通过将模拟双链断裂的dna分子与热疗相组合治疗癌症的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种用于治疗癌症的方法，所述方法包括模拟双链断裂的核酸分子的治疗与热疗的组合。
【专利说明】通过将模拟双链断裂的DNA分子与热疗相组合治疗癌症
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及肿瘤学领域。
【背景技术】
[0002]热疗是增强各种抗癌疗法的有效性的最早临床应用的药剂之一。热疗是其中将身体组织暴露于高温以损伤和杀死癌细胞或使癌细胞对辐射和某些抗癌药物(环磷酰胺、多柔比星、顺钼、依托泊苷、异环磷酰胺、吉西他滨、干扰素-α、长春新碱、卡钼、奥沙利钼……)的效应更加敏感的一种治疗。它一般不单独使用。其研究集中于许多癌症类型的治疗，包括肉瘤、黑色素瘤、头颈癌、脑癌、肺癌、食管癌、乳腺癌、膀胱癌、直肠癌、肝癌、宫颈癌和腹膜间皮癌。然而，热疗的准确作用方式仍然是难以捉摸的。 [0003]W02010/082821 和 Krawczyk 等(2011，Proc Natl Acad Sci)公开了温和热疗抑制同源重组(HR)并诱导BRCA2降解。同源重组是修复双链断裂(DSB)的途径之一。已知BRCA2参与双链断裂(DSB)的重组修复，并且PARP抑制剂能够有效杀死BRCA2缺陷的乳腺癌细胞。因此，作者推断，在通过热疗抑制BRCA2 (以及随后的同源重组)的同时，诱导DSB的药剂可用于治疗癌症。他们还建议与该组合一起进一步使用PARP抑制剂。PARP参与单链DNA断裂(SSB)的检测并将单链DNA断裂的信号传导到参与SSB修复的酶学机制。这些作者最终发现，通过热疗提高对放射疗法的敏感性是同源重组特异性的，因为在同源重组缺陷的细胞(Rad54-/-)中没有观察到这种效应。
[0004]尽管使用热疗的癌症治疗正在取得进展，但对于使用热疗治疗癌症的改进的方法仍存在强烈需求。
【发明内容】
[0005]本发明人令人吃惊地发现，与Krawczyk等示出的内容以及关于DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)的已知信息相反，热疗效应不是DBS修复的同源重组途径特异性的。更具体来说，被称为Dbait分子的模拟双链断裂的核酸分子可用于与热疗相组合治疗癌症。Dbait分子通过参与DNA双链断裂(DSB)修复的非同源末端连接途径的DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)的过度活化起作用，而不在细胞中引起任何附加的DNA损伤(W02005/040378 ；W02008/034866 ；Quanz 等,2009，Clinical Cancer Researchl5:1308 ；Quanz 等，2009，PLoS0NE4:e6298 ；Dutreix 等，2010，Mut.Res.704:182)。令人吃惊的是，通过 DNA-PK 抑制剂NU7026抑制DNA修复，不引起对热疗敏感并且防止Dbait敏化。因此，Dbait敏化需要DNA-PK激酶活化，并独立于DSB DNA修复抑制而起作用。他们也显示，令人吃惊地，即使在不存在任何诱导DSB的药剂的情况下，也可以观察到Dbait分子与热疗的组合的抗肿瘤效应。此外，所述组合的观察到的效应似乎是协同性且Dbait剂量依赖性的效应。
[0006]因此，本发明涉及一种用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其具有至少一个游离末端和与人类基因组中的任何基因具有小于60%序列同一性的24-200bp的DNA双链部分。[0007]更优选地，所述核酸分子具有下式之一:
【权利要求】
1.用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，所述核酸分子具有至少一个游离末端和与人类基因组中的任何基因具有小于60%序列同一性的24-200bp的DNA双链部分。
2.权利要求1的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述核酸分子具有下式之一:
3.权利要求1或2的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述核酸分子具有下式之一:
4.权利要求1-3任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述促进胞吞的分子是胆甾醇。
5.权利要求1-4任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述核酸分子选自:
6.权利要求1-5任一项的核酸分子，其中所述核酸分子是
7.权利要求1-6任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述热疗包括至少41 °C、优选至少42 0C的温度。
8.权利要求1-7任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述热疗通过微波(RFA)、超声、红外线、纳米粒子或纳米管、感应加热、磁热疗、灌注或输注预加温的液体例如血液、腹膜内加热流或直接加热来进行。
9.权利要求1-8任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述癌症是实体癌，优选地选自肉瘤、黑色素瘤、头颈癌、肾癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、甲状腺癌、肺癌、食管癌、乳腺癌、膀胱癌、结直肠癌、肝癌、宫颈癌和子宫内膜癌和腹膜癌，更优选为肝癌和腹膜癌。
10.权利要求1-9任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中P是1，并且所述核酸分子与内涵体溶解剂、优选喹啉内涵体溶解剂、更优选氯喹或羟氯喹组合使用。
11.权利要求1-10任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述核酸分子与放射疗法和/或抗肿瘤化学疗法组合使用。
12.权利要求11的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述抗肿瘤化学疗法是通过DNA损伤性抗肿瘤剂直接或间接进行的治疗。
13.权利要求12的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述DNA损伤性抗肿瘤剂选自拓扑异构酶I或II的抑制剂、DNA交联剂、DNA烷化剂、抗代谢剂和有丝分裂纺锤体抑制剂。
14.权利要求1-10任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述核酸分子不与放射疗法和/或抗肿瘤化学疗法组合使用。
15.权利要求1-10任一项的用于与热疗相组合治疗癌症的核酸分子，其中所述核酸分子不与放射疗法和/或使用DNA损伤性抗肿瘤剂的抗肿瘤化学疗法组合使用。
【文档编号】A61K47/48GK103732746SQ201280025978
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2012年5月25日 优先权日:2011年5月27日
【发明者】马里·杜特雷克斯, 孙建生, 弗拉维安·德万 申请人:法国居里学院, Dna医疗公司