专利名称：：神经酰胺产生促进剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及可以使神经酰胺增加并使皮肤的屏障(barrier)功能和保湿功能恢复的神经酰胺产生促进剂和保湿剂。
背景技术：
：神经鞘脂类之一的神经酰胺在生物体整体中是微量的脂质，但在皮肤最外侧的层角质层中占脂质的一半以上，在皮肤的保湿机构、屏障机构中发挥着重要作用。该神经酰胺在表皮细胞中产生分泌后，在角质层中的细胞之间构筑层状(lamella)结构而发挥功能。但是，有很多报告称，在干燥皮肤、粗糙皮肤、遗传过敏性皮炎(atopicdermatitis)、老年性干皮症(senilexerosis)、银屑病等皮肤疾病中，神经酰胺的健全代谢受到妨碍，角质层中的神经酰胺量减少，引起皮肤的保湿功能和屏障功能的下降等。对于这样的皮肤疾病，也尝试从外部补充减少的神经酰胺，但有长期效果得不到认可、稳定性低等的问题。自古以来益母草和山药都是作为中草药被使用的药用植物。即，报告了益母草作为除活血、经、益精药而用于妇女在产前产后的各种症状，对于由肾炎引起的浮肿有效(非专利文献l)。山药以健脾益气、滋养强壮、止泻、止渴为目的使用，报告具有血压下降作用、男性激素增强作用(非专利文献2)。但是，关于这样的植物具有神经酰胺产生促进效果和保湿效果，至今完全未知。非专利文献l:和汉药用植物(第20版，刈米达夫等编辑，广川书店)，72页非专利文献2:天然医药资源学(第2版，竹田忠纮等编辑，广川书店)，263264页
发明内容本发明是涉及以下l)4)的发明。1)以选自益母草和山药的植物或其提取物为有效成分的神经酰胺产生促进剂。2)以选自益母草和山药的植物或其提取物为有效成分的保湿剂。3)选自益母草和山药的植物或其提取物的用于制造神经酰胺产生促进剂的用途。4)选自益母草和山药的植物或其提取物的用于制造保湿剂的用途。具体实施例方式本发明涉及提供能够恢复或维持皮肤的屏障功能和保湿功能的化妆品或医药品。本发明人等探索安全性高的天然物原材料时发现，在特定的植物或其提取物中具有神经酰胺产生促进作用，它们作为能够恢复或维持角质层的高屏障功能和保湿功能的医药品或化妆品是有用的。本发明的神经酰胺产生促进剂使角质层中的神经酰胺增加，作为用于恢复或维持皮肤的屏障功能和保湿功能的化妆品、医药品等是有用的。在本发明中，益母草(HerbaLeonuri)以唇形科(Laminaceae)益母草属植物(丄eo柳n^;ow'ci^Houtt.)为来源植物，山药(RhizomaDioscoreae)以薯蓣禾斗(Dioscoreaceae)的薯蓣(￡)/oscore<3oppositeThumb.)为来源植物。上述植物可以将该植物的全草、叶、皮、枝、果实或根等原样或粉碎使用，但对于益母草优选使用地上部分，对于山药优选使用根、茎。作为本发明的植物提取物，包含将上述植物的使用部分直接或干燥后切断为适当大小或粉碎加工而得到的部分进行提取而得到的提取物，除此以外还包含进一步分离精制而得到的活性更高的组分(成分)。提取可以是在室温或加热状态下使之在溶剂中含浸或使用索式提取器(Soxhletextractor)等提取器具进行的溶剂提取，除此以外，还可以使用利用水蒸汽蒸馏等蒸馏法进行提取的方法、使二氧化碳气体成为超临界状态而进行的超临界提取法或压搾而得到提取物的压榨法等。作为在溶剂提取中使用的提取溶剂，可以使用极性溶剂、非极性溶剂的任意一种，也可以将它们混合使用。例如，可以列举水；甲醇、乙醇、丙醇、丁醇等醇类；乙二醇、丙二醇、丁二醇等多元醇类；丙酮、甲基乙基酮等酮类；醋酸甲酯、醋酸乙酯等酯类；四氢呋喃、二乙醚等链状和环状醚类；聚乙二醇等聚醚类；二氯甲烷、氯仿、四氯化碳等卤化烃类；己烷、环己烷、石油醚等烃类；苯、甲苯等芳香族烃类；吡啶类；超临界二氧化碳；油脂、蜡、其它油等，这些可以单独或组合2种以上使用，也可以改变溶剂而反复进行。其中，优选使用水、乙醇、丙二醇、丁二醇、石油醚等，特别优选使用水乙醇混合液、石油醚。对于提取而言，例如由水、醇类、烃类或水醇混合液进行提取时，优选相对1质量份植物使用150质量份溶剂，在410(TC、优选在208(TC的温度下，以1小时30日、更优选以1小时10日进行提取。另外，作为提取物的分离精制手段，例如，可以列举将提取物进行活性碳处理、液液分配、柱色谱、液相色谱、凝胶过滤、精密蒸馏等。根据需要，还可以以公知的方法进一步实施脱臭、脱色等处理。本发明的植物提取物，既可以直接使用上述方法得到的提取液和组分，也可以作为以适当溶剂稀释后得到的稀释液使用，或也可以为制成为浓縮提取物和干燥粉末或调制成为膏状的提取物。另外，也可以进行冷冻干燥，在使用时以通常用于提取的溶剂，例如以水、乙醇、丙二醇、丁二醇、水乙醇混合液、水丙二醇混合液、水丁二醇混合液等溶剂进行稀释后使用。另外，也可以在脂质体(liposome)等囊泡和微胶囊等中包含使用。如在后述实施例中所示，本发明的植物或其提取物在正常人角化细胞中，具有使神经酰胺量增加的作用。神经酰胺在皮肤的保湿机构、屏障机构中发挥重要作用(芋川玄尔香妆会志，1(4)，250—253，1991)。在这里，所谓保湿功能意思是通过含有适度水分而给皮肤带来柔软性并成为光滑美丽的皮肤的功能，所谓屏障功能意思是防止体内水分外出并且在使身体皮肤不干燥的同时防止来自外部的异物侵入体内的功能。因此，本发明的植物或其提取物可以作为神经酰胺产生促进剂或保湿剂、屏障增强剂使用，另外，可以用于制造神经酰胺产生促进剂或保湿剂、屏障增强剂。该神经酰胺产生促进剂或保湿剂可以作为用于使角质层中的神经酰胺增加并恢复或维持皮肤的屏障功能和保湿功能的医药品、日本的医药部外品、化妆品等使用。另外，该神经酰胺产生促进剂或保湿剂也可以作为以神经酰胺产生促进或保湿为概念并根据需要表示其宗旨的日本的医药部外品、化妆品使用。作为将本发明的神经酰胺产生促进剂和保湿剂用作医药品时的给药方式，例如，可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂等经口给药或注射剂、外用剂、坐剂、经皮吸收剂等非经口给药的任一种。在配制该医药制剂时，可以单独地使用本发明的植物或其提取物，或适当组合其它在药学上被允许的赋形剂、粘合剂、增量剂、粉碎剂、表面活性剂、润滑剂、分散剂、缓冲剂、保存剂、矫味剂、香料、覆膜剂、载体、稀释剂等使用。该制剂中的本发明植物的含量，作为干燥固体成分优选含有0.0120质量％，特别优选含有0.0510质量％，作为植物提取物，按照固体成分换算优选含有0.000110质量％，特别优选含有0.0015质量％。另外，在将本发明的神经酰胺产生促进剂和保湿剂作为医药品使用时，成人每人每日的给药量，作为本发明的植物或其提取物(换算为干燥固体成分)，例如优选是0.0011000mg，特别优选是0.01100mg。另外，将本发明的神经酰胺产生促进剂和保湿剂作为日本的医药部外品和化妆品使用时，可以制成为皮肤外用剂、洗净剂、美容用化妆品，根据使用方法，可以以洗液、乳液、凝胶、乳脂、软膏剂、粉剂、颗粒剂等各种剂型进行提供。这样的各种剂型的日本的医药部外品和化妆品，可以将本发明的植物或其提取物单独地进行调制，或通过适当组合被配合在医药部外品、皮肤化妆品和洗净品中的油性成分、保湿剂、粉体、色素、乳化剂、增溶剂、洗净剂、紫外线吸收剂、增粘剂、药效成分、香料、树脂、防菌防霉剂、植物提取物、醇类等而调制。另外，作为药效成分，可以列举透明质酸钠等其它保湿成分。明植物的含量，作为干燥固体成分，优选为0.01100质量％、特别优选0.0570质量％。另一方面，提取物的含量一般按照固体成分换算优选为0.00001100质量％、特别优选为0.000170质量％。以上所述的"日本的医药部外品"是指由日本药事法第2条第2項所规定的具有特殊功效的化妆品，但相对于医药品而言其功效比较缓和。实施例制造例1益母草提取物的制造相对100g益母草加入5倍量的石油醚，在5(TC搅拌提取1小时，过滤，得到石油醚提取液，再将该石油醚提取液蒸发后，得到益母草的石油醚提取物约0.5克。制造例2山药提取物的制造将制造例1的100g益母草取代为100g山药，进行同样方法的提取，得到山药石油醚提取液，再将该石油醚提取液蒸发后，得到山药的石油醚提取物约0.3克。实施例1神经酰胺产生促进试验<试验用溶液和对照溶液>制造例试验用溶液对照溶液1(益母草的石油醚提取物)以乙醇为溶剂制备含l%w/v的该石油醚提取物的乙醇溶液。乙醇2(山药的石油醚提取物)以乙醇为溶剂制备含l%w/v的该石油醚提取物的乙醇溶液。乙醇<培养条件〉于EpiLife-KG2(KURABO公司)6孔板中培养正常人表皮角化细胞(NHEK(F))，培养到成为聚集(confluent)状态。此后，变换为EpiLife-KG2(无增殖添加因子)，分别添加上述试验用溶液和对照溶液。培养3日后，从每个孔回收细胞。<脂质提取>由BlighandDyer法从回收的细胞中提取脂质。将提取液进行氮气干燥后，将在氯仿甲醇混合液中再溶解的部分制作为脂质样品。另外，蛋白质量由BCA法进行定量。<神经酰胺量解析〉以薄层色谱(TLC)法在提取的脂质中进行解析。以氯仿甲醇醋酸=190:9:i水平方向展开2次。喷以硫酸铜显色溶液，以加热板烘烤并检测神经酰胺，所得值以各自的蛋白量相除得神经酰胺量(表1)表中数值表示以(添加了上述对照液的)对照品的神经酰胺量为1时的相对值。表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>如表1所示，对于本发明的植物提取物确认了人角化细胞的神经酰胺产生促进效果。权利要求1.一种神经酰胺产生促进剂，其特征在于，以选自益母草和山药的植物或其提取物为有效成分。2.—种保湿剂，其特征在于，以选自益母草和山药的植物或其提取物为有效成分。3.选自益母草和山药的植物或其提取物的用于制造神经酰胺产生促进剂的用途。4.选自益母草和山药的植物或其提取物的用于制造保湿剂的用途。全文摘要本发明提供能够恢复和维持皮肤的屏障功能和保湿功能的化妆品或医药品。本发明提供以选自益母草和山药的植物或其提取物为有效成分的神经酰胺产生促进剂、保湿剂。文档编号A61K36/88GK101653537SQ20091011874公开日2010年2月24日申请日期2009年3月4日优先权日2008年8月18日发明者伊藤正太郎,孔凡旗,杨春欣,秦万章,野尻浩申请人:复旦大学附属中山医院;花王株式会社