专利名称：：水不溶性的或低水溶性药物在脂质化糖胺聚糖颗粒中的制剂和它们的诊断和治疗用途的制作方法水不溶性的或低水溶性药物在脂质化糖胺聚糖颗粒中的制剂和它们的诊断和治疗用途相关申请的交叉引用本申请要求来自2004年11月2日提出的美国临时申请号60/623,862的根据35U.S.C.S119(e)的优先权利益，将其全部内容通过参考结合于此。发明背景发明领域本发明涉及药物递送和制剂，并且具体涉及包封水不溶性的或低水溶性药物的脂质化糖胺聚糖颗粒以及它们在诊断和治疗病理性病症中的用途。相关技术描述糖胺聚糖，或粘多糖，连同胶原一起，是全部结缔组织的主要结构元件。糖胺聚糖，或gags，是与少量蛋白质结合的多糖链的大的复合物。这些化合物具有结合大量水的能力，从而产生形成身体的结缔组织的类似凝胶的基质。糖胺聚糖是由重复二糖单元(氨基糖-酸性糖重复单元)组成的长链。所述氨基糖典型地是葡糖胺或半乳糖胺。所述氨基糖还可以是硫酸化的。所述酸性糖可以是D-葡糖醛酸或L-艾杜糖醛酸。在体内，不同于透明质酸，糖胺聚糖共价结合到蛋白质，形成蛋白聚糖单体。所述多糖链通过酸性糖类和氨基糖类的顺序加入而延长。最常见的糖胺聚糖是透明质酸、硫酸角质素、硫酸软骨素、硫酸肝素、和硫酸皮肤素(dermatinsulfate)。可以将糖胺聚糖化学修饰成比它们的最初提取形式中含有更多硫基。另外，可以将糖胺聚糖部分或完全合成并且可以是植物或者动物来源的。透明质酸是糖胺聚糖家族的天然存在的成员，以特别高的浓度存在于软骨和关节接合处的滑液中，而且存在于玻璃体液中，血管壁、和脐带及其它结缔组织中。透明质酸可以是游离形式，诸如在滑液中，并且可以是结合的形式，诸如细胞外基质成分。由交替的N-乙酰基-D-葡糖胺和D-葡糖醛酸残基通过交替的卩-l,3-葡糖醛酸(glucuronidic)和卩-l,4-葡糖胺(glucosaminidic)的键结合而组成该多糖。在水中，透明质酸溶解而形成高度粘性的流体。从天然来源分离的透明质酸分子量一般在5><104直到107道尔顿的范围内。透明质酸对于细胞外基质和多种肿瘤具有高度亲合性，所述肿瘤包括乳房、脑、肺、皮肤、及其它器官和组织的那些。药物递送系统通过将药物施用到身体内，用于经过长时期保持恒定的药物血液水平，或者通过全身或局部施用并且经过延长的时期，用于保持药物在特定靶向器官内的最理想浓度。例如，化学修饰的透明质酸可以用于控释的药物递送。Balazs等，在美国专利4,582,865中，报道了透明质酸的交联的凝胶可以减慢分散在其中但不共价结合到凝胶大分子基质的低分子量物质的释放。将其它形式的药物制剂/制剂用作药物递送系统，包括作为药用载体的聚合物薄膜的使用或脂质体的使用。存在两个基本类别的药物载体微粒系统，诸如细胞、微球体、病毒包膜、和脂质体；禾tl非-微粒系统，通常是可溶解的系统，由大分子诸如蛋白质或合成聚合物组成。然而在临床中可用的大多数药物剂型(超过99%)是游离药物剂型。然而，作为药物递送系统起作用的微观和亚微观微粒载体，与用游离药物治疗相比，用于改善临床结果。载体之内的包封保护所述药物免受生物学环境影响，减少降解和失活的风险。包封作用也防止生物学环境对游离药物的不加选择的分布，减少毒性和不利的副作用的风险。经过延长的时期，通过全身的或通过局部的施用，载体介导减少过早的药物清除并且确保恒定的药物血液水平和/或在靶向器官的最理想药物浓度。微粒载体作为持续释放或控释药物长效制剂起作用，从而有助于改进药物功效并可以减少剂量给药频率。尽管提供了所述优点，但是还存在一些与利用包封药物的生物聚合物有关的困难。例如，构造为微米颗粒或纳米颗粒的生物聚合物具有有限的耙向能力、有限的循环中保留和稳定性、长期施用时的潜在毒性、和不能外渗的。已经进行了许多尝试而将不同的识别物质，包括抗体、糖蛋白、和凝集素，结合到微粒系统，所述微粒系统诸如脂质体、微球体及其他，以便赋予它们一些程度的靶向。虽然这些识别试剂结合到所述微粒体系已经成功，但是得到的修饰微粒系统不能如所希望的发挥作用，特别是在体内。当利用这样的识别物质时，也出现其它困难。例如，抗体可以是患者-特异性的，并且从而对于药物疗法增加成本。另外，并非全部识别底物和载体之间的结合是共价的。共价键是必要的，因为非共价结合可以导致识别物质在施用部位从所述微粒体系离解，原因在于微粒体系和所述识别物质靶向部位的识别相反部分之间的竞争。在这样的离解时，施用的修饰微粒体系可以回复到规则的微粒体系，从而使修饰微粒体系施用的目的失败。当涉及具有低水溶解度的药物(自此以后称为低水溶性和水不溶性的药物)时，还存在用游离药物治疗中的缺陷。为了产生将完全容许治疗的剂型，必需将水不溶性的或低水溶性药物配制在媒介物中，所述媒介物将是足够疏水的以溶解所述药物，还是足够亲水的以提供到水介质中的施用。这些媒介物通常是类似洗涤剂的，诸如用于紫杉醇的CremophorEL(聚乙氧基化蓖麻油(polyethoxylatedcasteroil))和乙醇的1:1掺合物。缺点是这些媒介物及其它类似的清洁剂基媒介物是高度毒性的并且引起高敏感性反应和组胺在患者中的释放。授予Sakurai等的美国专利5，733，892公开了可溶于水溶液中的脂质化的糖胺聚糖分子。WO03/015755公开了在水相中形成颗粒悬浮液的脂质化的糖胺聚糖颗粒的类似体系。本发明是WO03/015755的脂质化糖胺聚糖颗粒的改进，因为对于与水不溶性的和低水溶性药物的靶向递送有关的问题，没有一种当前可用的递送技术提供满意的解决方案。在这里任何文件的引用不意欲承认，对于本申请的任何权利要求的可专利性，这样的文件是有关的现有技术，或是考虑过的材料。关于任何文件的内容或日期的任何声明是基于提出时对于申请人可用的信息，并且不构成关于这样一种声明的正确性的承认。发明概述本发明的目的是克服现有技术的缺陷。本发明的另一个目的是形成用于包封水不溶性的或低水溶性药物的脂质化糖胺聚糖颗粒。本发明的进一步的目的是递送包封在脂质化糖胺聚糖颗粒中的这种水不溶性的或低水溶性药物。本发明提供包封在脂质化糖胺聚糖颗粒中的水不溶性的或低水溶性药物的剂型，也称"gagomers"。这样的gagomers是生物附着的生物聚合物，通过将具有伯氨基的脂质交联到含有羧酸的糖胺聚糖而产生。以受控方式形成微米颗粒(microparticle)或纳米颗粒，对于微米颗粒主要粒径范围约为2-5微米，和对于纳米颗粒大于50-200纳米。小的或大的水不溶性的或低水溶性的有效成分/药物可以被包封/包埋在这些gagomer颗粒中，具有大于50%的高功效，并且通常大于80%。本发明也提供含有包封在脂质化糖胺聚糖颗粒中的水不溶性的或低水溶性的药物/有效成分的药物组合物。本发明的其它方面包括制备包封药物/有效成分的脂质化糖胺聚糖颗粒的方法，以及用于治疗患有病理性病症的受试者的方法，所述方法施用有效量的包封在脂质化糖胺聚糖颗粒中的水不溶或低水溶性有效成分/药物。本发明进一步的方面涉及用于治疗适应证的改进方法，所述方法用对于治疗所述适应证是有效的水不溶或低水溶性药物，在这里所述改进是施用包封在脂质化糖胺聚糖颗粒中的水不溶或低水溶性药物。附图简述图1是显示在经由-DMSO方法中，gagomers中紫杉醇包封效率作为gagomer浓度(mgPE/ml的单位)函数的曲线图。所述点是在如列出的不同初始药物浓度获得的实验数据。实线和误差棒是全部数据点的平均包封效率和Sd。图2是显示经由-乙醇方法中，gagomers中紫杉醇包封效率作为gagomer浓度(mgPE/ml的单位)函数的曲线图。所述点是在如列出的不同初始药物浓度获得的实验数据。实线是非理论的，绘出以强调所述数据的趋势。图3是显示在经由-PE方法中，gagomers中紫杉醇包封效率，载体制备和药物包封作用作为gagomer浓度(mgPE/ml的单位)函数的曲线图。所述点是在如列出的不同初始药物浓度获得的实验数据。实线和误差棒是全部数据点的平均包封效率和sd。图4是三种制剂类型(即，经由-DMSO，经由-乙醇和经由-PE)中，显示作为药物/gagomer比例的函数的紫杉醇包封效率的比较的曲线图。使用的缩写TX-紫杉醇；GAG-gagomers;HA-透明质酸(hyaluronan);PE-磷酯酰乙醇胺。所述点是实验的，符号如下空心方块经由DMSO;空心圆形经由乙醇；实心圆形经由PE。实线是非理论的，绘出以强调所述数据的趋势。图5是显示在50%人血清中并在37°C的无药物gagomers和包封紫杉醇的gagomers(经由乙醇方法制备)的稳定性作为时间函数的曲线图。分别监控gagomers中的HA浓度，gagomers中的PE浓度，药物包封的水平。无药物的和包封紫杉醇的gagomers是(TX-GAG)，通过经由-乙醇方法制备的。所述点是实验的并且列出了每一检测变量的特定代号。实线是非理论的，绘出以强调所述数据的趋势。图6是显示在PBS和，单独地，在50%血清中，在单向流通量(恶化)病症下，来自用经由乙醇方法制备的gagomers的紫杉醇流出动力学的曲线图。因变量ft是从所述剂型在时间4时释放的总药物的分数。所述点是实验的数据。实线是根据式(l)和表3脚注中列出的动力学参数绘出的理论预期。图7显示用于gagomers内部装填的不溶药物的生产过程的方案。图8是显示在离心的沉淀中的紫杉醇(TX)保留的曲线图，所述沉淀单独用磷酸盐-缓冲盐水洗涤(浅色棒)，或用相同的缓冲液但是还含有0.2%牛血清白蛋白洗涤(深色棒)。图9显示装载药物和无药物的gagomers还有游离药物的差示扫描量热法。上部部分游离的紫杉醇-结晶体(点划线)和水合的(虚线)和无药物的gagomers(实黑线)。下部部分游离结晶体(实黑线)或水合的(虚线)紫杉醇与无药物gagomers的混合物，以药物脂质的摩尔比为1:2。装载紫杉醇的gagomers(点划线)也以药物脂质的摩尔比为1:2。图IO是显示在灭菌前后，在B16F10.9细胞培养中的游离紫杉醇和装载紫杉醇的gagomers的细胞毒性的曲线图。发明详述脂质化糖胺聚糖颗粒，也称"gagomers",是用于水不溶和低水溶性药物/有效成分的新的药物递送技术，其克服现有技术的限制和缺陷。该技术依据制造方法和临床结果提供具有显著性能改善的多用途的，多产品的药物递送系统。这些gagomers具有作为用于全身性、局部的、和区域性施用的部位-附着，部位-保留，缓释药物长效制剂起作用的能力。供水不溶或低水溶性药物所用的该技术的引入预计将显著促进靶向药物递送形式的技术水平。Gagomer颗粒是生物附着的生物聚合物，通过将糖胺聚糖与至少一种脂质起反应而制备，优选磷脂如磷酯酰乙醇胺(PE)，更优选二月桂基磷酯酰乙醇胺(DLPE)或二棕榈酰基磷酯酰乙醇胺(DPPE)，其在链长上不同，将所述糖胺聚糖中的羧酸基团与所述脂质中的伯胺交联。优选地，将在糖胺聚糖羧基残基和脂质的伯胺之间形成共价键的碳二亚胺型的偶联剂用于所述交联。由本发明的发明人发现的gagomer技术的独特特征是这些载体颗粒，依靠它们的内部脂质区域，提供水不溶和低水溶性药物的溶解和包封的环境，不需要包括任何毒性的和不利的引起副作用的类似洗涤剂的媒介物。Gagomer颗粒因此具有有利的能力而作为用于水不溶和低水溶性药物的耙向递送系统起作用。将水不溶和低水溶性药物高效率地包封在gagomer颗粒中而形成根据本发明的包封药物的gagomer颗粒。由此得到的制剂作为缓释药物长效制剂起作用，其在血清中是稳定的并且在类似于或优于相等的剂量游离药物的水平维持药物活性。本发明涉及gagomer颗粒中的水不溶或低水溶性药物的制剂，涉及含有包封药物的gagomers的药物组合物并且涉及制备和使用其的方法。根据本发明包封在gagomer颗粒中的低水溶性药物的优选实施方案是紫杉醇(taxol;TX)，一种首先从太平洋紫杉植物的树皮中分离的细胞毒药物。紫杉醇促进高度稳定的和功能障碍的细胞内微管蛋白的产生，因为正常的小管动力学中断而导致细胞死亡，从而阻止细胞分裂。基于该活性，将紫杉醇用作各式各样的癌症的化疗药物，所述癌症包括卵巢、乳房、结肠、头部、非小细胞肺癌，和AIDS有关的卡波西肉瘤。用紫杉醇的疗法面对，如上以一般术语所述，两个主要问题(l)如同任何化学治疗药物的对肿瘤-靶向载体的迫切需要；和(2)它在水溶液中具有非常低的溶解度。在目前批准的用于临床的紫杉醇制剂中，将紫杉醇溶解在高毒性的CremophorEL(聚乙氧基蓖麻油)和乙醇的1:1掺合物中。所述领域中正在进行的努力大多数聚焦在用更多有利的媒介物替代CremophorEL/乙醇掺合物上，所述有利的媒介物包括载体诸如PEG化的脂质体。然而迄今为止，还没有哪一个已经证明是充分满意的。虽然较好的媒介物可以用于克服所述溶解度问题，但是所述努力没有一种解决肿瘤靶向的问题。相反，根据本发明包封在gagomer颗粒中的紫杉醇的优选实施方案解决了单一载体/递送技术中的耙向和溶解度的问题。这应当减少患者中的毒性和副作用并且同时增强治疗功效，导致临床结果的显著改善。已经预先发现包封在脂质化糖胺聚糖颗粒中的水溶性的药物比游离的药物更加有效，特别是对于已经变得耐药物的癌细胞。看来所述gagomers结合到癌细胞并且由此成为药物的长效制剂，所述药物的长效制剂可以比它们是分泌的更迅速地进入细胞。这些水溶性的药物由此对细胞具有毒性效果，尽管已经在癌细胞中发展了的耐药物的机理。预期与所述游离药物相比，根据本发明包封在脂质化糖胺聚糖颗粒中的水不溶或低水不溶药物也将对细胞具有增强的效果。除紫杉醇之外，用于在gagomer颗粒中包封的具有低水溶解度的药物/药物模型的其它非限制性实例连同它们的治疗适应症一起呈现在表1中。具有S30pg/ml的水溶解度的药物被认为是低水溶性的或水不溶性的。对于本发明的目的，术语"药物"意欲指可以治疗地影响身体的任何试剂。治疗药物的实例包括癌症治疗的化学治疗剂，治疗感染的抗生素，治疗真菌感染的抗真菌药，治疗炎性病症的消炎药等。如在下文的实施例所示，基于制备、包封效率和细胞毒性，优选脂质二月桂基磷酯酰乙醇胺用于包封紫杉醇。然而，对于一些其它药物，可以证实二棕榈酰基磷酯酰乙醇胺将是更好的并且是更优选的。表1具有低水溶解度的药物/药物模型和治疗适应症<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>用于本发明的gagomers是非毒性的微米颗粒和纳米颗粒药物递送系统，也分别地称为MDDS和NDDS，其采用药物包埋粘性生物聚合物。这些载体，当用水不溶性的或低水溶性药物装填时，与它们的游离形式施用的相同药物相比，改善临床结果。而且，这些gagomer颗粒具有许多超过其它颗粒载体的其它优点，诸如(l)循环中的良好和充分保留-糖胺聚糖成分已经具有亲水的外壳，发现延迟由RES的调理作用和摄取，和(2)糖胺聚糖成分的生物附着属性赋予所述gagomer颗粒具有以高亲合性结合到体内识别位点并赋予主动靶向的测量。可以将本发明的包封药物的gagomers用于药物组合物，以治疗需要其的受试者中病理性病症。如这里所用的术语"受试者"用于包括人及其它哺乳动物诸如牛、羊、猪、山羊、狗、猫、大鼠、小鼠等，还有包括两栖动物、鸟、爬行动物和鱼的动物。适于用本发明的包封药物的gagmomers治疗的病理性病症包括水不溶性的或低水溶性药物用于治疗的任何适应证。实例包括，但不限于，癌症，细菌和真菌感染，包括对于创伤诸如灼烧、由寄生虫或病毒所引起感染继发的那些，伤口愈合，炎症等。由此，本发明也提供治疗患有病理性病症的受试者的方法，所述方法涉及将有效量的包封在根据本发明的gagomer中的水不溶或低水溶性药物施用到所述受试者，以治疗所述病理性病症。在紫杉醇的优选药物实施方案的情况下，所述病理性病症是癌症。本发明是在当前方法上的进一步改进，用于将水不溶或低水溶性药物递送到需要对特定适应证治疗的受试者，所述药物对于治疗那适应证是有效的，所述改进是将施用到受试者的药物包封在gagomer颗粒中。虽然为了避免免疫原性和毒性的问题，在本发明使用的gagomers中优选天然存在的糖胺聚糖，但是也可以使用合成的糖胺聚糖，还有天然的、合成的、或半合成的分子，包括但不限于软骨素、透明质酸、葡糖醛酸、艾杜糖醛酸、硫酸角质素、硫酸角蛋白、硫酸乙酰肝素、硫酸皮肤素，及其片段、盐、和混合物。如这里所用的术语"糖胺聚糖"还包括糖胺聚糖的盐和游离酸以及已经化学变更的(但不是部分水解了的)，然而维持它们的功能的糖胺聚糖。这些修饰包括，但不限于，酯化、硫酸盐化、聚硫酸盐化、和甲基化。利用透明质酸(HA)作为实例，它的透明质酸盐包括透明质酸钠盐、透明质酸钾盐、透明质酸镁盐、和透明质酸钙盐。糖胺聚糖的天然来源包括植物和动物来源，即，山毛榉树和动物软骨的形式，包括鲨鱼软骨、牛气管、鲸隔膜、猪鼻孔，和软体动物诸如绿壳蛘(尸e，c,to/w"禾口海参。以它们从它们的生物学来源纯化获得的大小使用所述糖胺聚糖，而且不进行化学的和/或生物的降解。例如，对于透明质酸，这对应于约lxl()S至约lxl(^道尔顿的范围。可以通过任何方便的路线施用根据本发明含有包封药物的gagomers的药物组合物，包括胃肠外的，例如皮下的、静脉内的、局部的、肌肉内的、腹内的、透皮的、直肠的、阴道的、鼻内的或眼内的。备选地或伴随地，可以通过经口路线施用。肠胃外投药可以通过推注注射或通过随时间的逐步灌注。肠胃外投药的一般特征在于注射，最典型的是皮下的、肌肉内的或静脉内的。本发明的由包封药物的gagomer颗粒，渗透增强剂，及其它生物学活性的药物或药剂组成的局部制剂可以以许多方式施用。液体形成可以从适合的递送装置逐滴施用至皮肤或患病皮肤或粘膜的适当区域并且以用手用力擦入或简单进行风干。可以将适合的胶凝剂加入到液体制剂并且可以将所述制剂施用到适当的区域并用力擦入。对于施用到创伤或烧伤，可以将所述gagomers结合到诸如油剂、乳剂等剂型中。可以以洗剂、乳膏剂、糊剂、软膏剂等形式直接将这样的制剂施用到作用区域。备选地，可以将局部液体制剂放入到喷雾器件中并作为喷雾递送。这类药物递送装置特别好地适合于受皮肤病理影响的大面积皮肤、高度敏感皮肤或鼻或口腔的施用。任选地，可以以软膏剂或透皮贴的形式施用所述gagomers。应当理解，施用的经口路线包括施用的含服和舌下路线。本发明的gagomers也可以通过其它路线施用，其通过粘膜优化摄取。例如，阴道的(特别是治疗阴道病理的情况)，直肠的和鼻内的路线是优选的施用路线。此外，所述gagomers特别适于通过粘膜组织或上皮细胞的递送。如果鼻内施用，则gagomers将典型地以气溶胶形式或以滴剂形式施用。这可以特别用于治疗肺病变。可以在Remington'sPharmaceuticalScisncss，16th禾口l她版,MackPublishing,Easton，Pa.(1980and1990),禾口IntroductiontoPharmaceuticalDosageForms,她版,Lea&Febiger，Philadelphia(1985)中发现适合的制剂，其中的每一个通过参考结合于此。取决于施用的预定方式，使用的组合物可以以固体、半固体或液体剂型的形式，例如，片剂、栓剂、丸剂、胶囊、散剂、液体、混悬剂等，优选以适于精确剂量的单一施用的单位剂型。所述药物组合物含有所述本发明的包封药物的gagomer颗粒和药学上可接受稀释剂、载体、赋形剂、辅剂、或助剂。优选所述药学上可接受载体是对于所述活性化合物化学惰性的并且其在使用条件下没有有害副作用或毒性的一种。载体的选择是由特定有效成分还由用于施用所述成分的特定方法而部分确定的。因此，存在本发明药物组合物的各式各样的适合的制剂。适合的赋形剂是，特别是，填充剂诸如糖类(例如，乳糖或蔗糖，甘露糖醇，山梨糖醇，等)纤维素制剂和/或磷酸钙(例如，磷酸三钙、磷酸氢钙等)以及粘合剂诸如利用例如玉米淀粉、小麦淀粉、水稻淀粉、马铃薯淀粉的淀粉糊剂，明胶，黄蓍胶，甲基纤维素，羟丙基甲基纤维素，羧甲基纤维素钠，和/或聚乙烯基吡咯烷。肠胃外投药的可注射制剂可以作为液体混悬剂、在注射之前液体中的适于溶液或混悬剂的固体形式，或作为乳剂制备。适合的赋形剂是，例如，水、盐水、右旋糖、甘油、乙醇等。另外，如果需要，要施用的药物组合物也可以含有少量的非毒性助剂诸如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂等，例如，乙酸钠、山梨聚糖单月桂酸盐、三乙醇胺油酸盐等。水性注射混悬剂也可以含有增加所述混悬液粘度的物质，包括，例如，羧甲基纤维素钠、山梨糖醇、和/或葡聚糖。任选地，所述混悬液也可以含有稳定剂。胃肠外的制剂可以存在于单位剂量或多个剂量的密封容器中，诸如安瓿和小瓶，并且可以储存在冷冻-干燥的(冻干的)条件中，在用于注射的立即使用之前仅需要加入无菌液体载体，例如，水。临时的注射混悬液可以从之前描述种类的无菌散剂、粒剂、和片剂制备。对于口服，药学上可接受的、非毒性的成分是由任何通常采用的赋形剂的结合形成的，所述赋形剂诸如，甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、交联羧甲纤维素、葡萄糖、明胶、蔗糖、碳酸镁等。这样的组合物包括混悬剂、片剂、可分散的片剂、丸剂、胶囊、散剂、缓释制剂等。适于口服的制剂可以由液体混悬剂组成，例如有效量的悬浮在稀释剂诸如水、盐水、或橙汁中的包封药物的gagomer颗粒；小药囊，锭剂，和药片，各自含有预定量的有效成分作为固体或粒剂；散剂，适当液体中的混悬剂；和适合的乳剂。液体制剂可以包括稀释剂诸如水和醇类，例如，乙醇、苯甲醇、和聚乙烯醇，或者有或者没有加入药学上可接受的表面活性剂、悬浮剂、或乳化剂。当所述组合物是丸剂或片剂时，它将连同所述有效成分一起含有稀释剂诸如乳糖、蔗糖、磷酸二钙等；润滑剂诸如硬脂酸镁等；和粘合剂诸如淀粉、阿拉伯胶、明胶、聚乙烯吡咯浣、纤维素及其衍生物等。片剂形式可以包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇、玉米淀粉、马铃薯淀粉、海藻酸、微晶纤维素、阿拉伯胶、明胶、瓜尔胶、胶体二氧化硅、交联羧甲纤维素钠、滑石、硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂酸、防腐剂、增香剂、药学上可接受的崩解剂、润湿剂、和药理学相容的载体的一种或多种。胶囊形式可以是普通的硬质或软质壳的明胶类型，含有例如表面活性剂、润滑剂、和惰性填充剂，诸如乳糖、蔗糖、磷酸钙、和玉米淀粉。锭剂形式可以在通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶的载体中含有包封药物的gagomer颗粒，还有在诸如明胶或甘油的惰性基底中包含有效成分的软锭剂，或蔗糖和阿拉伯胶。在确定要施用的gagomer颗粒的剂量中，根据特定有效成分的药理特性选择施用的剂量和频率。通常，应该使用至少三个剂量水平。一般在毒性研究中，最高剂量应当达到毒性水平但是对于所述组中的大多数动物是亚致死量的。如有可能，最低的剂量应当诱导生物学可证明的效果。这些研究对于每一种选择的化合物应该平行进行。另外，所述的有效成分(包封药物的gagomer颗粒)的ED5"对于检测总体的50%有效的剂量)水平应当是选择的剂量水平的一种，并且选择的另两个达到毒性水平。最低剂量是不显示生物学可证明效果的剂量。应该利用根据获得的结果计算的使用适当的新剂量反复检测毒理学。属于明确限定品系的年轻健康小鼠或大鼠是种类的第一个选择，并且第一个研究一般使用优选的给药途径。将给出安慰剂或不治疗的对照组包括在所述检测中。一般毒性的检测，如上所述，通常应当在另一个非啮齿动物种类例如兔或狗中重复。也可以利用备选的施用路线重复研究。单一剂量毒性检验应当以这样一种方式进行，以便揭示急性毒性的病征并确定的死亡方式。根据上述毒性检验获得的结果计算要施用的剂量。不继续研究全部最初选择的化合物可以是适意的。关于单一剂量毒性的数据，例如，LD5C，实验动物的50%死亡的剂量，将以每kg体重的重量或体积单位表达并且应当一般用不同的施用方式供给至少两个种类。除啮齿动物中的LDso值之外，合乎需要的是对于其它种类即狗和兔确定最高耐受剂量和/或最低致死剂量。当适合的和推测安全的剂量水平已经如上所建立时，包封药物的gagomer颗粒的慢性毒性的研究、它对繁殖的影响、和潜在的突变性也可以是需要的，以便确保计算的适当剂量范围关于这些危险也将是安全的。例如，然后进行揭示有效成分和代谢物的吸收、分布、生物学转化、和分泌的药动学的药理学动物研究。利用获得的结果，然后设计关于人药理学的研究。所述化合物在人中的药效学和药动学的研究应该在健康的受试者中利用为临床使用设计的施用路线进行，并且可以在患者中重复。应当研究给定不同剂量时，或当给定几种类型缀合物或缀合物的组合和游离化合物时的剂量-应答关系，以便阐明剂量-应答关系(剂量对血浆浓度对效果)，治疗范围，和最佳剂量时间间隔。同样，应该进行关于时间-效果关系的研究，例如，效果的时间过程的研究和不同器官的研究，以便阐明所需和不想要的所述药物的药理学效果，特别是关于维持生命的器官系统。然后将本发明的化合物准备用于临床试验以比较所述化合物对于现有疗法的功效。可以在这点更细致地建立对于治疗效果和副作用的剂量-应答关系。要施用到任何给定患者的本发明包封药物的gagomer颗粒的量必须经验确定，并且将取决于所述患者的病征而不同。可以首先施用相对少量的包封药物的gagomer颗粒，如果没有注意到副作用则稳定增加剂量。当然，应当不超过在常规动物毒性试验中确定的最大安全毒性剂量。在本发明范围内的组合物包括全部组合物，其中以有效量包含包封水不溶性的或低水溶性药物的gagomers以实现它的预定的目的。虽然个体需要不同，但是每一化合物的有效量的最理想范围的测定在本领域技术的范围之内。施用的剂量将取决于其个体接受者的年龄、健康、和重量，还有任何共同作用的治疗属性和所需效果。典型的剂量包括0.01至100mg/kg体重。优选的剂量在约0.1至100mg/kg体重的范围内。最优选的剂量在约1至50mg/kg体重的范围内。用药物包埋的gagomers制剂是简单的和节省成本的。这些包封药物的gagomer颗粒作为缓释药物长效制剂，对于抗生素和化学治疗的流出具有在19-35小时范围内的半寿命。这些gagomer颗粒的性质，连同它们的生物附着属性，提供这些药物载体作为部位-粘附的、部位-保留的、缓释的药物长效制剂起作用的能力，所述药物长效制剂用于全身性的给药，包括经口的、局部的、和部位的，包括鼻内的。Gagomer制剂的原理是将所述脂质溶解在有机溶剂中并将它以形成薄脂质膜的的方式蒸发至干燥，然后在碱性缓冲液中水合，通常是pH9的硼酸盐缓冲液。备选地，所述脂质可以在脂质的Tm之上的温度在适当的碱缓冲液中直接水合。将糖胺聚糖分开溶解在酸性水相中并且用水溶性偶联剂诸如碳二亚胺活化。将水合的脂质膜和活化的糖胺聚糖的水溶液一起产生并且将所述体系保持在碱性pH缓冲液中以发生共价结合。可以合成两个基本类型的gagomers:低脂质对糖胺聚糖的比例(1:1，重量比)，表示为LLG，和高比例的脂质对糖胺聚糖(5:1至20:1，重量比)，表示为HLG。通过改变所述制剂中的特定步骤，结果可以涉及形成微米或纳米颗粒。可以将由本发明的程序形成的gagomers在有或者没有药物的情况下冻干(冷冻-干燥)，并且单独与水再水合或者与感兴趣的药物水溶液再水合。不像其它微粒载体诸如脂质体，在冷冻干燥之前不需要为了增强长期储存和制剂的稳定性而加入保护剂(冷冻保护剂诸如糖类)到所述gagomers。所述gagomers具有由透明质酸(hyaluronan)(透明质酸)提供的内在的冷冻保护。在再水合之后，可以加热所述制剂。一旦所述gagomers已经冷冻干燥，可以将它们在延长的时期储存直到使用它们。用于储存的适当温度将取决于gagomers的脂质制剂和包封材料的温度灵敏性。当冷冻干燥的gagomers将要使用时，通过简单地将水溶液诸如蒸馏水或适当的缓冲液加入到所述gagomers并使它们再水合。该再水合可以在室温或在适合于gagomers和它们的内部内容物的其它温度进行。优选通过下列方法将具有至少一个伯氨基的脂质共价结合到含有羧酸的糖胺聚糖而制备本发明的gagomers,脂质化的糖胺聚糖，所述脂质优选是磷脂，更优选是磷酯酰乙醇胺，并且最优选是二月桂基或二棕榈酰基的磷酯酰乙醇胺，所述含有羧酸的糖胺聚糖优选透明质酸(HA):(1)单独将脂质和水不溶性的或低水溶性的有效成分溶解在有机溶剂中；(2)将溶解的脂质和溶解的水不溶性的或低水溶性的有效成分一起组合到组合的溶液中；(3)将所述组合的溶液蒸发至干燥并作为悬浮液分散在碱性硼酸盐缓冲液中；(4)将分散的悬浮液与通过与偶联剂预温育而活化的糖胺聚糖的溶液混合并温育，而形成包封水不溶性的或低水溶性有效成分的脂质化糖胺聚糖颗粒；和(5)通过连续离心分级以富集脂质化的糖胺聚糖颗粒。可以任选将分级的和富集的脂质化糖胺聚糖颗粒进一步冷冻干燥。备选地，可以在包封药物/有效成分之前通过下列方法制备脂质化的gagomers:(a)提供一个反应容器，其中所述脂质在所述容器底部和壁上展开成薄层。这可以通过将所述脂质溶解在有机溶剂中并且在旋转蒸发器中在低压下将所述脂质蒸发至干燥而实现。(b)通过在酸性pH中与交联剂预温育而活化所述糖胺聚糖。(c)将活化的糖胺聚糖加入到所述反应容器。(d)将脂质和活化的糖胺聚糖的反应混合物缓冲到8.6-9.0范围内的碱性pH。(e)随着连续振动，将所述缓冲的反应混合物温育充分的时期而形成脂质化的糖胺聚糖，诸如在37。C过夜。因为脂质化的gags设计成用于体内使用，所以它们应当在大约37°C是稳定的。虽然更高的温度可以用于脂质化，但是脂质随着升高的温度经历物理变化，一般约62。C。因此，优选在约30-40°C的温度进行脂质化。(f)将脂质化的糖胺聚糖缓冲到中性pH并且根据需要加入其它离子和水溶性添加剂以便用生物流体中存在的离子或盐(诸如NaCl、KC1、Ca2+和Mg"将离子强度升高到生理性水平。(g)通过连续离心分级所述颗粒，每一在4°C以1.6xl05g的力运行40分钟，如下3次运行以后的沉淀是富集微米颗粒的级分，进行3次另外运行的微米颗粒富集级分的上清液是富集纳米颗粒的级分。(h)将得到的脂质化糖胺聚糖冷冻干燥。(i)将水不溶性的或低水溶性有效成分的储备溶液制备在有机溶剂诸如DMSO或乙醇中。然后通过将所述储备溶液稀释到水中而制备工作溶液，以致有机溶剂的浓度是3%。然后将该工作溶液用于将冷冻干燥的gagomer粉末再水合。可以对于相等浓度的可溶透明质酸和从透明质酸和磷酯酰乙醇胺制备的gagomer进行分光光度计^的光散射后的浊度研究，以获得所述合成是否实际得到微粒物质的观察。正如所料，在检测的浓度范围上，游离透明质酸是可溶的，并且它的溶液不散射光。相反，含有gagomer的样品是混浊的，随着gagomer浓度增加的光散射表明所述生物聚合物是不可溶物质。优选在不用任何包封材料的情况下制造所述脂质化糖胺聚糖颗粒，然后冷冻干燥而形成粉末。然后将粉末状的糖胺聚糖颗粒与要包封的材料的粉末混合。备选地，通过将粉末状的糖胺聚糖颗粒与要包封的材料溶液在有机溶剂混合而使之重构，其有机溶剂优选是乙醇。一旦使所述混合物重构，所述颗粒将已经捕获了混合在其中的材料。由此，小的水不溶性的或低水溶性的分子，诸如抗生素和化学治疗药物，还有大分子，可以用这个技术包封。通过将至少一种长形式的糖胺聚糖反应而制备本发明的颗粒，所述长形式即gag还没有被切成较小的尺寸。全部糖胺聚糖，除透明质酸之外，天然地是以共价结合到多糖部分的蛋白质部分的形式。用于水解蛋白质-糖键的方法，化学地和酶法地，对于本领域技术人员是众所周知的。另外，一些已经除去蛋白质部分的商业产品是可用的。将糖胺聚糖聚合物与脂质反应，所述脂质具有至少一个伯氨基而将糖胺聚糖的羧基残基交联到所述脂质中的伯胺。一旦该反应发生，热力学稳定性引起所述脂质彼此相互作用以致将所述产物拉成糖胺聚糖在外面和脂质在内部的球形。脂质分子的自组装是获得gagomer颗粒的决定力。这些颗粒用于将水不溶性的或低水溶性药物/有效成分包封在所述颗粒的内部。在本发明的一个实施方案中，除去糖胺聚糖的蛋白质部分并且仅将糖骨架与所述脂质反应。将透明质酸结合到脂质体的外部用于靶向或用于制造更具生物附着性的脂质体是本领域已知的。在本发明中，没有脂质体；相反地，脂质分子共价结合到透明质酸。在本发明另一个实施方案中，可以首先将其它分子结合到所述糖胺聚糖，然后将其与脂质反应。产生的颗粒使这些其它分子呈现在所述颗粒的外部。这些其它分子可以是，例如，抗体、叶酸、卟啉、或凝集素，并且可以用于靶向。现在一般地描述了本发明，参考下列实施例将更容易地理解本发明，所述实施例作为举例说明提供而不意欲作为本发明的限制。实施例1装填紫杉醇的gagomers的制备DMSO中的初始药物溶解，接着是广泛稀释到水中(称为经由-DMSO方法)将冷冻干燥的无药物的gagomer粉末制备如下平行运行下面的步骤(1)和(2):(l)将透明质酸(HA)溶解在水中，到2mg/ml的浓度。将EDC以20mg/mgHA的比例加入到所述溶液，通过用HCl(lM)滴定将pH调节到4.0，并且将所述体系在37°C在振荡器中温育2小时。(2)将60mg的二棕榈酰基磷酯酰乙醇胺(DPPE)溶解在氯仿:甲醇(3:1，体积比)中达1.5mg/ml的浓度并在低压下在旋转蒸发器中将所述溶液蒸发至完全干燥，直到获得干燥的均匀膜。其后，将10ml的0.1M的硼酸盐缓冲液，PH9.0，加入到所述干燥的脂质，将悬浮液剧烈搅拌数分钟，然后在37°C在振荡器中温育2小时而产生均匀的脂质分散体。(3)将活化的HA溶液和PE的碱性悬浮液以1:1的HA:脂质重量比混合，并且在37。C在振荡器中过夜温育。(4)将来自(3)的反应混合物在超速离心机中以160,000g的力并且在4。C离心40分钟。弃去上清液，并且将所述沉淀进行4个循环的洗涤如下在磷酸盐缓冲液盐水(PBS)，pH7.2中的沉淀的再悬浮作用，在上面列出的条件下再次离心。弃去上清液，将所述沉淀重悬在PBS等中。将最后的沉淀悬浮在PBS中达所需体积(通常是体系(3)的体积)。(5)将gagomer悬浮液分配到1ml的冷冻干燥微型瓶中，并且冷冻干燥如下在-80。C的2小时冷冻，过夜冷冻干燥(环境温度，冷凝器温度LT-50。C，压力0.055hPa。将gagomer粉末冷冻储存(-18。C)直到使用。在该实施例并且在全部随后的实施例中，gagomer浓度将由它的磷酯酰乙醇胺(PE)含量限定。在40mM的药物浓度范围内制备DMSO中紫杉醇的储备溶液。通过这些储备溶液在水中稀释到170-625吗/ml的浓度范围并且最后的DMSO浓度是<1%而制备工作紫杉醇溶液。将给定的工作溶液立即与选择数量的gagomer粉末混合到最后的gagomer浓度在0.16-5mgPE/ml的范围内。将所述混合物在37。C在振荡器浴中温育2小时。通过在所述制剂中包含痕量的311-紫杉醇而检定紫杉醇。将药物包封效率定义为在载体颗粒内包封的体系中总药物的分数。通过"热力学方法"确定紫杉醇包封效率，如下。将紫杉醇-gagomer制剂进行超高速离心(40分钟，4°C，175000g的力)。将上清液(其含有未包封的药物)从所述沉淀(其含有包封药物的gagomers)分离。将所述沉淀重悬浮在无药物的缓冲液中达初始体积。在所述分离以前的原始制剂中确定上清液和重悬沉淀中的紫杉醇浓度，并且将这些数据用于确定包封效率。如图1所示，这些制备的离子中的紫杉醇包封效率是很高的，96(±2)%，并且对于gagomer浓度不是敏感的。实施例2装填紫杉醇的gagomers的制备乙醇中的初始药物溶解，接着是广泛稀释到水中(称为经由-乙醇方法)类似于实施例1中描述的那些制备紫杉醇-gagomer制剂，但是具有下列区别将乙醇代替DMSO用作储备溶液用的溶剂。工作紫杉醇浓度在43-170pg/ml的范围内并且最后的乙醇浓度是<1%。如图2所示，通过在测试范围之内关于gagomer浓度具有轻微的或没有相依性的该方法，同样获得高包封效率，对于高和低紫杉醇浓度分别是80(±6)%和95(±1)%。实施例3装填紫杉醇的gagomers的制备初始药物溶解在乙醇中，接着是加入到有机PE溶液(称为经由-PE的方法)在该方法中，将紫杉醇引入在gagomer制备的过程中，在所述阶段中将PE溶解在有机溶剂体系中。将紫杉醇溶解在乙醇中并在室温下以氯仿:甲醇为3:1体积比加入到PE溶液(即，上面的实施例1的步骤2)。从这点开始，如实施例1中所描述继续进行gagomer制备，不同之处在于省略步骤5(冷冻干燥)。所述制剂中的紫杉醇终浓度是0.2-1.2mM。如图3中所示，该方法也获得高的包封效率，82(±5)%，优点是该方法可以包封比实施例1和2更高的药物剂量。后者的点是通过显示在表2中的比较强调的，用于紫杉醇溶解在乙醇中的体系。虽然包封效率比"经由PE"方法是相对低的，它可以利用更加高的药物剂量。因此，优选方法(即，经由-PE)中的包封药物剂量是5倍更高的。表2:紫杉醇装填储存<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>实施例4包封效率和紫杉醇装填的关系将描述在上面实施例1-3中的全部三种方法的包封效率对装填水平(紫杉醇/PE，重量比)进行比较。如图4所示，在经由各种各样的紫杉醇装填的三种包封方法之间存在良好的一致。实施例5血清中的稳定性血清中紫杉醇-gagomer制剂的全面稳定性概貌(l)颗粒完整性的保留，所述颗粒完整性可以由下列的两个组分-透明质酸和PE的结果独立监控和(2)在所述颗粒内装填药物的保留。为了评价紫杉醇-gagomer制剂的血清稳定性，将样品在50%人血清中在37°C温育直到24小时。关于颗粒完整性和它对紫杉醇存在的灵敏性的血清效果，为了得到更多的理解，用无药物的gagomers进行类似的研究。在实验的整个持续时间内选择的时间点从反应混合物取出等分部分，并通过离心进行分离。离心条件和细节类似于实施例1中对于确定包封效率的热力学方法公开的那些。将含有完整gagomers的沉淀和它们的包封药物重悬在PBS中。利用下列痕量标记检定离心以前的取出的等分部分、上清液和重悬的沉淀中的透明质酸(HA)，PE和紫杉醇FITC-标记的HA(F-HA)，"C-PE，和在有关的地方，3H-紫杉醇。结果总结在图5中。所述数据相当清楚地显示，对于无药物的和装填药物的检测体系，不取决于PE，大多数透明质酸保留在所述沉淀中。经过大部分时间范围，对于两个组分，该保留还在相同的水平。这些发现可以得出结论，在血清中存在良好的颗粒稳定性。类似的包封药物的保留还证实了该结论。将全部数据采用在一起使之表明，不仅gagomers在血清中是稳定的，包封的药物不从完整的颗粒损失，而且它的存在不削弱血清中的颗粒稳定性。实施例6紫杉醇从完整gagomers的流出在单向通量(下沉(sink))条件下，利用如WO03/015755和Margalit等(1991)中所描述的透析方法，在PBS和50%人血清中研究了紫杉醇从gagomers的流出。将痕量的311-紫杉醇包括在制剂中以检定在每一时间点从透析袋释放的紫杉醇，还有在时间=0和在所述实验结尾的gagomers中的紫杉醇。根据在本发明的发明人的实验室中预先开发的程序进行数据处理和分析(WO03/015755;Margalit等，1991)并且发现在时间岣时符合两个独立的药物池(drugpools)的情况，一种是包封的药物，另一个是未包封的药物。结果显示在图6和表3中。该类型的数据分析重建gagomers和外部介质在时间=0时的药物分布，并且因此构成确定包封效率的另一个方法，与实施例1中公开的热力学方法无关。表3:在PBS和血清中的来自gagomers的紫杉醇流出的参数<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>d)PBS中50%的人血清(2)方程(l):ft=(100-f2)(l-e部)+f2(l_e-k2t)ft-时间^t从制剂释放的总药物的分数&:时间=0的gagomer-包封药物的分数k,:未包封的药物流出的速率常数k2:包封的药物流出的速率常数图6中提出的每一数据显示包封和未包封的药物在透析液中的组合积累，并且清除地看出在血清存在下的流出比PBS中慢。如表3中所见，与上面的实施例4的数据和结论相伴随，保留高血清稳定性-f2(包封水平)值在血清和PBS中相当类似。在两种介质中，紫杉醇-gagomer制剂作为持续释放药物长效制剂起作用，一种在药物载体中高度合意的特性。有趣的是，当血清存在于透析袋内时，两个速率常数减少。对于本情况一亲脂性药物的流出一血清组分是白蛋白和脂蛋白，二者在全部实验中保留在所述袋内(膜截止值是12000-14000Da)。如Margalit等(1991)中所详细论述，未包封的药物和包封的药物从透析袋流出到透析液各自是具有单一速率限制性步骤的独立多步骤过程，其中所述药物从它的原始池通过一系列中间池扩散，结果为透析液。该相同的特性一从各自原始药物池扩散的单一速率限制性步骤一也保持在紫杉醇的本情况中，并且血清比PBS的速率常数差异意味着在速率限制性药物池的环境中的微小变化。实施例7体外的细胞毒性在药物-gagomer制剂的基质、细胞系和治疗规程上评价紫杉醇和gagomer-包封的紫杉醇的细胞毒性(见实施例1，2和3)，药物浓度范围跨越lnM至100nM。在实验前的二十四小时，将所需的细胞系以5"03细胞/孔的范围内的密度接种到96-孔多孔培养板上。在亚-融合单层上启动所述实验。在实验启动时，加入治疗介质，如表4中所列出。使用两个规程(I)短规程。将所述细胞用治疗介质温育4小时，在其结尾抽出所述治疗介质，将所述细胞洗涤并在无药物的补充血清的细胞生长培养基中温育44小时。终点是从开始的48小时。(II)长规程将所述细胞在所述治疗介质中温育48小时。在终止时，在两种规程中，利用MTT或者SRB测定法在每一孔中确定细胞生存能力。表4:用于紫杉醇-gagomer细胞毒性体外评价的治疗介质的组成。<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>长和短的两个规程的基本原理如下所述长规程是常规的一种，用于不同药物制剂之中细胞毒性的体外比较。通常在24-72小时时间范围之内的时期将所述细胞用治疗制剂温育，并且全部制剂温育相同的时间。当所述比较在游离药物和载体配制的药物之间时，所述载体特别是与所述耙细胞具有特定的正相互作用的载体，该相同温育时期使所述结果有利于游离药物偏斜。在体内，所述游离药物不会在靶向区域保留长久，而耙向载体可以停留延长的时期。将短的规程设计成对于体内情况调节该游离药物对载体药物的不平衡。在4小时以后治疗介质的除去将全部细胞外的游离药物从所述体系清除，而装填药物的载体可以与所述细胞缔合(结合到所述膜和/或胞吞)。如果这样的缔合发生，则在4小时治疗介质除去时，并非清除全部载体介导的药物，并且残留的药物-载体制剂可以在所述实验的其余部分始终继续将药物供给所述细胞。对于每一细胞系，证实使用的gagomer浓度(不需要超过1.5mgPE/ml的gagomer浓度范围)对于所述细胞没有毒性。将细胞生存能力作为紫杉醇浓度的函数的数据用于求出ICso(引起细胞增殖的50%抑制的药物浓度)。该参数广泛用作本领域标准的参数效能一IC5Q越低，给定制剂的效能越高。对于游离的和gagomer装填的药物的紫杉醇ICso值列出在表5中。在全部情况中，并且对于三种不同紫杉醇-gagomer类型的制剂，所述数据相当清楚地显示包封的紫杉醇保持活性的。对于经由-DMSO和经由-乙醇的制剂，在游离的和载体-配制的药物之间不存在显著差异。表5:游离的和gagomer-包封的紫杉醇的细胞毒性<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>(1)短规程用治疗介质的4小时温育，然后气吸，洗涤，在无药物的补充血清的细胞生长培养基中温育另外的44小时。长规程用治疗介质的48小时温育。(2)直接稀释到培养基中的游离紫杉醇(3)TX-GAG:紫杉醇-包封的gagomers(4)细胞来源和类型B16F10.9:小鼠黑素瘤，B16F10的亚系，MDR,超表达的透明质酸受体D122:小鼠肺Lewis癌亚系，MDR,超表达的透明质酸受体C-26:小鼠结肠癌,MDR,超表达的透明质酸受体PANC-1:人胰腺癌，MDR,超表达的透明质酸受体COS-7:绿色非洲猴(GreenAfricanmonkey)肾，CV-1的亚系。非肿瘤细胞和透明质酸受体的差表达体SNU-251:人卵巢癌，在文献中未发现关于透明质酸受体或MDR状态的报道。经由-PE制剂的结果，也列出在表5中。这些结果是许多中最振奋人心的。它们相当清楚地显示，在短规程中(当比较游离的对比载体-配制的药物时更相关的一种)存在1(35()值的下降。由此，从游离的到所述gagomer-配制的药物的潜能增加超过4倍。考虑以上论述的向细胞提供药物的机理，当在gagomers中配制时潜能的增加甚至可能更高。而且，肿瘤细胞系中的增加比对照非肿瘤系中显著更高。实施例8紫杉醇-装填的gagomers的制剂和表征最初的药物溶解在乙醇中，接着是加入到乙醇DPPE溶液(称为经由乙醇的-DPPE方法)。该方法类似于实施例3的那些，具有下列不同(l)将所述脂质，二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺(DPPE)，在55。C溶解在乙醇中，达12mgPE/ml的浓度。(2)将储存浓度的紫杉醇溶解在乙醇中并加入到乙醇DPPE溶液，将合并的DPPE/紫杉醇乙醇溶液在55°C保持另外的15分钟。(3)将DPPE/紫杉醇乙醇溶液蒸发至干燥并分散在如实施例1步骤2中所描述的碱性硼酸盐缓冲液中，不同之处在于该分散的温育是在65°C。从该点，如实施例3继续所述过程。紫杉醇的功效是完全的(即，100%)。如实施例7中所描述的确定B16D10.9细胞中的细胞毒性。表示在表6第一行中的结果表明，gagomer-包封的紫杉醇保持活性并且比游离紫杉醇更有效(即，更低的ICs。)。将紫杉醇的乙醇溶液在40-70。C范围内的数个温度加热，在该实施例方法中用于制造紫杉醇-包封gagomers的相同条件下，并且利用相同的细胞毒性检定法，证实，在本条件下，加热不削弱所述药物的细胞毒活性。表6:游离的和gagomer-包封的紫杉醇、作为脂溶剂的乙醇在B16F10.9细胞中的细胞毒性。TX匿GAG制剂方法IC5o短规程(1)(jxM紫杉醇)游离的紫杉醇(2)TX-GAG(3)经由乙醇的-DPPE1.81.1经由乙醇的-DLPE1.80.15(1)短的规程用治疗介质温育4小时，然后气吸，洗涤，在无药物的补充血清的细胞生长培养基中温育另外的44小时。长规程用治疗介质温育48小时。(2)直接稀释到培养基中的游离紫杉醇(3)TX-GAG:包封紫杉醇的gagomers实施例9紫杉醇-装填的gagomers的制剂和表征最初的药物溶解在乙醇中，接着加入到乙醇DLPE溶液(称为经由乙醇的-DLPE方法)Gagomer制剂和紫杉醇包封全部类似于实施例8描述的那些，除下列之外.(l)DPPE，具有两个棕榈酰基链(即，C16)，用另一个PE-DLPE替代，其中两个链是二月桂基(即，C12)。(2)乙醇中脂质溶解的温度，用于乙醇脂质溶液与乙醇紫杉醇溶液的混合，并且将用于DLPE和紫杉醇在碱性硼酸盐缓冲液中的分散用的2小时温育的温度全部降低至44。C。全部其它步骤类似于实施例8的那些。紫杉醇的功效是完全的(即，100%)。如实施例7中所描述的测定B16D10.9细胞中的细胞毒性。表示在表6第二行中的结果表明，gagomer-包封的紫杉醇保持活性，并且比游离紫杉醇更有效(S卩，更低的IC50)。在迄今为止制造的全部紫杉醇-gagomer制剂之中，依据制剂、包封效率和细胞毒性，该制剂(见表5和6)是最好的。实施例IOTX-GAG颗粒的药物装填容量利用DLPE作为所述脂质，根据图7中描绘的方案制备TX-GAG颗粒。初始的药物/脂质摩尔比范围从1:10(即，O.l)至1:2(SP，0.5)的TX:脂质，并且通过离心和洗涤，如实施例1所描述，对于这些制剂的每一个测定包封效率。为了评价离心沉淀中的紫杉醇是否完全在gagomer颗粒内，或它的一些一特别是因为增加药物装填一作为所述颗粒外部的游离的不溶药物保留，从过量试剂洗涤出TX-GAG颗粒，所述洗涤通过高速离心进行，(图7中的步骤5)进行如下将每一制剂分成两个部分。如上述实施例中，将一部分离心并单独用磷酸盐-缓冲盐水(PBS)洗涤。将另一个部分离心并在类似条件下洗涤，但是洗涤介质是含有0.2。/。牛血清白蛋白(BSA)的PBS。利用后者的基本原理不仅基于该蛋白质作为一般的"污染物吸收蛋白质"的常规用途，而且特别因为紫杉醇具有对于该蛋白质的高亲合性，并且血清白蛋白作为在目前使用的商业制剂中提供给患者的游离紫杉醇的内源载体起作用。如果离心的沉淀包含不进入gagomer颗粒的药物，并且由于它的不溶性，在所述沉淀中连同TX-GAG颗粒一起沉淀，所以BSA应当已经溶解至少一些沉淀的游离药物。与单独用PBS洗涤同等的体系相比，这个从沉淀中沉淀的游离紫杉醇除去到上清液中将减少离心沉淀中的药物。显示在图8中的结果使之相当清楚，BSA洗涤不减少所述沉淀中的药物，由此表明对于全部装填一与gagomers缔合的全部紫杉醇实际上被装填在gagomerrs内部。更高的BSA浓度(3%)也不从TX-GAG颗粒洗出紫杉醇。实施例11TX-GAG颗粒的量热分析如实施例10中所描述而制备TX-GAG颗粒，药物/脂质摩尔比在1:10至1:2的范围内。类似地制备无药物的gagomers，省略所述药物。将两个类型的体系冷冻干燥，如图7的步骤6中所描述。在230-250°C的温度范围内，晶体的紫杉醇还有从水悬浮液冻干的紫杉醇(表示水合的紫杉醇)，已知首先经历熔化，然后分解。还已知，所述熔化是吸热过程并且所述分解是放热过程。两个过程，以及它们的首先是吸热峰接着是放热峰的连续图样，可以通过将所述物质进行差示扫描量热法(DCS)确定并观察。这通过两种扫描举例说明，一种是对于晶体的和另一个是对于水合的紫杉醇，在图9的上部中。也如图9上部中所显示，发现进行DSC的无药物的gagomers在100°C的区域具有小的吸热峰，原因在于所述脂质，但是在230-270。C范围内不经历热变化，在230-270。C范围的地方游离紫杉醇经历大量的变化，如上所显示和所论述。将药物:脂质摩尔比为1:2的无药物gagomers和晶体的或水合的紫杉醇的混合物同样进行DSC。如图9下部中所例举，混合物中独立的组分保留它们的各自的热行为，显示所述脂质，吸热峰在100°C的区域，并且两个连续的吸热和放热峰在230-250。C的范围内。与上述全部相反，将TX-GAG制剂进行DCS，对于包封(与游离的相比)的药物揭示不同的热行为。同样如图9下部中所示，对于1:2的TX:PE的药物装填，紫杉醇的熔化峰消失，然而分解峰保留。用下面的药物:脂质装填获得类似的结果。对于全部样品，也通过热解重量分析(TGA)进行分解峰的识别。全部上述结果一起符合实施例10的发现，强烈表明获得了具有特别高药物装载的TX-GAG颗粒。实施例12灭菌TX-GAG颗粒中的紫杉醇稳定性根据图7的方案制备TX-GAG颗粒的水悬浮液，直到并且包括步骤5，也制备单独的紫杉醇水悬浮液(即，游离紫杉醇)。将来自TX-GAG和游离紫杉醇的样品留出，并且将每一体系的其余部分进行下列灭菌过程在120°C的12分钟的高压灭菌法。该灭菌过程的关键问题是对于TX-GAG制剂是可行的，是药物活性的保留。因此，将在灭菌过程之前留出的原始样品，还有经历所述过程的样品，在B16F10.9培养中对它们的细胞毒性测试，如实施例7中所描述。如图10中图解的结果所示，并且如预期，灭菌过程在游离紫杉醇的细胞毒性方面不产生任何显著的下降。而且，该过程在gagomer-装填的紫杉醇的细胞毒性方面也不引起任何显著的下降。事实上，全部四个体系在细胞毒性方面、0.30^M紫杉醇范围内的ICso值是类似的。这些结果表明TX-GAG制剂在施加的灭菌条件下具有良好的稳定性，并且还表明对于产物灭菌这是一个可行的方法。现在已经充分描述了本发明，本领域技术人员应当理解，在不背离本发明实质和范围并且不用过多实验的情况下，可以在各种各样的同等参数、浓度、和条件之内进行相同的发明。虽然己经关于其具体的实施方案描述了本发明，但是应当理解还可以修改它。该申请意欲覆盖本发明的任何变化、用途、或改编，一般得，按照本发明原理并且将本公开内容的背离，例如进入本领域内已知的或通常的实施，和例如可以应用于陈述如下的上文的基本特征，包括在后附权利要求的范围内。在这里引用的全部参考文献，包括期刊论文或摘要，公开的或相应的美国或国外的专利申请，出版的美国或国外的专利，或任何其它参考文献，通过参考全部结合于此，包括引用的参考文献中出现的全部数据、表、图、和正文。另外，在这里引用的参考文献中引用的参考文献也通过参考全部结合。对于已知方法步骤、常规方法步骤、已知方法或常规方法的参考不以任何方式承认，本发明的任何方面、描述或实施方案是在有关技术中公开的、教导的或提出的。上述具体实施方案的描述将充分揭示本发明的一般属性，以致他人可以通过应用本领域技术之内的知识(包括在这里引用的参考文献的内容)，在不背离本发明一般概念的情况下，不用过多实验而容易地为多种应用修改和/或改编这样的具体实施方案。因此，基于在这里提出的教导和指导，意欲将这样的改编和修改在公开的实施方案的等效的含义和范围内。应当理解，在这里的措辞或术语是为了描述而不是限制的目的，因此本说明书的术语或措辞将由技术人员根据在这里提出的教导和指导结合本领域普通技术人员的知识而解释。参考文献R.Margalit，R.Alon，M.Linenberg,I.Rubin,T丄Roseman,R.W.Wood.Liposomaldrugdelivery:thermodynamicandchemicalkineticconsiderations.J.ControlledRelease17:285-296(1991)权利要求1.一种脂质化糖胺聚糖颗粒，所述脂质化糖胺聚糖颗粒包含至少一种糖胺聚糖与至少一种具有伯氨基的脂质的反应产物，并且包封水不溶性的或低水溶性的有效成分。2.权利要求l的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述水不溶性的或低溶解性的有效成分是用于治疗癌症的化疗药物。3.权利要求2的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述化疗药物是紫杉醇。4.权利要求3的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述至少一种脂质是二月桂基磷脂酰基乙醇胺。5.权利要求l的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述至少一种糖胺聚糖选自由透明质酸、硫酸角蛋白、硫酸角质素、硫酸软骨素、硫酸肝素、硫酸乙酰肝素、硫酸皮肤素，及其片段、盐、和混合物组成的组。6.权利要求1的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述至少一种糖胺聚糖是透明质酸。7.权利要求1的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述脂质是磷酯酰乙醇胺。8.权利要求7的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述磷脂酰乙醇胺是二棕榈酰基磷酯酰乙醇胺。9.权利要求7的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述磷脂酰乙醇胺是二月桂基磷酯酰乙醇胺。10.权利要求1的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述颗粒大小在约2-5微米的范围内。11.根据权利要求1的脂质化糖胺聚糖颗粒，其中所述颗粒大小在约50-200纳米的范围内。12.—种药物组合物，所述药物组合物包含权利要求1的脂质化糖胺聚糖颗粒和药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或助剂。13.—种用于治疗患有病理性病症的受试者的方法，所述方法包含将包封在权利要求1的脂质化糖胺聚糖颗粒中的有效量的水不溶性或低水溶性有效成分施用到所述受试者，以治疗所述病理性病症。14.权利要求13的方法，其中所述病理性病症是癌症。15.权利要求14的方法，其中所述水不溶性或低水溶性有效成分是紫杉醇。16.在用水不溶性的或低水溶性药物治疗适应证的方法中，所述药物对于治疗所述适应证是有效的，改进是其中所述药物被包封在脂质化糖胺聚糖颗粒中施用。17.用于制备权利要求1的脂质化糖胺聚糖颗粒的方法，所述方法包含将脂质和水不溶性的或低水溶性的有效成分溶解在有机溶剂中；将溶解的脂质和溶解的水不溶性的或低水溶性有效成分一起组合到组合溶液中；将所述组合溶液蒸发至干燥并且分散为碱性硼酸盐缓冲液中的悬浮液；将分散的悬浮液和通过与偶联剂预温育活化的糖胺聚糖溶液混合并温育，而形成包封水不溶性的或低水溶性有效成分的脂质化糖胺聚糖颗粒；并且通过连续离心分级而富集脂质化糖胺聚糖颗粒。18.权利要求17的方法，所述方法还包含将分级的和富集的脂质化糖胺聚糖颗粒冷冻干燥。19.权利要求17的方法，其中所述脂质是磷酯酰乙醇胺。20.权利要求19的方法，其中所述磷酯酰乙醇胺选自由二棕榈酰基磷酯酰乙醇胺和二月桂基磷酯酰乙醇胺组成的组。21.权利要求17的方法，其中所述有机溶剂是乙醇。22.权利要求17的方法，其中所述糖胺聚糖是透明质酸。23.权利要求17的方法，其中所述混合的分散的悬浮液和活化的糖胺聚糖溶液的糖胺聚糖对脂质的重量比约为1:1。24.权利要求17的方法，其中所述混合的分散的悬浮液和活化的糖胺聚糖溶液的有效成分对脂质的摩尔比在约1:10至1:2的范围内。25.权利要求1的脂质化糖胺聚糖颗粒在配制用于治疗病理性病症的药剂中的用途，其中将对于治疗所述病理性病症有效的水不溶性的或低水溶性的有效成分包封在所述脂质化糖胺聚糖颗粒中。26.根据权利要求25的用途，其中所述病理性病症是癌症。27.根据权利要求26的用途，其中所述水不溶性的或低水溶性的有效成分是紫杉醇。全文摘要本发明提供在脂质化糖胺聚糖颗粒中包封的水不溶性的或低水溶性药物的剂型，用于靶向药物递送。文档编号A61K9/50GK101217946SQ200580044983公开日2008年7月9日申请日期2005年11月2日优先权日2004年11月2日发明者伊利亚·里夫金,诺加·叶鲁沙尔米,达恩·佩尔,里莫纳·毛尔高利特申请人:特拉维夫大学未来技术研发有限公司