专利名称：海藻多肽在制备降血脂、降血糖保健品中的用途和包含上述多肽的降血脂、降血糖饮料的制作方法
技术领域：
本发明涉及多肽的医药用途和包含上述多肽的饮料，具体地涉及一种具有降血月旨、降血糖功能的海藻多肽和包含上述多肽的降血脂、降血糖饮料。
背景技术：
海藻属于低等植物，主要生长在浅海区域，我国海岸线长，浅海面积大，海藻种类 丰富，这其中，有经济价值的海藻主要分成绿藻、褐藻及红藻三大类。目前，已经开展人工养殖的经济海藻主要有属于褐藻类的海带、裙带菜和羊栖菜；属于红藻类的坛紫菜、条斑紫菜、龙须菜、细基江蓠、红毛菜和麒麟菜等。然而，由于我国海藻事业发展处于初级阶段，因此，其对于海藻的利用是相当不充分的，目前，我国的海藻产品集中在海藻多糖这一方面。根据文献报道，海藻中的海藻多糖都具有提高人体免疫力、抗癌、抗病毒的活性，并可以降低血管中导致动脉粥样硬化的脂质含量。因此，国内市场比较成熟的工业化海藻产品主要为海藻多糖产品从红藻中提取的琼胶、卡拉胶等，从褐藻中提取的褐藻胶、褐藻糖胶等，以及从绿藻中提取的木聚糖、甘露聚糖等。而海藻多糖是一类组成相当复杂的生物大分子，其提纯常采用乙醇沉淀法、季胺盐沉淀法、DEAE纤维柱层析和凝胶柱层析法，并通过分子筛或者阴离子交换柱等可以达到多糖与蛋白分离的目的，进而使得占海藻含量10% 50%之间的海藻蛋白大多形成了工业废料，造成极大浪费。另一方面，现有的降糖药物有胰岛素、双胍类(代表药物为二甲双胍)、磺脲类(代表药物为格列吡嗪、格列齐特等)、a 一糖苷酶抑制剂(代表药物为阿卡波糖)、胰岛素增敏齐IJ(代表药物为罗格列酮、吡格列酮等)。然而，上述各种药物都有其局限性，如双胍类的降糖药对肠胃的伤害较大，容易导致消化不良；磺脲类药物可能导致白细胞减少；a —糖苷酶抑制剂则会产生胃肠道反应，具体表现有腹胀、胃胀、上腹部灼痛、腹泻或便秘等；胰岛素增敏剂则有可能导致水潴留的发生。而现有最常用降血脂药物为HMG — CoA还原酶抑制剂，具体有洛伐他丁、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀和罗伐他汀等，然而，他汀类药物容易引起肝酶增高，可能引起肝功能变化，且部分患者在服药后有肌肉疼痛的症状，个别甚至引发肌肉溶解症。综上，目前针对降低血糖、降低血脂并无一种可靠、令人满意的治疗方法。
发明内容
本发明的目的在于提供海藻多肽在制备降血脂、降血糖药物中的用途。海藻多肽在制备降血脂、降血糖保健品中的用途，所述海藻多肽采用如下的方式制得浸泡后的坛紫菜和水的混合物料经过胶体磨研磨，得到坛紫菜浆液，采用AS. 1398中性蛋白酶在45。。 55。。、pH7. 2 7. 8、加酶量E/S 8000 12000U. g'底物浓度3 7%(w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液5h 10h，获得酶解液，将酶解液离心后收集上清液，再将上清液经超滤分离获得分子量小于10000 Da的活性组分，冷冻干燥后备用。本发明所述的坛紫菜(/jOrjDAjTa haitanensis)属于红藻门(Rhodophyta)原红藻纲(Protoflorideae)红毛菜目(Bangiales)红毛菜科(Bangiaceae)紫菜属(Porphyra)。在推荐的实施例中，优选采用AS. 1398中性蛋白酶在50°C、pH7.5、加酶量E/S10000U. g_\底物浓度5% (w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液10h，获得酶解液。在推荐的实施例中，离心后收集的上清液按I :1的比例加水稀释一倍，而后将稀释后的上清液加入超滤设备进行分离。本发明的另一目的在于提供包含上述海藻多肽的降血脂、降血糖饮料。 一种包括海藻多肽的降血脂、降血糖饮料，其特征在于其包括降血脂、降血糖有效量的海藻多肽和可食用的饮料配方，所述海藻多肽原液采用如下的方式制得浸泡后的坛紫菜和水的混合物料经过胶体磨研磨，得到坛紫菜浆液，采用AS. 1398中性蛋白酶在45。。 55°C、pH7. 2 7. 8、加酶量E/S 8000 12000U. g'底物浓度3 7% (w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液5h 10h，获得酶解液，将酶解液离心后收集上清液，再将上清液经超滤分离获得分子量小于10000 Da的活性组分的海藻多肽原液。本发明通过上述的分离方法脱除海藻多肽液苦腥味，并保留浓郁紫菜风味，进而获得口感独特、具有食疗价值的饮料产品。在推荐的实施例中，所述的饮料配方包括环状糊精、苹果酸、柠檬酸钠、异维C钠、维C、甘氨酸、白砂糖和羧甲基纤维素钠，并按照环状糊精5%。 7%。、苹果酸0.5%。 1%。、柠檬酸钠 0. 2%0 0. 6%。、异维 C 钠 0. 2%0 0. 6%。、维 CO. 2%0 0. 6%。、甘氨酸 0. 1%。 0. 3%0、白砂糖50%。 80%。和羧甲基纤维素钠0. 5 0. 8%。的比例加入海藻多肽原液中。在推荐的实施例中，所述的饮料配方还包括枫糖香精和烤大麦香精，并按照枫糖香精0. 1%。 0. 3%。和烤大麦香精0. 5%。 I. 5%。的比例加入海藻多肽原液中。需要说明的是，本发明所使用的原料为干坛紫菜，其既可以选择口感较好、营养价值较高的头茬紫菜，也可以使用口感和营养价值较低的末茬紫菜。而鉴于海藻多肽饮料能够以四茬或五茬的紫菜为原料，因此，其原料来源广、成本低，制备过程简单易行，设备及资金投入相对较少，并可大幅度提升产品的附加值，获得较高的经济效益。本发明提供的海藻多肽饮料具有如下特点
1、口感润滑、酸甜适中、紫菜风味浓郁，呈深紫红色、透明清亮。其适合于各式灌装，经超闻温瞬时杀菌后保质期可达I年以上；
2、有机碘含量丰富，适合于我国内陆缺碘地区的推广利用，起到丰富补碘产品的作用；维生素及矿物质含量也较高，且腥味小、风味独特，是典型的低脂肪、富含纤维素和矿物质的健康海洋食品；
3、具有降血脂、降血糖及降血压的功效通过动物实验证实，紫菜经生物酶解获得的海藻多肽具有显著的降血脂、降血糖及降血压作用，长期服用可抑制体重过快增长、减少动脉硬化的发生机率(关于海藻多肽降血压作用的报道请见中国海洋药物，2010年03期，王茵等)；本发明利用我国丰富的海藻资源，以中国传统养生理论和现代科研成果为基础，以食疗同源为理念，根据海藻的营养功能特性和现代饮食结构的需求，通过现代生物工程技术、纳米膜超滤技术、生物活性分析技术等提取具有降血脂、降血糖功效的活性多肽物质。本发明研制的海藻多肽系列产品可以填补海藻蛋白活性多肽产品的市场空白，且由于海藻活性多肽自身具有易吸收、高活性、降血脂、降血糖、降血压功效显著等优势，加之特有的藻香味，适合现在人们在食品方面对健康、营养、美味的需求。本发明以该海藻多肽为主要配方，探讨海藻多肽液苦腥味的脱除技术、风味的调配工艺，优化影响产品稳定性的条件及最佳的杀菌方案，精制成兼具营养和降血脂、降血糖、降血压等保健功效食疗同源的海藻多肽饮料等系列新型海藻类健康制品。这符合当前海藻食品研究开发的方向，符合海洋保健品潜在市场需求，具有巨大的推广前景，能够促进海藻产业走上绿色工艺、绿色产品的健康发展之路，带动海藻产业经济效益增长，推动我国海洋经济的发展。
具体实施方式
为了便于理解本发明，特列举实施例，以进一步诠释本发明，而不是对本发明的任何方式的限制。实施例I
1)原料原料选择头茬干坛紫菜；
2)加水浸泡按I:25 (坛紫菜水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)胶体磨绞碎将坛紫菜浸泡混合液通过胶体磨，形成颗粒较细的坛紫菜浆液；
4)加热保温将坛紫菜浆液加热到中心温度达50°C；
5)蛋白酶酶解:采用AS.1398中性蛋白酶在50°C、pH7. 5、加酶量E/S 10000U. g—1、底物浓度5% (w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液10h，获得酶解液；
6)离心将酶解液于8000r.HiirT1离心lOmin，初步除去紫菜渣，获得上清液；
7)上清液稀释离心收取的上清液较为浓稠，先按I:1的比例加水稀释一倍；
8)超滤除杂将稀释后的上清液通过陶瓷卷心的超滤设备分离，获得分子量小于10000 Da的活性组分，冷冻干燥后备用。实施例2
1)原料原料选择第三茬干坛紫菜；
2)加水浸泡按I:25 (坛紫菜水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)胶体磨绞碎将坛紫菜浸泡混合液通过胶体磨，形成颗粒较细的坛紫菜浆液；
4)加热保温将坛紫菜浆液加热到中心温度达45°C；
5)蛋白酶酶解采用AS.1398中性蛋白酶在45。。、pH7. 2、加酶量E/S 8000U. g—1、底物浓度3% (w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液10h，获得酶解液；
6)离心将酶解液于8000r.HiirT1离心lOmin，初步除去紫菜渣，获得上清液；
7)上清液稀释离心收取的上清液较为浓稠，先按I:1的比例加水稀释一倍；
8)超滤除杂将稀释后的上清液通过陶瓷卷心的超滤设备分离，获得分子量小于10000 Da的活性组分，喷雾干燥后备用。实施例31)原料原料选择末茬干坛紫菜；
2)加水浸泡按I30 (坛紫菜:水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)胶体磨绞碎将坛紫菜浸泡混合液通过胶体磨，形成颗粒较细的坛紫菜浆液；
4)加热保温将坛紫菜浆液加热到中心温度达55°C；
5)蛋白酶酶解:采用AS.1398中性蛋白酶在55°C、pH7.8、加酶量E/S 12000U. g-1、底物浓度7% (w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液5h，获得酶解液；
6)离心将酶解液于8000r.HiirT1离心lOmin，初步除去紫菜渣，获得上清液； 7)上清液稀释离心收取的上清液较为浓稠，先按I:1的比例加水稀释一倍；
8)超滤除杂将稀释后的上清液通过陶瓷卷心的超滤设备分离，获得分子量小于10000 Da的活性组分，冷冻干燥后备用。实施例4
1)原料原料选择第三茬干坛紫菜；
2)加水浸泡按I20 (坛紫菜:水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)胶体磨绞碎将坛紫菜浸泡混合液通过胶体磨，形成颗粒较细的坛紫菜浆液；
4)加热保温将坛紫菜浆液加热到中心温度达45°C；
5)蛋白酶酶解采用AS.1398中性蛋白酶在45。。、pH7. 2、加酶量E/S 8000U. g—1、底物浓度3% (w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液10h，获得酶解液；
6)离心将酶解液于8000r.HiirT1离心lOmin，初步除去紫菜渣，获得上清液；
7)上清液稀释离心收取的上清液较为浓稠，先按I:1的比例加水稀释一倍；
8)超滤除杂将稀释后的上清液通过陶瓷卷心的超滤设备分离，获得分子量小于10000 Da的活性组分组成的海藻多肽原液；
9)按照环状糊精6.5%。、苹果酸0. 8%。、柠檬酸钠0. 4%。、异维C钠0. 45%。、维CO. 5%。、甘氨酸0. 15%。、白砂糖70%。和羧甲基纤维素钠0. 6%。的比例向海藻多肽原液中加入上述物质，溶解，得到海藻多肽饮料；
10)杀菌罐装罐装材料选择马口铁三片罐，巴氏杀菌(85°C、20min)，得到饮料产品。饮料口味试饮及外观评价由几名专业人员组成的评估小组完成，该饮料口感润滑、酸甜适中、紫菜风味浓郁，不带苦腥味，外观呈深紫红色、透明清亮。实施例5
1)原料原料选择末茬干坛紫菜；
2)加水浸泡按I:25 (坛紫菜水)的比例加水,浸泡30 min ；
3)胶体磨绞碎将坛紫菜浸泡混合液通过胶体磨，形成颗粒较细的坛紫菜浆液；
4)加热保温将坛紫菜浆液加热到中心温度达55°C；
5)蛋白酶酶解:采用AS.1398中性蛋白酶在55°C、pH7.8、加酶量E/S 12000U. g-1、底物浓度7% (w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液5h，获得酶解液；
6)离心将酶解液于8000r.HiirT1离心lOmin，初步除去紫菜渣，获得上清液；
7)上清液稀释离心收取的上清液较为浓稠，先按I:1的比例加水稀释一倍；
8)超滤除杂将稀释后的上清液通过陶瓷卷心的超滤设备分离，获得分子量小于10000 Da的活性组分组成的海藻多肽原液；9)按照环状糊精6.5%。、苹果酸0. 8%。、柠檬酸钠0. 4%。、异维C钠0. 45%。、维CO. 5%0、甘氨酸0. 15%。、白砂糖70%。、羧甲基纤维素钠0. 6%。、枫糖香精0. 1%。和烤大麦香精1%。的比例向海藻多肽原液中加入上述物质，溶解，得到海藻多肽饮料；这其中，枫糖香精、烤大麦香精为调香配方，因此，可根据消费者口味调配其它香型；
10)杀菌罐装罐装材料选择马口铁三片罐，巴氏杀菌(85°C、20min)，得到饮料产品。饮料口味试饮及外观评价由几名专业人员组成的评估小组完成，该饮料口感润滑、酸甜适中、紫菜风味浓郁，不带苦腥味，外观呈深紫红色、透明清亮。试验例I
I实验材料与方法
I.I海藻多肽
实施例I制得的海藻多肽。I. 2实验动物
昆明小鼠(KM)，雄性，体质量20 25g，100只；
Wistar大鼠，雄性，体质量150 200g，60只。I. 3指标检测试剂
总胆固醇试剂盒、甘油三酯试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇试剂盒、超氧化物歧化酶试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶试剂盒、丙二醛试剂盒、一氧化氮试剂盒；糖化血清蛋白试剂盒、血清胰岛素试剂盒、肝糖元试剂盒等。I. 4其他试剂材料
辛伐他汀，北京北大维信生物科技有限公司；格列吡嗪控释片，美国辉瑞制药有限公司；四氧喃唳，sigma公司；高脂饲料(配方10%猪油、10%蛋黄粉、1%胆固醇、0. 3%胆盐、78. 7%基础饲料)，苏州双狮实验动物饲料科技有限公司。I. 5降血脂作用动物实验方法
1.5. I实验动物分组
60只Wistar大鼠以基础饲料适应性喂养5d后，称体质量并根据体质量进行分层随机分组，包括高脂模型Wistar大鼠5组(50只，每组10只)和正常对照组I组(10只)。 I. 5. 2闻脂I旲型大鼠造丰旲
将5组高脂模型Wistar大鼠进行高脂模型造模试验，50只Wistar大鼠连续饲喂高脂饲料2周，正常对照组饲喂正常饲料，2周后尾部取血，检测血清TC、TG、HDL-C, LDL-C的指标检测。1.5.3实验分组及剂量设计
选取高脂模型Wistar大鼠中的5组，组别分别为B高脂模型对照组、C高脂药物对照组(辛伐他汀IOmg .kg—1)』高脂海藻多肽低剂量组(0. 5 g .kg—1)』中剂量组(I. 0 g .kg—1)、F高剂量组(I. 5 g ^kg4);正常对照组的组别为A正常对照组。具体分组及剂量要求如表I所示。表I降血脂实验动物分组及给药剂量__
序号组另Il_喂养词料灌胃药物齐[!量(mg/kgbw)_
A~正常对照组-正常饲料I馏水 -—
B_高脂模型对照组高脂饲料蒸馏水 -_
C I高脂药物对照组 I高脂词料I辛伐他汀Iio
权利要求
1.海藻多肽在制备降血脂、降血糖保健品中的用途，所述海藻多肽采用如下的方式制得浸泡后的坛紫菜和水的混合物料经过胶体磨研磨，得到坛紫菜浆液，采用AS. 1398中性蛋白酶在45°C 55°C、pH7. 2 7. 8、加酶量E/S 8000 12000U. g'底物重量体积比浓度3 7%的条件下酶解坛紫菜浆液5h 10h，获得酶解液，将酶解液离心后收集上清液，再将上清液经超滤分离获得分子量小于10000 Da的活性组分，冷冻干燥或喷雾干燥后备用。
2.根据权利要求书I所述的用途，其特征在于优选采用AS.1398中性蛋白酶在50°C、pH7. 5、加酶量E/S 10000U. g_\底物重量体积比浓度5%的条件下酶解坛紫菜浆液10h，获得酶解液。
3.根据权利要求书2所述的用途，其特征在于离心后收集的上清液按I:1的比例加水稀释一倍，而后将稀释后的上清液加入超滤设备进行分离。
4.一种包括海藻多肽的降血脂、降血糖饮料，其特征在于其包括降血脂、降血糖有效量的海藻多肽和可食用的饮料配方，所述海藻多肽原液采用如下的方式制得浸泡后的坛紫菜和水的混合物料经过胶体磨研磨，得到坛紫菜浆液，采用AS. 1398中性蛋白酶在45。。 55°C>pH7. 2 7. 8、加酶量E/S 8000 12000U. g'底物浓度3 7% (w/v)的条件下酶解坛紫菜浆液5h 10h，获得酶解液，将酶解液离心后收集上清液，再将上清液经超滤分离获得分子量小于10000 Da的活性组分的海藻多肽原液。
5.根据权利要求书4所述的包括海藻多肽的降血脂、降血糖饮料，其特征在于所述的饮料配方包括环状糊精、苹果酸、柠檬酸钠、异维C钠、维C、甘氨酸、白砂糖和羧甲基纤维素钠，并按照环状糊精5%。 7%。、苹果酸0. 5%。 1%。、柠檬酸钠0. 2%。 0. 6%。、异维C钠0.2%。 0. 6%。、维CO. 2%。 0. 6%。、甘氨酸0. I %。 0. 3%0、白砂糖50%。 80%。和羧甲基纤维素钠0. 5 0. 8%。的比例加入海藻多肽原液中。
6.根据权利要求书5所述的包括海藻多肽的降血脂、降血糖饮料，其特征在于所述的饮料配方还包括枫糖香精和烤大麦香精，并按照枫糖香精0. 1%。 0. 3%。和烤大麦香精0.5%。 I. 5%。的比例加入海藻多肽原液中。
7.根据权利要求书4所述的具有降血脂、降血糖功能的海藻多肽饮料，其特征在于离心后收集的上清液按I :1的比例加水稀释一倍，而后将稀释后的上清液加入超滤设备进行分离。
全文摘要
本发明涉及海藻多肽在制备降血脂、降血糖保健品中的用途和包含上述多肽的降血脂、降血糖饮料。海藻多肽采用如下的方式制得浸泡后的坛紫菜和水的混合物料经过胶体磨研磨，得到坛紫菜浆液，采用AS.1398中性蛋白酶在45℃～55℃、pH7.2～7.8、加酶量E/S8000～12000U.g-1、底物重量体积比浓度3～7%的条件下酶解坛紫菜浆液5h～10h，获得酶解液，将酶解液离心后收集上清液，再将上清液经超滤分离获得分子量小于10000Da的活性组分。通过动物实验证实，紫菜经生物酶解获得的海藻多肽具有显著的降血脂、降血糖及降血压作用，长期服用可抑制体重过快增长、减少动脉硬化的发生机率。
文档编号A61P3/10GK102961733SQ20121046266
公开日2013年3月13日 申请日期2012年11月16日 优先权日2012年11月16日
发明者吴成业, 王茵, 苏永昌, 刘淑集 申请人:福建省水产研究所