专利名称：一种降血糖的药物组合物及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物，特别是一种降血糖的药物组合物，及其用于制备降血糖药物的用途。
背景技术：
糖尿病是一种由多基因、多因素引起的慢性代谢性疾病。中药复方具有多靶点、多种成分协同作用的优势，与单一靶点的药物相比更适合此类疾病的治疗。以阿卡波糖为代表的α -葡萄糖苷酶抑制剂通过减缓碳水化合物的消化吸收，能够降低II型糖尿病患者的餐后血糖(PPHG)，增加胰岛素敏感性及分泌能力，已经成为II型糖尿病的一线治疗药物， 占据30%以上的市场份额，具有广阔的市场前景。但目前尚无具有α-葡萄糖苷酶抑制作用的中药复方制剂上市。前期研究工作和文献报道显示，桑白皮中的1-脱氧野尻霉素(DNJ)具有较强的 α -葡萄糖苷酶抑制作用，而且桑白皮和葛根配伍具有协同增效作用。动物体内实验结果表明，桑葛复方的降低血糖作用明显优于单一的桑白皮提取物和葛根提取物，可开发成具有 α-葡萄糖苷酶抑制作用的桑葛降糖复方。专利“一种降血糖的药物组合物及其制备方法”(申请号CN200610099050. 5)保护
了桑白皮葛根为1 6 1的组合物，其专利说明书中表明，当葛根用量一定，且桑白皮 葛根比例为1 6 1时，随着桑白皮用量的增加，其α-葡萄糖苷酶抑制作用是逐渐增强的，即当桑葛复方中DNJ含量增加时，复方对α -葡萄糖苷酶抑制作用也随之增强，表明DNJ 对α-葡萄糖苷酶的抑制作用存在量效关系。但目前尚没有研究对葛根在桑白皮葛根复方(简称桑葛复方)中的作用进行阐述。
发明内容
本发明的发明人经过大量地实验，证明了葛根在桑葛复方中的作用，即在桑葛复方中，当桑白皮用量不变时，随着葛根用量的增加，降糖效果也随之增强，并提供了新的桑葛复方。具体地，本发明涉及以下几个方面本发明的一个方面涉及一种药物组合物，其含有桑白皮和葛根，其特征在于桑白皮和葛根的比例按重量份计为1 2 1 10，例如可以为1 3 1 10，1 6 1 10 或 1 8 1 10。在本发明的实施方案中，所述药物组合物的组成为桑白皮和葛根。在本发明的实施方案中，所述桑白皮和葛根的比例按重量份计为1 2、1 3、 1 4、1 6、1 8 或 1 10。在本发明的一个实施方案中，当桑白皮和葛根的比例为1 8禾Pl 10时，能够明显降低空腹血糖以及餐后30 120min血糖，并且随着葛根所占比例的增加，降糖效果更好。
在本发明的另一个实施方案中，当桑白皮和葛根的比例为1 3禾Pl 6时，分别与桑白皮和葛根的比例为3 1和6 1时相比，具有更强的降血糖作用，且降糖作用更持久。本发明的另一方面涉及本发明的药物组合物在制备降血糖药物中的用途。本发明的另一方面涉及本发明的药物组合物在制备治疗高血糖、糖尿病或其并发症的药物中的用途。本发明的另一方面涉及本发明的药物组合物的制备方法，其包括以下步骤(1)取原料桑白皮和葛根，其比例按重量份计为1 2 1 10;(2)分别制备桑白皮提取物和葛根提取物，其制备方法为将桑白皮和葛根分别经过水或有机溶剂如乙醇提取，或提取后进行进一步纯化，得到提取物；(3)将步骤O)的桑白皮和葛根提取物混合均勻后得到本发明的药物组合物，即桑葛提取物。其中步骤O)中的桑白皮和葛根提取物优选采用以下制备方法桑白皮提取物的制备方法为以下方法中的其中之一A.桑白皮药材经过切制或粉碎，用水提取，提取次数为1 3次，优选提取3次，提取温度为室温 煮沸，优选煮沸提取，溶剂量为药材重量的10 30倍重量份，优选20-30 倍，获得桑白皮药材水提取液，提取液浓缩后离心，上清液浓缩成稠膏得到桑白皮提取物A， 或经过喷雾干燥、减压或常压干燥得桑白皮提取物A ；B.桑白皮药材水提取液浓缩后加入乙醇沉淀，乙醇浓度范围50% 90%，优选乙醇浓度范围为70 80%，沉淀弃之，上清液浓缩，回收乙醇后成稠膏得到桑白皮提取物B， 或经过喷雾干燥、减压或常压干燥得桑白皮提取物B ；C.桑白皮药材水提取液浓缩后离心，上清液过强酸型阳离子交换树脂，树脂可选择001 ± 4,001 ± 7、D61、DOOlcc等型号，优选001 ± 7 (732型)，上柱流出液弃之，收集 0. 1 IN的氨水洗脱液，优选用0. 5N的氨水洗脱，洗脱液浓缩后得到桑白皮提取物C，或经过喷雾干燥、减压或常压干燥得桑白皮提取物C ；D.桑白皮药材水提取液浓缩后离心，上清液过强酸型阳离子交换树脂，树脂可选择001 ± 4,001 ± 7、D61、DOOlcc等型号，优选001 ± 7 (732型)，上柱流出液弃之，收集 0. 1 IN的氨水洗脱液，洗脱液浓缩挥去氨水，PH值8 9，浓缩液继续上强碱型阴离子交换树脂，树脂可选择201 4、D201等型号，优选201 4型，上柱流出液和水洗液(水洗至中性)串联上弱酸型阳离子交换树脂柱，树脂可选择WK40、110、D113、D151等型号，优选 D151型，收集从弱酸型阳离子交换树脂柱下来的PH为8 9的流出液和水洗液，合并浓缩后得到桑白皮提取物D，或经过常压、减压干燥、冷冻干燥或喷雾干燥得桑白皮提取物D ；E、桑白皮药材水提取液浓缩后离心，上粉末或颗粒型活性碳柱，提取液也可经过醇沉上清液挥去乙醇后在上活性炭柱，上柱完毕用水洗至茚三酮反应阴性时换用10 50%的乙醇洗脱，优选15 25%的乙醇洗脱，用1-萘酚试剂定性检测总糖，当molish反应消失时结束洗脱，洗脱液浓缩后得到桑白皮提取物E，或经过常压、减压干燥、冷冻干燥或喷雾干燥得桑白皮提取物E ；葛根提取物的制备方法为以下方法中的其中之一F.葛根药材经过切制或粉碎，用水提取，提取次数为1 3次，提取温度为室温 煮沸，优选煮沸提取，溶剂量为药材重量的10 30倍重量份，优选20 30倍，获得葛根药材的水提取液，提取液浓缩后离心，上清液继续浓缩成稠膏得到葛根提取物F，或经过喷雾干燥、减压或常压干燥得葛根提取物F ；G.葛根药材经过切制或粉碎，用浓度为30 95%乙醇回流提取，优选70 80% 的乙醇提取，提取次数为1 3次，优选提取3次，溶剂量为药材重量的10 30倍重量份， 优选20 30倍，获得葛根药材的醇提取液，提取液浓缩后离心，上清液继续浓缩成稠膏得到葛根提取物G，或经过喷雾干燥、减压或常压干燥得葛根提取物G ；H、葛根药材的水提取液浓缩后加入乙醇醇沉，乙醇浓度范围50% 90%，优选乙醇浓度范围为70 80%，沉淀弃之，上清液继续浓缩成稠膏得到葛根提取物H，或经过喷雾干燥、减压或常压干燥得葛根提取物H ；I、葛根药材的醇提取液浓缩至无醇后加入水沉淀，沉淀弃之，上清液浓缩后得到葛根提取物I，或经过喷雾干燥、减压或常压干燥得葛根提取物I ；J、葛根药材的水或醇提取液浓缩后，上非极性大孔树脂柱，树脂型号可选择AB-8、 DS401、D101、D3520、NKA-9、D4006等型号，优选AB_8、DS401，上柱流出液和水洗液弃之，收集50 95 %乙醇洗脱液，优选70 %乙醇洗脱，洗脱液浓缩后得到葛根提取物J，或经过喷雾干燥、减压或常压干燥得葛根提取物J。 在本发明的实施方案中，采用制备方法A-E制备桑白皮提取物；在本发明的实施方案中，采用制备方法F-J制备葛根提取物。在本发明的一个实施方案中，采用制备方法C或D制备桑白皮提取物，在本发明的另一个实施方案中，采用制备方法F或J制备葛根提取物。在本发明的实施方案中，桑白皮提取物中DNJ的含量为1. 45 % -60 %，葛根提取物中葛根素的含量为10% -35.4%。混合选自A-E制得的桑白皮提取物和选自F-J制得的葛根提取物，得到本发明的药物组合物，即桑葛提取物。在本发明的一个实施方案中，分别将C和J、D和J制得的提取物混合，得到桑葛提取物。本发明的另一方面涉及葛根在延迟α -葡萄糖苷酶抑制剂肠道吸收中的用途。在所述用途中，葛根可以是葛根原料药经过粉碎制得，也可以是按照上述制备方法制备得到的提取物，即葛根经过水或乙醇提取或提取后进行纯化得到的产物。在本发明的一个实施方案中，葛根是经过乙醇提取以及大孔树脂柱纯化后获得的产物。所述α -葡萄糖苷酶抑制剂为DNJ、N-Me-DNJ、GAL-DNJ或fagomine，在本发明的一个实施方案中，所述α -葡萄糖苷酶抑制剂为DNJ。发明的有益效果1.本发明进一步证明了葛根在桑葛复方中的作用，将桑白皮和葛根在复方中的配比范围进一步扩大为桑白皮葛根比例为1 2 1 10，即当桑白皮用量不变时，随着葛根用量的增加，复方的降糖效果随之增强。2.本发明通过药代动力学试验初步证明了本发明复方的部分作用机制，即葛根中的成分对DNJ在动物体内的吸收、代谢、分布、排泄等过程发生了影响，延滞了肠道DNJ的快速吸收，使更大浓度的DNJ与小肠刷状缘上的a_葡萄糖苷酶充分接触，对酶的抑制作用增强，致部分双糖不能水解成葡萄糖吸收入血，使得餐后血糖变得更低、平稳且降糖作用更持久。3.本发明证明了桑葛复方中葛根对桑白皮的协同作用，克服了以往研究认为的在该复方中桑白皮起主要作用、只需要少量葛根的偏见，并提出了新的作用机制，为糖尿病治疗药物的研制开辟了新方向。
图1.大鼠口服给予桑白皮和桑葛复方后DNK40mg/kg)的药时曲线。其中横坐标为给药后时间(单位h)，纵坐标为DNJ浓度(单位ng/mL)。
具体实施例方式下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。实验例实验例1、2的桑白皮提取物按照实施例3制备，葛根提取物按照实施例10制备， 桑葛提取物按照实施例11制备。实验例1不同配比桑葛复方的药效学实验(1)采用雄性ICR小鼠(购自北京维通利华实验动物技术有限公司)64只，每组8只， 体重为M_28g，禁食过夜(从第一天5 OOpm开始空腹，第二天上午开始造模)，通过快速尾静脉注射新鲜配制的链脲佐菌素(STZ)溶液造模，后者的剂量为140mg/kg，造模结束后使小鼠自由饮食。在造模2周后进行空腹血糖(白天空腹3-4h)测定，血糖在11. ImM以上的可作为成功的模型选用。具体造模方法请参见药理学实验指南-新药发现和药理学评价， H.G.沃格尔编著，科学出版社2001年第一版。然后将各组小鼠连续灌胃给予各个组别的受试药物(所用样品分别按照实施例 3、10和11制备)，其中桑白皮和葛根单独使用时的提取物给药剂量分别为0. 04g/kg和 0. 21g/kg，使用桑葛复方时桑白皮提取物的给药剂量为0. 04g/kg，葛根的用量参见表1中配比，每天灌胃2次，连续灌胃2个月，在2个月后进行模型小鼠的淀粉耐量试验，具体方法如下STZ糖尿病小鼠白天禁食不禁水4h，然后分别灌胃给予与0. 15g/ml糊化后淀粉混勻在一起的各组受试药物，给药剂量与长期给药剂量相同，其中淀粉的剂量为3g/kg，空白对照(为正常小鼠)和模型对照组仅给予淀粉，然后在给予淀粉的0min、30min、60min及 120min进行血糖的测定，试验结果见表1。表1不同配比的桑葛复方连续给予2个月后淀粉耐量试验结果(1)
权利要求
1.一种药物组合物，其含有桑白皮和葛根，其特征在于桑白皮和葛根的比例按重量份计为1 2 1 10。
2.权利要求1的药物组合物，其中所述的桑白皮和葛根的比例按重量份计为1 3 1 10。
3.权利要求2的药物组合物，其中所述的桑白皮和葛根的比例按重量份计为1 6 1 10。
4.权利要求3的药物组合物，其中所述的桑白皮和葛根的比例按重量份计为1 8 1 10。
5.权利要求1-4任一项的药物组合物在制备降血糖药物中的用途。
6.权利要求1-4任一项的药物组合物在制备治疗高血糖、糖尿病或其并发症的药物中的用途。
7.权利要求1-4任一项的药物组合物的制备方法。
8.葛根在延迟α-葡萄糖苷酶抑制剂肠道吸收中的用途。
9.权利要求8的用途，其中所述的α-葡萄糖苷酶抑制剂为1-脱氧野尻霉素。
全文摘要
本发明提供了一种降血糖的药物组合物，及其用于制备降血糖药物的用途。所述药物组合物含有桑白皮和葛根，其特征在于桑白皮和葛根的比例按重量份计为1∶2～1∶10。本发明还涉及所述药物组合物的制备方法及其用于制备治疗高血糖、糖尿病或其并发症的药物中的用途。本发明还涉及葛根在延迟α-葡萄糖苷酶抑制剂的肠道吸收中的用途。
文档编号A61P3/10GK102579585SQ20111000253
公开日2012年7月18日 申请日期2011年1月7日 优先权日2011年1月7日
发明者刘春丽, 樊利青, 段震文, 郭树仁 申请人:北京北大维信生物科技有限公司