专利名称：一种滴眼制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于药品技术领域，涉及一种滴眼制剂及其制备方法。
背景技术：
干眼是因泪液质和(或)量的异常以及泪液动力学异常引起的眼部不适、眼表损害的一 类疾病的总称，是最常见的眼表疾病之一。临床表现为干涩、烧灼、物感、痒感、视物模糊、 眼红及视力疲劳等。严重的干眼还可以引起角膜炎、角膜新生血管、角膜溃疡等严重危害视 力，其对人们生活质量的影响已愈来愈受到关注。其发生与睑缘炎和睑板腺功能障碍有密切 的关系。
目前的研究提出，干眼在本质上可能是一类非感染性炎症性疾病，因而抗炎成为干眼 治疗的一个新方向。千眼的发生与睑缘炎和睑板腺功能障碍有密切的关系。研究发现，睑板 腺中含有大量的棒状杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌及丙酸杆菌。已知丙酸杆菌可以产生蜡脂酶 及甘油三脂酶，凝固酶阴性葡萄球菌还可以产生胆固醇酯酶。这些酶的存在可以改变睑板腺 脂质的成分， 一方面可导致睑板腺分泌物的熔点上升，使得睑板腺脂质的粘稠度增加，引起
睑板腺导管狭窄甚至阻塞，导致睑板腺功能障碍；另一方面，可产生游离脂肪酸，破坏泪膜
的稳定性，引起干眼。多西环素(doxycycline，又名强力霉素、脱氧土霉素)具有广谱的抗菌作 用，口服多西环素能有效地抑制引起慢性睑缘炎及睑板腺功能障碍的细菌生长，而且能有效 地抑制凝固酶阴性葡萄球菌及丙酸杆菌脂酶的产生及其活性，因而对慢性睑缘炎及睑板腺功能障碍均具有良好的治疗效果，从而起到治疗干眼的作用。同时，目前常用的抗炎药物 糖皮质激素的长期应用具有较大的副作用，可引发白内障、青光眼等严重的并发症。近年来 的研究表明，既往作为抗生素使用的多西环素可以抑制体外培养的人角膜上皮细胞及结膜上 皮细胞炎症相关因子的表达。经过实验证明，多西环素滴眼液可以减轻干眼兔眼表的炎症反 应，并能有效地抑制眼化学伤诱导的角膜新生血管形成。例如，中国专利200410027807.0即 公开了含量为0.1wt^ 0.5wtW盐酸强力霉素的滴眼液及其制备方法，该制备方法为将盐酸 强力霉素、渗透压调节剂溶解于蒸馏水中；补加蒸馏水至所需体积，调节pH值为5.5 6.0; 膜过滤除菌，分装即得所述的滴眼液。
然而，多西环素在干燥情况下是一种淡黄色粉或黄色结晶性粉末，无臭无味，味苦，微 有引湿性，室温下稳定，遇光变质,但在氯仿中几乎不溶；在中性及碱性溶液中不稳定，抗菌 活性迅速降低，但在酸性溶液中活性增高；配成水溶液时性质不稳定，见光易发生分解，1 X水溶液pH值为2—3，刺激性较大。
多西环素分子中含有多官能团和5个不对称碳原子的复杂化合物，其中含有酚一酮、酮 一烯醇及酞胺等结构。其结构由不稳定的碳环和二元酮组成，故易受光、热、水等因素影响 而发生分解。盐酸多西环素的分解反应主要包括碱催化的水解反应，发生在C1和C6位上的 异构化反应，以及氧化反应等。
目前上市的眼部制剂之中，传统的眼用制剂仍占主导地位，其中滴眼剂占据约70%，其 中62. 4 %为溶液型，8. 7 %为混悬型；还有少量的软膏剂占17. 4%。但滴眼剂由于泪液的引 流、停留时间短等因素影响， 一般只有1-10%的生物利用度，而眼膏剂由于一般会引起视野 模糊，病患的依从性较差。泪液的引流作用以及眼受刺激所引起的眨眼是造成眼周给药流失的最主要原因。凝胶系 统的作用便是增加制剂的粘性，减小流动性，延长接触时间以达到改良效果。
原位凝胶是指在用药前的为液体状态，滴入眼穹窿后由于环境的改变而形成凝胶的一种 制剂。相对与生物黏附性凝胶，原位凝胶能够提供更准确的剂量，凝胶更均匀地涂布，因此 有更好的依从性和重现性。依据形成凝胶的机制不同，主要分为温度敏感型、离子敏感型、 pH敏感型以及混合型。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种多西环素滴眼制剂，该滴眼制剂性质稳定，吸收效果好。 一种多西环素滴眼制剂，含有0.03 — 0.5wt^多西环素，蒸馏水、还含有羟丙基-p-环糊精、
抗氧剂，pH为5.5-6.0，其中多西环素与羟丙基-P-环糊精的重量比为1: 1-50。
优选地，所述的抗氧剂选自亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠中的一种
或一种以上的组合。
所述滴眼制剂优选为温度敏感原位凝胶滴眼液，该原位凝胶滴眼液还含有泊洛沙姆，该 泊洛沙姆在制剂中的含量为16 — 30wt%。更优选地，所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407和泊洛沙 姆188，泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的用量比为25: 1 ~3: 2。 本发明的另一 目的是提供上述西环素滴眼制剂的制备方法。 一种制备权利要求1所述多西环素滴眼制剂的方法，包括以下步骤--(1)用超声法、搅拌法或研磨法将多西环素、蒸馏水和羟丙基-p-环糊精配制成多西环 素一羟丙基-卩-环糊精包合物水溶液，使用0.45pm微孔滤膜过滤'得溶液A;
6(2)加入适量抗氧剂，调节溶液的pH值为5.5-6.0，补加蒸馏水至所需重量，膜过滤除菌。
在步骤(1)和(2)之间，还包括有以下步骤
称取重量份的泊洛沙姆，缓慢分散到适量蒸馏水中，低温冷藏保存，直至形成澄清均一
的溶液，得溶液B，将溶液A和溶液B充分混合；或者按照上述多西环素滴眼制剂称取重量 份的泊洛沙姆，缓慢分散到溶液A中，低温冷藏保存，直至形成澄清均一的溶液。
所述适合制成眼用凝胶的药物可接受的载体是使多西环素的眼用凝胶制剂稳定又较少刺 激性的基质，可延长药物在眼部的滞留时间，增强药物吸收，提高生物利用度，减少用药次 数，增强疗效和用药安全性。本发明经过大量实验优选，从众多高分子材料中选取了本发明 优选的凝胶基质，泊洛沙姆。
本发明的优点在于，利用羟丙基-)3-环糊精制备药物的包合物，提高药物溶解性、溶出速 率，并提高药物稳定性。并利用泊洛沙姆水溶液的温度敏感性质及不同型号泊洛沙姆的组合， 制备了具有适宜相转变温度的眼用原位凝胶制剂，使其能够在室温条件下以液态状态给药并 在角膜表面形成凝胶，同眼膏剂相比，并不引起视力模糊，方便患者用药，提高了用药依从 性，同滴眼液相比，减少了药物的流失，同时延缓药物消除从而提高局部生物利用度。
图1为多西环素一水合物的羟丙基-J3-环糊精包合物的相溶解图
图2为多西环素一水合物、羟丙基-|3-环糊精、二者物理混合物以及包合物的X射线衍射图谱。
具体实施例方式
环糊精是淀粉经环糊精葡萄糖基转位酶作用后形成的一系列环状寡聚糖。由于环糊精及 其衍生物本身呈水溶性，对人体安全低毒，且不会引起免疫反应，所以引起了人们越来越多 关注，在包合技术中广泛应用。
药物的环糊精包含物，其特点在于能增加药物的溶解度；增加药物的稳定性；使挥发 性液体、固体或油状液体粉末化；降低药物的剌激性及毒副作用；掩盖苦味以及提高药物生 物利用度。近年来常将发生药物制成的各种包含物。在药用上cu P环糊精较为常用。
环糊精由6、 7、 8或更多个D-吡喃葡萄糖单元通过a-l， 4糖苷键连结而成的环状化合 物，分别称:a-CD、 (3-CD、 ，CD。
P-CD的空穴大小介于其余二者之间，空穴形状呈棱柱状，在水中的溶解度为18.5g/L， 最容易从水中析出结品，随着水中温度的升高溶解度增大，因此包合性好，而且毒性小，利 于吸收和分解。但是，P-CD只能包合药物的部分基团，而且稳定性不佳，对很多药物不合适， 故达不到应有效果；另外，P-CD受到自身溶解度较小的性质限制，其增溶能力有限。
半合成的J3-CD衍生物，主要是对其分子结构进行必要的修饰。P-CD水溶性较小，原因 在于空穴的两端有7个伯羟基和14个仲羟基,分子间或分子内氢基阻止了水分子的水化作用。 将甲基、以及、羟丙基、羟乙基等基团引入P-CD分子中与羟基进行烷基化反应，便可以破 坏P-CD分子内氢键的形成，使水溶性发生变化。
羟丙基-P-环糊精(HP-p-CD)是亲水性的P-CD衍生物，与p-CD相比，物理化学性质发 生了以下的改变1、从结晶性变成了非晶性。2、溶解性质变化。HP-P-CD在水中的溶解度 大于50%，并可溶于醇的水溶液。3、 HP-(3-CD不被胃酸和a-淀粉酶水解，几乎不参与生物
8体内代谢，也不蓄积。口服后基本上全部以完整的形态随大便排出体外。4、 p-CD与药物形 成复合物对药物有缓释作用，而HP-P-CD与药物形成复合物对药物有促释作用，使药物在生 物体内迅速释放。5、 P-CD有溶血作用，非肠道给药也有一定的刺激性。HP-(3-CD表面活 性低，基本上没有溶血性和刺激性。6、卩-CD与HP-P-CD对客体药物的选择性有些差异。
在多篇文献报道中，HP-P-CD有以下作用提高药物溶解性、提高溶出速率、提高口服 药物生物利用度、减少药物对胃肠道的刺激、掩盖药物的不良气味、提高药物稳定性，部分 文献对HP-P-CD的改善粉体性质以及靶向作用等有提及。
羟丙基-P-环糊精为P-环糊精的衍生物，巨头筒状分子结构，极易溶于水，包合量大，毒 性低，可应用于眼部给药。经试验，多西环素与羟丙基-P-环糊精按一定的重量比进行包合后， 溶解度得到提高，稳定性也有较大的提高。
实施例l
本实施例所述的滴眼制剂，为滴眼液，以100g计，含多西环素0.10g、羟丙基-卩-环糊精 l.OOg、亚硫酸氢钠0.10g， pH 5.5-6.0。
制备方法取盐酸多西环素(含多西环素0.10g)，羟丙基-p-环糊精1.00g，加入少量蒸 馏水至湿润，于研钵中充分研磨3h，加入适量蒸馏水稀释，得浅黄色澄明多西环素包合物溶 液，加入亚硫酸氢钠0.10g，补加蒸馏水至100g，过程中调整pH值为5.0 -6.0 (pH调节剂 可为磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氢氧化钠、或碳酸氢钠)，膜过滤除菌，得多西环素滴眼液。
实施例2
9本实施例所述的滴眼制剂，为滴眼液，以100g计，含多西环素0.10g、羟丙基-(3-环糊精 1.00g、亚硫酸氢钠0.10g， pH 5.5-6.0。
制备方法取羟丙基-(3-环糊精1.00g，溶于10g蒸馏水中，得羟丙基-P-环糊精溶液；取 多西环素(含多西环素一水合物0.10g)，分散于约5.0g蒸馏水中，在搅拌中缓慢滴加到羟丙 基-P-环糊精溶液中，超声3h,得浅黄色澄明多西环素包合物溶液。通过相溶解和X射线衍射 分析，如图l和图2。其中，图I (A)多西环素一水合物 (B)羟丙基-(3-环糊精(C) 多西环素一水合物与羟丙基-P-环糊精物理混合物(1: 24w/w) (D)多西环素一水合物羟 丙基-p-环糊精包合物(1: 24w/w)。
从图1可见，羟丙基-p-环糊精能明显提高多西环素一水合物在水中的溶解度；从X射线 衍射分析结果可见，多西环素一水合物与羟丙基-P-环糊精物理混合物中有明显的药物特征 峰，而二者包合物中则无，可推断多西环素一水合物与羟丙基-P-环糊精形成包合物。
在多西环素包合物溶液中加入硫代硫酸钠0.10g，补加蒸馏水至100g，过程中调整pH值 为5.5-6.0，膜过滤除菌，得多西环素滴眼液。
实施例3
本实施例所述的滴眼制剂，为温度敏感原位凝胶滴眼液，以100g计，含多西环素0.03g、 羟丙基-(3-环糊精0.90g、泊洛沙姆407 16.00g、亚硫酸氢钠0.10g， pH 5.5-6.0。
制备方法取羟丙基-P-环糊精0.90g，溶于10g蒸馏水中，得羟丙基-P-环糊精溶液；取 多西环素(含多西环素一水合物0.03g)，分散于约1.5g蒸馏水中，在搅拌中缓慢滴加到羟丙基-J3-环糊精溶液中，超声3h，得浅黄色澄明多西环素包合物溶液，为溶液A。
取泊洛沙姆407 16.00g，缓缓分散至50g蒸馏水中，低温冷藏保存12-24h，直至形成澄
清均一的溶液，为溶液B。
将以上溶液A与溶液B充分混合，加入亚硫酸氢钠0.10g，补加蒸馏水至100g，过程中
调整pH值为5.0-6.0,膜过滤除菌，得多西环素眼用温度敏感原位凝胶滴眼液。相变温度为
29隱3(TC。
实施例4
本发明所述的滴眼制剂，为温度敏感原位凝胶滴眼液，以100g计，含多西环素0.50g、 羟丙基-P-环糊精25.00g、泊洛沙姆407 20.00g、泊洛沙姆188 3.00g、亚硫酸氢钠0.10g， pH 5.5-6.0。
制备方法取羟丙基-P-环糊精25.00g，溶于40g蒸馏水中，得羟丙基-P-环糊精溶液；取 多西环素(含多西环素一水合物0.50g)，分散于约5g蒸馏水中，在搅拌中缓慢滴加到羟丙基 -P-环糊精溶液中，磁力搅拌10h，得浅黄色澄明多西环素包合物溶液。
取泊洛沙姆407 20.00g，泊洛沙姆188 3.00g、缓缓分散至以上多西环素包合物溶液中' 低温冷藏保存12-24h，直至形成澄清均一的溶液。加入亚硫酸钠0.10g，补加蒸馏水至100g， 过程中调整pH值为5.0-6.0，膜过滤除菌，得多西环素眼用温度敏感原位凝胶滴眼液。相变 温度为27-28。C，经模拟泪液稀释后(凝胶-泪液体积比约为40: 7)，相变温度为36-37°C。
实施例5本发明所述的滴眼制剂，为温度敏感原位凝胶滴眼液，以100g计，含多西环素0.10g、 羟丙基-P-环糊精3.00g、泊洛沙姆407 25.00g、泊洛沙姆188 10.00g、亚硫酸氢钠0.10g， pH 5.5-6.0。
制备方法取羟丙基-P-环糊精3.00g，溶于10g蒸馏水中，得羟丙基-|3-环糊精溶液；取 多西环素(含多西环素一水合物0.10g)，分散于约5g蒸馏水中，在搅拌中缓慢滴加到羟丙基 -P-环糊精溶液中，磁力搅拌10h，得浅黄色澄明多西环素包合物溶液，为溶液A。
取泊洛沙姆407 25.00g、泊洛沙姆188 10.00g、缓缓分散至45g蒸馏水中，低温冷藏保存 12-24h，直至形成澄清均一的溶液，为溶液B。
将以上溶液A与溶液B充分混合，加入亚硫酸氢钠0.10g，补加蒸馏水至100g，过程中 调整pH值为5.0-6.0，膜过滤除菌，得多西环素眼用温度敏感原位凝胶滴眼液。相变温度为 29-30°C，经模拟泪液稀释后(凝胶-泪液体积比约为40: 7)，相变温度为36-37°C。
实施例6
本发明所述的滴眼制剂，为温度敏感原位凝胶滴眼液，以100g计，含多西环素0.1g、羟 丙基-(3-环糊精5.00g、泊洛沙姆407 25,00g、泊洛沙姆188 10.00g、亚硫酸氢钠0.10g， pH 5.0 -6.0。
制备方法取羟丙基-(3-环糊精5.00g，溶于10g蒸馏水中，得羟丙基-P-环糊精溶液；取 多西环素(含多西环素一水合物0.10g)，分散于约5g蒸馏水中，在搅拌中缓慢滴加到羟丙基
12-p-环糊精溶液中，磁力搅拌10h，得浅黄色澄明多西环素包合物溶液，为溶液A。
取泊洛沙姆407 25.00g、泊洛沙姆188 2.00g、缓缓分散至40g蒸馏水中，低温冷藏保存
12-24h，直至形成澄清均一的溶液，为溶液B。
将以上溶液A与溶液B充分混合，加入亚硫酸氢钠0.10g，补加蒸馏水至100g，过程中
调整pH值为5.0-6.0,膜过滤除菌，得多西环素眼用温度敏感原位凝胶滴眼液。相变温度为
25-26°C，经模拟泪液稀释后(凝胶-泪液体积比约为40: 7)，相变温度为33-34°C 。
实施例7:多西环素凝胶对角膜新生血管抑制作用的疗效评估
目的研究局部滴用多西环素眼用凝胶对大鼠角膜新生血管的治疗效果。 方法雌性SD大鼠14只，手术向角膜囊袋顶端植入bFGF缓释膜片，手术切口对合好，切 口不缝合，术毕加用0.5%妥布霉素眼膏。将大鼠随机分成治疗组(0.1%多西环素凝胶)和对 照组(赋形剂)。治疗组0.1%多西环素滴凝胶，每天四次，每次滴50ul，术后连续用药6天； 对照组用赋形剂，每天四次，每次滴50ul。心脏灌注墨汁，使角巩缘、结膜血管，及角膜新 生血管完全变为黑色。剜出眼球，4%多聚甲醛固定，24小时后取出固定好的眼球，手术显微 镜下沿角巩缘取下角膜，根据CNV生长区放射状剪开角膜，铺平后裂隙灯下照相。在治疗后 7天用裂隙灯显微镜动态观察角膜并拍照。应用Image Pro-Plus 5.1图像处理软件(Media Cybernetics公司,USA)测量CNV的长度和面积，血管长度以角巩缘向缓释片垂直生长的血管 为准，各组之间的统计学分析采用独立样本ttest或者Mann-WhitneyUtest。统计学差异被定 义为P<0,05。所有统计分析均采用SPSS 13.0软件包(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)。 结果表l两实验组的缓释片的大小以及其到角膜缘距离的数据*
对照组 0.1%多西环素凝胶 P值
缓释片大小(mm2) 2.29±0.11** 2.37±0.17 0.892
缓释片到角膜缘距离(mm)1.21±0.03 1.22±0.05 0.956
*在试验第7天测得 **结果用算术平均数±标准差描述
表2两试验组的血管区面积和平均血管长度
对照组 0.1%多西环素凝胶 P值
血管区面积(mm2) 5.2U2.65 0.62±0.54 0.001 *
平均血管长度(mm)1.69士0.58 0.45±0.27 0.000
*Mann-Whitney U test
治疗组和对照组之间bFGF缓释片的大小以及缓释片到角膜缘的距离的差异无统计学意义(表 1)。治疗组和对照组之间，血管面积及血管长度的差异有统计学意义(表2)。 结论局部滴用多西环素凝胶可以抑制角膜新生血管。
1权利要求
1、一种多西环素滴眼制剂，含有0.03-0.5wt％多西环素，蒸馏水、其特征在于还含有羟内基-β-环糊精、抗氧剂，pH为5.0-6.0，其中多西环素与羟丙基-β-环糊精的重量比为1∶1-50。
2、 根据权利要求1所述的多西环素滴眼制剂，其特征在于所述的抗氧剂选自亚硫酸钠、亚 硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠中的一种或一种以上的组合。
3、 根据权利要求1所述的多西环素滴眼制剂，其特征在于所述滴眼制剂为温度敏感原位凝胶滴眼液，该原位凝胶滴眼液还含有泊洛沙姆，泊洛沙姆在制剂中的含量为16 — 30wt%。
4、 根据权利要求3所述的多西环素滴眼制剂，其特征在于所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407和 /或泊洛沙姆188。
5、 根据权利要求4所述的多西环素滴眼制剂，其特征在于所述泊洛沙姆为泊洛沙姆407和 泊洛沙姆188，泊洛沙姆407和泊洛沙姆188的用量比为25: 1~3: 2。
6、 根据权利要求1_5任一项所述的多西环素滴眼制剂，其特征在于所述多西环素是以多 西环素一水合物或盐酸多西环素存在于制剂中。
7、 一种制备权利要求1所述多西环素滴眼制剂的方法，其特征在于主要包括以下步骤(1) 用超声法、搅拌法或研磨法将多西环素、蒸馏水和羟丙基-P-环糊精配制成多西环素一羟丙基-P-环糊精包合物水溶液，使用0.45pm微孔滤膜过滤，得溶液A;(2) 加入适量抗氧剂，调节溶液的pH值为5.0-6.0，补加蒸馏水至所需重量，膜过滤除菌。
8、 根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于在步骤(1)和(2)之间，还包括有以下步骤按权利要求3 — 5任一项所述的多西环素滴眼制剂称取重量份的泊洛沙姆，缓慢分散到适 量蒸馏水中，低温冷藏保存，直至形成澄清均一的溶液，得溶液B;将溶液A和溶液B充分 混合；或者按权利要求3 — 5任一项所述的多西环素滴眼制剂称取重量份的泊洛沙姆，缓慢分 散到溶液A中，低温冷藏保存，直至形成澄清均一的溶液。
全文摘要
本发明公开了一种多西环素滴眼制剂及其制备方法，多西环素滴眼制剂含有0.03-0.5wt％多西环素，蒸馏水、还含有羟丙基-β-环糊精、抗氧剂，pH为5.0-6.0，其中多西环素与羟丙基-β-环糊精的重量比为1∶1-50。本发明所述的多西环素滴眼制剂可提高多西环素药物溶解性、溶出速率，并提高药物稳定性。
文档编号A61K9/08GK101537010SQ200910038429
公开日2009年9月23日 申请日期2009年4月7日 优先权日2009年4月7日
发明者何子昕, 吴传斌, 丹 梁 申请人:中山大学