专利名称：降血糖药物组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的药物组合物，特别是涉及由玉米须和蚕茧组成的药物组合物。 本发明进一步涉及制备该组合物的方法，以及所说的组合物在牛产用于预防和治疗
n型糖尿病及相关疾病的药物中的应用。
背景技术：
随着人民生活水平的提高糖尿病发病率也呈逐年上升趋势。糖尿病患者血糖控 制不好可引起多种并发症，如心脑^管病变、肾功能衰竭、失明、截肢等。这些并 发症是患者致残、致死的主要原因。世界卫生组织的有关资料表明，糖尿病的患病
率、致残率和病死率及对总体健康的危害程度，己居慢性非传染性疾病的第3位; 糖尿病造成的死亡，也居当今世界死亡原因的第5位。糖尿病患者的死因主要是各 种并发症，其中脑血管病约占10%。因此，糖尿病性脑血'宵病受到国内外学者越来 越多的关注。现对糖尿病并存脑血符病的流行病学、发病机制等方面进行简要概述 (王铭维,糖尿病与脑血管病,中华老年医学杂志,2007;28(8):567)。目前全球糖尿病患 者已达18亿左右我国约有3000万,，据调查，我国45岁以上的人群中，有7%~8% 患糖尿病。预计到2010年，全世界糖尿病患者将达到2.4亿人。糖尿病发病率也逐 年增高，在京、沪、港和穗等大城市的成年人群中，其发病率已经达10°/。左右，我 国己成为仅次于印度的第2位糖尿病大国。糖尿病是脑血管病的重要的危险因素之 一，糖尿病并发脑血管病的比例是非糖尿病患者的4-10倍，因脑血管病死亡的糖尿 病患者占糖尿病患者总死因的10%。张斌等报道糖尿病患者脑血管病的患病率为 17.3%;尹岭等对923例糖尿病患者进行脑卒中危险因素调查表明，糖尿病脑卒中的 危险性比对照组增加3.6倍(p0.01、。在发病年龄上，糖尿病所致脑血管病发病年龄较轻，与非糖尿病患病人群相比，其脑血管病发病年龄可提前10~20年。还有学者 认为，不仅糖尿病患者脑卒中的发病率增高，糖耐量异常患者脑卒中发病率也比健 康人高2倍。Tuomilehto等在1996年报道(Prospective study of the middle-aged finnish population.S加ke,1996;27(2):210)，糖尿病合并脑梗死死因统计显示，男性中占16%、女 性占33%的死亡原因直接与糖尿病有关。
近年来，中医药防治糖尿病的研究取得了较大进展，在验证传统方剂的同时， 许多研究者还开发并研制了一批新的降血糖中成药物组合物。例如，中国专 利00131808.X号公开了由知母、天花粉、泽泻、玉竹、沙苑、淮山、地骨皮、 桑白皮、玉米须、枸杞组成的药物组合物。中国专利02122952.X号公开了一种 由桑皮、桑葚、桑叶、桑枝、桑蚕、玉米须-味中药组成的降血糖药物组合物。中 国专利200510109039.8号公开了包括玉米须、灵芝、苦瓜、甘草的药物组合物。 中国专利200610036515.2号公开了以黄芪、水蛭、玉米须、芡实、金樱了、益 母草、蝉蜕、山楂为原料制成的药物组合物。然而，这些组合物基本上都是由多种 天然中草药经简单的泡制和提取制成的。因此，不仅成分相对复杂，制备不便，而 且难以进行更深入的结构/药效研究，也不利于药物质量控制和中药现代化。
发明内容
本发明的一个H的是提供由玉米须和蚕茧组成的药物组合物。
根据本发明药物组合物的一个优选实施方案，其中玉米须占总量的33至67% (W/W)，蚕茧占67至33% (W/W)。
根据本发明药物组合物的一个优选实施方案，其中还可含有一种或多种具有相 同或相似活性的其他药物成分。
根据本发明药物组合物的一个优选实施方案，其中所说的其他药物成分选自天 然药物和化学合成药物。
根据本发明药物组合物的一个优选实施方案，其中还可含有一种或多种医药上 可接受的载体或赋形剂。
本发明的另一个目的是提供牛产如上限定的药物组合物的方法，该方法包括制 备玉米须和蚕茧按一定比例组合的混合物的水提取物，然后将它们按适当的比例与一种或多种医药上可接受的载体或赋形剂混合。
根据本发明方法的一个优选实施方案，其中玉米须和蚕茧提取物是适当重量比 例的玉米须和蚕茧的水提取物。
根据本发明方法的一个优选实施方案，其中玉米须占总量的33至67% ( W/W), 蚕茧占67至33% (W/W)。
本发明的再一个目的是提供如上限定的药物组合物在生产用于预防和治疗糖尿病及 相关疾病的药物中的应用。
本发明涉及由玉米须和蚕茧组成的新的药物组合物。本发明进一步涉及制备所 说的药物组合物的方法，以及所说的药物组合物在牛产预防和治疗糖尿病及相关疾 病的药物中的应用。
玉米须(Stigma maydis)为禾本科玉蜀黍植物玉米的干燥花柱和柱头，它含有多 种化学成分，如挥发油、皂苷、生物碱、类黄酮、多糖、P-谷甾醇、豆甾醇、尿囊 素、有机酸等。性平、味甘，具有利尿、泄热、平肝、利胆之功效，可用于治疗肾炎、 胆结石、糖尿病、黄疸、麻疹、乳糜血尿、血蹦等症，其水煎剂有一定的降糖作用。 现代药理研究表明玉米须有降血糖、利尿、止血、降血压等功效。临床用于治疗糖 尿病、慢性肾炎、泌尿系结石、泌尿系感染、高血压、血崩等病症疗效较好。现代 实验研究表明玉米须水煎剂可明显降低四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖，其30g的降糖作 用与IOO mg降糖灵作用相似。玉米须水煎剂具有对抗肾上腺素的升血糖作用，且玉 米须水煎剂对正常动物血糖无明显影响。由此可推测玉米须水煎剂可能有双胍类降 糖药物的作用。
蚕蛹(Silkworm pupa)为药膳同源传统中药材，具有很高的营养和药用价值。 我国的蚕蛹资源丰富，产量约占'全世界总产量的80%，年产鲜蛹30万吨以上。《本 草纲目》等古代医药经典著作中，均记载蚕蛹具有生津止渴、消食理气、壮阳、滋 补强壮等作用。近代药理学研究表明，蚕蛹具有促进脂肪代谢、保护肝脏、抗癌、 利尿等作用及增长智力、保护视力、延缓衰老等多种功能。蚕蛹水解复合氨基酸具 有提高免疫机能、保护肝脏、营养滋补强壮作用，雄性激素样作用，抗肿瘤作用及 降压、降血糖作用；蚕蛹不饱和脂肪酸特别是a-亚麻酸含量是维系人类脑进化的生 命核心物质，具有增长智力、保护视力、延缓衰老等多种功能。蚕蛹甲壳素的强碱水解脱乙酰基产物即为壳聚糖，甲壳素和壳聚糖具有降低胆固醇，提高机体免疫力， 降压，降血糖，强化肝脏机能。
本发明人在长期从事中药现代化研究的基础上，结合传统的中医药学理论和现 代生化提取工艺及药理学研究方法，以玉米须和蚕茧为主要提取原料，成功地制备 了具有降血糖作用的药物。药理学研究结果表明，本发明的药物组合物不仅可有效 地降低血糖，而且对正常动物血糖无影响(参见实施例)。因此，本发明的药物组合 物可作为一种新的降血糖药物，广泛用于临床。
为了制备本发明的药物组合物，可按照常规中药制备方法，按一定比例(例如 1:2至2:1， W/W)搭配玉米须和蚕蛹，通过水煎提取有效成分。简单地说，使用玉 米须和蚕蛹作为起始原料，将两者混合并洗净后用水浸泡2小时，大火煮沸后改小 火保持沸腾2小时使液体体积减小为牛药量重量的大约一半。冷却、抽滤并收集滤 液。在滤液中加入适当体积的95%乙醇，使提取液中酒精浓度约为75%， 4"C静止24 小时。然后用多层滤纸抽滤2次，充分去除沉淀物。用旋转蒸发仪浓縮回收乙醇， 浓縮物置于表面皿中加热，进一步去除乙醇和水分，直至无醇味。然后用冻千机冻 干24小时，再与一种或多种药用载体或赋形剂混合，从而得到本发明的药物组合物。
本发明的药物组合物含有玉米须和蚕蛹的活性成份，以及一种或多种医药上可 接受的载体和/或稀释剂，其中玉米须占药物组合物总重量的67-33%，蚕茧占 33-67%。必要时，本发明的药物组合物还可含有一种或多种具有相同或相似作用的 天然或化学合成的其它活性成分。
药理学研究结果表明，本发明的药物组合物不仅可有效地抑制被试动物的血糖 升高，而且对正常动物血糖无影响。特别是，我们的实验研究结果证明，本发明药 物组合物的两种基本活性成分具有明显地协同降血糖活性。因此，本发明的药物组 合物的降糖作用显著优于单独的玉米须和或蚕蛹的降血糖作用。本发明的药物组合 物不仅可用于预防和治疗糖尿病，而且还可用于预防和治疗某些与血糖异常升高相 关的其他疾病。这些疾病包括但不仅限于肥胖症、高血压病、冠心病、脂肪肝及高 血脂。
可能按照制药工^中已知的方法将本发明的药物组合物制成片剂、胶囊剂、丸 剂、粉末剂、栓剂以及溶液剂和悬浮剂。其中优选的是适于经胃肠道给药的胶囊剂和片剂。在制备适于口服给药的胶囊剂、片剂、丸剂和粉末剂时，可以使用蔗糖、 乳糖、半乳糖、玉米淀粉、明胶、微晶纤维素、羧甲基纤维素等作为载体或赋形剂。
另外，也可以使用制药工业中已知的方法和辅助成分将本发明的药物组合物制 成适于口服给药的溶液剂和悬浮剂。为了制S"适于胃肠道外途径给药的溶液剂或悬 浮剂，可以使用蒸馏水、注射用水、等渗氯化钠溶液或者低浓度(例如卜100mM) 磷酸盐缓冲盐水(PBS)作为载体或稀释剂。可以在这些胃肠道外给药的制剂中加 入一种或多种其他辅助成分或添加剂，例如可使用抗坏血酸作为抗氧化剂，使用苯 甲酸钠等作为防腐剂。在这些剂型的制剂中，还可以含有其他适当的增溶剂、崩解 剂、润滑剂、着色剂、分散剂或表面活性剂。
一般说来，本发明药物组合物的口服给药剂量为O.l至5g生药/kg体重/天，较 好为0.1至500mg生药/kg体重/天，最好为1至2g牛药/kg体重/天。然而，更确切 的用药剂量应根据待治疗的疾病或病理状态的性质、严重程度、病人的年龄、体重、 待治疗病人对所用药物的敏感性及给药方式等因素由临床医牛确定。
以下实施例旨在进一步举例说明，而不是限制本发明。在不违背本发明的精神 和原则的前提下，对发明个别技术步骤进行的任何改动和改变都将落入本发明待批 权利要求范围内
具体实施例方式
实施例1:本发明降血糖药物组合物的制备
(1) 称取玉米须200g，蚕蛹200g，洗净后，分别加蒸馏水400ml浸泡2小时 后，大火煮沸，改小火保持沸腾2小时使液体体积约为生药量重量的一半(约300ml)， 冷却，抽滤并收集滤液，在滤液中加入适当体积的95%乙醇，使提取液中酒精浓度 约为75%， 4'C静止24小时。收集上清，用多层滤纸抽滤2次，充分去除沉淀物。 用旋转蒸发仪浓縮回收乙醇，浓縮物置于表面皿中加热，进一步去除乙醇和水分， 至无味，然后用冻干机冻干24小时，得玉米须水提物和蚕茧水提物。
(2) 称取玉米须200g，蚕蛹400g，洗净后混合，加蒸馏水900ml浸泡2小时， 然后大火煮沸，煮沸后改小火保持沸腾2小时，使液体体积减小为生药量重量的一 半(约300ml)。冷却、抽滤并收集滤液，在滤液中加入适当体积的95%乙醇，使提取液中酒精浓度约为75%， 4'C静止24小时。收集上清，然后用多层滤纸抽滤2次， 充分去除沉淀物。用旋转蒸发仪浓縮回收乙醇，浓缩物置于表面皿中加热，进一步 i除乙醇和水分，然后用冻干机冻干24小时，得到本发明药物组合物的冻干粉末。 可以按照常规方法，将如上制得的干粉制备成各种适于经胃肠道途径和胃肠道 途径外途径给药的各种常规剂型。例如，按常规方法将如上制得的干粉无菌装入胶 囊，即得到胶囊剂型的本发明药物组合物。在上述干粉中无菌加入适当量的注射用 水，即得到注射液剂型的本发明药物组合物。
实施例2:本发明的药物组合物对四氧嘧啶诱发的高血糖动物的降糖作用
取昆明小鼠120只，雌雄各半，禁食5小时，自由饮水，尾静脉注射四氧嘧啶 75mg/Kg(30秒内推完)，72h后，禁食12小时，自由饮水。眶上缘取血，筛选血糖 值》180mg/dL的实验动物。将各组小鼠平均血糖值相差不大于20mg/dL随机分为6 组，即高剂量组、中剂量组、低剂量组...模型组、阳性组。另取正常小鼠20为空白 对照组。连续给药20天后，禁食12h，自由&水，眶上缘取血，用葡萄糖氧化酶法 在波长490nm处测血糖值，数据进行t-test统计学检验分析。结果如下列表2所不。
表l本发明的药物组合物对四氧嘧啶诱发的高血糖动物的降糖作用(mg/dL)( ;土s)
组别数量(只)血糖值(mg/dL)
空白对照组2079. 94±7. 54
低剂量组20139. 46±40. 97*
中剂量组20142. 00±46. 65*
高剂景组20174. 23±36. 89
阳性组20136. 66±34. 10*
模型组20185. 44±35. 97
*P<0.05 与模型组比较。
从表l所示的结果可以看出，正常造模后给药，低剂量组、中剂量组、阳性组 与模型组比较连续给药20天后血糖浓度明显降低(p《0.05)。可见，本发明的药物 组合物具有明显的降低血糖作用. '
8实施例3:本发明的药物组合与单方玉米须和蚕茧单一成分提取物对四氧嘧啶诱发 的高血糖小鼠的降糖作用比较
取昆明小鼠80只，雌雄各半，禁食5小时，自由饮水，尾静脉注射四氧嘧啶 75mg/Kg(30秒内推完)，72h后，禁食12小时，自由饮水，眶上缘取血，筛选小鼠， 使血糖值》180mg/dL，各组小鼠平均血糖值相差不大于20mg/dL随机分为4组，雌 雄各半，即玉米须水提物给药组、蚕茧水提物给药组、玉米须蚕茧混合提取物给药 组和模型组。另取正常小鼠20只(雌雄各半)为正常对照组。连续给药25天后，禁 食12h，自由饮水，眶上缘取血，用葡萄糖氧化酶法在波长4卯nm处测血糖值，数 据进行t-test统计学检验分析。结果如下列表l中所示。
表2本发明药物组和物对四氧嘧啶诱发的高血糖动物的降糖作用及其与单一成分提取物
治疗效果的比较(mg/dL)( S±s)
组别数量(只)血糖值(mg/dL)
正常对照组2075. 86±5. 73
模型组20188. 29±40. 15
玉米须水提物给药组20150. 34±36. 56
蚕茧水提物给药组20189. 23±27. 41
玉米须蚕茧混合提取物给药组20128. 25±28. 32*
*P<0.01与模型组相比较。
从表2所示的结果可以看出，连续投用本发明的药物组合物(玉米须蚕茧混合提取 物)25天后，血糖浓度与模型组相比较，差异非常显著(PO.Ol)。用药后，实验 动物的血糖水平基本恢复正常值。我们的实验结果显示，玉米须和蚕茧组合物的水 提物的降糖效果明显好于单独地使用的玉米须水提物或蚕茧水提物。这一结果清楚 地提示，玉米须与蚕茧两者具有显著的协同降血糖作用。因而，本实验的结果坚定 了我们进一步开发本发明的组合物并将其推向产业化的决心。实施例4:本发明药物组合物预防给药对四氧嘧啶诱发的高血糖动物的降糖作用
取昆明小鼠120只，雌雄各半，随机分为6组，即空白对照组、高剂量组、中 剂量组、低剂量组、模型组、阳性组。正常饲养，高剂量组、中剂量组、低剂量组 连续给药15天后，禁食5小时，自由饮水，尾静脉注射四氧嘧徒75mg/Kg(30秒内 推完)，72h后，禁食12小时，自由饮水，^上缘取血，用葡萄糖氧化酶法在波长 490nm处测血糖值，筛选小鼠，使血糖值》180mg/dL。阳性组开始给药，15天后禁 食12h，自由饮水，于眶上缘取血，用葡萄糖氧化酶法在波长490mn处测血糖值， 数据进行t-test统计学检验分析。实验研究的结果如下列表3所不。
表3本发明的药物组合物预防给药对四氧嘧啶诱发的高血糖动物的降糖作用(mg/dL)( 5±s)
组别数量(只)血糖值(mg/dL)
空fl对照组2(—'80. 93±7, 16
低剂量组20 131. 16±20. 06*
中剂量组20143.55±24.64
高剂量组20147. 47±26. 68
阳性组20147. 96±34. 43
模型组20174. 33±78. 71
*P<0.05 与模型组比较。
从表3所示的结果可以看出，小鼠预防给药30天后，低剂量组与模型组比较血 糖浓度明显降低(p《0.05)。其他组与模型组比较，血糖浓度也有一定降低趋势(p 《0.2)。可见，玉米须和全蛹提取物构成的组合物可有效地预防四氧嘧啶诱发的血 糖升高。
权利要求
1、以玉米须和蚕茧水提取物为活性成分，并含有一种或多种医药上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。
2、 根据权利要求1的药物组合物，其中活性成分玉米须占总量的33至67% (W/W)，蚕茧占67至33% (W/W)。
3、 制备权利要求1限定的药物组合物的方法，该方法包括制备适当比例的 玉米须和蚕茧混合物的水提取物，然后与一种或多种医药上可接受的载体或赋形 剂混合。
4、 根据权利要求3的方法，其中玉米须占总量的33至67% (W/W),蚕茧 占67至33% (W/W)。
5、 权利要求1限定的药物组合物在生产用于预防和治疗糖尿病的药物中的 应用。
全文摘要
本发明涉及新的药物组合物，特别是涉及由玉米须和蚕茧组成的药物组合物。本发明进一步涉及制备该组合物的方法，以及所说的组合物在生产用于预防和治疗II型糖尿病及相关疾病的药物中的应用。
文档编号A61K36/899GK101474367SQ20081000000
公开日2009年7月8日 申请日期2008年1月2日 优先权日2008年1月2日
发明者刚 吕, 孙靖辉, 安丽萍, 左红香, 张成义, 坦 李, 李海斌, 杜培革, 丹 田, 野 申, 苑广信 申请人:北华大学