Metrnl蛋白在制备降血糖药物方面的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及医药【技术领域】，本发明提供了Metrnl蛋白在制备降血糖药物或保健食品中的应用。本发明经体外实验显示，在正常型小鼠和Metrnl过表达小鼠实施空腹糖耐量实验中，相较正常型小鼠而言，Metrnl过表达小鼠的血糖水平的上升明显要迟缓，这说明Metrnl蛋白的过表达阻滞了血糖的上升，提示Metrnl蛋白有降低血糖的作用。并且Metrnl蛋白本身是一种人体的内源性蛋白质，因此作为潜在药物的安全性很高。
【专利说明】Metrnl蛋白在制备降血糖药物方面的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及医药【技术领域】，具体涉及Metrnl蛋白在制备降血糖药物方面的应用。【背景技术】
[0002]Metrnl蛋白是一个非常新的蛋白，由metrnl基因编码，大小为30kDa左右,Metrnl蛋白的氨基酸序列见NP_001004431.1，该蛋白的表达、生理功能近于未知状况。
[0003]中国专利申请CN200980137344.4，发明名称为“生长因子METRNL的治疗用途”，申请公布号:CN102164611A，公开了 METRNL是一种具有神经元保护和/或神经发生作用的神经生存和生长因子，METRNL蛋白可用于治疗神经系统的疾病、疾患或损害。
[0004]糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。糖尿病时长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。发展新的降血糖药物，一直是药物开发中的一个热点和重点。
[0005]目前国内外尚 无有关Metrnl蛋白在制备降血糖药物方面的文献报道。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于提供Metrnl蛋白的新用途。
[0007]本发明提供了 Metrnl蛋白在制备降血糖药物或保健食品中的应用。
[0008]本发明经体外实验显示:在正常型小鼠和Metrnl过表达小鼠实施空腹糖耐量实验，即在空腹下给予葡萄糖腹腔注射，小鼠摄入葡萄糖后，血糖会很快上升。我们发现:相较正常型小鼠而言，Metrnl过表达小鼠的血糖水平的上升明显要迟缓，这说明Metrnl蛋白的过表达阻滞了血糖的上升，因此，Metrnl蛋白有降低血糖的作用。
[0009]本发明中，所述的Metrnl蛋白是一种蛋白质,大小为30kDa,人Metrnl蛋白的氨基酸序列见NP_001004431.1号。
[0010]本发明所述的Metrnl蛋白在制备降血糖药物或保健食品中的应用，所述的药物是由药物活性成分Metrnl蛋白和药学上可接受的辅料组成的药物组合物。
[0011]所述的药学上可接受的辅料是指药学领域常规的药物辅料，其中，稀释剂、赋形剂如水等；粘合剂如纤维素衍生物、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等；填充剂如淀粉等；崩裂剂如碳酸钙或碳酸氢钠；也可以在组合物中加入其他辅助剂如香味剂和/或甜味剂。
[0012]所述的药物组合物可采用医学领域常规的方法，将Metrnl蛋白作为活性成分，与药学上可接受的辅料制成各种剂型。当用于腹腔注射时，可将其制备成常规的固体制剂如片剂、粉剂或胶囊剂等；用于注射时，可将其制备成注射液。在各种制剂中，活性成分的重量含量为0.1%~99.9%，优选的重量含量为0.5~90%。
[0013]所述的药物组合物可以用于降低高脂血症的血糖水平。可以按剂型通过腹腔注射、腹腔注射、皮下注射、静脉注射、肌肉注射、淋巴结内注射、粘膜用药等途径应用于需要治疗的个体。个体可以是人或动物。剂量一般为I~1000mg/公斤体重/天，具体可根据个体的年龄、病情等进行变化。
[0014]相比于现有技术，本发明的有益效果如下:本发明提供了 Metrnl蛋白在制备降血糖药物方面的应用，Metrnl蛋白可以明显降低因腹腔注射葡萄糖导致的血糖升高。这对于糖尿病的治疗可能具有重大意义。并且Metrnl蛋白本身是一种人体的内源性蛋白质，从目前的资料来对人体可能的副作用很小，因此作为潜在药物的安全性很高。
【专利附图】
【附图说明】
[0015]图1是正常小鼠和Metrnl过表达小鼠腹腔注射葡萄糖后的血糖变化情况。【具体实施方式】
[0016]现结合实施例和附图，对本发明作详细描述，但本发明的实施不仅限于此。
[0017]正常型小鼠购自上海南方模式动物中心。
[0018]本发明所用试剂和原料均市售可得或可按文献方法制备。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。
[0019]实施例1:Metrnl脂肪特异性过表达小鼠的制备
[0020]首先制备Metrnl过表达病毒载体，制备方法如下:制备方法如下:克隆获得Metrnl基因的开放性阅读框，将获得的序列插入慢病毒穿梭质粒的多克隆位点，将穿梭质粒与其他包装质粒共转染HEK293细胞，随后收集培养上清，并过滤离心纯化和浓缩病毒。
[0021]上述的Metrnl过表达病毒载体，也可以使用直接市购的商品制得，如Metrnl基因的开放性阅读框可购自Thermo公司，货号MMM1013-202763251。病毒包装质粒可购自invitrogen 公司，货号 K5325-20。
[0022]构建Metrnl脂肪细胞特异性过表达小鼠，培养方法如下:构建包含脂肪特异性表达基因Fabp4上游启动子区域与Metrnl基因开放性阅读框的质粒Fabp4-Metrnl，测序正确后，酶切线性化，注射受精卵，移植到假孕母鼠的子宫内，对后代小鼠进行基因组鉴定。挑选转基因成功的子鼠与C57BL6小鼠交配，下一代小鼠中基因组中携带Fabp4-Metrnl的为实验组，未携带的为对照组。
[0023]Metrnl脂肪特异性过表达小鼠也可委托上海南方模式动物中心构建。
[0024]实施例2 =Metrnl过表达可以降低因腹腔注射葡萄糖导致的血糖升高
[0025]对约12周龄的正常型小鼠和Metrnl过表达小鼠均使用相同剂量的葡萄糖，给药方法为腹腔注射，具体方法如下:
[0026]12周龄的正常型小鼠和Metrnl过表达小鼠，禁食8小时后，于腹腔注射葡萄糖，剂量为lg/kg。随后在不同的时间点(具体的时间点见表1)取小鼠的尾部静脉血，用快速血糖仪(美国强生公司产品)测出血糖。
[0027]结果表明，腹腔注射葡萄糖在Metrnl过表达小鼠上导致的血糖升高作用要显著低于在正常小鼠上的作用，详见表1和图1。
[0028]表1.Metrnl过表达可抑制腹腔注射葡萄糖导致的血糖升高
[0029]
【权利要求】
1 .Metrnl蛋白在制备降血糖药物或保健食品中的应用。
【文档编号】A61K38/18GK103536904SQ201310525184
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2013年10月29日 优先权日:2013年10月29日
【发明者】缪朝玉, 李志勇, 王培
申请人:中国人民解放军第二军医大学