专利名称：沙棘黄酮循环超声波提取方法
技术领域：
本发明属于植物有效成分提取工艺技术领域，具体为一种沙棘黄酮循环超声波提取方法。
背景技术：
沙棘Hippophae rhamnoides，又名醋柳、酸刺，为胡颓子科酸刺属植物，落叶權木，主要分布在欧亚大陆，在我国的三北地区为主产区。具有很高的食用和药用价值，是我国医学界常用的原料药材。沙棘中的化学成分很多，包括氨基酸、维生素、糖类、甙类及微量元素。黄酮化合物是沙棘中的主要生物活性成份，沙棘黄酮特别是其中的异鼠李素对心脑血管疾病有一定的疗效，尤其对心绞痛及心功能有明显改善效果。现有的提取沙棘中黄酮的成熟工艺主要是溶媒法，但是工艺耗时长，操作繁琐，需要设备庞大，难以控制。近年来，应用超声波技术在提取天然产物中显示出一定的优势。该技术是利用超生波产生“机械振动”，“空化现象”以及“热效应”等特性，使植物组织发生理化性质变化，达到提取有效成分的目的。现有文献报道中，2005年9月出版的《林产化学与工业》25卷第三期，“正交试验法优选沙棘总黄酮的超声波提取工艺”给出了利用超声波技术对沙棘叶中的总黄酮提取的优化方案，但是结果表明，总黄酮的提取率最高仅为1.72％。
发明内容
本发明为了解决现有传统工艺中提取沙棘黄酮产率低、操作复杂的问题而提供了一种沙棘黄酮循环超声波提取方法。
本发明是由以下技术方案实现的，一种沙棘黄酮循环超声波提取方法，其步骤为，取沙棘果实压榨除去果皮和籽，离心除去水份得纯果肉，干燥后备用；然后按照液料比3∶1(体积∶重量)的比例加入90～95％的乙醇，具体操作先将90～95％的乙醇投入到循环提取器中，搅拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取时间30～35分钟，提取温度为45℃～50℃，然后脱脂，水洗，过滤，干燥后即得成品。
利用本方法从沙棘果实中提取的黄酮内含的异鼠李素、槲皮素是有效的药用成分，实验表明沙棘黄酮是难溶于室温乙醇的，但是其在乙醇中的溶解度与乙醇的提取温度成正比，实际上，温度越高(最高不超过85℃)产生的乙醇蒸汽对设备产生的压力越大，这样一来就需要使用复杂和高性能的设备；而且高温还能破坏最有药效价值的成份，经过实验确定45～50℃是最佳温度范围。经过实验证明，如果采用浓度低于90％的乙醇，则沙棘果实中的其它成份也被较多地提取出来，如果要从中筛选出有效的药用成分，则必须进一步精致，使用的工艺很复杂；对本发明制药的目的而言，杂质增多不但影响有效的药用成份的含量还会影响有效成份对人体的疗效。90％的乙醇还容易回收利用，回收设备最高能回收到95％的乙醇。最终本发明所述的工艺总黄酮提取率为5.8％～6.0％。
沙棘黄酮提取物中异鼠李素的含量测定含量测定方法高效掖相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅顽键合硅胶为填充剂；甲醇-0.4％磷酸溶液(58∶42)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按异鼠李素峰计算应不低于3000。
对照样品溶液的制备精密称取异鼠李素对照样品适量，加甲醇制成每毫升含异鼠李素10μg的溶液，即得。
供试样品的制备取本品粉末0.5克，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇50毫升称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液25毫升，置于具塞锥形瓶中，加盐酸3.5毫升，在75℃水浴中加热水解1小时，立即冷却，转移至50毫升量瓶中，用适量乙醇洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，滤过，取滤液1毫升，转移至25毫升量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，即得。
测定法分别精密吸取异鼠李素对照样品10μl与供试样品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
以测定其中一次提取的沙棘黄酮样品为例本品按干燥品计算含异鼠李素(C16H12O7)的量。供试品由顺天制药有限公司提供，取样量，0.50781克；异鼠李素对照样品溶液10.78μg/ml(山西省药品检验所提供)；如附图1所示意，出峰时间7.408、对照峰面积240.23245；峰高17.64525、峰宽0.2067、板数7118。如附图2所示意，出峰时间6.925、样品峰面积约515.550、峰高42.65489、峰宽0.1844、板数7871。
对照峰面积(10μl)240.232，样品峰面积(5μl)515.550；计算含量为24.54％。
表1
上表为本工艺实验若干次提取结果。
在本发明中使用的超声波提取装置来源于北京弘祥隆生物技术开发公司，型号HF-200B，有效容积200L，超声功率300～3600W，最大功率5300W，可控温度室温～55度，搅拌速度0～2000rpm，材质不锈钢，处理能力30～70kg/hr，能耗0.1～0.15KW/kg，其上的循环提取器是实现本工艺的主要场所，乙醇和沙棘果肉混合物主要在循环提取器不断循环，接受超声波的作用，时间为主要指标。
本方法与传统的溶媒加热回流提取法相比，提取率相当，但是本工艺所用时间短，仅为溶媒法的1/6；而且提取乙醇用量少，耗损量仅为溶媒法的1/10，设备占地面积小，节约了能源，提高了经济效益和社会效益。与对比文献上提到的工艺相比，本发明得到的产物有效成份纯度高，主要成份集中为异鼠李素、槲皮素，而对比文献所述工艺得到的是总黄酮，提取率仅为1.72％而且并没有指出其中有效的药用成份的种类和含量及药用疗效。
图1为对照品的色谱2为样品的色谱图具体实施方式
实施例1一种沙棘黄酮循环超声波提取方法，其步骤为，取沙棘果实压榨除去果皮和籽，离心除去水份得纯果肉，干燥后备用；然后按照液料比3∶1(体积∶重量)的比例加入90％的乙醇，具体操作先将90％的乙醇投入到循环提取器中，搅拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取时间30分钟，提取温度为45℃，然后脱脂，水洗，过滤，干燥后即得成品。沙棘原料选自本公司沙棘种植基地。
最后以提取物为原料，加入糖粉，糊精，羧甲基淀粉钠，微晶纤维素，泊洛沙姆混合物用乙醇做湿润剂，制粒，60℃干燥后加入硬脂酸镁压片，每片中所含主要药用成份以异鼠李素计，不低于5mg。
实施例2一种沙棘黄酮循环超声波提取方法，其步骤为，取沙棘果实压榨除去果皮和籽，离心除去水份得纯果肉，干燥后备用；然后按照液料比3∶1(体积∶重量)的比例加入95％的乙醇，具体操作先将95％的乙醇投入到循环提取器中，搅拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取时间35分钟，提取温度为50℃，然后脱脂，水洗，过滤，干燥后即得成品。
实施例3一种沙棘黄酮循环超声波提取方法，其步骤为，取沙棘果实压榨除去果皮和籽，离心除去水份得纯果肉，干燥后备用；然后按照液料比3∶1(体积∶重量)的比例加入92％的乙醇，具体操作先将92％的乙醇投入到循环提取器中，搅拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取时间33分钟，提取温度为48℃，然后脱脂，水洗，过滤，干燥后即得成品。
权利要求
1.一种沙棘黄酮循环超声波提取方法，其特征在于步骤为，取沙棘果实压榨除去果皮和籽，离心除去水份得纯果肉，干燥后备用；然后按照液料比3∶1(体积∶重量)的比例加入90～95％的乙醇，具体操作先将90～95％的乙醇投入到循环提取器中，搅拌下加入干燥好的沙棘果肉，控制提取时间30～35分钟，提取温度为45℃～50℃，然后脱脂，水洗，过滤，干燥后即得成品。
2.根据权利要求1所述的沙棘黄酮循环超声波提取方法，其特征在于乙醇优选90％，提取时间优选30分钟，提取温度为45℃～50℃。
全文摘要
本发明属于植物有效成分提取工艺技术领域，具体为一种沙棘黄酮循环超声波提取方法。解决了现有传统工艺中提取沙棘黄酮产率低、操作复杂的问题。其步骤为，取沙棘果实压榨除去果皮和籽，离心除去水份得纯果肉，干燥后备用；然后按照液料比3∶1的比例加入90～95％的乙醇，将乙醇投入到循环提取器中，搅拌下加入干燥好的沙棘果肉，提取时间30～35分钟，温度为45℃～50℃，然后脱脂，水洗，过滤，干燥后即得成品。但是本工艺所用时间短，仅为溶媒法的1/6；而且提取乙醇用量少，耗损量仅为溶媒法的1/10，设备占地面积小，节约了能源，提高了经济效益和社会效益。得到的产物有效成份纯度高，主要成份集中为异鼠李素、槲皮素。
文档编号A61K36/185GK1900098SQ200610090929
公开日2007年1月24日 申请日期2006年7月4日 优先权日2006年7月4日
发明者马晋鹏, 齐坤华, 马驰, 逯转林 申请人:山西顺天制药有限公司