专利名称：2-羟丙基-β-环糊精包合地塞米松注射液的制作方法
2-羟丙基-β -环糊精包合地塞米松注射液本发明涉及皮质激素注射液，特别是一种环糊精包合地塞米松注射液。
背景技术：
地塞米松是一种强效糖皮质激素，具有较强的抗炎、抗内毒素、抑制免疫、抗休克 及增强应激反应等药理作用，地塞米松及其不同的酯或盐广泛应用于各科治疗多种疾病， 如自身免疫性疾病，过敏，炎症，哮喘及皮肤科、眼科疾病，当用于地塞米松用于静脉注射治 疗时，多采用地塞米松磷酸钠为活性成分的注射液剂型。由于地塞米松强大的抗炎作用、 抗休克作用，地塞米松磷酸钠注射液已经成为抢救垂危病人的必不可少的急救药物。由于 地塞米松磷酸钠是一种前体药物，经注射后需要在体内由磷酸酯酶解离为地塞米松才能起 效，而在急救治疗中，急救药物的起效速度往往决定了病人的生死存亡，因此寻求一种起效 更快的地塞米松制剂成为我们一直希望解决的技术问题。此外，现有技术中国产地塞米松磷酸钠注射液中含有30%的丙二醇，事实上在国 外，早在上世纪三十年代开始就着手对丙二醇安全性进行了深入的研究，积累了大量资料， 目前已发表的相关安全性及临床研究文献有160多篇。上世纪70年代，G.Martin在儿科 杂志撰文指出，液体剂型中的丙二醇具潜在毒性问题。1978年K. Arulananthan报道了丙 二醇的中枢毒性。此后1985 1988年间，Demey及其合作者报道静脉滴注含有丙二醇的 硝酸甘油制剂可引起高渗不良反应、溶血、乳酸性酸中毒以及中枢神经功能障碍。Fligner 报告了局部应用含有丙二醇磺胺嘧啶银盐于烧伤病员，由于丙二醇的透皮吸收，血中丙二 醇峰浓度高达1059μ g/ml，除由高渗造成的不良反应外，患者尚可出现呼吸、心跳停止。此 后Keiner报告，5名患者接受含有丙二醇静脉药物治疗时，35份血清样本及8份脑脊液样 本中丙二醇浓度分别为6 711 μ g/ml和11 599μ g/ml,由于丙二醇的代谢，病员出现了 乳酸性酸中毒。由此可见，作为辅料与溶剂，丙二醇具有潜在的危险性，可产生高渗透压、乳 酸性酸中毒、中枢神经系统抑制、溶血、局部静脉炎以及呼吸、心脏毒性反应，其安全性，尤 其是用急救治疗的安全性令人担忧。环糊精能与许多药物形成包合物，从而增加药物的水溶性，但由于其具有肾毒 性不能用于注射，而对环糊精化学修饰而得到的羟基烃基化环糊精，特别是羟丙基 β “环糊精，其包合能力更强，能显著提高很多药物的溶解度、稳定性，并且由于其亲水性 好，易于生物环境相容，且因表面活性较小，不易溶血，注射时对组织的刺激性也较小。目前 已经有多种采用羟丙基-β-环糊精的注射剂。中国专利申请CN200410071922.8公开了一 种冰片的羟丙基- β _环糊精包合物及其制剂和制备方法，虽然也是对难溶于水的有效成 分的包合，但冰片与地塞米松等皮质激素物理、化学性质、化学分子结构均有很大不同，用 于包合冰片的工艺和配方并不适用于地塞米松等皮质激素。世界专利W02004/069280提到了一个可局部用于耳朵和眼睛的澄清液体抗生素 /皮质激素液体滴加剂，该发明申请的发明点在于，由无水乙醇中得到的地塞米松和羟丙 基β环糊精包合结晶物，过程是将地塞米松和羟丙基β环糊精40-45°C下溶于适量无水 乙醇中，浓缩析出包合结晶物，最后成浆状，冷却过滤，得到地塞米松和羟丙基β环糊精包
3合物。然而，申请的所公开的该包合物制备工艺中包合物溶液浓缩至最后需要留一定的体 积母液，由于羟丙基β环糊精易溶于乙醇，其在乙醇中的溶解度也在50g/100ml以上，此 外由于羟丙基β环糊精的饱和乙醇溶液粘度较高，因此得到的包合物为泥浆状物，粘度很 大，几乎难于过滤，并且即使进行了过滤，由于羟丙基β环糊精在乙醇中的高溶解度，也会 有相当一部分包合物和未包合的羟丙基- β _环糊精被留在母液中。同时由于该包合物制 备过程使用纯溶媒无水乙醇，在制备包合物物时乙醇本身会被包合到羟丙基β环糊精中 (chem. pharm, Bull，720-750，1988)，所以为了提高包合率，只能更进一步提高羟丙基β环 糊精的用量，而且得到的包合物乙醇溶媒残留较高。由于乙醇被包合在羟丙基环糊精 中，常规方法难于处理，使得该包合物难于应用到对溶媒残留要求较高的注射液的制备中。中国专利申请CN200610130124. 7公开了一直皮质激素包合水溶液及其应用，公 开了以地塞米松、氟米龙为活性成分的皮质激素包合水溶液，该申请的技术方案中，最优 选了 2-羟丙基-β-环糊精作为包合用辅料，然而根据欧洲药典公开的内容表明，羟丙 基-β -环糊精的取代度范围为2. 8-10. 5，然而上述申请中均未公开所用羟丙基-β -环糊 精的取代度，而羟丙基-β-环糊精与其包合能力与肾毒性、溶血性都密切相关。取代度过 低或过高都会影响包合注射时的效果，因此优选一种适合取代度的羟丙基_环糊精用 来制备包合药物注射液现有技术种存在的问题。
发明内容
在实验中我们惊奇的发现，通过优选2-羟基_ β _环糊精的取代度范围，所提供的 包合地塞米松注射液在除了具有较高的稳定性、注射安全性外，能够在注射后更迅速起效， 从而更有利于治疗。本发明提供了一种2-羟丙基-β-环糊精包合的地塞米松注射液，所述地塞米松 与2-羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1 1 20，其特征在于，所用的2-羟丙基-β-环糊 精取代度优选为4 7特别优选为4 6。所述地塞米松与2-羟丙基-β -环糊精的摩尔比优选为1 2 5。所述的注射液，地塞米松含量为0.05% 1%，优选为0. 0.5%，特别优选为 0. 1%,0. 2%,0. 5%。所述的注射液中还可以加入PH调节剂；如盐酸溶液、氢氧化钠溶液、碳酸氢钠溶 液、沙氏磷酸盐缓冲液、巴氏硼酸盐缓冲液、吉斐氏缓冲液、硼酸缓冲液等等，优选磷酸/磷 酸盐缓冲液。所述注射液的PH值优选为5 7所述的注射液还可以加入注射剂中常见的附加剂，所述的附加剂的加入可以按照 《药剂学》(崔福德，2003年11月第五版)第三章第二节中表3-4公开的附加剂种类和浓度 范围添加。优选加入作为螯合剂的依地酸二钠0. 01%-0. 1%，作为抗氧剂的亚硫酸氢钠、 亚硫酸钠、α -生育酚、焦亚硫酸钠和硫代硫酸钠中的一种或几种0. 05% -0. 2%，作为渗透 压调节剂的0. 4% -0. 9%氯化钠、4% 5%葡萄糖、 2. 5%甘油，以上各种附加剂可以 加入一种或几种。本发明提供的包合地塞米松注射液的制备方法如下将2-羟基-β _环糊精、地塞 米松加入含水或不含水的极性有机溶剂中，使其溶清，加入或不加稀释水，蒸出有机溶剂， 得到地塞米松包合物的水溶液，将其他附加剂溶于适量的注射用水中，与包合物水溶液混和并稀释至需要的浓度即得，过滤、灭菌、封装。所述极性有机溶剂可选六个碳以内的醇、酮、醚、有机胺或其它们类似物中的一 种或几种；优选乙醇，丙酮，四氢呋喃，中的一种或几种；最优选乙醇和丙酮。该有机溶 剂的水分要求不高，以配制过程能够溶解环糊精衍生物和皮质激素为准。比如可以选用 80% -96%的乙醇水溶液，一般的药用乙醇(94% -96% )均可以使用；比如水分不超过 10%的丙酮，都可以使用。配制过程加入的稀释水，可以在蒸除有机溶剂前后一次性加入， 也可以分次加入；比如稀释水加入的方法分为浓缩蒸除前加一次，浓缩蒸除过程中再加两 次；或者在浓缩蒸除过程分三次加入。配制过程温度要求不严格，0-50°C下都可以，一般室 温下20-25 °C最好。稀释水优选注射用水。如果使用含水的有机溶媒，在其含水量足够整个配制过程 使用的情况下，可以不用加入稀释水，或者只加入少量的稀释水。配制地塞米松包合溶液时地塞米松和水的重量比为1 2到1 500，地塞米松和 有机溶剂的重量比为1 3到1 200。地塞米松和水的重量比优选为1 5到1 100; 地塞米松和有机溶剂的重量比优选为1 5到1 50。我们意外的发现，与现有的地塞米松磷酸钠注射相比，本发明提供的地塞米松包 合物注射液，所制得的注射液在静脉注射时能够较长时间维持较高的DEX血药浓度，从而 可以在更好的发挥地塞米松的疗效的同时降低注射液中DEX的浓度，从而克服皮质激素 的副作用。同时血药浓度检测表明在本发明提供的技术方案中所得的地塞米松包合物注 射液能够快速起效，其注射后一小时内的血药浓度明显高于同样浓度的地塞米松磷酸钠 (以地塞米松计)注射液。而与未经优选取代度范围的包合注射液相比，本发明所得的注 射液在各个取样时间点上所测得的血药浓度也显著提高，据分析可能是通过优选2-羟丙 基-β-环糊精的取代度范围，使得被包合的地塞米松解离速度更为稳定，解离速度更快， 产生了快速、持续起效的技术效果。特别是用于抢救危重病人时，能够更快速、持续起效的 药物往往能够产生挽救生命的决定性作用，因此本发明提供的地塞米松包合物注射液与现 有技术相比产生了在对于危重病人抢救的效果方面产生了也显著的进步，特别是在优选了此外，由于优选了 2-羟丙基-环糊精的取代度，使得制得的地塞米松包合物的物 理化学性质更为一致，因此与现有技术中的地塞米松注射液和未优选2-羟丙基- β -环糊 精取代度的包合物相比，本发明提供的地塞米松包合注射液的稳定性也较好。
具体实施例方式本发明实施例1-7所使用的2-羟丙基- β -环糊精为市售，取代度为4. 1-5. 9实施例1室温下将20g 2-羟丙基-β-环糊精溶于(取代度范围为4. 1 5. 9) 150ml丙酮 中，加入5g地塞米松，搅拌溶清，再搅拌30分钟，微孔膜过滤(220nm)，加入200ml的注射用 水，搅拌5分钟，减压浓缩，蒸除溶媒，得到地塞米松/2-羟丙基β环糊精包合物水溶液。另取注射用水加入Ig EDTA-2Na,磷酸盐缓冲溶液调pH至7. 5，再用氯化钠调至 等渗，微孔膜过滤(220nm)，加入到前述地塞米松/3-羟丙基β环糊精包合物水溶液中至 1000ml，过滤、灭菌、封装，所得注射液浓度为5mg/ml。实施例2
5
40 士 2°C下将4g 2-羟丙基- β环糊精(取代度范围为4. 1 5. 9)溶于80ml丙 酮中，加入Ig地塞米松，搅拌溶清，再搅拌30分钟，微孔膜过滤(220nm)，加入6mL的注射用 水，搅拌5分钟，减压浓缩，浓缩过程分两次加入注射用水，每次6ml，除尽溶媒，得到地塞米 松/2-羟丙基β环糊精包合水溶液，备用。另取注射用水加入Ig EDTA-2Na,磷酸盐缓冲溶液调pH至6. 5，再用氯化钠调至 等渗，微孔膜过滤(220nm)，加入到前述地塞米松/2-羟丙基β环糊精包合物水溶液中至 1000ml，过滤、灭菌、封装，配制过程在氮气保护下进行，所得注射液浓度为lmg/ml。实施例3室温下将28g羟丙基-β环糊精(取代度范围为4. 1 5. 9)溶于80ml无水乙醇 中，加入2g地塞米松，搅拌溶清，再搅拌30分钟，微孔膜过滤(220nm)，搅拌5分钟，减压浓 缩，浓缩过程分三次加入注射用水，每次15ml，蒸除乙醇，得到地塞米松/羟丙基-β -环糊 精包合水溶液，备用。另取注射用水加入Ig EDTA-2Na,磷酸盐缓冲溶液调pH至7，再用氯化钠调至等 渗，微孔膜过滤(220nm)，加入到前述地塞米松/3-羟丙基β环糊精包合物水溶液中至 1000ml，过滤、灭菌、封装，配制过程在氮气保护下进行，所得注射液浓度为2mg/ml。实施例4室温下将20g 2-羟丙基-β -环糊精溶于(取代度范围为4. 1 5. 9) 80ml丙酮 中，加入5g地塞米松，搅拌溶清，再搅拌30分钟，微孔膜过滤(220nm)，加入25ml的注射用 水，搅拌5分钟，减压浓缩，蒸除溶媒，得到地塞米松/2-羟丙基-β -环糊精包合物水溶液。另取注射用水加入Ig EDTA-2Na，lgα-生育酚，磷酸盐缓冲溶液调pH至7.5，再用 氯化钠调至等渗，微孔膜过滤(220nm)，加入到前述地塞米松/3-羟丙基β环糊精包合物水 溶液中至1000ml，过滤、灭菌、封装，配制过程在氮气保护下进行，所得注射液浓度为5mg/ ml ο实施例540士2°C下将40g 2_羟丙基-β环糊精(取代度范围为4. 1 5. 9)溶于IOOml 丙酮中，加入0. 5g地塞米松，搅拌溶清，再搅拌30分钟，微孔膜过滤(220nm)，加入25mL的 注射用水，搅拌5分钟，减压浓缩，浓缩过程分两次加入注射用水，每次15ml，除尽溶媒，得 到地塞米松/2-羟丙基β环糊精包合水溶液，备用。另取注射用水加入Ig EDTA-2Na, Ig α -生育酚，磷酸盐缓冲溶液调pH至6. 5，再 用氯化钠调至等渗，微孔膜过滤(220nm)，加入到前述地塞米松/2-羟丙基β环糊精包合 物水溶液中至1000ml，过滤、灭菌、封装，配制过程在氮气保护下进行，所得注射液浓度为 0. 5mg/ml。实施例6室温下将28g羟丙基- β -环糊精(取代度范围为4. 1 5. 9)溶于IOOml无水乙 醇中，加入2g地塞米松，搅拌溶清，再搅拌30分钟，微孔膜过滤(220nm)，搅拌5分钟，减压 浓缩，浓缩过程分三次加入注射用水，每次15ml，蒸除乙醇，得到地塞米松/羟丙基-β -环 糊精包合水溶液，备用。另取注射用水加入lgEDTA_2Na，Ig α -生育酚，磷酸盐缓冲溶液调pH至7，再用氯 化钠调至等渗，微孔膜过滤(220nm)，加入到前述地塞米松/3-羟丙基β环糊精包合物水溶液中至1000ml，过滤、灭菌、封装，配制过程在氮气保护下进行，所得注射液浓度为2mg/ml。实施例740±2°C下将2g 2-羟丙基- β环糊精(取代度范围为4· 1 5. 9)溶于20ml丙 酮中，加入0. 5g地塞米松，搅拌溶清，再搅拌30分钟，微孔膜过滤(220nm)，加入3mL的注射 用水，搅拌5分钟，减压浓缩,浓缩过程分两次加入注射用水，每次15ml，除尽溶媒，得到地 塞米松/2-羟丙基β环糊精包合水溶液，备用。另取注射用水加入Ig EDTA-2Na, Ig α -生育酚，磷酸盐缓冲溶液调ρΗ至6. 5，再 用氯化钠调至等渗，微孔膜过滤(220nm)，加入到前述地塞米松/2-羟丙基β环糊精包合 物水溶液中至1000ml，过滤、灭菌、封装，配制过程在氮气保护下进行，所得注射液浓度为 0. 5mg/ml。实施例7-1本实施例所用2-羟丙基-β -环糊精为市售，取代度范围为2. 8-10. 5， 其他工艺与配方与实施例7相同实施例8稳定性对比实验将按本发明实施例7方案制得的地塞米松包合物水溶液(1)、实施例7-1方案制得 地塞米松包合物水溶液(1-1)与中国专利申请CN200610130124. 7实施例2中制备的地塞 米松包合物水溶液(2)进行稳定性对比实验。实验样品的制备将(1)与(2)分别用注射用水稀释成为地塞米松磷酸钠浓度为lmg/ml的注射液， 并用氯化钠调至等渗，采用Iml规格的玻璃安瓿封装，分别为注射液(1)与注射液(2)稳定性实验将注射液⑴与(2)制得的注射液分别取15支，避光包装于高温条件(60士2°C ) 下恒温放置，于，0，5，IOd时取样并检测药品的含量、澄明度等指标，每次取样5支。(云士s， η = 5) 稳定性试验表明，采用环糊精包合的注射液(1)和注射液(1-1)的含量稳定性要 高于常规的地塞米松磷酸钠注射液(2)，采用了取代度为4. 1-5. 9的2-羟丙基-β-环糊精 的注射液(1)的含量稳定性也要高于取代度2. 8-10. 5的注射液(1-1)。说明优选的取代度 范围可以使得制得的包合物注射液稳定性更好。实施例9药代动力学参数测定实验药物本发明实施例1-7和实施例7-1制备的地塞米松包合物注射液分为实 验组1 7和实验组7-1.
取市售地塞米松磷酸钠用注射用水配制成2mg/ml (以地塞米松计)的注射液(3) (用磷酸盐缓冲液先将注射用水调至pH = 7. 5，配制成的注射液用氯化钠调至等渗)实验设备Agilent1100LC ；TGL-16G 高速离心机；Sartoriousl712 型分析天平色谱条件甲醇-0.02MKH2P04 (磷酸调 pH 至 4. 0)-55 :45 ;Dikma Diamosil-C18(4. 6X15(kim，5ym)色谱柱；检测波长 240nm，柱温 30°C，流速 lmL/min。实验动物与给药豚鼠，雌雄不限，体重250 300g，随机分为实验组1 7及实 验组7-1以及对照组1，每组10只，分别给予实施例1 7及实施例7-1以及自制的地塞米 松磷酸钠注射液(3)静脉注射。实验方法给药前禁食过夜，每只实验动物静脉注射相应组别的实验药物，给药剂 量实验组1、4注射0. 4ml (地塞米松计2mg)，其他各实验组注射1ml，对照组注射Iml (地 塞米松计2mg)，实验组与对照组均于注射后0. 25h、0. 5h，lh，2h，3h对实验动物耳缘静脉取 血，每次取样0.5ml。血样离心分离得到血浆，加两倍量甲醇，混勻，离心，取上清液进行测 定。不同组别动物血浆中地塞米松(DEX)和地塞米松磷酸钠(DSP)浓度见下表(云土s，n = 10) 从表中的数据可以看出，在给药量均为2mg(以地塞米松计)的情况下，采用本发 明实施例制得地塞米松包合物注射液的实验组在0. 5h时实验动物的DEX血药浓度与对照 组相当，而在0. 25 3h内其他取样点内其DEX血药浓度均显著高于同时间的对照组(P < 0. 05)。在给药量均为2mg时，采用本发明实施例所得注射液的实验组在注射后0. 25 3h时间内受试动物DEX的AUC明显高于对照组，从所有实验组的血药浓度数据看，采用本 发明实施例所得注射液的实验组在注射后0. 25 3h内血液内DEX浓度释放较为迅速，能 够维持较长时间较高的血药浓度。另外，在给药量为2mg的实验组，注射后0. 25-lh内的 DEX血药浓度也明显高于对照组。此外与实验组7相比，采用取代度为2. 8-10. 5的2-羟丙 基-β -环糊精的实验组7-1注射后0. 25 Ih动物DEX的AUC较低，显示出优选了取代度 的2-羟丙基- β -环糊精制备的包合物注射液在有效成分的迅速释放方面具有显著效果。
权利要求
一种2 羟丙基 β 环糊精包合的地塞米松注射液，所述地塞米松与2 羟丙基 β 环糊精的摩尔比为1∶1～20，其特征在于，所用的2 羟丙基 β 环糊精取代度优选为4～7。
2.如权利要求1所述的注射液，其特征是所述地塞米松与2-羟丙基-环糊精的摩 尔比优选为1 2 5。
3.如权利要求1至2中任一所述的注射液，其特征是所述的地塞米松含量为0.05% 1%。
4.如权利要求1至3中任一所述的注射液，其特征是所述的注射液中还可加入pH调节 剂，所述的注射的PH优选调节至5-7。
5.如权利要求1至4中任一所述的注射液，其特征是所述注射液中可以加入螯合剂的 依地酸二钠0. 01% -0. 1%，作为抗氧剂的亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、a -生育酚、焦亚硫酸钠 和硫代硫酸钠中的一种或几种0. 05% -0. 2%，作为渗透压调节剂的0. 4% -0. 9%氯化钠、 4% 5%葡萄糖、 2. 5%甘油中的一种或几种。
6.如权利要求1至5中任一所述的注射液，其特征是所述的注射液的配制方法如下 将2-羟基-环糊精、地塞米松加入含水或不含水的极性有机溶剂中，使其溶清，加入或 不加稀释水，蒸出有机溶剂，得到地塞米松包合物的水溶液，将其他附加剂溶于适量的注射 用水中，与包合物水溶液混和并稀释至需要的浓度即得，过滤、灭菌、封装。
7.如权利要求6所述的注射液，其特征是所述注射液时加入的极性有机溶剂优选乙 醇，丙酮、四氢呋喃中的一种或几种。
8.如权利要求7所述的注射液，其特征是所述注射液时加入的极性有机溶剂优选乙 醇，丙酮中的一种或几种。
9.如权利要求6至8中任一所述的注射液，其特征是配制地塞米松包合溶液时地塞米 松和水的重量比1 2到1 500，地塞米松和有机溶剂的重量比1 3到1 200。
10.如权利要求9所述的注射液，其特征是配制地塞米松包合溶液时地塞米松和水的 重量比优选1 5到1 100，地塞米松和有机溶剂的重量比优选1 5到1 50。
全文摘要
2-羟丙基-β-环糊精包合地塞米松注射液，地塞米松与2-羟丙基-β-环糊精的摩尔比为1∶1～20，所用的2-羟丙基-β-环糊精取代度优选为4～7，地塞米松与2-羟丙基-β-环糊精的摩尔比优选为1∶2～5。
文档编号A61P29/00GK101926760SQ200910069408
公开日2010年12月29日 申请日期2009年6月24日 优先权日2009年6月24日
发明者孙亮, 赵琳, 陈松 申请人:天津金耀集团有限公司