的碳源浓度为15g/L,氮源浓度为1.0g/L,发酵35h,得一次发酵 液;
[0076] 所述的液体发酵培养基没升组分如下:
[0077]蔗糖25g,葡萄糖15g,玉米粉8g,酵母膏10g,大豆柏6g,磷酸氢二钾lg,氯化铵3g, 无水硫酸镁3g,水定容至1L,pH 5.3;
[0078] (2)直接向步骤(1)制得的一次发酵液中继续接种含有浓度为7.5 X 108个/ml的海 洋红酵母种子液,接种量为一次发酵液体积的5%,在温度26°C、通气量1.6vvm、pH 4.6的条 件下,搅拌发酵,发酵期间流加碳源溶液和氮源溶液,使发酵罐中的碳源浓度为22g/L,氮源 浓度为2. Og/L,发酵22h,制得混合发酵液;
[0079] (3)将步骤(2)制得的混合发酵液经1200转/分离心22min,固液分离,取固体,经_ 22°C真空冷冻干燥,制得富含虾青素的饲料添加剂。
[0080] 所述步骤(1)中,含有2.0X108个/ml的红发夫酵母的种子液,制备步骤如下:
[0081] a、将红发夫酵母接种于活化培养基I中,22°C活化培养30h,制得活化红发夫酵母;
[0082] b、将步骤a制得的活化红发夫酵母接种于摇瓶培养基I中,在22 °C、220r/min条件 下,培养30h,制得红发夫酵母一级种子;
[0083] c、将步骤b制得的红发夫酵母一级种子按5%的体积百分含量接种于种子培养基I 中,调节通气量为0.6vvm,通气搅拌速度为180rpm、温度为26°C培养25h,制得红发夫酵母的 种子液。经检测,菌体浓度为2.0 X 108个/ml。
[0084]进一步优选的,所述活化培养基I每升组分如下:
[0085]葡萄糖22g,蛋白胨7g,海水晶6g,磷酸氢二钾lg,水定容至1L,pH4.8。
[0086]进一步优选的,所述摇瓶培养基I每升组分如下:
[0087]葡萄糖22g,蛋白胨6g,酵母浸粉7g,海水晶5g,磷酸氢二钾lg,无水硫酸镁0.5g,水 定容至lL,pH4.8。
[0088] 进一步优选的,所述种子培养基I每升组分如下:
[0089]葡萄糖28g,蛋白胨1 lg,酵母浸粉6g,海水晶4g,氯化铵4g,磷酸氢二钾1 lg,无水硫 酸镁〇.7g,水定容至lL,pH 4.8。
[0090] 所述步骤(2)中,含有浓度为7.5 X 108个/ml的海洋红酵母种子液,制备步骤如下:
[0091 ] A、将海洋红酵母接种于活化培养基II中,22°C活化培养30h,制得活化海洋红酵 母;
[0092] B、将步骤A制得的活化海洋红酵母接种于摇瓶培养基II中,在22°C、220r/min条件 下,培养30h,制得海洋红酵母一级种子;
[0093] C、将步骤B制得的海洋红酵母一级种子按6%的体积百分含量接种于种子培养基 II中,调节通气量为0.6vvm,通气搅拌速度为180rpm、温度为26 °C培养25h,制得海洋红酵母 的种子液。经检测,菌体浓度为7.5 X 108个/ml。
[0094] 进一步优选的,所述活化培养基II每升组分如下:
[0095] 葡萄糖22g,酵母浸粉6g,磷酸氢二钾2g,无水硫酸镁0.6g,水定容至1L,pH 4.3。
[0096]进一步优选的,所述摇瓶培养基II每升组分如下:
[0097]葡萄糖24g,蛋白胨13g,酵母浸粉8g,海水晶18g,磷酸氢二钾1.5g,无水硫酸镁 〇.9g,水定容至 lL,pH4.5。
[0098] 进一步优选的,所述种子培养基II每升组分如下:
[00"]葡萄糖22g,蛋白胨12g,酵母浸粉6g,海水晶8g,氯化铵6g,磷酸氢二钾8g,无水硫 酸镁2g,水定容至lL,pH 4.3。
[0100] 所述步骤(1)和步骤(2)中流加碳源溶液的质量浓度为50g/L,流加氮源溶液的质 量浓度为3g/L。
[0101] 所述步骤(1)和步骤(2)中碳源选自蔗糖;氮源选自酵母浸粉。
[0102] 实施例3
[0103] 共生培养制备富含虾青素的饲料添加剂的方法,步骤如下:
[0104] (1)将含有1.5 X108个/ml的红发夫酵母的种子液按体积百分比10%接种于液体 发酵培养基中,在温度26°C、通气量1.2vvm、pH 4.8的条件下,搅拌发酵,发酵期间流加碳源 溶液和氮源溶液,使发酵罐中的碳源浓度为15g/L,氮源浓度为1. Og/L,发酵35h,得一次发 酵液;
[0105] 所述的液体发酵培养基没升组分如下:
[0106] 蔗糖30g,葡萄糖15g,玉米粉10g,酵母膏15g,大豆柏5g,磷酸氢二钾0.5g,氯化铵 5g,无水硫酸镁5g,水定容至lL,pH 5.4;
[0107] (2)直接向步骤(1)制得的一次发酵液中继续接种含有浓度为5.5 X 108个/ml的海 洋红酵母种子液,接种量为一次发酵液体积的20 %,在温度28 °C、通气量1.8vvm、pH 5.0的 条件下,搅拌发酵,发酵期间流加碳源溶液和氮源溶液,使发酵罐中的碳源浓度为25g/L,氮 源浓度为2. Og/L,发酵25h,制得混合发酵液;
[0108] (3)将步骤(2)制得的混合发酵液经1200转/分离心24min,固液分离,取固体,经_ 25°C真空冷冻干燥,制得富含虾青素的饲料添加剂。
[0109] 所述步骤(1)中,含有浓度为1.5 X108个/ml的红发夫酵母的种子液,制备步骤如 下:
[0110] a、将红发夫酵母接种于活化培养基I中,25°C活化培养36h,制得活化红发夫酵母;
[0111 ] b、将步骤a制得的活化红发夫酵母接种于摇瓶培养基I中,在25 °C、220r/min条件 下,培养36h,制得红发夫酵母一级种子;
[0112] c、将步骤b制得的红发夫酵母一级种子按7%的体积百分含量接种于种子培养基I 中,调节通气量为0.8vvm,通气搅拌速度为200rpm、温度为28 °C培养28h,制得红发夫酵母的 种子液。经检测,菌体浓度为1.5 X 108个/ml。
[0113] 进一步优选的,所述活化培养基I每升组分如下:
[0114] 葡萄糖24g,蛋白胨8g,海水晶6g,磷酸氢二钾0 · 9g,水定容至1L,pH4 · 8。
[0115] 进一步优选的,所述摇瓶培养基I每升组分如下:
[0116]葡萄糖24g,蛋白胨6g,酵母浸粉7g,海水晶8g,磷酸氢二钾lg,无水硫酸镁0.7g,水 定容至lL,pH 4.9。
[0117]进一步优选的,所述种子培养基I每升组分如下:
[0118]葡萄糖28g,蛋白胨12g,酵母浸粉7g,海水晶5g,氯化铵5g,磷酸氢二钾12g,无水硫 酸镁〇.9g,水定容至lL,pH 4.8。
[0119] 所述步骤(2)中,含有浓度为5
当前第2页1 2 3 4 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1