专利名称：具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备方法
技术领域：
本发明属于白藜芦醇药物制剂的制备领域，特别涉及一种具有防治类风湿性关节
炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备方法。
背景技术：
白藜戸醇(Resveratrol)是植物在受到应激时自身合成的一种植物抗毒素，广泛 存在植物中，现在至少在21个科、31个属的72种植物中发现有白藜芦醇存在。但从文献报 道情况来看，目前研究最多、最被关注的只有虎杖、葡萄、花生等少数几种中草药和可食用 的植物。 目前，提取天然白藜芦醇多以中药材虎杖(根)为原料。由于中药虎杖种植容 易，产量高、价格低，来源方便，后续资源有保障，研究人员做了很多研究，如CN1251361A， 一种从中药虎杖中提取白藜芦醇的工艺；01126769. O，一种从虎杖中制备白藜芦醇的方法； 02114583. O—种从虎杖中提取白藜戸醇的制备方法；03147908. l，一种从虎杖中制备白藜 戸醇的方法；200510027573. 4，从中草药植物虎杖中制备白藜戸醇的方法；
200610161949. 5， 一种从中药虎杖中分离纯化白藜芦醇苷和白藜芦醇的方法；
200810032067. 8，从虎杖中提取纯度98 %以上的白藜芦醇的工艺； 200710030601. 7， 一种从新鲜虎杖中提取、纯化白藜芦醇的工艺方法。但是以上技术均未解 决工业化生产和药用问题。 白藜芦醇具有多方面的保健功能，具有防治心血管疾病、防癌、抗病毒及免疫调节 作用，其作用主要表现为它的抗氧化特性。在医药、食品、化妆等行业有着广泛应用前景。近
年来，欧美各国已将其开发为保健食品上市，有片齐U、胶囊、口服液等多种剂型。最近，国内 也出现了 一些白藜芦醇产品，如"天狮活力胶囊"、"紫金胶囊"、"纳贝益生胶囊"等；欧美已 批准上市的白藜芦醇高端制剂产品(包括药品及保健品)已有千余种，全球使用者约2亿 人，并且，平均以每年5000万人的速度增长。估计未来白藜芦醇制剂的销售将达到5亿 8亿美元，形成非常巨大的产业。 由于其具有调节免疫功能，在治疗免疫性疾病有一定疗效、副作用小的优点，文献 报道，200510031435. 3，白藜芦醇在治疗类风湿关节炎、非感染性炎症中的应用。然而，没有 解决应用到人体的制剂及制备方法，以及人体口服的剂量。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓 释胶囊的制备方法，该制备方操作简单，原料来源广泛，成本低，对环境友好，在制备过程中 加入纤维素酶预处理，大大提高了有效成分的转移率，确保了提取的白藜芦醇的纯度，适合 工业化生产。 本发明的一种具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备方法，包括
(1)白藜芦醇的提取
粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入O. 1-1. 0% (W/V)的纤维素酶(市售)的溶液 于20-4(TC预处理30-60小时，然后用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，加水，用大孔吸附树 脂分离，再倾入水和15% 75%的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，加入0. 1-0.5% (W/V)的活性炭脱色，最后用乙醇反复结晶得白藜芦醇；
(2)缓释胶囊的制备 速释颗粒白藜芦醇50-100g、乳糖20-50g和淀粉20_50g分别过100目，混合均 匀，加入1_10%的淀粉浆制成软材，过40目筛，干燥，备用； 缓释颗粒白藜戸醇50-100g、羟丙基甲基纤维素30-60g、甲基纤维素10-50g、乳 糖10-20g分别过100目，混合均匀，加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP-K30)的5%乙醇溶液润湿， 制成软材，过40目筛，干燥，备用； 将上述速、缓二颗粒按质量比1 : l混合，填充胶囊。 所述步骤(1)中药粉与0. 1-1. 0 % (W/V)纤维素酶液的质量体积比为 lg : 1. 0-2. Oml ; 所述步骤(1)中的大孔吸附树脂的用量为虎杖粉质量的0. 5-2倍； 所述步骤(1)中的分离是指用D型大孔吸附树脂柱子，流速lL/分钟，用去离子水
洗脱至无色； 所述步骤(1)中的洗脱是指先后用15wt^乙醇和75wt^乙醇进行洗脱。 本发明提供了从虎杖提取、分离白藜芦醇的方法，用纤维素酶预处理，将糖苷水解
使白藜芦醇游离，再用乙醇萃取，有效成分转移率高，杂质少；另因为大孔吸附树脂分离效
果好，成本低，易生产，本发明制备白藜芦醇的方法中主要使用D、DA系列，确定大孔吸附树
脂用量为药材量的0. 5-2倍的最佳用量，充分确保吸附有效成分，减少树脂的浪费。 通过对白藜芦醇在对大鼠佐剂性关节炎的防治作用、对大鼠佐剂性关节炎继发性
病变的预防作用、对II型胶原引起大鼠风湿性关节炎作用研究等三个方面作用研究，证明
该药在治疗关节炎方面具有较好的治疗作用，动物实验表明无论对大鼠佐剂性关节炎还是
对大鼠由II型胶原诱导的风湿性关节炎多具有治疗作用，同时该药具有抗炎、镇痛作用。
这些实验充分证明了该药具有多个作用靶点、多种治疗作用，是一个非常独特的药物。 有益效果 本发明的制备方操作简单，原料来源广泛，成本低，对环境友好，在制备过程中加 入纤维素酶预处理，大大提高了有效成分的转移率，确保了提取的白藜芦醇的纯度，适合工 业化生产。
具体实施例方式
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人 员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定 的范围。 实施例1 干燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(10目)，用0. 1%的纤维素酶液(药粉酶液= lg : 1.3ml)预处理，25t:，30小时，处理过的药粉，用乙醇1200L回流提取，提取液回收乙醇，加水，用D101-I型大孔吸附树脂200kg的柱子，流速lL/分钟，用去离子水洗脱至无色， 再用15%乙醇200L洗脱，及用75%乙醇500L洗脱，收取75%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓縮 液用0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脱色，乙醇反复结晶得白藜芦醇2. 2kg。
实施例2 干燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(20目)，用0.3%的纤维素酶液(药粉酶液= lg : 1.5ml)预处理，3(TC，48小时，处理过的药粉，用乙醇1400L回流提取，提取液回收乙 醇，加水，用D101-I型大孔吸附树脂250kg的柱子，流速1L/分钟，用去离子水洗脱至无色， 再用15 %乙醇200L洗脱，及用75 %乙醇500L洗脱，收取75 %乙醇洗脱液，回收乙醇，用 0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脱色，乙醇反复结晶得白藜芦醇2. 4kg。
实施例3 干燥虎杖200kg，粉碎成粗粉(30目)，用0.5%的纤维素酶液(药粉酶液= lg : 1.8ml)预处理，35t:，60小时，处理过的药粉，用乙醇1600L回流提取，提取液回收乙 醇，加水，用D101-I型大孔吸附树脂300kg的柱子，流速1L/分钟，用去离子水洗脱至无色， 再用15 %乙醇200L洗脱，及用75 %乙醇500L洗脱，收取75 %乙醇洗脱液，回收乙醇，用 0. 1-0. 5% (W/V)的活性炭脱色，乙醇反复结晶得白藜芦醇2. 5kg。
实施例4 白藜芦醇缓释胶囊质量标准处方每粒含白藜芦醇120mg。 速释颗粒 品名规格用量备注
白藜芦醇》98.5%70g主药乳糖药用35g辅料
淀粉 药用 30g 辅料 缓释颗粒
a々规格用量备注
白藜卢醇》98.5%50g主药
羟丙基甲基纤维素药用(HPMC-K4M)50g辅料
甲基纤维素药用EC25g辅料
乳糖药用10g辅料
聚乙烯吡咯烷酮药用(PVP-K30) 5%乙醇溶液QS黏合剂制备工艺
速释颗粒；将主药与辅料分别过IOO目，混合均匀，用5%的淀粉浆制成软材，过40 目筛，干燥，备用。 缓释颗粒；将主药与辅料分别过100目，混合均匀，用适量PVP-K305 %乙醇溶液润 湿，制成软材，过40目筛，干燥，备用。 将速、缓二颗粒，等分混合，填充1号胶囊，每粒0. 3g。
性状胶囊剂，内容物为白色至类白色颗粒状，味微苦。鉴别取本品内容物0. lg，用乙醇2ml溶解，乙醇溶液，滴在滤纸上，干燥后，喷洒
三氯化铁试液，显紫蓝色。检查含量测定
色谱条件与系统适用性试验 色谱杜(4. 6X250mm);填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶。
流动相甲醇水=40 : 60 ;
流速1. OmL/min ; 检测波长304nm ;进样最20 ii L ;柱温25°C 。
理论板数按白藜芦醇峰计算应不低于2500. 对照品溶液的制备精密称取白藜芦醇对照品5mg，加甲醇制成每lml含50 y g的 溶液，即得。 供试品溶液的制备取本品10粒，取出内容物，精密称取30mg，置100ml量瓶，加 甲醇至刻度，摇匀，取lml，置20ml量瓶，加甲醇至刻度，即得。 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液(用微孔(0.45m)滤过)各 20 iU，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每粒含白藜芦醇(C14H1203)计，应在108-132mg内。
适应症适用于成人类风湿关节炎，有改善病情作用。
用法与用量每次l粒，一日2次。或遵医嘱。
规格每粒0.3g，24粒/盒(瓶)。
贮藏密封。
实施例5白藜戸醇(090701)药代动力学参数(使用DAS 2. 1. 1计算)
统计矩参数单位低剂量中剂量高剂量
(20mg/kg)(60mg/kg)(180mg/kg)
AUC(O-t)mg/L*h449.815991547.881
AUC(O-")mg/L*h486.905699.7821641.215
MRT(O-t)h3.8394.4534.151
MRT(O-")h4.7976.374.767
t1/2zh3.0673.9932.072
丁m3Xh0.50.51.5
Vz/FL/kg0.1820.4940.328
CLz/FL/h/kg0.0410.0860.11
GtTl3Xmg/L182.4207.5166667313.权利要求
一种具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备方法，包括(1)白藜芦醇的提取粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入0.1-1.0％(W/V)的纤维素酶的溶液于20-40℃预处理30-60小时，然后用乙醇回流提取，提取液回收乙醇，加水，用大孔吸附树脂分离，再倾入水和15％～75％的乙醇进行洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，加入0.1-0.5％(W/V)的活性炭脱色，最后用乙醇反复结晶得白藜芦醇；(2)缓释胶囊的制备速释颗粒白藜芦醇50-100g、乳糖20-50g和淀粉20-50g分别过100目，混合均匀，加入1-10％的淀粉浆制成软材，过40目筛，干燥，备用；缓释颗粒白藜芦醇50-100g、羟丙基甲基纤维素30-60g、甲基纤维素10-50g、乳糖10-20g分别过100目，混合均匀，加入聚乙烯吡咯烷酮的5％乙醇溶液润湿，制成软材，过40目筛，干燥，备用；将上述速、缓二颗粒按质量比1∶1混合，填充胶囊。
2. 根据权利要求1所述的一种具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备 方法，其特征在于所述步骤(1)中药粉与O. 1-1.0% (W/V)纤维素酶的溶液的质量体积比 为lg : 1. 0-2. Oml。
3. 根据权利要求1所述的一种具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备 方法，其特征在于所述步骤(1)中的大孔吸附树脂的用量为虎杖粉质量的0.5-2倍。
4. 根据权利要求1所述的一种具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备 方法，其特征在于所述步骤(1)中的分离是指用D型大孔吸附树脂柱子，流速1L/分钟，用 去离子水洗脱至无色。
5. 根据权利要求1所述的一种具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备 方法，其特征在于所述步骤(1)中的洗脱是指先后用15wt^乙醇和75wt^乙醇进行洗脱。
全文摘要
本发明涉及一种具有防治类风湿性关节炎的白藜芦醇缓释胶囊的制备方法，包括粉碎虎杖粉得10-30目的粗粉，加入纤维素酶液预进行处理，然后用乙醇回流提取，接着用大孔吸附树脂分离，再倾入水和乙醇进行洗脱后，加入活性炭脱色，最后用乙醇反复结晶得白藜芦醇；分别制备速释颗粒和缓释颗粒，然后将速、缓二颗粒按质量比1∶1混合，填充胶囊，即可。该制备方操作简单，原料来源广泛，成本低，对环境友好，在制备过程中加入纤维素酶预处理，大大提高了有效成分的转移率，确保了提取的白藜芦醇的纯度，适合工业化生产。
文档编号A61P19/02GK101693022SQ20091019775
公开日2010年4月14日 申请日期2009年10月27日 优先权日2009年10月27日
发明者沈海龙, 赵正福 申请人:赵正福;