专利名称：青蒿素b的制备方法及其新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种青蒿素Bfertemisinin B)的制备方法及其新用途，特别涉及一种青蒿素Bfertemisinin B)在制备预防和治疗自身免疫性疾病、炎症性疾病的药物中的应用。
背景技术：
近年来，随着社会工业化程度的逐步提高，自身免疫性疾病、超敏反应性疾病等由免疫反应过度而引起的疾病也在不断增加，寻找高效低毒的免疫抑制剂已成为当前一个世界性的研究热点。有证据表明，中药免疫抑制剂具有高效低毒的特殊疗效，但由于制剂质量难以控制、作用机制难以明确，限制了其在临床中的广泛应用。采用现代提取分离技术，从中药中获得具有免疫抑制活性的单体化合物，将克服这些不足，并有望创制免疫抑制新药。青蒿为菊科植物黄花蒿Artemisia annua L的干燥地上部分，主要含有青蒿素、青蒿甲素、青蒿乙素、青蒿丙素、青蒿酸、青蒿内酯、黄酮、香豆素和挥发油等成分，具有清热解暑、除蒸、截疟等功效。其中，化学单体青蒿素(artemisinir^Art)由我国药学家首先于20 世纪70年代提取分离得到，分子式C15H22O5,是我国第一个被WHO认可按化药研究标准开发的高效抗疟药。通过近十年的实验及临床研究证实，青蒿中多种有效成分具有免疫抑制活性，对类风湿性关节炎、红斑狼疮等自身免疫性疾病都显示出不同程度的治疗或保护作用， 具有抗炎和较为复杂的免疫抑制作用，但青蒿素B未见相关报道。青蒿乙素(Artearmuin B ；CAS No 50906-56-4)为从中药青蒿(Artemisia annua L.)中提取分离得到的倍半萜内酯类化合物，被认为是抗疟活性成分青蒿素的生物合成前体，其化学结构和绝对构型经光谱[D. JeremiC,A. JokiC,A. Behbud,and Μ. Stefanovic. Tetrahedron lett.，3039 (1973)·] 禾口 X 光 行射[D. G. Leppard, Μ. Rey, and Α. S. Dreiding, Helw. Chim. Acta. ，57，
权利要求
1.一种青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法为青蒿叶干燥后，粉碎，用有机溶剂渗漉/浸泡提取，60°C以下减压回收溶剂后，与柱层析硅胶混合，晾干，进行硅胶柱层析分离，用石油醚_乙酸乙酯或石油醚_丙酮混合溶剂梯度洗脱，以薄层层析法检测洗脱液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶剂至小体积，放置析出粗结晶，再经有机溶剂反复重结晶纯化，即得。
2.如权利要求1所述的青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法为青蒿叶1重量份干燥后，粉碎，用4 8体积份有机溶剂浸泡24 76小时，用40 80体积份的有机溶剂渗漉，收集渗漉液，50 60°C以下减压回收溶剂得浸膏，用有机溶剂溶解后，与2 4倍浸膏重量的柱层析硅胶混合，晾干，加入装有25 50倍浸膏重量柱层析硅胶的层析柱顶部进行硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯=1 0至5 5或石油醚-丙酮=1 0至6 4混合溶剂梯度洗脱，以薄层层析法检测洗脱液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶剂至小体积，放置析出粗结晶，再经有机溶剂反复重结晶纯化，即得。
3.如权利要求2所述的青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法为青蒿叶1重量份干燥后，粉碎，用5体积份95%乙醇浸泡24小时，用50体积份95%乙醇渗漉，收集渗漉液，50°C以下减压回收溶剂得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，与2倍浸膏重量的柱层析硅胶混合，晾干，加入装有30倍浸膏重量柱层析硅胶的层析柱顶部进行硅胶柱层析分离，用石油醚乙酸乙酯=1 0至5 5混合溶剂梯度洗脱，以薄层层析法检测洗脱液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶剂至小体积，放置析出粗结晶，再经丙酮反复重结晶纯化，即得。
4.如权利要求2所述的青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法为青蒿叶1重量份干燥后，粉碎，用4体积份乙酸乙酯浸泡50小时，用45体积份的乙酸乙酯渗漉，收集渗漉液，55°C以下减压回收溶剂得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，与3倍浸膏重量的柱层析硅胶混合，晾干，加入装有25倍浸膏重量柱层析硅胶的层析柱顶部进行硅胶柱层析分离，用石油醚乙酸乙酯=1 0至5 5混合溶剂梯度洗脱，以薄层层析法检测洗脱液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶剂至小体积，放置析出粗结晶，再经乙酸乙酯反复重结晶纯化，即得。
5.如权利要求2所述的青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法为青蒿叶1重量份干燥后，粉碎，用7体积份石油醚浸泡70小时，用75体积份的石油醚渗漉，收集渗漉液，600C以下减压回收溶剂得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，与4倍浸膏重量的柱层析硅胶混合，晾干，加入装有45倍浸膏重量柱层析硅胶的层析柱顶部进行硅胶柱层析分离，用石油醚乙酸乙酯=1 0至5 5混合溶剂梯度洗脱，以薄层层析法检测洗脱液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶剂至小体积，放置析出粗结晶，再经乙醇反复重结晶纯化，即得。
6.如权利要求2所述的青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法为青蒿叶1重量份干燥后，粉碎，用8体积份丙酮浸泡48小时，用60体积份丙酮渗漉，收集渗漉液，50°C以下减压回收溶剂得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，与2倍浸膏重量的柱层析硅胶混合，晾干，加入装有30倍浸膏重量柱层析硅胶的层析柱顶部进行硅胶柱层析分离，用石油醚丙酮=1 0至6 4混合溶剂梯度洗脱，以薄层层析法检测洗脱液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶剂至小体积，放置析出粗结晶，再经乙醇反复重结晶纯化，即得。
7.如权利要求2所述的青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法为青蒿叶1重量份干燥后，粉碎，用5体积份乙醚浸泡50小时，用40体积份的乙醚渗漉， 收集渗漉液，55°C以下减压回收溶剂得浸膏，用乙酸乙酯溶解后，与3倍浸膏重量的柱层析硅胶混合，晾干，加入装有25倍浸膏重量柱层析硅胶的层析柱顶部进行硅胶柱层析分离， 用石油醚丙酮=1 0至6 4混合溶剂梯度洗脱，以薄层层析法检测洗脱液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶剂至小体积，放置析出粗结晶，再经丙酮反复重结晶纯化，即得。
8.如权利要求1或2所述的青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法中有机溶剂是指乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚、石油醚或汽油中的一种或几种。
9.如权利要求1-7任一所述的青蒿素B的制备方法，其特征在于该方法所得青蒿素B 的理化性质和波谱数据为无色方形结晶，熔点151-153°C，[a]-73.5°C (C = 1.01,Me0H), EI-MS m/e 248 (M+)，分子式为 C15H2tlO3 ；1H-WR(CDC13 300Hz)6. 14(1H, d, J = 3Hz，13_CH =),5. 42 (1H, d J = 3Hz，13-CH = ), 2. 70 (1H, s，5-CH)，1. 34 (3H，s，15_CH3)，0. 99 (3H， d, J = 6Hz, 14-CH3) ； 13C-NMR (CDCl3 75Hz) :43. 9 (C-I)，16. 4 (C_2)，24. 5 (C_3)，58. 2 (C_4)， 58. 7(C-5) ,81. 0(C-6) ,52. 8 (C_7)，21. 8 (C_8)，34. 0(C_9)，30. 7 (C-IO)，138. 7 (C-Il)， 169. 5 (C-12)，117. 2 (C-13)，18. 6 (C-14)，22. 7 (C-15)。
10.青蒿素B在制备免疫抑制的药物中的应用。
11.青蒿素B在制备预防和治疗自身免疫性疾病的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开青蒿素B的制备方法及其新用途。青蒿素B的提取分离方法为青蒿叶干燥，粉碎，用有机溶剂渗漉/浸泡提取，60℃以下减压回收溶剂后，与柱层析硅胶混合，晾干，进行硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮混合溶剂梯度洗脱，以薄层层析法检测洗脱液成分，收集含青蒿素B的流份，回收溶剂至小体积，放置析出粗结晶，再经有机溶剂如丙酮、乙醇等反复重结晶纯化，即得到青蒿素B。本发明青蒿素B(artemisinin B)用于制备免疫抑制的药物，具有显著的免疫抑制活性，可在制备预防和治疗自身免疫性疾病、炎症性疾病的药物和临床上应用。
文档编号A61P37/06GK102408431SQ20111038838
公开日2012年4月11日 申请日期2011年11月29日 优先权日2011年11月29日
发明者张东, 朱晓新, 李玉洁, 杨岚, 杨庆, 翁小刚, 陈颖 申请人:中国中医科学院中药研究所