、或出生 后1年内、或出生后2年内、或甚至更长时间内提供。
[0164] 在一些实施方案中，本发明的组合物在出生后几天或几周或几个月内提供。当婴 儿是早产儿时尤其如此，但这并不是必需的。
[0165] 本发明的组合物可根据需要提供数天（1、2、3、4、5、6…）、或数周（1、2、3、4、5、6、7、 8或甚至更久）、或数月（1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或甚至更久)或数年(1、2...)。
[0166] 根据本发明的组合物还可减少住院时间，并且降低保健/医疗的总体费用。
[0167] 本发明还涉及使用乳糖-N-四糖(LNT)、至少另一种人乳低聚糖和/或其前体来制 备待施用于婴儿和幼儿的组合物，用于预防婴儿和幼儿患坏死性小肠结肠炎，和/或用于治 疗婴儿和幼儿的坏死性小肠结肠炎(诸如，用于缩短婴儿和幼儿患坏死性小肠结肠炎的持 续时间、降低其患病风险、减少其并发症和/或严重性，和/或用于缓解由坏死性小肠结肠炎 引起的损害婴儿和幼儿健康的症状）。
[0168] 本发明还涉及使用乳糖-N-四糖(LNT)、至少另一种人乳低聚糖和/或其前体来制 备待施用于婴儿和幼儿的组合物，用于在婴儿和幼儿中增强肠道保护而免受微生物和病原 菌过度生长影响、促进肠道发育和成熟、减少肠道炎症、提高肠内喂食耐受性和/或预防与 其相关的任何疾病和并发症。
[0169] 本发明还涉及用于预防婴儿和幼儿患坏死性小肠结肠炎，和/或用于治疗婴儿和 幼儿的坏死性小肠结肠炎(诸如，用于缩短婴儿和幼儿患坏死性小肠结肠炎的持续时间、降 低其患病风险、减少其并发症和/或严重性，和/或用于缓解由坏死性小肠结肠炎引起的损 害婴儿和幼儿健康的症状)的方法，所述方法包括将包含乳糖-N-四糖(LNT)与至少另一种 人乳低聚糖和/或其前体的组合物施用于所述婴儿和幼儿。
[0170] 本发明还涉及用于在婴儿和幼儿中增强肠道保护而免受微生物和病原菌过度生 长影响、促进肠道发育和成熟、减少肠道炎症、提高肠内喂食耐受性和/或预防与其相关的 任何疾病和并发症的方法，所述方法包括将包含乳糖-N-四糖(LNT)与至少另一种人乳低聚 糖和/或其前体的组合物施用于所述婴儿和幼儿。
[0171] 本说明书中先前所述的不同实施方案、细节和示例也可同样应用于这些用途和方 法。
[0172] 实施例
[0173] 以下实施例示出了根据本发明所使用的组合物的一些特定实施方案。这些实施例 仅出于举例说明目的而给出，不应被理解为是对本发明的限制，因为在不脱离本发明的实 质的前提下，可对其作出多种改变。
[0174] 实施例1
[0175] 下表1给出了根据本发明的婴儿配方食品的组成的实施例。该组成仅以举例的方 式给出。
[0176]
[0177]
[0178] 表1:根据本发明的婴儿配方食品的组成的实施例
[0179] 实施例2
[0180] 使用不同的培养基处理携带表达质粒（具有控制碱性磷酸酶的NFkB启动子）的 HT29细胞，然后用促炎TNFa或革兰氏阴性菌(例如鼠伤寒沙门氏菌)激发。以上处理所用的 细胞培养基经长双歧杆菌婴儿亚种(Bifidobacterium longum subsp infantis)与（i)乳 糖或（i i)乳糖-N-四糖(LNT)发酵。
[0181] 这些细胞携带具有控制碱性磷酸酶的NF-κΒ启动子的表达质粒，使得TNF-α或革兰 氏阴性菌的刺激由碱性磷酸酶与荧光底物间的相互作用所产生的荧光强度指示。结果示于 图1中。图1示出以NFkB报告基因细胞系为例，当使用促炎TNF-α或革兰氏阴性菌(此处为鼠 伤寒沙门氏菌(S. typhymur ium))刺激时，炎症标志物和主要调节因子核因子κΒ (NFkB)的活 化。在存在经婴儿肠道共生细菌长双歧杆菌婴儿亚种发酵的细胞培养基和乳糖(对照）的情 况下，观察到很强的刺激，而在存在经长双歧杆菌婴儿亚种发酵的细胞培养基和乳糖-N-四 糖(LNT)的情况下，未观察到刺激。这表明LNT表现出强抗炎效果。含LNT的条件培养基导致 这些细胞对促炎TNFa或革兰氏阴性菌刺激具有更高的抗性。经LNT (乳糖-N-四糖)和双岐杆 菌发酵产物调理的培养基中肠上皮细胞比经乳糖和双岐杆菌发酵产物调理的对照培养基 中的细胞对TNFa促炎刺激有更高的抗性。
[0182] 这表明LNT在调节免疫稳态、在免疫应答成熟以及减少炎症性疾病(例如强烈发生 于新生婴儿NEC中）方面起了重要作用。
[0183] 实施例3
[0184] 研究目的:
[0185] 人乳低聚糖(ΗΜ0)可在新生儿肠道中介导大部分的已知益生元并使人乳具有抗炎 效果。
[0186] 为了显示人乳低聚糖的成熟和免疫效果，在合适的体内模型中证明这些效果尤为 重要，其中所述体内模型表现出肠道不成熟和免疫调节异常的显著特征。近年的文献记载 表明，早产小猪对母乳中的有益因子极其敏感，是早产婴儿的最佳模型。该模型允许详细地 进行喂食方式(肠内喂食、胃肠外喂食)操作，并且可清楚显示出响应于未达标准饮食的临 床表现(坏死性小肠结肠炎）。
[0187] 方法:
[0188] 给出生5天的早产剖腹产小猪喂食渐增剂量(3至15mL/kg/3h)的基于麦芽糖糊精 的肠道配方奶粉，其中所喂食的配方奶粉含有（n= 17)或不含（n= 15)以下ΗΜ0混合物 (4.78g/L配方奶粉）。
[0189]
[0190]表2:所测试的ΗΜ0混合物的组成
[0191] 第5天记录临床病症、NEC病变、粘膜量和器官重量。
[0192] 结果:
[0193] ΗΜ0组中的平均NEC发病率低于对照组(分别为35%和53%)。
[0194] ΗΜ0小猪近侧小肠的粘膜重量增加 (p〈0.05)，而其体重、器官重量和腹泻得分相 似。
[0195] 结论:
[0196] 为刚出生的早产剖腹产小猪提供根据本发明的富含ΗΜ0的配方食品的饮食，显示 对NEC发病率产生了积极效果。该配方食品显示提高了这些小猪对坏死性小肠结肠炎(NEC) 的短期抵抗力，而没有任何明显的副作用。这尤其可能是因为存在LNT以及LNT与其他人乳 低聚糖和/或其前体的潜在协同作用。
[0197] 在未添加唾液酸的另一实验中，也可得到相似的结论。
【主权项】
1. 用于预防和/或治疗婴儿和幼儿的坏死性小肠结肠炎的包含乳糖-N-四糖(LNT)和至 少另一种人乳低聚糖和/或其前体的组合物。2. 用于在婴儿和幼儿中增强肠道保护而免受微生物和病原菌过度生长影响、促进肠道 发育和成熟、减少肠道炎症、提高肠内喂食耐受性和/或预防与其相关的任何疾病和并发症 的包含乳糖-N-四糖(LNT)与至少另一种人乳低聚糖和/或其前体的组合物。3. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物包含乳糖-N-四糖(LNT)和一 种或两种或三种或四种或甚至更多种其他人乳低聚糖和/或其前体。4. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述至少另一种人乳低聚糖和/或 其前体选自N-乙酰化低聚糖、唾液酸化低聚糖、岩藻糖基化低聚糖、唾液酸、岩藻糖以及它 们的任意组合。5. 根据权利要求4所述的组合物，其中所述N-乙酰化低聚糖为乳糖-N-新四糖(LNnT)。6. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物包含乳糖-N-四糖(LNT)和乳 糖-N-新四糖(LNnT)，其中LNT: LNnT比值介于5:1和1:2之间。7. 根据权利要求4所述的组合物，其中所述唾液酸化低聚糖选自3 '唾液酸乳糖(3-SL)、 6'唾液酸乳糖(6-SL)，以及3'唾液酸乳糖(3-SL)与6'唾液酸乳糖(6-SL)的组合。8. 根据权利要求4所述的组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖选自2 岩藻糖基乳糖 (2-FL)、3-岩藻糖基乳糖、二岩藻糖基乳糖、乳糖-N-岩藻戊糖I、乳糖-N-岩藻戊糖II、乳糖-N-岩藻戊糖III、乳糖-N-岩藻戊糖V、乳糖-N-二岩藻己糖I、乳糖-N-岩藻己糖、岩藻糖基乳 糖-N-己糖、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖、岩藻糖基乳糖-N-新己糖、二岩藻糖基乳糖-N-己糖 I、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖I、二岩藻糖基乳糖-N-新己糖II、岩藻糖基-对-乳糖-N-己糖、 三岩藻糖基-对-乳糖-N-己糖I以及它们的任意组合。9. 根据权利要求8所述的组合物，其中所述岩藻糖基化低聚糖为2'-岩藻糖基乳糖（2-FL)〇10. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述至少另一种人乳低聚糖和/或 其前体选自乳糖-N-新四糖(LNnT)、3 '唾液酸乳糖(3-SL)、6 '唾液酸乳糖(6-SL)、2 ' -岩藻糖 基乳糖(2-FL)、唾液酸以及它们的任意组合。11. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物包含乳糖-N-四糖(LNT)、乳 糖-N-新四糖(LNnT)、6'唾液酸乳糖(6-SL)、2'_岩藻糖基乳糖(2-FL)，以及任选的唾液酸。12. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述乳糖-N-四糖(LNT)与所述至 少另一种人乳低聚糖和/或其前体各自均以占所述组合物的〇.lg/L至20g/L的量存在。13. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物还包含至少一种益生 菌，所述益生菌的量为1〇3至l〇 12cfu/g所述组合物(干重）。14. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物为婴儿配方食品、1段 婴儿配方食品、较大婴儿配方食品、婴孩食物、婴儿谷物组合物、成长乳、强化剂或补充剂。15. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物用于离乳期前和/或离乳期 过程中。16. 根据前述权利要求中任一项所述的组合物，所述组合物用于早产婴儿和/或小于胎 龄的婴儿和/或剖腹产的婴儿。
【专利摘要】本发明公开了一种组合物，所述组合物包含LNT和至少另一种人乳低聚糖或其前体，以用于预防和/或治疗婴儿和幼儿的坏死性小肠结肠炎。
【IPC分类】A61K35/74, A61P1/00, A23L33/00, A23L33/10, A61K31/702, A23L33/135, A23L33/125
【公开号】CN105722409
【申请号】CN201480062158
【发明人】P·T·桑吉尔德
【申请人】雀巢产品技术援助有限公司
【公开日】2016年6月29日
【申请日】2014年11月14日
【公告号】WO2015071403A1